實驗動物的生理病理檢測

實驗動物的生理病理檢測

第一節

一般體征的檢查與測量方法

第一節

一般體征的檢

一、體重的測量方法動物體重借助稱量儀器測量小鼠、大鼠：稱重可用帶游碼的普通天平或電子秤稱重。兔、豚鼠：可直接放在嬰兒秤上稱重，從嬰兒秤圓形刻度盤上讀取動物體重。犬：經訓練后可直接放在磅秤上稱重。未經馴服的犬，先將犬嘴綁好，由實驗員把犬抱起站在磅秤上稱重，記下讀數，減去實驗員體重，即為動物體重。

一、體重的測量方法動物體重借助稱量儀器測量二、體溫的測定方法

動物體溫測定是動物實驗中最常用的檢測指標之一。

在測定前應先固定好動物。一般測大鼠或小鼠體溫時，左手帶上布手套，將鼠抓起，并將鼠固定于實驗者手心，同時用環指和小指把鼠尾固定；兔則可用左臂夾住兔體，左手提起尾巴，犬可固定在臺上，然后右手持頭瑞涂上少許凡士林的肛表，由肛門插入直腸一定深度。測量時間3min。

測定體溫除了用肛表外，還可用半導體點溫度計可立即從溫度表上讀取溫度數。

二、體溫的測定方法動物體溫測定是動物實驗中最常用的檢各種成年動物的正常體溫各種成年動物的正常體溫三、脈搏的檢查方法

檢查脈搏較為重要，可以根據脈搏頻率和性質，判斷動物心臟和血液循環狀態以診斷動物的疾病及判定其預后。

檢查犬、貓、兔等較大動物的脈搏時，先將動物略加固定，待其安靜后，用右手伸入動物股部內側，食指和中指壓于血管上左右滑動，可感覺到血管象富有彈性的橡皮管在指下滑動。按脈的大小、強弱和軟硬，分別施以輕壓、中壓和重壓，體會脈搏的性質和節律。

小動物的脈搏可直接在動物左側胸部用手觸及心跳最明顯處，計數一定時間，算出每分鐘心跳次數。三、脈搏的檢查方法檢查脈搏較為重要，可以根四、呼吸頻率的測定方法

動物呼吸頻率和呼吸深度的改變是實驗時常見的癥狀之一，對闡明藥物作用的機制具有重要意義。

因此在實驗前后必須注意檢查動物的呼吸節律、頻率、深度的變化。這些變化可標志出呼吸器官的功能狀態。頻而表淺的呼吸是肺通氣量不足的癥狀。

動物呼吸頻率的測定方法十分簡單：首先使動物處于相對安靜狀態，以肉眼觀察并記錄呼吸的次數，一般要求記錄1min的呼吸次數。

四、呼吸頻率的測定方法動物呼吸頻率和呼吸深第二節血液及造血功能常用

指標的檢查方法第二節血液及造血功能常用

一、血液常用指標的檢查（一）紅細胞計數動物紅細胞計數可用普通的血細胞計數器，也可用光電比濁法。

方法（試管法）：

用血紅蛋白吸管吸取靜脈血20mm3

，擠入盛有4mL紅細胞稀釋液的華氏小試管中搖勻，滴入計數池，靜置3min，在高倍鏡下數中央大方格中的5個中方格中紅細胞數量，相加，計算（5格的總和×10000即為每1/2mm3

內的紅細胞數）。一、血液常用指標的檢查(二)白細胞計數

與紅細胞計數一樣，可用普通的血細胞計數器，也可用電子血細胞計數機計數。計數方法：

用血紅蛋白吸管吸取動物靜脈血至20mm3處，立即擠入盛有0.4ml白細胞稀釋液的小試管內，充分搖勻，將混懸液滴一小滴入計數池，靜置3min，在低倍鏡下數四角4個大方格的白細胞數，計算（4格白細胞總數×50=1mm3的白細胞總數。(二)白細胞計數

與紅細胞計數一樣，可用(三)白細胞分類計數采血推片干燥染色計數形態鑒別：（1）嗜中性粒細胞：10-12um，有嗜中性顆粒。（2）嗜酸性粒細胞：略大于嗜中性粒細胞，顆粒大，位于核外，粉紅色，核明顯，常分兩葉。（3）嗜堿性粒細胞：略大于嗜中性粒細胞，顆粒粗大壓在核上，呈紫色，核不明顯。

(三)白細胞分類計數采血推片（4）淋巴細胞：8-15um，一般圓的多，核偏一邊，核染色質排列成斑塊狀，較致密。核與胞漿比例為9：1或8：2。胞漿呈淺藍色，有時有灰青顆粒。核的形狀以圓形最多。（5）單核細胞：15-20um，胞漿淺淡，核腎形多有壓跡．核染色質疏松，核兩端常切斷胞漿。

（4）淋巴細胞：8-15um，一般圓的多，核偏一邊，核染色質(四)血小板計數計數方法：(1)小試管內加血小板稀釋液0.4mL，取動物靜脈血20mm3，迅速擠于稀釋液內，立即充分搖勻。(2)放置4—10min，待溶液呈透明紅色，說明紅細胞已經充分溶解，充分搖勻，取l小滴加入計數池。(3)放置10一15min，待血小板完全下沉后，先將中央大方格移至低倍鏡視野內，再轉以高倍鏡，數5個中方格內的血小板數。(4)血小板大小形態不一致，但均呈折光的發亮淡藍色小點，大小約紅細胞的1／7—1／2，呈不規則圓形或長圓形。在計數時必須來回扭動顯微鏡微調，不要遺漏計數。(5)計算：5個中方格的總和×l000=1mm3血液的血小板數。

(四)血小板計數計數方法：(五)血細胞比容容量及紅細胞

降率(血沉)測定1．血細胞比容容量測定

常用Wintrobe測定法：測定時，以EDTA二鈉作為抗凝劑，5mL靜脈血加1滴EDTA二鈉，以細而長的吸管吸取抗凝血，插入Wintrobe管底部，自上而下輕輕地把血液注入至刻度10處，不能夾有氣泡，在校準過的離心機內以3000r／min的速度離心30min，壓緊的紅細胞的高度(mm)即為血細胞比容容量數值，常以百分率表示。

