1、體外診斷試劑臨床研究相關技術要求北京培訓 2011.8.18 下午13：30 主講：陳亭亭老師，播報員：樂爸，夢之光，記錄員：依桐聽雨記錄內容以群中播報順序為序，由于時間緊迫，沒整理序號，反正是按序排列的，大家理解吧。本次主講，針對通用的臨床要求。但企業不要完全套用，今后審評三處將陸續推出診斷試劑的指導原則臨床評審主要依據醫療器械臨床試驗規定，5號令體外診斷試劑注冊管理辦法（試行）（國食藥監械2007229號）體外診斷試劑注冊申報資料形式與基本要求的公告 （國食藥監械2007609 號）體外診斷試劑臨床研究技術指導原則（國食藥監械2007240號） 其他發布的指導原則本次課上主要講解臨床研究指

2、導原則：包括臨床研究基本原則、設計原則、報告撰寫三個部分臨床研究基本原則介紹臨床研究，設計和管理是關鍵雖然該部分講解缺少方案的撰寫部分，但具體內容都體現在報告中了（報告和方案是對應的關系）設計和管理是臨床試驗的關鍵設計、管理、質量控制、過程監察、數據管理等等都是比較關鍵的（主講總結）臨床方案設計過程中，應以評審人員及產品未來上市角度對產品的評價需求及方法進行體現（樂爸總結）（資料中要體現出全面的內容）（一）基本要求1.倫理考慮：慮臨床研究用樣本對受試者的風險性的程度是否需要知情同意書剩余血液樣本，對受試者無風險，并無法獲得受試者知情同意，可以開倫理事宜的說明一般來說應該是倫理委員會提出，可以由

3、牽頭臨床單位提出新鮮樣本或必須有患者的直接取得的樣本，必須通過倫理委員會的認可臨床方案中，應對牽頭單位及參與單位進行說明倫理事宜的說明蓋倫理委員會的章倫理委員會對臨床方案提供的意見，以及方案的修改情況應在注冊申報資料中提出對研究對象信息保密，如：姓名、疾病情況等等臨床前的研究結果支持進行臨床研究研究單位及人員省級醫療衛生機構：許多藥物臨床基地不一定是省級醫療衛生機構省級：具有省級衛生醫療部門頒發的衛生醫療資質證明其它特殊情況：市級以上的疾控、?？漆t院、檢驗檢疫所、戒毒中心特殊產品：必須是特殊非常見或突發疾病或戒毒之類的產品，企業在選擇時應確認該臨床的特殊性人員要求：必須有相應的專業人員，并具有

4、與研究相適應的儀器臨床工作正式開始前：培訓、預實驗，熟悉方法、儀器及技術性能最大限度控制實驗誤差綜合考慮地區，人種，流行病源背景，病原微生物的特性等因素，臨床研究全過程，應吸收流行病學、統計學、臨床醫學、檢驗醫學等方面的專業人員（或知識）以保證研究方法科學合理臨床前的預實驗，可以保證正式臨床工作的順利推進和進行，以及結果的分析及統計（樂爸總結）（二）臨床研究設計原則本次主要內容1、研究方法臨床被考核試劑的批號應當與臨床試驗前申請人按照擬定產品標準做檢測時所用樣品批號一致，臨床前的檢測可以是自檢報告，也可以是申請人的委托檢測機構出具的檢測報告不同包裝規格時，可只采用一個包裝規格進行臨床僅限包裝體

5、積差異，其它完全無差異的情況。若成分差異則不作為不同包裝規格，最好分開注冊。即便如果要合并注冊，臨床也要分開舉例：膠體金，卡型和條型不同規格。需要進行臨床對比驗證；芯片，可以選擇最全的規格進行臨床1.1 新試劑：盲法同步，與金標準（病理組織學檢查，手術發現，影響診斷，病原體分離培養，長期隨訪等）進行比較早期診斷，療效檢測，預后判斷用途的，需進行跟蹤研究研究對象選擇：金標準確定未有某病的病例組用金標準正式無該病的患者和正常人群的對照組（包括易與本病混淆的疾病組）病例組包括：癥狀：典型和非典型；病程：早中晚；病情：輕重中；病種：說明書預期用途中聲稱；還要考慮年齡，常見干擾（用藥，代表性，常用藥物，

