1、 4/42021年大理大學臨床醫學院306臨床醫學綜合能力(西醫)考研核心題庫之生物化學論述題精編 特別說明 本書根據歷年考研大綱要求并結合歷年考研真題對該題型進行了整理編寫，涵蓋了這一考研科目該題型常考試題及重點試題并給出了參考答案，針對性強，考研復習首選資料。 版權聲明 青島掌心博閱電子書依法對本書享有專有著作權，同時我們尊重知識產權，對本電子書部分內容參考和引用的市面上已出版或發行圖書及來自互聯網等資料的文字、圖片、表格數據等資料，均要求注明和來源。但由于各種原因，如資料引用時未能聯系上或者無法確認內容來源等，因而有部分未注明或來源，在此對原或權利人表示感謝。若使用過程中對本書有任何異議

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3、。 （2）利用：絕大多數的合成反應需要A TP直接提供能量，僅少數情況下利用其他三磷酸核苷酸供能。在一些生理活動中，如肌肉收縮、分泌吸收、神經傳導和維持體溫等，也需ATP參與。 （3）貯存：由ATP和肌酸可生成CP貯存，需要時再轉換成ATP。 （4）轉換：在相應的酶催化下，ATP可供其他二磷酸核苷酸轉變成三磷酸核苷酸，參加有關反應。 2魚藤酮是來自植物的一種天然毒素，強烈抑制昆蟲和魚類線粒體NADH脫氫酶；抗霉素A 也是一種毒性很強的抗生素，強烈抑制電子傳遞鏈中泛酸的氧化。 （1）為什么某些昆蟲和魚類攝入魚藤酮會致死？ （2）為什么抗霉素A是一種毒藥？ （3）假設魚藤酮和抗霉素A封閉它們各自的

4、作用部位是等同的，那么哪一個毒性更厲害？ 【答案】（1）NADH脫氫酶被魚藤酮抑制，降低了電子流經呼吸鏈的速度，因此也就減少了A TP的合成。如果在這種情況下生成的ATP不能滿足生物體對ATP的需求，生物體將死掉。 （2）因為抗霉素A強烈抑制泛醌的氧化，同樣會發生（1）的情形。 （3）由于抗霉素A封閉了所有電子流向氧的路徑，而魚藤酮只是封閉來自NADH，而不是來自的電子的流動，所以抗霉素A的毒性更強。 3有一個七肽，經分析它的氨基酸組成為Lys、Gly、Arg、Phe、Ala、Tyr和Ser。此肽未經糜蛋白酶處理時，與FDNB反應不產生氨基酸。經糜蛋白酶作用后，此肽斷裂成兩個肽段，其氨基酸組成

5、分別為Ala、Tyr、Ser和Gly、Phe、LyS、Arg。這兩個肽段分別與FDNB反應，可分別產生DNP-Ser和DNP-Lys。此肽與胰蛋白酶反應，同樣能生成兩個肽段，它們的氨基酸組成分別是Arg、Gly和Phe、Tyr、Lys、Ser、Ala。試問此七肽的一級結構是怎樣的？給出分析過程。 【答案】（1）此肽未經糜蛋白酶處理，與DNFB反應不能給出任何有用的信息，表明該肽沒有游離的氨基末端，系一環狀多肽，由7個氨基酸組成。 （2）當用糜蛋白酶處理這個環狀分子時產生兩個小肽，與DNFB反應后水解可得到DNP-Ser 和DNP-Lys。從給出的條件可知這兩個小肽是： （3）當用胰蛋白酶處理這

6、個七肽時，產生的兩個小肽是： 考慮到（2）給出的結果，用胰蛋白酶處理后所得到的五肽的氨基酸順序應為； 。又由于（3）給出了的順序，進而可知糜蛋白酶處理環狀分子后所 得到的四肽的氨基酸順序是：。 上述總的結果是： 用糜蛋白酶處理：。 用胰蛋白酶處理：。 由于該物質是一個環狀多肽，所以它的氨基酸順序如下： 。 4何謂甲硫氨酸循環，有何生理意義？ 【答案】甲硫氨酸與ATP在腺苷轉移酶催化下生成SAM，SAM在甲基轉移酶作用下可將甲基轉移給另一物質，使其甲基化后轉變成腺苷同型半胱氨酸，后者進一步脫去腺苷，生成同型半胱氨酸。同型半胱氨酸可以接受甲基四氫葉酸提供的甲基，以維生素為輔酶，重新生成甲硫氨酸的循