(五)血細胞比容容量及紅細胞

降率2．紅細胞沉降率的測定以干燥草酸鉀和草酸銨或EDTA二鈉作為抗凝劑，將抗凝血加入Wintrobe管內到刻度10處，垂直放置，記錄1h紅細胞沉降的毫米數。測定時應在22—27℃之間的室溫下進行。

2．紅細胞沉降率的測定二、造血功能常用指標的檢查

1．骨髓細胞計數將小鼠頸椎脫位處死，取l根股骨，用10mL3％醋酸溶液沖出骨髓細胞，在血細胞計數器上計數4個大方格的細胞數，所得細胞數乘以2.5X100000，即為l根股骨中骨髓有核細胞數。2．骨髓細胞分類將小鼠解剖后，取l或2節胸骨作骨髓涂片，經甲醇固定后，用瑞氏或姬姆染液染色：分類計數500個骨髓有核細胞。二、造血功能常用指標的檢查1．骨髓細胞計數將小鼠頸椎脫3．骨髓粒細胞分裂指數

小鼠腹腔注射0.1mL(50ug)秋水仙堿溶液，5h后，取作骨髓涂片，經甲醇固定，用瑞氏或姬姆染液染色，計數每1000個粒細胞中分裂的粒細胞數。4．白細胞計數和分類切開小鼠腹股溝，切斷股動脈，取0.02mL全血加在15.9mL的生理鹽水中，加入0.1mL1%皂素溶解紅細胞，利用電子血細胞計計數白細胞。同時取1滴全血作涂片，經甲醇固定后，用瑞氏或姬姆染液染色，分類計數100個白細胞。

3．骨髓粒細胞分裂指數小鼠腹腔注射0.1mL(50ug)5．白體在脾臟和骨髓中的摻人試驗每只小鼠腹腔注射含有59Fe的枸櫞酸鹽緩沖液0.2mL(pH6.1)，6h后取出脾臟和兩根骰骨，分別置于玻璃膠布內，應用Fricarb1700型定標器測定放射性強度。6．白體在周圍血細胞中的摻人試驗

每只小鼠腹腔注入含有59Fe的枸櫞酸鹽緩沖液0.2mL(pH6.1)，3d后切開股動脈，取全血0．2mL滴人脫脂棉球內，用玻璃膠布包好后，測定放射性強度。

5．白體在脾臟和骨髓中的摻人試驗每只小鼠腹腔注射含有7．3H—胸腺嘧啶核苷的摻人試驗小鼠腹腔注入1mL3H—TdR，2h后取出脾臟，用生理鹽水沖出股骨和脛骨中的骨髓細胞，分別測定DNA含量和放射性強度。8．胸腺和脾臟重量測定動物活殺后取出脾臟和胸腺，用扭力天平稱重，分別計算出占動物體重的百分比。脾臟占體重的百分比反映動物骨髓外造血功能，正常小鼠脾臟占體重的1．81％左右。

7．3H—胸腺嘧啶核苷的摻人試驗小鼠腹腔注入1mL3H—第三節

血壓的測定與記錄方法

第三節

血壓的測定與記錄方法一、直接描記法

動物血壓直接描記法是動物實驗中最常用的方法，將套管直接插入動物動脈或靜脈內，套管的另一端連接血壓換能器，血壓換能器并與生理記錄儀相連。動物動脈血壓測定常采用頸總動脈或股動脈。分離出一側頸總動脈后，用縫線將動脈離心端扎緊，再用動脈夾在近心端夾住。在近扎線處下方，用眼科剪向心端將動脈剪一小口，將預先充滿抗凝劑的換能器插管從剪口向心方向插入頸總動脈，然后用預先備好的縫線連同套管及動脈一起扎牢，并固定于動物體上。松開動脈夾，動脈壓力信號由換能器轉換變為電信號后輸入生理記錄儀，描記出動脈血壓曲線。

一、直接描記法動物血壓直接描記法是動物二、間接測壓法

在慢性性實驗進行長期反復的血壓觀察時，采用此種方法。

（一）犬1．股動脈測壓法測量方法基本同一般人體血壓測量，但血壓計的壓力袋規格不同。2．頸部皮橋測壓法狗的間接測壓法多按VonLeesum法將頸動脈引至皮瓣內，然后測量該動脈血壓。皮橋手術后10一12d，皮橋變柔軟，試診時脈搏良好，即可進行測壓。此時用一般聽診器可測知收縮壓和舒張壓。

二、間接測壓法在慢性性實驗進行長期反復的血(二)兔1．頸部皮橋測壓法

基本和狗一樣。但兔皮瓣必須保留保留較多的皮下組織，以防止手術后皮瓣干枯。2．腹主動脈測壓法

將兔背臥固定在手術臺上，把血壓計和橡皮壓力袋纏于兔的下腹部，松緊適當，與測人血壓相同。（三）大鼠

多用鼠尾動脈測壓，也可用下肢動脈測壓。(二)兔1．頸部皮橋測壓法基本和狗一樣。但兔皮瓣必須第四節

尿液與糞便的檢查方法

第四節

尿液與糞便的檢查方法一、尿液的檢查方法

尿液的性狀與組成，可反應機體的代謝情況。特別是泌尿系統本身的疾病，對尿液成分影響更大。尿液檢查是泌尿系統疾病的診斷和觀察療效的重要方法。

尿液的采集，參照實驗動物各種體液收集方法。一般用清潔容器收集新鮮尿液，以晨尿為好，因晨尿濃度較高，易發現病理成分。作細菌培養時，應消毒外陰后留中段尿，必要時進行導尿。化學定量檢查時，應收集24h全部尿液，并加入適當的防腐劑(按尿量的0.5％一1％加入甲苯)。

一、尿液的檢查方法尿液的性狀與組成，可1、尿量檢查常用實驗動物的尿量見下表

1、尿量檢查常用實驗動物的尿量見下表(1)尿量增多

一晝夜尿量超過正常值范圍，稱為多尿。生理性尿量增多見于大量飲水或食含水分過多的蔬菜所致。病理性尿量增多，見于糖尿病、尿崩癥等。(2)尿量減少一晝夜尿量少于正常值范圍稱少尿，見于急性腎炎、急性腎功能衰竭等。