6、內源性物質等），交叉反應及易混病例，及無病患者用藥針對該疾病的常用或多用藥物（常見藥，常規藥）病例需分布均勻合理、覆蓋檢測范圍舉例：腫瘤標志物內源性干擾：自身抗體，RF，結構類似物及其它標志物等巨細胞病毒：弓形蟲，單純皰疹等干擾研究方法可參考注冊申報資料指導原則另有其他相關指導原則（征求意見稿或發布稿）已經發布的指導原則（腫瘤、血糖、流行性感冒病毒）在臨床試驗操作全過程和判定試驗結果時，應采用盲法（盡可能雙盲）是保證診斷實驗結果的真實可靠的關鍵，強調盲法應貫徹在臨床設計及實施全過程試驗分組：隨機盲法：單盲：病人不知道入組情況，研究者知道(亦帶來研究者的主觀偏倚）；雙盲：病人和研究者均不知應在臨

7、床方案中描述設盲方法，統計完成后揭盲臨床試驗中盡可能采用雙盲方法，盲法實施確有困難的，則采取手段使偏移降低到最小比如，第三方統一數據管理及統計1.2 已有同品種批準上市產品的證明與已上市產品等效對比試劑考慮方法學，臨床使用目的和范圍，主要性能指標標準品或校準品溯源情況，推薦參考值等臨床普遍認為較好方法學要求：原理一致同類產品，或原理一致靈敏度更優，樣本類型不得超越對照試劑如無原理一致，可選擇相近定量產品：參考值范圍相近，參考范圍要求，對照試劑應大于等于被考試試劑如果試劑選擇不合適，那么差異會被放大舉例，美國510k對比試劑的選擇：主要性能指標等同，適應癥等同，治療機理相同，基本組成相同，研究對

8、象選擇同前結果不符合的樣本，金標準或其他方法（較好或者更優）進行確認強烈建議：臨床前有充分的預實驗，預實驗：觀察同對照參比試劑的一致性如果考核試劑與對比試劑臨床整體結果差異較大，臨床是無意義的，此時做第三方確認無意義2）研究樣本用量在符合指導原則的有關最低樣本量的要求的前提下，還應符合統計學要求一般要求：3類，至少1000，2類，至少200，1類，一般不需臨床陽性樣本比例：符合統計學要求，統計學的最小樣本量:30例 臨床建議，陽性樣本占整體數量的三分之一以上特殊要求：血篩至少1萬，按照醫療器械管理的至少3000例，PCR方法用于病原體500。如果用于人的，應1000例補充：流式試劑至少500例

9、新診斷產品：定義為未在國內批準注冊的產品，被測物相同但分析敏感度指標不再國家已經批準注冊產品范圍內，且具有新的臨床診斷意義的產品進口產品，之前未在國內注冊同類產品的應提交資料說明該產品在國外臨床情況，以及注冊審批管理相關情況臨床協議：試驗機構及申請人（代理人）簽章臨床試驗方案：試驗負責人（簽名）、臨床試驗機構（簽章）、統計學負責人簽名及單位蓋章、申請人蓋章、倫理委員會（牽頭單位）蓋章臨床報告后面細講蓋章的要求：封面和騎縫要蓋章（建議，三份資料均應蓋騎縫章）臨床方案格式5號令要求可能有與診斷試劑產品特性不完全一致的內容，建議盡量參考并貼合要求包括如下：目的、背景，評價，風險收益分析，實驗人員，總