7、環過程。這個循環的生理意義是： 為機體的某些甲基化反應提供活性甲基； 使甲基四氫葉酸的甲基得到利用，提高四氫葉酸的利用率。 5論述基因重組技術中常用的篩選方法及其作用原理。 【答案】重組克隆的篩選和鑒定是基因工程中的重要環節之一。不同的克隆載體和相應的宿主系統，其重組克隆的篩選和鑒定方法不盡相同。從理論上說，重組克隆的篩選是排除自身環化的載體、未酶解完全的載體及非目的DNA片段插入的載體所形成的克隆。常用的篩選方法有兩類：一類是針對遺傳表型改變篩選法，以半乳糖苷酶系統篩選法為代表；另一類是分析重組子結構特征的篩選法，包括快速裂解菌落鑒定質粒大小、限制酶圖譜鑒定、Southern印跡雜交、PCR

8、 法、菌落（或噬菌斑）原位雜交等方法。 （1）半乳糖苷酶系統篩選法（藍白斑篩選法）。使用本方法的載體包括M13噬菌體、pUC 質粒系列、pGEM質粒系列等。這些載體的共同特征是載體上攜帶一段細菌的基因LacZ。LacZ 編碼半乳糖苷酶的一段146個氨基酸的肽，載體轉化的宿主細胞為基因型。重組子由于外源片段的插入使肽基因失活不能形成互補作用，也就是說，宿主細胞表現為半乳糖苷酶失活。因此，在X-gal平板上，重組克隆為無色噬菌斑或菌落，非重組克隆為藍色噬菌斑或菌落。這種篩選方法操作簡單，但當插入片段較短（小于500bp），且插入片段沒有影響LacZ基因的讀框時，有假陰性結果的出現。 （2）快速裂解

9、菌落鑒定質粒大小。從平板中挑取菌落，過夜培養后裂解，直接進行凝膠電泳，與載體DNA比較，根據遷移率的減小初步判斷是否有插入片段存在。本方法適用于插入片段較大的重組子的初步篩選。 （3）限制酶圖譜鑒定。對于初步篩選具有重組子的菌落，提純重組質粒或重組噬菌體DNA，用相應的限制性內切核酸酶（一種或兩種）切割重組子釋放出的插入片段，對于可能存在雙向插入的重組子還可用適當的限制性內切核酸酶消化鑒定插入方向，然后用凝膠電泳檢測插入片段和載體的大小。 （4）Southern印跡雜交。為確定DNA插入片段的正確性，在限制性內切核酸酶消化重組子、凝膠電泳分離后，通過Southern印跡轉移，將DNA移至硝酸纖

10、維膜上，再用放射性同位素或非放射性標記的相應外源DNA片段作為探針，進行分子雜交，鑒定重組子中的插入片段是否是所需的靶基因片段。 （5）PCR法。用PCR對重組子進行分析，不但可以迅速擴增插入片段，而且可以直接進行DNA序列分析。因為對于表達型重組子，其插入片段的序列的正確性是非常關鍵的。PCR法既適用于篩選含特異目的基因的重組克隆，也適用于從文庫中篩選含感興趣的基因或未知的功能基因的重組克隆。前者采用特異目的基因的引物，后者采用載體上的通用引物。 （6）菌落（或噬菌斑）原位雜交。菌落或噬菌斑原位雜交技術是將轉化菌DNA轉移到硝酸纖維膜上，用放射性同位素或非放射性標記的特異DNA或RNA探針進

11、行分子雜交，然后挑選陽性克隆。這種方法能進行大規模操作，是篩選基因文庫的首選方法。 6簡述基因工程的主要過程。 【答案】（1）目的基因的獲取：通過化學合成或PCR的方法獲取，也可從基因組DNA文庫或cDNA文庫篩選。 （2）克隆載體的選擇與構建：常用載體有質粒、噬菌體、病毒DNA。 （3）目的基因與載體的連接：利用DNA連接酶將目的基因與載體DNA進行共價連接形成重組DNA分子。 （4）重組DNA分子導入受體細胞：目的基因與載體連接成重組DNA分子后，需將其導入受體菌，隨受體菌生長、繁殖，重組DNA分子也復制、擴增。導入的方法有轉化和感染等。 （5）重組體的篩選：篩選出含重組DNA的受體菌，常用篩選方法有遺傳學方法如耐藥性標志選擇、分子雜交和免疫化學方法。 （6）克隆基因的表達：包括原核表達和真核表達兩種體系。可以生成有藥用價值的蛋白質或多肽。 7試總結對蛋白質進行分離及純化的相關技術。 【答案】蛋白質分