(1)尿量增多2．尿色檢查正常新鮮尿液多為黃色或淡黃色，尿的顏色多受食物或藥物的影響。(1)血尿

呈洗肉水樣或混有血凝塊。(2)血紅蛋白尿

呈濃茶色或醬油色，鏡檢無紅細胞，隱血試驗為陽性。(3)膽紅素尿

呈深黃色，振蕩后泡沫亦呈黃色。(4)乳糜尿為乳白色尿液，有時混有少量血液。2．尿色檢查正常新鮮尿液多為黃色或淡黃3、尿酸堿試驗正常一晝夜混合尿液呈弱酸性，pH值為5.4—8.4。食肉類動物尿液多呈酸性，素食類動物尿液可呈中性或弱堿性，在酸中毒、發熱時，尿液可呈較強酸性，可用pH試紙測定。4、尿比密

尿液比密與其中所含溶質的濃度成正比，一般用尿比密計進行測定，比密計上的刻度是以尿溫在15℃時制定的，當被檢尿溫每增加3℃加0.00l，每減少3℃減0.001。大量飲水時尿量增加，其比密降低；體內缺水時，尿量減少，比密增高。

3、尿酸堿試驗5．尿蛋白定性試驗

加熱醋酸法：取小試管一支，加尿液至2/3高度，手持試管下端。將上部尿液以火焰加熱，煮沸后加5％醋酸2—4滴，再加熱至沸即可觀察結果。如渾濁不消失，為尿蛋白陽性；若混濁消失則是磷酸鹽所致。結果判斷應以試管下部尿液為對照,觀察上部尿液的變化。6、尿糖定性試驗

取試管一支，加入班氏尿糖定性試劑2mL，加熱至沸，加尿液再煮沸2min，判定結果。

5．尿蛋白定性試驗二、糞便的檢查方法

糞便檢查是了解和診斷消化系統疾病的重要方法。糞便檢查常用于了解糞便中有無炎性產物、血液、寄生蟲卵或蟲體等病理成分，并可判斷胃腸、胰腺、肝、膽功能狀態及糞便中有無致病菌。

1．一般性狀檢查

(1)顏色：黃褐、黑色、灰白、鮮紅等。(2)性狀：水樣或粥樣，粘液、膿樣、血樣。(3)氣味：特殊臭味、酸臭、腐敗臭。

二、糞便的檢查方法糞便檢查是了解和診斷2．顯微鏡檢查

在潔凈的載玻片上滴1滴生理鹽水，用木簽挑取少許糞便與生理鹽水混合，涂勻，厚度適中。先用低倍鏡將全片檢視一遍，再用高倍鏡仔細觀察各種細胞、阿米巴包囊及滋養體等。注意下面各種物體的種類和數量。

（1）細胞：紅細胞、白細胞，巨噬細胞等。（2）原蟲及滋養體：阿米巴、鞭毛蟲的滋養體及包囊。（3）寄生蟲卵：各種寄生蟲卵的量，一般以低鏡視野下的數量表示。

2．顯微鏡檢查3、隱血檢查當上消化道少量出血時，糞便外觀無異常改變。凡疑有上消化道少量出應進行隱血檢查。方法：隱血檢查時，將少許糞便涂于潔凈玻片或濾紙條上，加1％聯苯胺冰醋酸液及3％過氧化氫液各一滴。如無顏色改變為陰性反應；出現藍顏色變化為陽性反應。

正常為陰性，上消化道出血為陽性。

3、隱血檢查當上消化道少量出血時，糞便外觀

第五節

胸、腹腔及腦脊液的檢查方法

第五節

胸、腹腔及腦脊液的檢查方法一、胃液的檢查

胃液檢查的目的在于了解胃的分泌、運動功能和胃液中有無病理成分改變有關的疾病。胃液收集在清晨空腹插入胃管，抽出全部胃液。1．一般性狀檢查(1)量：當十二指腸潰瘍或幽門梗阻時，空腹胃液量常增多。(2)色：正常胃液無色，如膽汁反流時呈黃色或草綠色，如有紅色表示有新出血；咖啡色證明血液在胃內存留時間較長，多為慢性潰瘍病。(3)味：正常胃液有輕度酸味，無特殊臭味。腐敗氣味或惡臭味均為病理改變。

一、胃液的檢查胃液檢查的目的在于了解胃的分2、化學檢查(1)游離鹽酸和總酸度檢查：給實驗餐后lh，游離鹽酸和總酸度明顯增多，如給組胺20min后增多可達最高峰。患潰瘍性病變，其胃液酸度增多；萎縮性胃炎、腫瘤時，胃液酸度明顯減少。(2)乳酸定性檢查：正常胃液內僅有少量乳酸。一般定性檢查為陰性；當胃酸缺乏時，胃內容物發酵，乳酸含量增多，乳酸試驗呈陽性反應。

2、化學檢查(1)游離鹽酸和總酸度檢查：給實驗餐后lh，游離3．顯微鏡檢查正常胃液內無紅細胞，可有少數白細胞及扁平上皮細胞，當胃受損出血時，胃液內可見紅細胞，胃炎時白細胞數增多。3．顯微鏡檢查二、十二指腸引流液檢查十二指腸引流液是指用導管引流的十二指腸、膽總管、膽囊和肝膽管內的液體。通過引流檢查可了解實驗動物膽汁分泌情況、膽管和胰腺功能狀態，對肝臟和膽道疾病有重要診斷意義。1、一般性狀檢查注意各部分膽汁的分段是否明顯；十二指腸液、膽總管膽汁(A)、膽囊膽汁(B)、肝膽汁（C）各部分膽汁的量、色、性狀等。將四種引流液分別收集于無菌試管內及時送檢。二、十二指腸引流液檢查十二指腸引流液

病理情況下，無B膽汁排出時，灌胃33％硫酸鎂后，仍無B膽汁排出則應考慮為膽總管梗阻或膽囊收縮不良。在灌入33％硫酸鎂前已有綠色或黑褐色B膽汁流出，則多見于膽管擴張，并伴有感染、膽汁淤積。3．顯微鏡檢查

