1、復(fù)方巖白菜素緩釋片的實(shí)驗(yàn)研究【摘要】目的介紹復(fù)方巖白菜素緩釋片的實(shí)驗(yàn)研究。方法對(duì)研究結(jié)果進(jìn)展總結(jié)。結(jié)果復(fù)方巖白菜素緩釋片制備工藝簡(jiǎn)單，可減少患者服藥次數(shù)和給藥劑量，具有鎮(zhèn)咳、祛痰、平喘作用，且平喘作用優(yōu)于復(fù)方巖白菜素片。結(jié)論復(fù)方巖白菜素緩釋片設(shè)計(jì)合理，質(zhì)量穩(wěn)定，療效確切，值得進(jìn)一步研究?！娟P(guān)鍵詞】包合物；復(fù)方巖白菜素緩釋片；藥效學(xué)；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)本課題采用包合技術(shù)解決巖白菜素溶解度小的問(wèn)題，并根據(jù)普通復(fù)方巖白菜素片的用法和用量，應(yīng)用藥動(dòng)學(xué)原理對(duì)劑型、劑量、釋藥時(shí)間、釋藥速率等加以綜合設(shè)計(jì)，進(jìn)展復(fù)方巖白菜素緩釋片制備工藝、主要藥效學(xué)鎮(zhèn)咳、祛痰、平喘作用試驗(yàn)、急性毒性試驗(yàn)、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定及穩(wěn)

2、定性試驗(yàn)。結(jié)果顯示，復(fù)方巖白菜素緩釋片制備工藝簡(jiǎn)單，可減少患者服藥次數(shù)和給藥劑量，具有鎮(zhèn)咳、祛痰、平喘作用，且平喘作用優(yōu)于復(fù)方巖白菜素片。1儀器與材料1.1儀器ZRS-6型智能溶出實(shí)驗(yàn)儀天津大學(xué)無(wú)線(xiàn)電廠；藥物穩(wěn)定性試驗(yàn)儀天津大學(xué)無(wú)線(xiàn)電廠；UV-2450/2550紫外分光光度計(jì)日本島津；402AI型超聲霧化器江蘇魚(yú)躍醫(yī)療設(shè)備。2方法與結(jié)果2.1巖白菜素-環(huán)糊精包合物的制備1我們采用巖白菜素-環(huán)糊精112，以甲醇為溶劑，用研磨法將巖白菜素制成環(huán)糊精包合物，包合物在水中溶解度可進(jìn)步46倍。2.2復(fù)方巖白菜素緩釋片制備工藝研究根據(jù)預(yù)試驗(yàn)，影響復(fù)方巖白菜素緩釋片的因素有4個(gè)，每個(gè)因素選擇3個(gè)程度，以2，

3、12h和24h的巖白菜素釋放量為指標(biāo)，選用L934正交試驗(yàn)進(jìn)展處方挑選，實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示：復(fù)方巖白菜素緩釋片最正確處方由巖白菜素包合物、撲爾敏、Latse、-Na、L-HP、s、EtH組成，采用濕法制粒壓片法制備，片劑質(zhì)量檢查合格，巖白菜素緩釋度符合設(shè)計(jì)要求。2.3復(fù)方巖白菜素緩釋片穩(wěn)定性試驗(yàn)根據(jù)?中國(guó)藥典?2022版原料藥與藥物制劑穩(wěn)定性試驗(yàn)指導(dǎo)原那么2進(jìn)展試驗(yàn)。取供試品3批，簡(jiǎn)單包裝，接近市售包裝，在溫度為252，相對(duì)濕度6010的條件下放置12個(gè)月。每3個(gè)月取樣一次，分別于0，3，6，9，12個(gè)月取樣，考察復(fù)方巖白菜素緩釋片性狀、含量和釋放度。結(jié)果與0個(gè)月比擬，以確定供試品的有效期。6個(gè)月試

4、驗(yàn)結(jié)果顯示：復(fù)方巖白菜素緩釋片性狀、含量和釋放度與與0個(gè)月根本相近，在簡(jiǎn)單包裝的條件下，復(fù)方巖白菜素緩釋片質(zhì)量根本穩(wěn)定，有效期還有待進(jìn)一步確實(shí)定。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.2.4復(fù)方巖白菜素緩釋片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究2.4.1含量測(cè)定參照2022版?中國(guó)藥典?方法23進(jìn)展。取樣品藥10片，精細(xì)稱(chēng)定，研細(xì)，過(guò)80目篩，精細(xì)稱(chēng)取相當(dāng)于平均片重的藥粉置于100l的容量瓶中，加甲醇振搖，過(guò)濾，精細(xì)量取濾液1.0l置于100l容量瓶中，定容，搖勻，放置10in后，在275n處測(cè)定其吸光度，由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)方程求出樣品中巖白菜素的含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示：復(fù)方巖白菜素緩釋片中巖白菜素的含量為164.5165.8g/片，與設(shè)計(jì)17

5、5g/片相比，含量偏低?？赡芘c測(cè)定方法和投料量有關(guān)，建議采用高效液相法測(cè)定其含量，并且按105進(jìn)展投料。2.4.2釋放度測(cè)定按?中國(guó)藥典?2022版溶出度測(cè)定第一法轉(zhuǎn)籃法2進(jìn)展測(cè)定。參照溶出度測(cè)定法附錄X第一法，以人工胃液為溶出介質(zhì)，溫度370.5，轉(zhuǎn)速50r/in，依法操作，經(jīng)0.5，1，2，4，6，8，10，12，24h，取溶液10l濾過(guò)，每次取樣后補(bǔ)加溶出介質(zhì)10l；精細(xì)量取續(xù)濾液2l置10l的容量瓶中,用人工胃液定容,搖勻后在275n波長(zhǎng)測(cè)定吸光度。2，12h和24h，復(fù)方巖白菜素緩釋片中巖白菜素釋放度分別為標(biāo)示量的20%40%和75%95，應(yīng)符合規(guī)定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：復(fù)方巖白菜素緩釋片

