第一頁，共十五頁，2022年，8月28日關于土壤全磷的測定實驗目的1.了解土壤中磷的存在形式及來源。2.通過對土壤全磷含量的測定，掌握土壤全磷測定的原理和方法。第二頁，共十五頁，2022年，8月28日LOGO土壤全磷的存在形式磷酸鈣、鎂（如磷酸八鈣、十鈣等）磷酸鐵、鋁（如紅磷鐵礦）其他復合磷酸鹽（如氟磷灰石）正磷酸鹽（磷酸一鈣、磷酸二鈣等）無機磷：占全磷的50%-80%有機磷：占全磷的20%-50%磷脂核酸、核蛋白植素（如肌醇六磷酸鈣鎂等）第三頁，共十五頁，2022年，8月28日LOGO土壤中磷的主要來源1.巖石風化而來。2.人為施入土壤的含磷肥料。第四頁，共十五頁，2022年，8月28日LOGO實驗原理

土壤樣品經濃硫酸和高氯酸高溫消化，使土壤中有機磷、無機磷經脫水碳化、氧化還原等一系列作用，最終轉化成正磷酸鹽。溶液中的正磷酸鹽磷在鉬酸銨和酒石酸銻鉀的作用下，形成磷鉬銻三元雜多酸，然后被抗壞血酸還原為磷鉬藍，可用比色法測定。

第五頁，共十五頁，2022年，8月28日LOGO儀器與設備：土壤篩：孔徑0.149mm分析天平分光光度計消化爐試劑：硫酸（密度-1,分析純）氫氧化鈉溶液（c=4mol.L-1）硫酸（c=1mol.L-1

）高氯酸（c=60%）二硝基酚指示劑硫酸鉬銻儲備液鉬銻抗顯色劑分光光度計消化爐第六頁，共十五頁，2022年，8月28日LOGO方法與步驟1待測液的制備（已備好）

稱取通過100目篩孔的烘干土樣1.0g置于100ml消化管底部（勿將樣品黏附在瓶頸上）。先滴入少許水潤濕樣品，在加濃硫酸5ml，搖勻放置30min（或放置過夜，可縮短消煮時間），然后加入60%高氯酸10滴，搖勻。消化爐上加熱消化，直至消化液轉為白色，表示消化完全，繼續消化20min（如長時間消化，溶液仍為黑色或棕色，則可將消化管取下，冷卻，補加高氯酸1~2滴置消化爐上繼續消化），全部消化時間約2.5小時，取下，冷卻，將消化液無損的轉移至100ml容量瓶，冷卻至室溫后定容，放置澄清后吸取清液供磷的測定。同時做空白試驗。第七頁，共十五頁，2022年，8月28日LOGO2待測液的測定1）吸取澄清后的消化液2.00~10.00ml（含P5~25g），放入50ml容量瓶中，加水稀釋至約30ml。2）加2~3滴二硝基酚指示劑，用4mol.L-1的NaOH溶液和1mol.L-1稀硫酸調節pH至溶液剛呈微黃色（指示劑酸方色為無色，在顯色酸度時，指示劑本身不會帶來顏色干擾），搖勻。3）加入鉬銻抗顯色劑5ml，用水定容至刻度，搖勻。4）在室溫高于15℃的條件下放置30min后，在分光光度計上用1cm光徑比色皿700nm的波長比色，以空白試驗溶液作為參比液調零點，讀取吸收值，利用標準曲線上計算出顯色液Pmg.L-1數，溶液顏色在8h內可保持穩定。第八頁，共十五頁，2022年，8月28日LOGO

3標準曲線的繪制（已備好）

分別準確吸取5mg.L-1磷標準溶液0、1、2、3、4、5、6ml于50ml容量瓶中，加水稀釋至約30ml。加入鉬銻抗顯色劑5ml，搖勻定容。即得含磷(P)量分別為0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、-1的標準溶液系列。搖勻，于15℃以上溫度放置30min后，1cm光徑比色皿700nm波長比色，用0mg.L-1磷標準系列顯色液作參比液，調節吸收值到零，由稀到濃測標準系列顯色液的吸收值，以吸收值為縱坐標，磷濃度(mg.L-1)為橫坐標，繪制標準準曲線。第九頁，共十五頁，2022年，8月28日LOGO磷標準曲線第十頁，共十五頁，2022年，8月28日LOGO4、結果計算

ρ——從校準曲線求得的顯色液中磷的濃度，mg.L-1

m——烘干土樣質量，gV——顯色時溶液定容的體積，ml

10-3——將g數換算成每kg土壤中含磷的g數

ts——分取倍數，ts=消煮待測液定容體積/測定時吸取待測液的體積

Vm××土壤全磷含量測定（g/kg）=ρ×10-3ts第十一頁，共十五頁，2022年，8月28日LOGO5注意事項

1)最后顯色液中含磷量在20-30g最好，可通過稱樣重和最后顯色時吸取待測液體積進行控制。

2)樣品批量測定時，加入濃硫酸后放置數小時，甚至過夜，可縮短消化時間。

3)鉬銻抗法要求顯色溫度為15~60℃，如果室溫低于15℃，可放置在30~40℃烘箱中保溫30min，取出冷卻后比色。

4)鉬銻抗法要求顯色液中硫酸的濃度為-1。如果酸度小于-1，雖然顯色加快但穩定時間較短，如果酸度大于-1，則顯色變慢。第十二頁，共十五頁，2022年，8月28日LOGO作業1.列出影響實驗結果的因素或者關鍵步驟，且根據結果對土壤樣品做出評價。2.比較不同樣地土壤全磷含量的差異并作簡要分析

。第十三頁，共十五頁，2022年，8月28日LOGO實驗數據表格