正常膽汁中可有少量白細胞，偶見上皮細胞、膽固醇結晶、膽紅素結晶、膽紅素鈣結晶。膽管炎癥時可見大量膿細胞。

4．細菌學檢查

十二指腸的引流液的細菌學檢查，可發現膽道炎癥的病原菌，作為治療的參考。

病理情況下，無B膽汁排出時，灌胃33％硫酸三、胸、腹腔積液的檢查

穿刺取出標本分為兩份，一份抗凝；另一份不加抗凝劑，以觀察能否自凝。標本采集后應立即送檢。

1．一般性狀檢查

(1)相對密度：應在標本采取后立即測定，方法同尿液相對密度測定。

(2)外觀：

漏出液多為淡黃色，透明或微濁，不自凝。滲出液可呈深淺不同的黃色，混濁而凝結。

三、胸、腹腔積液的檢查穿刺取出標本分為兩2．化學檢查

(1)粘蛋白定性(Rivalta)試驗

取100mL量筒一個，加100mL清水，然后滴入冰醋酸2滴，混勻：再加入標本l一2滴，立即觀察結果。如有明顯白云霧狀混濁，下降很快，沉淀能拖長20cm左右，為陽性反應；如混濁不明顯，下降緩慢，中途消失者，為陰性反應。漏出液為陰性反應，滲出液為陽性反應。(2)蛋白定量測定

漏出液蛋白含量在25g/L以下，滲出液在25g/L以上。

2．化學檢查(1)粘蛋白定性(Rivalta)試驗3．顯微鏡檢查

漏出液細胞計數常少于l×l05個/mL，分類以淋巴細胞和間皮細胞為主。滲出液常多于5×l05個/mL，出現大量中性粒細胞。4．細菌學檢查

標本采集后經離心沉淀，取沉渣涂片，作革蘭染色及抗酸染色，油鏡觀察。結果漏出液無細菌，滲出液中常可找到致病菌。

3．顯微鏡檢查四、腦脊液的檢查1．一般性狀檢查(1)壓力測定：根據腦脊液自穿刺針流出的滴速來推測壓力的高低。如每分鐘60滴以下，表示顱內壓大致正常；每分鐘60滴以上即表示顱內壓增高。(2)顏色：正常腦脊液為無色液體。如蛛網膜下腔出血、腦出血，則腦脊液呈均勻血性，離心后上清液呈淡紅色或黃色；當蛛網膜下腔陳舊性出血或脊椎管阻塞時，腦脊液的蛋白質含量增高而呈黃色。

(3)透明度：正常清晰透明。(4)凝結：正常腦脊液靜置12h亦不會凝結。當腦膜炎癥時，腦脊液靜置12h后即可出現凝結。四、腦脊液的檢查1．一般性狀檢查2．化學檢查(1)蛋白定性試驗：本試驗為腦脊液中蛋白質與石炭酸結合，形成不溶性蛋白而析出沉淀。正常腦脊液為陰性。當腦膜或腦實質炎癥時，腦脊液蛋白質含量增加，定性試驗呈不同程度的陽性反應。(2)蛋白定量試驗：在腦膜或腦實質炎癥、腦出血時，腦脊液蛋白質含量增加。(3)葡萄糖定量試驗：腦脊液葡萄糖含量與血糖濃度關系密切，約為血糖的60％。細菌感染時，腦脊液中糖含量減少；病毒感染卻增加。

2．化學檢查(1)蛋白定性試驗：本試驗為腦脊液中蛋白質與石3．顯微鏡檢查(1)紅細胞

正常腦脊液中無紅細胞。如腦出血或穿刺損傷血管時，可有大量紅細胞出若為陳舊性出血，可見多數皺縮的紅細胞。(2)白細胞計數及分類

正常腦脊液中細胞數極少，平均為0—8個/uL，多為淋巴細偶見內皮細胞。病毒感染以淋巴細胞增多為主；化膿性炎癥，以中性粒細胞增多為主。

3．顯微鏡檢查(1)紅細胞第六節

肝、腎功能的檢查方法

一、肝功能檢查肝臟是重要的貯存庫之一，但又是重要的解毒臟器。(一)肝臟解毒功能的測定：馬尿酸測定法。

(二)肝臟排泄功能的測定：酚四溴鈉(BSP)測定法。

(三)丙氨酸氨基轉移酶(ALT)測定

(四)肝臟糖原合成測定1．蒽酮法測定肝糖原的含量

2.肝細胞糖原合成的測定

第六節

肝、腎功能的檢查方法一、肝功能檢查二、腎功能檢查

腎功能檢查方法中，通常測定血液及尿中非蛋白氮(NPN)。測定血液中NP N含量，可反映腎小球濾過功能。

腎功能發生障礙時，血液中的NPN排出受阻，則在血液中堆積。可根據此原理采用比色法測定血液中NPN含量。

二、腎功能檢查腎功能檢查方法中，通常測第七節病理解剖學檢查第七節病理解剖學檢查一、體表檢查在尸體解剖檢查之前，首先應檢查動物皮毛、皮膚、乳腺、四肢和尾巴是否有缺損、潰疤痕或其他異常現象。檢查眼、耳、鼻、口腔、肛門和外生殖器是否有異常分泌物、出血、損傷和其他改變。

一、體表檢查在尸體解剖檢查之前，首二、腹腔檢查1、剖開腹腔時，首先應檢查腹腔是否有積液，包括漏出液，滲出液、出血或積膿，必要時作涂片和細菌培養檢查。2、化學中毒性疾病應取胃內容物作毒物分析。3、檢查各臟器的位置是否正常，有無畸形。腸袢之間是否粘連。胃、大腸、小腸及盲腸是否有扭轉、出血，穿孔或壞死，淋巴結是否腫大。

二、腹腔檢查1、剖開腹腔時，首先應檢查腹腔是否有積4、檢查腹腔各臟器表面完畢后，依次將各臟器取出，先摘出脾臟，其次取出小腸和大腸，再取出肝、胃、十二指腸和胰腺，最后取出腎上腺、腎和骨盆內器官。然后在十二指腸與空腸交界處切斷，結扎兩切口，提起空腸，以長刀剝離腸系膜，將小腸、大腸取出，沿著腸系膜附著線剪開腸腔。5、檢查糞便是否有粘液、出血或寄生蟲。6、檢查腸粘膜是否有充血、出血、穿孔、腫塊或炎性滲出物。7、注意檢查回腸集合淋巴結是否有增生或潰瘍等。

4、檢查腹腔各臟器表面完畢后，依次將各臟器取出，先摘8、胃：沿大彎剪開，檢查同上。9、肝：在檢查肝臟之前，首先檢查膽囊是否有結石，并擠壓膽囊，觀察膽汁是否從十二指腸壺腹部溢出。肝臟主要檢查有無腫大、硬化、腫瘤、寄生蟲，并注意檢查門靜脈有無血栓，切開肝臟第一刀應自上向下切一最大切面，再連續切開檢查。

