1、ThermoFisherLCQFleet型液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀操作規(guī)程一、開機(jī)與關(guān)機(jī)開機(jī)前，先檢查氮?dú)夂秃獾膲毫κ欠駶M足分析要求。翻開氦氣鋼瓶純度99.995%壓力表總閥，調(diào)整分壓表到0.15MPa。翻開氮?dú)怃撈考儔毫Ρ砜傞y，調(diào)整分壓表到0.40.6MPa。FCQ Fleet 總電源開關(guān)，機(jī)械泵開頭工作。此時(shí)勿翻開電子開關(guān)。在此狀態(tài)下抽真空，抽真空的時(shí)間依據(jù)下表：項(xiàng) 目停機(jī)時(shí)間抽真空時(shí)間14d 以上24h21-3d8h30.5d1h 存好，再裝上離子源。關(guān)機(jī)：關(guān)機(jī)挨次與開機(jī)挨次相反，無特別狀況或長假，質(zhì)譜儀不關(guān)機(jī)。二、日常開機(jī)機(jī)械泵未關(guān)閉時(shí)開機(jī)前的預(yù)備工作檢查設(shè)備電源、流路、信號(hào)連接是否完好

2、。0.45um 微孔濾膜抽真空過濾。夏天溫度較高時(shí)，純水或緩沖鹽盡量每天更換，以免長菌。流淌相添加劑：不要使用無機(jī)酸、堿金屬堿，它們會(huì)導(dǎo)致儀器腐蝕，推舉使子抑制作用，因而清洗用于液質(zhì)的樣品瓶等不要用洗滌精等外表活性劑。開機(jī)先翻開氮?dú)饪傞y，漸漸調(diào)整分壓表到 0.5MPa。 計(jì)算機(jī)。機(jī)狀態(tài)時(shí)，儀器才可以正常使用。翻開計(jì)算機(jī)桌面上的“Instrumentconfiguration”軟件，對(duì)儀器進(jìn)展配置。具體方法如下： MS DetectorOK； Chromatography MS LinkconfigureOK；Done選項(xiàng)，儀器開頭配置。翻開計(jì)算機(jī)桌面上的“Chromeleon Xpress”t

3、ake over control，對(duì)PurgeMore Options Purge0.2ml/min，穩(wěn)定儀器。翻開“LCQtune”界面，對(duì)質(zhì)譜儀各項(xiàng)參數(shù)進(jìn)展設(shè)定。離子源的選擇：ESI 源大氣壓下化學(xué)電離離子源。絕大多數(shù)的ESI 源分析，尤其是有益于那些熱不穩(wěn)定化合物、中等到高極性化合物和大分子蛋白/多肽的樣品分析。分子量較小的化合物、低極性APCI 源進(jìn)展分析。不同的離子源，液相流速也不一樣。離子源離子源流速范圍最正確流速說 明ESI1 L/min - 1mL/min一般來說, 高流速需要高的毛200 L/min細(xì)管溫度和氣體流速。一般來說，高流速需要更高的APCI200L/min - 2

4、mL/min500 L/min鞘氣和關(guān)心氣流量，但不需要提高毛細(xì)管溫度。對(duì)于 ESI 源，各項(xiàng)參數(shù)設(shè)定如下：液體流速液體流速Rate(l/min)金屬毛細(xì)管鞘氣壓力arb關(guān)心氣壓力arb噴霧電壓ISprayvoltage(kv)5.024050+3.5(-3.0*)200350355+4.0(-3.5*)10004007520+4.5(-4.0*)當(dāng)轉(zhuǎn)變離子傳輸毛細(xì)管或金屬毛細(xì)管的溫度時(shí)肯定要優(yōu)化透鏡電壓*當(dāng)轉(zhuǎn)變離子傳輸毛細(xì)管或金屬毛細(xì)管的溫度時(shí)肯定要優(yōu)化透鏡電壓* 負(fù)離子模式氦氣，也可能造成真空度很低。前極真空度的數(shù)值與離子源的溫度有關(guān)，溫度越高數(shù)值越小。在“LCQTune”質(zhì)譜把握軟件中，

5、點(diǎn)擊界面上的“Vacuum”按鈕，觀看質(zhì)譜真空狀態(tài)。在“IonGauge”選擇氦氣，也可能造成真空度很低。前極真空度的數(shù)值與離子源的溫度有關(guān)，溫度越高數(shù)值越小。參數(shù)單位正常范圍高真空IonGauge Pressure10-5Torr0.75-1.50前極真空ConvectronGauge PressureTorr1.0-1.5說明：三、方法和序列的建立建立分析方法翻開計(jì)算機(jī)桌面上的 Xcalibur 軟件，選擇 Thermo Xcalibur Roadmap，選擇 Dionex ChromatographyFCQFleet MS Dionex Chromatography中，需要設(shè)定柱溫、泵、

6、自動(dòng) MS 中設(shè)定質(zhì)譜的采集時(shí)間、掃描模式、掃描范圍以及正負(fù)離子檢測模式等參數(shù)。一般而言，分析有機(jī)酸，選用負(fù)離子模式；有機(jī)堿，選用正離子模式。建立分析序列序號(hào)名稱1Sample Type設(shè)置要求方法建立后，回到ThermoXcaliburRoadmap，選擇序號(hào)名稱1Sample Type設(shè)置要求22345678File NameSample IDPathInset Method Position levelF2 在彈出的對(duì)話框中輸入“樣品名稱”填“1”即可譜圖存儲(chǔ)路徑，依據(jù)要求進(jìn)展設(shè)置選擇“InstrumentSetup”存儲(chǔ)好的方法“1”進(jìn)樣體積不填四、測試樣品進(jìn)樣當(dāng)分析方法和分析序列均建

7、立后，點(diǎn)擊 Run Sample分析單個(gè)樣品或是Run Sequenc分析序列“Load” 燈亮。譜圖觀看：包括在線觀看和離線譜圖兩種。Thermo Xcalibur Roadmap Instrument setup 下，右鍵 BrowserOpen Sequence In Progress 可實(shí)時(shí)查看圖譜狀況“Path”，可以離線查看相應(yīng)的譜圖。五、儀器的維護(hù)每次使用儀器后，要對(duì)儀器進(jìn)展如下維護(hù)： 15min。 15min。 Gas Flow Rate鞘氣”5min。 APCI 電暈針重堵封管路，以防灰塵進(jìn)入；關(guān)閉電子開關(guān)。每周維護(hù)儀器檢查泵油高度和質(zhì)量，假設(shè)需要的話，添加泵油。假設(shè)儀器使用率很高時(shí)，每周一次清洗 API Stack 包括金屬毛細(xì)管，Ski