1、分散液液微萃取技術(DLLME)分散教液微萃取技術是200&年為各頭山需苛枕提自-種新型基亍分骸液液微萃取的樣品社處理技權該技術科半于微型化的液-酒萃取見英原理是萃取劑在分敬劑的作用W形成分敞的細小有機液滴，均勻地分敬在水樣中從血形成水/孑散削F潸取劑乳濁液協系，口標分析物不斷地被萃取回有機相屮.最后在水樣及小體祝萃取勰上間達到萃取平新巧系統達到平術L仟噴涪劑中萃取到的分折物殆量由下或計算確定叫陰十G代式+=nA有機涪劑中萃取到的分折物的量；5為分桁物的初始熬度;：氐罰詢分析物在冇機和與水扭乏間的分配MS；%譏分別曲有機相和水相的體積.DLLME適用于親脂性髙或申弩的分析斷分配猱數KM).對丁

2、離皮親水曲中性仆析物不適nJitil對卜具有厭堿性的分析物，可通過控壯樣品落液的pH值使幷析物以非離孑比狀態存在，城而提高分配系數1.4.2DLLME操作過程分散液液微萃取的操作過程如圖1所示。首先把樣品溶液加入到尖底帶塞離心管中，然后向離心管中快速注入含有萃取劑的分散劑，振動形成乳濁液，此時樣品溶液中的目標分析物被分散的有機萃取劑富集，再經離心分離，最后吸取離心管底部的沉淀相萃収劑)直接注入GC或HPLC進行分析。=快連汕入婦他丸則143影響DLLME萃取率的主要因素1.4.3,1萃取劑的類型迭樣合適的萃取劑是提高萃取率的關鍵。根搖“相似相溶原理”，萃取劑的性質必須與分析物的性質相匹配，才能

3、保證對分析物有較強的萃取富集能力，因此茅取劑要求水溶性小.不易揮發.密度比水大而且要能夠在分做劑作用下形成小液滴均勻分散在水相中，具有艮好的色譜性能.即其色譜峰很好地與分析物的色譜峰分開。常用的萃取劑主要有氯苯、三氯甲烷、四氯乙烷、四氯乙烯、二硫化碳、二氮乙烷等。隨著DLLME的發展，一些密度小于水的有機溶劑和一些環保的離子液體也被用作萃耿劑，如甲苯、正己烷、十二烷醇和卜己基-3-甲基味呼六弒磷酸鹽、1宰基3甲基咪些六就磷酸鹽、1,3-二丁基瞇哇六氟確酸鹽、1.丁基-3甲基味瞠六氟磷酸鹽。1.4.3.2分散劑的類型DLLME中，分散劑起著橋梁作用：分敬劑內溶解的萃取劑髓著分散劑體積的擴張而釋放

4、出來，當擴張的分散劑溶于樣晶溶液時，萃取刑部分析出【呵。由(1)式可知：有機液滴的體積越大，萃取所得分析物的量就越大。但由于分析物進入液滴的過程是擴散過程，液滴體積越大，則萃取速率越小，達到平衡所需時間越長艸】。因此在DLLME中分散劑的首要任務是將萃取劑分散成細小的有機液滴，翠取劑液滴體積減小，萃取過程很快達到平衡，而且萃瞅刑的表面積增大，可以在較短時間內完全萃取。此外分散劑還需滿足三個條件：一是能完全溶解萃取劑，易溶于樣品溶液；二是萃取劑在分散劑中的分配系數要大于其在樣品溶液中的分配系數：三是有較好的色譜行為。常用的分散劑主要有丙舸、乙購、甲脾等。1-4.3.3萃取劑的體積萃取劑的體積直接

5、影響該方法的富集倍數。萃取劑體積增大，離心后有機相體枳也隨Z增大，則有機相屮分析物的濃度降低，富集倍數下降，靈敏度也隨之降低呵。因此萃取刑的體積既婆保通富集借數較島也娶保證有足夠的有機相上機分析。一般萃取劑的體積為10100M?鐵1.4.3.4分散剤的體積分散劑體積的大水貞接影響水/分散劑/萃取劑乳濁液體系的形成，從而影響萃取效率當分散劑體積較小時，萃取劑不能均勻地分散在水相中，從而不能形成良好的乳濁液體系使萃取效率降低，當分散劑體積較大時，分析物在水中的溶解度増大不易被萃取，幫取效率也會降低【創。一般分散劑的體積為0.42.0mL【峋。1.4.3.5萃取時間的選癢在DLLME中，萃取時間指在