10、腎臟：應注意檢查顏色，是否腫大或縮小，以及有無炎癥反應、硬化，腫塊及結核等。并注意腎盂有無結石。腎切開應從腎外緣向腎門方向剖開。

8、胃：沿大彎剪開，檢查同上。三、胸部檢查

剪下胸骨，先取出胸腺，然后檢查兩側胸腔是否有積液，胸膜是否有出血點、炎癥或粘連。

剖開心包，觀察心包液的量、顏色、性質等。并觀察心臟的形狀，各室是否擴大。心尖是否變圓，心外膜是否光滑或有出血點三、胸部檢查剪下胸骨，先取出胸腺，然后心臟的取出與剖驗取出心臟之前，先在體內剖開右心和肺動脈，檢查肺動脈內是否有栓塞，然后以左手將心臟提起，剪斷肺動脈和主動脈。

剖開心臟的步驟：（1）剪(切)開上、下腔靜脈，自右心房向下至心尖部作直線剖開。（2）從心尖向肺動脈方向作一切口。(3)剪開肺靜脈，向心尖部作一切口，再向主動脈方向作一切口。

記錄各瓣膜的周徑，左、右心肌厚度，檢查各瓣膜是否有贅生物或增厚，心內膜是否有附壁血栓，心肌是否有梗死灶。主動脈和冠狀動脈內壁是否有粥樣斑塊。注意各部位是否有先天性異常現象。

心臟的取出與剖驗四、腦與脊髓的檢查腦：剖開顱骨取腦時，首先檢查蛛網膜下腔是否有炎性滲出物，腦表面是否有出血或腫塊等。取出腦組織后應先固定，然后剖開檢查：固定方法是在腦底較大動脈下方穿一根線，懸空吊在瓶中固定，以免沉底后變偏。切腦時，先將小腦取下(左右各一切，做v字型切口)。再將大腦放在一塊木板上，自前額葉做冠狀切面。根據腦大小做數切面，并逐層檢查。脊髓：取脊髓的方法是先切開背部皮膚，再剝離棘突上的軟組織，以骨鉗將棘突和椎板一一鉗去，便可露出脊髓的硬脊膜，剪開后即可取出固定。

四、腦與脊髓的檢查腦：剖開顱骨取腦時，首先檢查蛛網膜下腔是五、取材注意事項1、切取組織塊的大小一般為1.0cm-1.5cm，厚為0.3cm，但也可根據需要確定切取大小及厚度。2、固定液一般為10％福爾馬林，某些特殊染色應與病理室聯系。3、取樣要全面且具有代表性，能顯示病變的發展過程。在一塊組織中要包括病灶及其周圍正常組織。器官應包括重要結構部分，如胃、腸應包括從漿膜到粘膜各層組織，并能看到淋巴濾泡。腎臟應包括皮質、髓質和腎盂。

五、取材注意事項1、切取組織塊的大小一般為1.0cm-1.

實驗動物的生理病理檢測

實驗動物的生理病理檢測

第一節

一般體征的檢查與測量方法

第一節

一般體征的檢

一、體重的測量方法動物體重借助稱量儀器測量小鼠、大鼠：稱重可用帶游碼的普通天平或電子秤稱重。兔、豚鼠：可直接放在嬰兒秤上稱重，從嬰兒秤圓形刻度盤上讀取動物體重。犬：經訓練后可直接放在磅秤上稱重。未經馴服的犬，先將犬嘴綁好，由實驗員把犬抱起站在磅秤上稱重，記下讀數，減去實驗員體重，即為動物體重。

一、體重的測量方法動物體重借助稱量儀器測量二、體溫的測定方法

動物體溫測定是動物實驗中最常用的檢測指標之一。

在測定前應先固定好動物。一般測大鼠或小鼠體溫時，左手帶上布手套，將鼠抓起，并將鼠固定于實驗者手心，同時用環指和小指把鼠尾固定；兔則可用左臂夾住兔體，左手提起尾巴，犬可固定在臺上，然后右手持頭瑞涂上少許凡士林的肛表，由肛門插入直腸一定深度。測量時間3min。

測定體溫除了用肛表外，還可用半導體點溫度計可立即從溫度表上讀取溫度數。

二、體溫的測定方法動物體溫測定是動物實驗中最常用的檢各種成年動物的正常體溫各種成年動物的正常體溫三、脈搏的檢查方法

檢查脈搏較為重要，可以根據脈搏頻率和性質，判斷動物心臟和血液循環狀態以診斷動物的疾病及判定其預后。

檢查犬、貓、兔等較大動物的脈搏時，先將動物略加固定，待其安靜后，用右手伸入動物股部內側，食指和中指壓于血管上左右滑動，可感覺到血管象富有彈性的橡皮管在指下滑動。按脈的大小、強弱和軟硬，分別施以輕壓、中壓和重壓，體會脈搏的性質和節律。

小動物的脈搏可直接在動物左側胸部用手觸及心跳最明顯處，計數一定時間，算出每分鐘心跳次數。三、脈搏的檢查方法檢查脈搏較為重要，可以根四、呼吸頻率的測定方法

動物呼吸頻率和呼吸深度的改變是實驗時常見的癥狀之一，對闡明藥物作用的機制具有重要意義。

因此在實驗前后必須注意檢查動物的呼吸節律、頻率、深度的變化。這些變化可標志出呼吸器官的功能狀態。頻而表淺的呼吸是肺通氣量不足的癥狀。

動物呼吸頻率的測定方法十分簡單：首先使動物處于相對安靜狀態，以肉眼觀察并記錄呼吸的次數，一般要求記錄1min的呼吸次數。

四、呼吸頻率的測定方法動物呼吸頻率和呼吸深第二節血液及造血功能常用

指標的檢查方法第二節血液及造血功能常用

一、血液常用指標的檢查（一）紅細胞計數動物紅細胞計數可用普通的血細胞計數器，也可用光電比濁法。

方法（試管法）：

用血紅蛋白吸管吸取靜脈血20mm3

，擠入盛有4mL紅細胞稀釋液的華氏小試管中搖勻，滴入計數池，靜置3min，在高倍鏡下數中央大方格中的5個中方格中紅細胞數量，相加，計算（5格的總和×10000即為每1/2mm3