10、體設計，持續時間及理由，每病種試驗例數及確定理由，選擇對象范圍、對象數量及選擇的理由必要時對照組的設置，治療性產品應當有明確的額適應癥或適用范圍，臨床性能的評價方法和統計處理方法，副作用預測及應當采取的措施臨床試驗時間：從方案設計開始到最終統計結束，不建議臨床時間過短（舉例：1天？）5號令中方案內容第八及第九項內容，請大家特別關注，第十項可能不適用，第十一項請關注，臨床性能的評價方法和統計處理方法注意問題：1.重視報告，忽視方案2.方案內容應逐條詳細闡述，并有依據3.方案內容要和報告內容一一對應4.統計學分析方法及評價標準要在方案中預先設定臨床方案要求各臨床單位的方案應一致，所選參比試劑以及第

11、三方試劑應一致（為了滿足統計學基本要求），儀器應一致，考慮到特殊情況下不做硬性要求各臨床機構例數應均勻分布，醫學決策水平附近應滿足一定比例報告方式定性，不光提供陰陽性數據，還應提供S/CO值（尤其是乙肝，HIV等），判斷cutoff附近的數據特殊方法，如病理學或者電泳，PCR，有時會要求提供代表性的圖片，或者原始結果截圖總結報告有臨床試驗機構的牽頭單位或申請人（代理人）完成建議是臨床試驗機構牽頭單位完成，誰完成，誰蓋章臨床研究報告按照臨床指導原則封面同分報告正文內容和報告格式照著指導原則進行講解1、基本內容引言背景簡介被測物的來源等采用方法、原理、技術要求等國內外的批準上市情況研究目的試驗管理

12、管理結構：主要研究者、參加人員、實驗室指控情況、統計、數據管理情況以及發生變化的情況4.實驗設計大致描述試驗設計及研究方法選擇1）樣本量及樣本量確定的依據如滿足不了30%以上的陽性樣本數量，也可以根據流行病學要求設計樣本量，并提供文獻等資料說明2）樣本選擇依據、入選標準、排除標準和提出標準（應是方案中已有臨床專家確定的）樣本要說明所用類型，新鮮樣本或凍存樣本也應說明 3）樣本采集、保存、運輸的方法等4）金標準或對比試驗產品的確立注重依據臨床研究所用所有產品的信息名稱、規格、來源、批號等，注意在有效內6）質控方法的闡述7）臨床研究數據的統計分析方法應寫清楚8）研究過程中方案的修改一般情況下，方案

13、不宜更改，對于任何更改均需要說明要詳細闡述更改的時間、理由、過程、有無備案以及對研究評價的影響如果沒有更改，也應該進行說明一下5.臨床研究結果及分析如果使用不同疾病臨床病例（病程、分級），則需對不同病例（病程，分級）進行統計，必要時進行分析，制例數統計討論和結論不符合結果產生的原因及采取的措施（復測與否、或第三方驗證），驗證后額結果統計，仍然不符的原因及處置等等報告附件臨床研究中所采用所有試劑的使用說明書（原文應有翻譯件）臨床研究中所有臨床實驗數據研究人員的簡歷文獻變更事項中的臨床試驗常見情況介紹檢測條件及參考值同時發生變更：比如國際標準變化，試劑盒并無變化的，可以提供相關資料即可；其它（比如

14、質控品變化，檢測條件變化等）需要提供完整臨床試驗資料2）增加適應癥3）增加測定用樣本類型相同或者相近的（血清，血漿，全血）差異不大，對比驗證即可。比如一種做200例或者1000例，其它兩種各做50例比對即可，不是這種情況的，比如腦脊液或尿液等基質不同的，應分別進行臨床統計學分析基本要求1、定性分析：四格表 被考核試劑 金標準 合計 陽性 陰性陽性 a b陰性 c d敏感度：a/a+C，特異度D/B+D注意對照試劑法與金標準方法，在四格表統計上的差異。（名詞差異，比如金標準，可以叫敏感度，特異度；對照試劑法只能叫陽性符合率，陰性符合率）2）統計學檢驗配對卡方檢驗：說明的是檢出率或陽性率高低是否不