6、樣品溶液中注入含有萃取劑的分散劑后，到開始離心乳濁液之前這段時間。J于萃取劑與分析物的接觸面積比較大，萊取時間短是DLLME的一個突岀優點。1.4.3.6pH的影響調罄樣品溶液的pH值，可以提奇酸性或堿性分析物的萃取效率。因為控制溶液的pH值能夠改變一些酸性或堿性分析物在溶液中的電離平衡，便其更多的向中性分子方向轉變，但在實際操作中，可供調節的pH值范圍并不寬，采用適當的緩沖劑可増加測定的重現性。1,437離子強度的影響山于分析物在有機溶劑和樣品溶液之間的分配系數受樣品基質的影響，當樣品基質發生變化時，分配系數也會隨之發生變化。通常向樣品中加入一些無機鹽類（如NaCLKC1等），可以增加溶液的

7、離子強度。離子強度的增加增大了目標分析物在有機相中的分配系數，同時也降低了萃取劑在水溶液中的溶解度，從而引起沉積相體積的增加（切。離子強度對萃取效率的影響比較復雜，隨著離子強度的增加，萃取效率可能增加、減少或者不變。這可能是由于離子的存在改變了能斯特擴散層的物理持性，從而改變了目標分析物進入小液滴的擴散速率【創。1.4.4DLLME在農藥殘留檢測中的應用目前，分散液液微萃取己廣泛應用于有機磷兩）、有機氯卩叭擬除蟲菊酯、氨基甲酸酣等農藥檢測。下面就分散液液微萃取在幾種主要農藥殘留檢測上的應用做一簡要概述（見表1-1），1.4.4.1有機磷農藥檢測有機磷農藥足目前-我國使用屋最大的農藥，多數屬于劇

8、番和髙毒類農藥，為有效控制有機備農藥殘留污染，首要任務星發展快速、可靠、靈皺度高、應用范圍廣和成本低的檢測技術。分散液液微萃取因其操作簡單、萃取時間短、效率高、重現性好等優點已普遍應用于有機磷農藥殘留檢測。謝洪學等【切應用分散液液微萃取氣相色譜法技術建立了水樣中甲拌磷的檢測方法。該方法以10|iL四氯乙烯為萃取劑，l.OmL丙釀為分散劑，在優化條件下，該方法的富集倍數高達300倍，線性范圍為0.0|10叫mL,檢出限為0.001RL/Lr回收率為104%,相對標準僞差為6,65%。同時他們還將分散液液微萃取與單滴微萃取、液相微萃取三種方法進行對比：分散液液微萃取所用萃取時間煽短，而且富集倍數高

9、，萃取效率好。此外,分散液液微萃取對于環境特別是水中有機磷農藥的檢測效果非常好，靈敏度為，操作簡單。在農藥殘留檢測中多使用鹵代疑等高毒性有機溶劑。分散液液微萃取采用離子液體作為萃取劑避免了高竜性有機溶劑的使用。離子液體一般是由體積相對犢大的結構不對稱的有機陽離子和體積相對較小的無機陰離子構成，在室溫下或接近于室溫下呈液態的物質。常見的有機陽離子主要是咪哩離子、毗唳離子、一般的季鐐離子等離子液體具有可以忽略的蒸氣壓、不易燃、熱穩定性好等性質，因此用它代替傳統的有機溶劑可以避免因有機溶劑揮發帶來的環境污染問題，因此被巻為“綠色溶劑”劇。HeLijun等呵利用離子液體13二丁基咪哇六氟磷酸鹽為萃取劑