內的紅細胞數）。一、血液常用指標的檢查(二)白細胞計數

與紅細胞計數一樣，可用普通的血細胞計數器，也可用電子血細胞計數機計數。計數方法：

用血紅蛋白吸管吸取動物靜脈血至20mm3處，立即擠入盛有0.4ml白細胞稀釋液的小試管內，充分搖勻，將混懸液滴一小滴入計數池，靜置3min，在低倍鏡下數四角4個大方格的白細胞數，計算（4格白細胞總數×50=1mm3的白細胞總數。(二)白細胞計數

與紅細胞計數一樣，可用(三)白細胞分類計數采血推片干燥染色計數形態鑒別：（1）嗜中性粒細胞：10-12um，有嗜中性顆粒。（2）嗜酸性粒細胞：略大于嗜中性粒細胞，顆粒大，位于核外，粉紅色，核明顯，常分兩葉。（3）嗜堿性粒細胞：略大于嗜中性粒細胞，顆粒粗大壓在核上，呈紫色，核不明顯。

(三)白細胞分類計數采血推片（4）淋巴細胞：8-15um，一般圓的多，核偏一邊，核染色質排列成斑塊狀，較致密。核與胞漿比例為9：1或8：2。胞漿呈淺藍色，有時有灰青顆粒。核的形狀以圓形最多。（5）單核細胞：15-20um，胞漿淺淡，核腎形多有壓跡．核染色質疏松，核兩端常切斷胞漿。

（4）淋巴細胞：8-15um，一般圓的多，核偏一邊，核染色質(四)血小板計數計數方法：(1)小試管內加血小板稀釋液0.4mL，取動物靜脈血20mm3，迅速擠于稀釋液內，立即充分搖勻。(2)放置4—10min，待溶液呈透明紅色，說明紅細胞已經充分溶解，充分搖勻，取l小滴加入計數池。(3)放置10一15min，待血小板完全下沉后，先將中央大方格移至低倍鏡視野內，再轉以高倍鏡，數5個中方格內的血小板數。(4)血小板大小形態不一致，但均呈折光的發亮淡藍色小點，大小約紅細胞的1／7—1／2，呈不規則圓形或長圓形。在計數時必須來回扭動顯微鏡微調，不要遺漏計數。(5)計算：5個中方格的總和×l000=1mm3血液的血小板數。

(四)血小板計數計數方法：(五)血細胞比容容量及紅細胞

降率(血沉)測定1．血細胞比容容量測定

常用Wintrobe測定法：測定時，以EDTA二鈉作為抗凝劑，5mL靜脈血加1滴EDTA二鈉，以細而長的吸管吸取抗凝血，插入Wintrobe管底部，自上而下輕輕地把血液注入至刻度10處，不能夾有氣泡，在校準過的離心機內以3000r／min的速度離心30min，壓緊的紅細胞的高度(mm)即為血細胞比容容量數值，常以百分率表示。

(五)血細胞比容容量及紅細胞

降率2．紅細胞沉降率的測定以干燥草酸鉀和草酸銨或EDTA二鈉作為抗凝劑，將抗凝血加入Wintrobe管內到刻度10處，垂直放置，記錄1h紅細胞沉降的毫米數。測定時應在22—27℃之間的室溫下進行。

2．紅細胞沉降率的測定二、造血功能常用指標的檢查

1．骨髓細胞計數將小鼠頸椎脫位處死，取l根股骨，用10mL3％醋酸溶液沖出骨髓細胞，在血細胞計數器上計數4個大方格的細胞數，所得細胞數乘以2.5X100000，即為l根股骨中骨髓有核細胞數。2．骨髓細胞分類將小鼠解剖后，取l或2節胸骨作骨髓涂片，經甲醇固定后，用瑞氏或姬姆染液染色：分類計數500個骨髓有核細胞。二、造血功能常用指標的檢查1．骨髓細胞計數將小鼠頸椎脫3．骨髓粒細胞分裂指數

小鼠腹腔注射0.1mL(50ug)秋水仙堿溶液，5h后，取作骨髓涂片，經甲醇固定，用瑞氏或姬姆染液染色，計數每1000個粒細胞中分裂的粒細胞數。4．白細胞計數和分類切開小鼠腹股溝，切斷股動脈，取0.02mL全血加在15.9mL的生理鹽水中，加入0.1mL1%皂素溶解紅細胞，利用電子血細胞計計數白細胞。同時取1滴全血作涂片，經甲醇固定后，用瑞氏或姬姆染液染色，分類計數100個白細胞。

3．骨髓粒細胞分裂指數小鼠腹腔注射0.1mL(50ug)5．白體在脾臟和骨髓中的摻人試驗每只小鼠腹腔注射含有59Fe的枸櫞酸鹽緩沖液0.2mL(pH6.1)，6h后取出脾臟和兩根骰骨，分別置于玻璃膠布內，應用Fricarb1700型定標器測定放射性強度。6．白體在周圍血細胞中的摻人試驗

每只小鼠腹腔注入含有59Fe的枸櫞酸鹽緩沖液0.2mL(pH6.1)，3d后切開股動脈，取全血0．2mL滴人脫脂棉球內，用玻璃膠布包好后，測定放射性強度。

5．白體在脾臟和骨髓中的摻人試驗每只小鼠腹腔注射含有7．3H—胸腺嘧啶核苷的摻人試驗小鼠腹腔注入1mL3H—TdR，2h后取出脾臟，用生理鹽水沖出股骨和脛骨中的骨髓細胞，分別測定DNA含量和放射性強度。8．胸腺和脾臟重量測定動物活殺后取出脾臟和胸腺，用扭力天平稱重，分別計算出占動物體重的百分比。脾臟占體重的百分比反映動物骨髓外造血功能，正常小鼠脾臟占體重的1．81％左右。

7．3H—胸腺嘧啶核苷的摻人試驗小鼠腹腔注入1mL3H—第三節

血壓的測定與記錄方法

第三節

血壓的測定與記錄方法一、直接描記法

動物血壓直接描記法是動物實驗中最常用的方法，將套管直接插入動物動脈或靜脈內，套管的另一端連接血壓換能器，血壓換能器并與生理記錄儀相連。動物動脈血壓測定常采用頸總動脈或股動脈。分離出一側頸總動脈后，用縫線將動脈離心端扎緊，再用動脈夾在近心端夾住。在近扎線處下方，用眼科剪向心端將動脈剪一小口，將預先充滿抗凝劑的換能器插管從剪口向心方向插入頸總動脈，然后用預先備好的縫線連同套管及動脈一起扎牢，并固定于動物體上。松開動脈夾，動脈壓力信號由換能器轉換變為電信號后輸入生理記錄儀，描記出動脈血壓曲線。