6、2h的釋放度為39.1%，12h的釋放度為82.5%，24h的釋放度為97.6%，符合設(shè)計(jì)要求。2.5復(fù)方巖白菜素緩釋片急性毒性試驗(yàn)2.5.1半數(shù)致死量LD50測(cè)定?中藥藥理研究方法學(xué)?4中急性毒性試驗(yàn)方法進(jìn)展。將60只小鼠隨機(jī)分成5組，每組12只，雌雄各6只，動(dòng)物隔夜禁食12h后分別將濃度為260，182，127.4，89.2，62.4g/100l復(fù)方巖白菜素緩釋片混懸液給不同組別的動(dòng)物灌胃1次，灌胃劑量為0.25l/10g，給藥后禁食2h，然后觀察7日內(nèi)動(dòng)物反響及死亡情況。結(jié)果顯示，7日內(nèi)全部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物一般狀態(tài)良好，無(wú)任何毒性反響病癥，未見(jiàn)有動(dòng)物死亡，需進(jìn)展最大耐受量測(cè)定。2.5.2最大耐受

7、量測(cè)定方法同半數(shù)致死量LD50測(cè)定。將60只小鼠隨機(jī)分成5組，每組12只，雌雄各6只，動(dòng)物隔夜禁食12小時(shí)后分別將濃度為62.4，89.2，127.4，182，260g/100l，復(fù)方巖白菜素緩釋片混懸液給不同組別的動(dòng)物灌胃，灌胃劑量為0.4l/10g，2次/d，間隔6h，等容積，不同濃度，此后觀察7d內(nèi)動(dòng)物反響及死亡情況。結(jié)果顯示：小鼠口服復(fù)方巖白菜素緩釋片的最大耐受量大于4.16g/20g208g/kg，動(dòng)物一般狀態(tài)良好，活動(dòng)、進(jìn)食、大小便正常，皮毛均好，無(wú)任何毒性反響病癥，說(shuō)明復(fù)方巖白菜素緩釋片無(wú)明顯急性毒性作用和其它副作用，是一種平安性較高的制劑。2.6復(fù)方巖白菜素緩釋片主要藥效學(xué)試驗(yàn)

8、482.6.1祛痰實(shí)驗(yàn)小鼠氣管酚紅法取小鼠60只，雌雄各半，隨機(jī)分為6組，每組10只，即生理鹽水組；氯化銨組1000g/kg；復(fù)方巖白菜素片組40g/kg；巖白菜素緩釋片低18g/kg、中36g/kg、高72g/kg劑量組。各組分別灌胃i.g.相應(yīng)的藥物，給藥量均為0.2l/10g，2次/d，連續(xù)7d，末次給藥后30in，腹腔注射0.5%酚紅生理鹽水溶液0.5l/只，注射30in后，處死動(dòng)物，背位固定，別離氣管，用5%NaH3溶液ll沖洗氣道3次，合并沖洗液于事先裝有2l5%NaH3的試管內(nèi)。在546n處測(cè)吸收值，比擬吸光度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，巖白菜素緩釋片能增加氣管酚紅分泌量，具有明顯的祛痰作用

9、。其中低劑量組效果顯著P0.01，祛痰作用明顯高于氯化銨組和復(fù)方巖白菜素片組。2.6.2整體引喘實(shí)驗(yàn)取安康的豚鼠于實(shí)驗(yàn)前4d分別置于4L密閉玻璃中罩內(nèi)，用402AI型超聲霧化器噴入0.1%組胺和2%乙酰膽堿等體積混合液，持續(xù)15s，記錄“引喘埋伏期從噴霧開(kāi)場(chǎng)至出現(xiàn)驚厥的時(shí)間，埋伏期在120s內(nèi)為合格的敏感動(dòng)物。挑選合格的豚鼠48只，隨機(jī)分為6組，即生理鹽水組，氨茶堿組70g/kg，復(fù)方巖白菜素片組40g/kg；巖白菜素緩釋片低18g/kg、中36g/kg、高72g/kg劑量組。各組分別i.g.相應(yīng)的藥物，給藥量均為0.5l/100g，2次/d，連續(xù)3d，末次給藥后1h，按前述進(jìn)展引喘實(shí)驗(yàn)，記錄

10、“引喘埋伏期，假設(shè)超過(guò)6in仍未出現(xiàn)哮喘者以6in計(jì)。結(jié)果提示，巖白菜素緩釋片能延長(zhǎng)“引喘埋伏期，具有明顯的平喘作用，其中低劑量組效果顯著P0.01，其平喘作用明顯高于氯化銨組。3討論初步研究結(jié)果顯示，用藥劑學(xué)的方法和手段，將普通復(fù)方巖白菜素片改為復(fù)方巖白菜素緩釋片，設(shè)計(jì)合理。復(fù)方巖白菜素緩釋片是一個(gè)平安、有效、質(zhì)量穩(wěn)定的制劑，值得進(jìn)一步深化研究?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1關(guān)家彥.巖白菜素包結(jié)物的研制J.中成藥，1991，131：4.2國(guó)家藥典委員.中國(guó)藥典S.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2022：73，74，176，179.3趙翠云，楊春蓮，鄧葉萍，等.復(fù)方巖白菜素含量及溶出速度的測(cè)定J.大理學(xué)院學(xué)報(bào)，2022，612：7.4陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)，第2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2022：630.5方春生，王建超，陳根，等.藍(lán)布正祛痰平喘作用的研究J.云南中醫(yī)中藥雜志，2022，282：36.