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文檔簡介

實驗四酵母細胞的固定化高大響一、實驗目的和要求了解固定化細胞的原理。掌握用海藻酸鈉制備固定化酵母細胞的方法。二、實驗原理工業上常用包埋法固定微生物細胞。根據包埋劑的特性，海藻酸鈉在水相中加熱溶解呈溶液狀。將細胞加入混勻，滴入氯化鈣溶液中，由于離子的轉移作用而凝固，形成凝膠顆粒，凝膠顆粒中的微小空格將細胞固定。海藻酸鈣凝固的顆粒能反復使用，細胞在空格中可新陳代謝（固定活細胞），也可以利用細胞中的酶進行酶促反應（固定死細胞）。本實驗利用海藻酸鈣凝膠包埋酵母生長細胞。酵母細胞的活化取市售干酵母按1g投入到20ml

36～38℃的溫水中活化15～20分鐘，酵母細胞活化時體積會變大，活化前應該選擇體積足夠大的容器，以避免酵母細胞的活化液溢出容器外。四、實驗方法和步驟酵母細胞的固定化在冷卻至45～50℃左右海藻酸鈉溶液中，加入5mL預熱至35℃的酵母培養液，混合均勻。將混合液裝入注射器中，裝上大好針頭，以緩慢而穩定的速度將其滴入1.5％CaCl2溶液中，邊滴邊搖動三角瓶，即可制得直徑為3mm左右的凝膠珠。在CaCl2溶液中鈣化30min，即可使用。四、實驗方法和步驟

加熱使海藻酸鈉溶化是操作中最重要的一環一定要溶解徹底，在溶解過程中不斷攪拌，在降溫過程中不能低于45℃，否則會凝固。

五、注意事項

海藻酸鈉的濃度涉及到固定化細胞的質量如果海藻酸鈉濃度過高，將很難形成凝膠珠；如果濃度過低，形成的凝膠珠所包埋的酵母細胞的數目少，影響實驗效果。

五、注意事項

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