一、直接描記法動物血壓直接描記法是動物二、間接測壓法

在慢性性實驗進行長期反復的血壓觀察時，采用此種方法。

（一）犬1．股動脈測壓法測量方法基本同一般人體血壓測量，但血壓計的壓力袋規格不同。2．頸部皮橋測壓法狗的間接測壓法多按VonLeesum法將頸動脈引至皮瓣內，然后測量該動脈血壓。皮橋手術后10一12d，皮橋變柔軟，試診時脈搏良好，即可進行測壓。此時用一般聽診器可測知收縮壓和舒張壓。

二、間接測壓法在慢性性實驗進行長期反復的血(二)兔1．頸部皮橋測壓法

基本和狗一樣。但兔皮瓣必須保留保留較多的皮下組織，以防止手術后皮瓣干枯。2．腹主動脈測壓法

將兔背臥固定在手術臺上，把血壓計和橡皮壓力袋纏于兔的下腹部，松緊適當，與測人血壓相同。（三）大鼠

多用鼠尾動脈測壓，也可用下肢動脈測壓。(二)兔1．頸部皮橋測壓法基本和狗一樣。但兔皮瓣必須第四節

尿液與糞便的檢查方法

第四節

尿液與糞便的檢查方法一、尿液的檢查方法

尿液的性狀與組成，可反應機體的代謝情況。特別是泌尿系統本身的疾病，對尿液成分影響更大。尿液檢查是泌尿系統疾病的診斷和觀察療效的重要方法。

尿液的采集，參照實驗動物各種體液收集方法。一般用清潔容器收集新鮮尿液，以晨尿為好，因晨尿濃度較高，易發現病理成分。作細菌培養時，應消毒外陰后留中段尿，必要時進行導尿。化學定量檢查時，應收集24h全部尿液，并加入適當的防腐劑(按尿量的0.5％一1％加入甲苯)。

一、尿液的檢查方法尿液的性狀與組成，可1、尿量檢查常用實驗動物的尿量見下表

1、尿量檢查常用實驗動物的尿量見下表(1)尿量增多

一晝夜尿量超過正常值范圍，稱為多尿。生理性尿量增多見于大量飲水或食含水分過多的蔬菜所致。病理性尿量增多，見于糖尿病、尿崩癥等。(2)尿量減少一晝夜尿量少于正常值范圍稱少尿，見于急性腎炎、急性腎功能衰竭等。

(1)尿量增多2．尿色檢查正常新鮮尿液多為黃色或淡黃色，尿的顏色多受食物或藥物的影響。(1)血尿

呈洗肉水樣或混有血凝塊。(2)血紅蛋白尿

呈濃茶色或醬油色，鏡檢無紅細胞，隱血試驗為陽性。(3)膽紅素尿

呈深黃色，振蕩后泡沫亦呈黃色。(4)乳糜尿為乳白色尿液，有時混有少量血液。2．尿色檢查正常新鮮尿液多為黃色或淡黃3、尿酸堿試驗正常一晝夜混合尿液呈弱酸性，pH值為5.4—8.4。食肉類動物尿液多呈酸性，素食類動物尿液可呈中性或弱堿性，在酸中毒、發熱時，尿液可呈較強酸性，可用pH試紙測定。4、尿比密

尿液比密與其中所含溶質的濃度成正比，一般用尿比密計進行測定，比密計上的刻度是以尿溫在15℃時制定的，當被檢尿溫每增加3℃加0.00l，每減少3℃減0.001。大量飲水時尿量增加，其比密降低；體內缺水時，尿量減少，比密增高。

3、尿酸堿試驗5．尿蛋白定性試驗

加熱醋酸法：取小試管一支，加尿液至2/3高度，手持試管下端。將上部尿液以火焰加熱，煮沸后加5％醋酸2—4滴，再加熱至沸即可觀察結果。如渾濁不消失，為尿蛋白陽性；若混濁消失則是磷酸鹽所致。結果判斷應以試管下部尿液為對照,觀察上部尿液的變化。6、尿糖定性試驗

取試管一支，加入班氏尿糖定性試劑2mL，加熱至沸，加尿液再煮沸2min，判定結果。

5．尿蛋白定性試驗二、糞便的檢查方法

糞便檢查是了解和診斷消化系統疾病的重要方法。糞便檢查常用于了解糞便中有無炎性產物、血液、寄生蟲卵或蟲體等病理成分，并可判斷胃腸、胰腺、肝、膽功能狀態及糞便中有無致病菌。

1．一般性狀檢查

(1)顏色：黃褐、黑色、灰白、鮮紅等。(2)性狀：水樣或粥樣，粘液、膿樣、血樣。(3)氣味：特殊臭味、酸臭、腐敗臭。

二、糞便的檢查方法糞便檢查是了解和診斷2．顯微鏡檢查

在潔凈的載玻片上滴1滴生理鹽水，用木簽挑取少許糞便與生理鹽水混合，涂勻，厚度適中。先用低倍鏡將全片檢視一遍，再用高倍鏡仔細觀察各種細胞、阿米巴包囊及滋養體等。注意下面各種物體的種類和數量。

（1）細胞：紅細胞、白細胞，巨噬細胞等。（2）原蟲及滋養體：阿米巴、鞭毛蟲的滋養體及包囊。（3）寄生蟲卵：各種寄生蟲卵的量，一般以低鏡視野下的數量表示。

2．顯微鏡檢查3、隱血檢查當上消化道少量出血時，糞便外觀無異常改變。凡疑有上消化道少量出應進行隱血檢查。方法：隱血檢查時，將少許糞便涂于潔凈玻片或濾紙條上，加1％聯苯胺冰醋酸液及3％過氧化氫液各一滴。如無顏色改變為陰性反應；出現藍顏色變化為陽性反應。