10、，甲醇為分散劑，通過分散液液微恭取高效液相色譜技術檢測了水和梨樣品中的殺螟硫璘、對硫磷、倍硫磷、辛硫磷，優化條件下富集倍數達300倍，線性范圉為51000jigL檢出隈為0.010.05|ig/L,回收率為91%109%,相對標準偏差為1.1%2.7%。此研究表明，離子液體可有效地萃取樣品中的有機磷農藥，其富集倍數很高，而且其檢出限、線性范圍、回收率和相對標準偏差等都滿足有機磷農藥殘留檢測標準，同時“綠色溶劑”的使用為分散液液微萃取的發展提供了新思路，其必將成為今后研究的熱點。分散液液微萃取適合簡單基質樣品有機磷農藥分析，起初主要應用于水樣分析，近年來逐步將其應用于復雜呈質樣品分析。Bidar

11、i等珂以氯苯為萃取劑，丙酮為分散劑，利用超聲波輔助萃取，并與氣相色譜-火焰光度檢測器結合測定了部茄樣品中的有機磷，在優化條件下其檢出限滿定有機磷農殘檢測標準。分散液液微萃取也可用于固體甚質樣品分析，Moinfar等應用分散液液微萃取結合氣相色譜火焰光度檢測器測定茶葉中的10種有機暁，以N正己烷為萃取劑，乙購為分散劑.在優化條件下測得該方法的檢岀限為0.03l.OOp0kg,回收率為83%-117%,相對標準偏差為3%7.8%。這些硏究成功地將分散液液微萃取應用于較復朵基質樣品農藥殘留檢測，隨著研究的深入分散液液微萃取在復雜基質樣品中農藥殘留檢測將得到進一步發展。144.2有機氯農藥檢測以六六六

12、和滴滴涕為代表的有機氯農藥，廣泛存在于各種介質中弘叭Tsai等剛提出分散液液微萃取低溶劑消耗(DLLME-LSC)技術結合氣相色譜質譜聯用測罡水樣中的5中有機氯農藥。該技術以三氮乙烯為舉取劑，以叔丁基甲基醛為分散劑，優化后該技術的富集倍數高達1885-2648,檢出限為0.00040.0025啣L,回收率為54%119%,相對標準偏差為41%9.7%。同時其硼究者也將該方法與傳統分散液液微萃取進行了比較，發現其富集倍數遠比傳統分散液液微萃取髙，而且DLLME-LSC方法分散劑用呈少，其星大的優點是萃取時間短，僅需90$,萃取率高(Matsadiq等【呵建立了分散液液微萃取氣相色譜電子捕獲檢測器

13、技術測定了桃子果汁、果肉、果皮中的艾氏劑和滴滴滴。這些技術的建立對水、水果等基質農藥殘留檢測提供了重要的指導意義。2007年，Zanjani等佝首次提出了懸浮固化液相微萃取(SFO-LPME)技術，使用的萃取劑密度小于水，熔點接近室溫(1030*C).萃取完成后懸浮于溶液表面的萃取劑絞冰港冷卻后固化，將其取出在室溫下融化后可直接進樣進行分析。Leong等(何基于懸浮固化液相微萃取結合氣相色譜-電子捕茯檢測器技術測定水樣中的有機氯農藥殘留，以】OpL的十六烷為萃取劑，以200fiL的乙膳為分散劑。在優化條件下，該方法的富集倍數達37-872.檢出限為0.0110.11阿1“回收率為83%103%

14、,相對標準偏基為5.8%8%。懸浮固化液相徽萃取技術操作簡單，提取液無需嚴格凈化便可直接上機分析，該技術的捉出拓寬了有機氯農殘檢測方法，而且其萃取時間短、效率高、垂現性好等優點將會極大程度地推動其在農藥殘謝分析申的應用。1.4.43擬除蟲軸酯農跖檢測擬除蟲菊酣是一類仿生合成的殺蟲劑，其便用屋僅次于有機磷殺蟲劑，在擬除蟲菊酯類農藥殘留的分析中，質常用的分析方法是用氣相魚譜電子捕獲檢測器法和火焰離子化檢測器法Matsadiq等網】通過懸浮固化分散液液微萃取結合氣相色譜-電子捕獲檢測器技術測定了桃子果汁、果肉、果皮中的聯苯菊耶、：氛戊菊耶、氯敏禪.菊酯、甲鼠癇酯。以8.0吐的1-十二烷為萃取劑，0.