15、同KAPPA檢驗：說明的是檢出結果的一致性，大于等于0.75 一致性較好，小于0.40一致性不理想，并進行假設檢驗，有否統計學意義由于統計學問題，卡方與KAPPA聯合使用，可能出現結論相反的情況，企業酌情使用在診斷方面，kappa更好一些，如果兩個都做都不錯的話最好，兩個相反的時候不代表結果不好舉例：KAPPA = 0.324，結論是有一定的一致性？判定：結論錯誤一般定量的分析統計學：線性回歸y=kx+b求解，要求，K接近于1，b接近于0兩者進行假設檢驗，報告95%的置信區間r方：例如日本藥事法規定，方法比較時，一致率達到90%以上，定量r大于等于0.9，斜率在0.9-1.1之間；美國EP要求

16、，方法比較，r2=0.95，需要做個醫學決定水平偏倚及離群點分析，最多刪除2.5%的數據，如果偏移（95%置信區間）超出醫學決定水平允許偏差范圍，則不能判定實質性等同，需擴大樣本量重新試驗或重新設計產品錯誤案例介紹（已拍照）1） y=0.3x+a 斜率過低，相關系數過低，系數K以1附近為佳2）y=0.89X+0.46 數據線性分析OK，但數據過于分散，原因可能是未對離群點進行處理（刪除）等問題偏倚分析結合臨床可接受偏差范圍，制訂可接受偏移范圍1）測試數據點之間的偏倚圖例：橫坐標檢測范圍，縱坐標兩組試劑的均值的額差值參見EP 偏倚分析（這里建議大家好好看看美國的EP文件，很有參考價值）特殊產品的

17、舉例：血型、配型檢測試劑：按照IVD管理，例數要求不少于3000例，方法學區別情況下要重新做臨床？血站可以獲得較多樣本，但非血篩試劑不用于血站。因此要選擇具體使用的臨床機構來做HPV分型試劑盒，突變或芯片類試劑?？赡茌^多涉及極其罕見型別，不低于統計學要求（30例），實在收集不到，可申請。不批這一型別？金標類產品：如果跟同類比對不好，可以選擇不同原理的方法學產品比對，如用ELISA方法定量類試劑：如果有臨界值（cutoff值）可以判斷陰陽性，則除了對定量部分做相關回歸分析，還應該對定性的部分進行臨床驗證并進行統計分析境外臨床試驗資料提交方式1.境外完成的臨床試驗資料或境外臨床使用情況總結2.舉例

18、：美國，日本：要求方法學比較歐洲：不同臨床地點，臨床樣本做的性能資料（準確度，精密度，特異度，敏感度等）3.變更涉及到前述需要提交臨床資料的條款，境外產品同時也需要提交境外資料4.醫療器械產品境外臨床資料提交（性能資料，設計驗證報告，臨床應用資料，總結報告，文獻），這部分指的是臨床檢驗分析儀器，可參考文獻EP9-A2注意：如果產品在國外不需要臨床的，建議提交設計驗證報告，或臨床應用資料，或臨床總結報告，或使用該產品發表的臨床使用相關文獻資料不可以僅僅提供一個聲明現場答疑1、問：產品性能指標不變，試劑條件不變，只有參考值變化，怎么處理？答：定性試劑盒CUTOFF值變化，此時應重新做臨床；臨床疾病

19、參考范圍問題目前國家評審中心正在討論2、問：倫理問題的說明，牽頭單位沒有倫理委員會答：實在沒有倫理委員會的話，醫院管理部門蓋章也行3、問：變更臨床與首次注冊臨床答：只要重新做臨床，要求都是一樣的4、問：生化儀，在原產國沒有上市答：不能注冊，有法規要求5、問：臨床資料上騎縫章答：醫院和企業共同蓋章6、問：金標產品，分析性能已經做了對比試驗答：這種只要做一種就行，但一般建議做條形的，不做卡型的7、問：分型用檢測系統，有分型系統，試劑和專用耗材答：分拆注冊8、問：沒有參考物質的，與進口試劑做方法學比對，確定準確性答：可以9、問：三類試劑，兩種標本類型答：看什么類型，如果標本完全不同的，各按1000例完成10、問：腫瘤PCR檢測產品，炎癥也有表達。但表達程度不同答：能準嗎？11、問：凍存樣本答：對于特別難獲得的，允許多一些凍存陽