正常為陰性，上消化道出血為陽性。

3、隱血檢查當上消化道少量出血時，糞便外觀

第五節

胸、腹腔及腦脊液的檢查方法

第五節

胸、腹腔及腦脊液的檢查方法一、胃液的檢查

胃液檢查的目的在于了解胃的分泌、運動功能和胃液中有無病理成分改變有關的疾病。胃液收集在清晨空腹插入胃管，抽出全部胃液。1．一般性狀檢查(1)量：當十二指腸潰瘍或幽門梗阻時，空腹胃液量常增多。(2)色：正常胃液無色，如膽汁反流時呈黃色或草綠色，如有紅色表示有新出血；咖啡色證明血液在胃內存留時間較長，多為慢性潰瘍病。(3)味：正常胃液有輕度酸味，無特殊臭味。腐敗氣味或惡臭味均為病理改變。

一、胃液的檢查胃液檢查的目的在于了解胃的分2、化學檢查(1)游離鹽酸和總酸度檢查：給實驗餐后lh，游離鹽酸和總酸度明顯增多，如給組胺20min后增多可達最高峰。患潰瘍性病變，其胃液酸度增多；萎縮性胃炎、腫瘤時，胃液酸度明顯減少。(2)乳酸定性檢查：正常胃液內僅有少量乳酸。一般定性檢查為陰性；當胃酸缺乏時，胃內容物發酵，乳酸含量增多，乳酸試驗呈陽性反應。

2、化學檢查(1)游離鹽酸和總酸度檢查：給實驗餐后lh，游離3．顯微鏡檢查正常胃液內無紅細胞，可有少數白細胞及扁平上皮細胞，當胃受損出血時，胃液內可見紅細胞，胃炎時白細胞數增多。3．顯微鏡檢查二、十二指腸引流液檢查十二指腸引流液是指用導管引流的十二指腸、膽總管、膽囊和肝膽管內的液體。通過引流檢查可了解實驗動物膽汁分泌情況、膽管和胰腺功能狀態，對肝臟和膽道疾病有重要診斷意義。1、一般性狀檢查注意各部分膽汁的分段是否明顯；十二指腸液、膽總管膽汁(A)、膽囊膽汁(B)、肝膽汁（C）各部分膽汁的量、色、性狀等。將四種引流液分別收集于無菌試管內及時送檢。二、十二指腸引流液檢查十二指腸引流液

病理情況下，無B膽汁排出時，灌胃33％硫酸鎂后，仍無B膽汁排出則應考慮為膽總管梗阻或膽囊收縮不良。在灌入33％硫酸鎂前已有綠色或黑褐色B膽汁流出，則多見于膽管擴張，并伴有感染、膽汁淤積。3．顯微鏡檢查

正常膽汁中可有少量白細胞，偶見上皮細胞、膽固醇結晶、膽紅素結晶、膽紅素鈣結晶。膽管炎癥時可見大量膿細胞。

4．細菌學檢查

十二指腸的引流液的細菌學檢查，可發現膽道炎癥的病原菌，作為治療的參考。

病理情況下，無B膽汁排出時，灌胃33％硫酸三、胸、腹腔積液的檢查

穿刺取出標本分為兩份，一份抗凝；另一份不加抗凝劑，以觀察能否自凝。標本采集后應立即送檢。

1．一般性狀檢查

(1)相對密度：應在標本采取后立即測定，方法同尿液相對密度測定。

(2)外觀：

漏出液多為淡黃色，透明或微濁，不自凝。滲出液可呈深淺不同的黃色，混濁而凝結。

三、胸、腹腔積液的檢查穿刺取出標本分為兩2．化學檢查

(1)粘蛋白定性(Rivalta)試驗

取100mL量筒一個，加100mL清水，然后滴入冰醋酸2滴，混勻：再加入標本l一2滴，立即觀察結果。如有明顯白云霧狀混濁，下降很快，沉淀能拖長20cm左右，為陽性反應；如混濁不明顯，下降緩慢，中途消失者，為陰性反應。漏出液為陰性反應，滲出液為陽性反應。(2)蛋白定量測定

漏出液蛋白含量在25g/L以下，滲出液在25g/L以上。

2．化學檢查(1)粘蛋白定性(Rivalta)試驗3．顯微鏡檢查

漏出液細胞計數常少于l×l05個/mL，分類以淋巴細胞和間皮細胞為主。滲出液常多于5×l05個/mL，出現大量中性粒細胞。4．細菌學檢查

標本采集后經離心沉淀，取沉渣涂片，作革蘭染色及抗酸染色，油鏡觀察。結果漏出液無細菌，滲出液中常可找到致病菌。

3．顯微鏡檢查四、腦脊液的檢查1．一般性狀檢查(1)壓力測定：根據腦脊液自穿刺針流出的滴速來推測壓力的高低。如每分鐘60滴以下，表示顱內壓大致正常；每分鐘60滴以上即表示顱內壓增高。(2)顏色：正常腦脊液為無色液體。如蛛網膜下腔出血、腦出血，則腦脊液呈均勻血性，離心后上清液呈淡紅色或黃色；當蛛網膜下腔陳舊性出血或脊椎管阻塞時，腦脊液的蛋白質含量增高而呈黃色。

(3)透明度：正常清晰透明。(4)凝結：正常腦脊液靜置12h亦不會凝結。當腦膜炎癥時，腦脊液靜置12h后即可出現凝結。四、腦脊液的檢查1．一般性狀檢查2．化學檢查(1)蛋白定性試驗：本試驗為腦脊液中蛋白質與石炭酸結合，形成不溶性蛋白而析出沉淀。正常腦脊液為陰性。當腦膜或腦實質炎癥時，腦脊液蛋白質含量增加，定性試驗呈不同程度的陽性反應。(2)蛋白定量試驗：在腦膜或腦實質炎癥、腦出血時，腦脊液蛋白質含量增加。(3)葡萄糖定量試驗：腦脊液葡萄糖含量與血糖濃度關系密切，約為血糖的60％。細菌感染時，腦脊液中糖含量減少；病毒感染卻增加。

2．化學檢查(1)蛋白定性試驗：本試驗為腦脊液中蛋白質與石3．顯微鏡檢查(1)紅細胞

正常腦脊液中無紅細胞。如腦出血或穿刺損傷血管時，可有大量紅細胞出若為陳舊性出血，可見多數皺縮的紅細胞。(2)白細胞計數及分類

正常腦脊液中細胞數極少，平均為0—8個/uL，多為淋巴細偶見內皮細胞。病毒感染以淋巴細胞增多為主；化膿性炎癥，以中性粒細胞增多為主。

3．