15、4mL的兩酮為分散札在優化條件下果汁樣晶的檢出限為2.8lg.5ng/L,果汁、果肉和果皮的回收率為73%106%相對標準偏差為2.6%11.8%。該分析方法成功地將懸浮固化分散液液微萃取結合氣相色譜-電子捕獲檢測器技術應用于蕪菜、水果分析，是一種壞境友好的樣品詢處理新技術，在農藥殘留分析領域具有較為廣闊的應用前Cunha等提出分散液液微萃取結合氣相色譜質譜聯用技術測定蘋果中的氯氟菊酯、節氯第酯、氯眾棄酯農藥殘留，其檢岀限、回收率、重復性原線性范圍等多項技術描標均能滿足當前蔬菜、水果中擬除蟲菊酯殘留的檢測要求。該技術有機溶劑用量少，操作簡便，提取液無須嚴格凈化便可進行氣相色譜質譜聯用分析，大大

16、提高了分析速度，而且可以避免農藥殘留檢測中的假陽性現辣。1.4.4.4氮基甲酸酯農藥檢測氨基甲酸酯類農藥作用機理與有機磷農藥相似，其毒性作用較有機磷農藥中莓較輕，由于其分解速度快、殘留期短、選擇性強、廣譜、高效、低毎等優點被廣泛應用。LinXiangyun旳呦建立分散液液微萃取高效裁相色譜技術測定番茄、黃瓜、蘿卜和生菜四種基質中的氨基甲酸酯類農藥殘留。取5.0mL樣品溶液，向其快速注入l.OmL乙睛和8O|iL氯仿，形成良好的乳化疲，振動離心，去上潔液，沉淀的有機溶液用氮吹儀吹于，用色譜分析的渝動相iOOL溶解，注入高效液相色譜的自動進樣器進行分析。該方法的檢出限為0.53.0pgg,加標回收

17、率為75%-98%,相對標準偏差為2.9%7.5%。該技術將分散液液微萃収應用于多種復雜基質樣品分析，從而拓寬了分散液液微窣取的應用范圍，此外該技術實現了樣品的自動化進樣，節省了分析時間，取得了較好的結果。郝家勇等采用分散液液微萃取-高效液相色譜技術柱后衍生法測定了番茄樣品中的涕滅威、克百威、甲蔡威、異丙威4種氨基甲駿酯類農藥殘留。該方法以離子液體】丁基3甲基咪理六氟礎酸鹽為萊取劑，沒冇添加分散劑，因為在分散液液微萃取高效液相色譜中分散劑的使用會降低分析物在萃取劑中的分配系數，從而降低英萃取率。在優化實驗條件下，該方法的富集倍數高達37625,檢岀限為012Q43昭L平均加標回收率為75%12

18、0%。該方法具有翠取效率高、靈敏度高、操作簡單、綠色環保等優點，可以滿足番茄樣品中氨基甲酸酯類農笏殘留的檢測要求，且相對于單滴微萃取法具有萃取時間短、雨復性好等優點卩袈1-1分散液液微萃取在食品和環境農藥殘留檢測中的應用Table1-1AppliMticwiofDispersiveLiquid-LiquidMicroextractionfortheAtulysis.ofPesticideResidues分析枷IfiS儀器及壯測分阪梵及只用狂m半C%)RS0(%)承為(MJ(mL)9機確類水樣GC-F1D旳粧乙*610詢陽1.03-00O.OOiplL1616.65(43)GC-FPD紅苯L2丙

19、iHi.o789-I0X)0.503Og譏93-1181265GC-FPD口飯乙燥11內IW1.00.00270怡加L75-1091.5133168HPLC-UVDso-50O.I7-O.29ji&T881032.Z.7HPLGUYDh辛3fi3甲卿t哇35甲醉10200O5.Op0L87-118-70HPLC三紅乙烷15乙B!07270282T8L4-6.1PDGCECD十六:烷10乙曲0.237872OOH-O.llpgL83】03S.8&862冇IT島英GC-MS三擔乙i*13屮基延201855-264800004-0.002強譏5411949759GC-MS四SI乙烯10內胡1.046

