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文檔簡介
1、檢測生物組織中的糖類蛋白質脂肪第1頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質 1.實驗原理第2頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四 斐林試劑蘇丹橘黃色紅色磚紅色沉淀紫色蘇丹 雙縮脲試劑鑒定物質試劑實驗現象還原性糖脂肪蛋白質淀粉 碘液 藍色 生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質的鑒定實驗原理第3頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四第4頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四選材:含糖量較高的白色或近于白色的植物組織(排除色素對顯色的干擾),蘋果、梨最好 。 實驗流程(步驟)1.可溶性還原糖 制
2、備組織樣液:制漿:去皮、切塊、研磨,過濾:(用單層紗布)取液:(mL)顯色反應 mL組織樣液剛配制的斐林試劑mL現象: 呈現藍色變成磚紅色(用前混勻)5065.C水浴加熱2min葡萄糖,果糖,麥芽糖;蔗糖為非還原性糖第5頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四還原糖的檢測和觀察:第6頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四還原糖的檢測結果第7頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四第8頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四2.脂肪的鑒定 取材:花生種子(浸泡h),去皮,將子葉削成薄片 制片:選取最薄的薄片移至載玻片中央在薄片上滴
3、加蘇丹(或蘇丹) 染液2 3滴,染色min滴加體積分數為50%的酒精溶液12滴,洗去浮色(多余的蘇丹 )吸去余液,滴1-2滴蒸餾水,蓋上蓋玻片,制成臨時裝片顯微觀察:先在低倍鏡下找到已著色的薄片,后用高倍鏡觀察現象:有被染成橘黃色(或紅色)的脂肪微粒脂肪微粒第9頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四脂肪的檢測結果第10頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四第11頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四3.蛋白質的鑒定 選材與制備組織樣液:黃豆組織樣液(或雞蛋蛋清稀釋液)黃豆浸泡 去皮切片研磨過濾濾液 顯色反應mL組織樣液雙縮脲試劑mL現象:無
4、色雙縮脲試劑滴紫色或紫紅色(創設堿性條件)(提供Cu2+)第12頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四蛋白質的檢測結果第13頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四第14頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四4.淀粉的鑒定取材:馬鈴薯勻漿檢測:mL組織樣液碘液2滴現象: 搖勻后變成藍色第15頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四問題探討:1、在做還原糖、蛋白質鑒定的實驗時,為什么要留出一部分樣液?作對照2、使用雙縮脲試劑時為什么B液只能加34滴而不能過量? 過量的雙縮脲試劑B會與試劑A反應,使溶液呈藍色,而掩蓋生成的紫色。3
5、、為什么斐林試劑要現配現用,不能放置太久? 時間太長,Cu(OH)2懸濁液就沉淀在試管底部而無法參與反應。深化第16頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四比較項目試劑及成分原理溶液濃度方法加熱與否結果可溶還原糖的鑒定斐林試劑NaOH和CuSO4磚紅色沉淀蛋白質的鑒定雙縮脲試劑NaOH和CuSO4溶液呈紫色4、斐林試劑與雙縮脲試劑兩者有何不同?新配制的Cu(OH)2溶液在堿性環境下的Cu2+NaOH濃度為0.1g/mLCuS04濃度為0.05g/mLNaOH濃度為0.1g/mLCuS04濃度為0.01g/mL先把NaOH溶液和CuSO4溶液混合,而后立即使用。先加入Na0H1mL,然后再加CuS044滴,搖勻。(不能過量)水浴加熱不需要第17頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四知識結構第18頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四1、青蘋果汁遇碘液顯藍色,熟蘋果汁能與斐林試劑作用產生磚紅色沉淀,下列結論中最合理的是 ( ) A青蘋果汁中有淀粉,不含還原糖 B熟蘋果汁中含還原糖,沒有淀粉 C蘋果轉熟時,大量淀粉水解成還原糖 D蘋果轉熟時單糖聚合成淀粉 C例題第19頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四、安徽阜陽劣質奶粉事件震驚全國,引起世人注目。鑒定
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