20、3160.0017.025唧L56-120【72)HPLC-LVD卜己慕3甲越嘛瞠八銀的酸註50-0240.45畑1781073.86.7(73)GC-ECDtUR10.0丙J.0708-10870.04-O.lpg.L76-1163.1-7.251覇麻類農藥HPLCUVD1壬耳-3甲華嘛嚨六簸疏咸鹽501丁基3甲戀聯0.3-0.28O.83yg/L8411474HPLC-UVDi-av-3.甲荔睬QAfttSKft45-0.28760叱L771362.793(75)GC-MS甲龍30乙睛1.00.0010.50煙L951CM2.36月76氧基甲酸LC-MS.MS四氯化炭60乙!2.050一6

21、31201.9-9.1HPLC-DAD二鼠甲40乙041.0801770.t00.50g&l訊97卩8HPLC-VWDWMZtt20卬腎0.570.7l.OpgL2.6有機毎類農藥蘋杲汁水樣果汁（蘋果、tt子*03GCMS四氟化炭100丙朋043*620.06-2.20P&165-10S10(65)旁猛次農藥HPLCFLD例氯乙烷5.2乙SJ7.8877760.01230.0】6帕180-1IB1.38-2.74180)SA5GCFPDHK60MH1.001-0.5gg.kg10IM)茶葉GC-FPDN止己烷2450.50.a31.00pgAg831173?$(55術瓜H瓜GC-PDSU27Z

22、K1.044S000109畑kg677112-9(1右機賓類華呆GC-FPD二繳荒30MM151.323.58煙ml.648911J-I5482農對集英GC-MSM-*10內醋100.0010i40mg.kg60F2.89(83水樣HPLC1,3二丁華味哇7V簸質酸埜50甲醉0.63000.0】Q05噸917091.12.7153)材機廉類農熱菊矽農*汁桃肉住皮GC-ECD1十一|8.0丙制0.42.8T&5nL737062.671.8160藥*粧:類農釣題汁GCFID四氣乙婦30甲用35344-3512.23咖921074.0(W1HPLC1.3二丁范必氟磧酸鹽200-317-6250.12

23、O.43pgL75-1205.3-S.567氨睪叩戰裔農藥務跖HPLC-FLD二球甲烷200幅2.220248.020.0畑熄79-993.5-85(521疋臬HPLC-DAD三抜甲烷80Z.K1.00.5T.0gg傀789829751己荃3甲基嘛HPLC-DAD哇夭妹2駿鹽甲醉0.714一0.32-4.66Mgkg53978.7【8588mg隨著人們生活水平的提高利健庚知識的晉及，越來越多的消費者開始選擇有利于健康的、營養豐富的果汁飲品。我國是水果生產大國，果汁資源豐富，完全能滿足人們需求。然而在水果種植、儲藏、加工過程中為了保鮮、保質常常會使用一些農藥，導致果汁中農藥殘留增加，這不僅對環境

24、產生污染，同時對人體健康也構成很大威脅。隨看消費者健康恿識的提高，由農藥殘留引起的果汁安全問題日益成為人們關注的焦點，許多國家也借此實施技術卑壘。這就對果汁中農藥殘留檢測提出了更高的耍求。為了保隱人們健康，提高果計質壁和市場競爭力，打破國并貿易技術壁壘，建立新型的果汁農藥殘葩檢測技術顯得尤為重要。目前農藥殘留分析檢測使用的方法主要有氣相色譜法、高效液相色譜法、氣相色i檢質譜聯用法和液相色譜-質譜聯用法等。氣相色譜法具有分離能力強、分析速度快、檢測靈敏度高和易于普及等優點而被廣泛應用，尤其在食品農產品領域。與液相色譜儀的紫外檢測器或二極管陣列檢測器相比，氣相色譜儀的火焰光度檢測器和電子捕獲檢測器對農藥具有更高靈敏度和選擇性等優點。樣品前處理是農藥殘留分析檢測的關鍵步驟，占農藥殘留整個分析過程2/3的時間。傳統的前處理方法主要有液液萃取、索式抽提、超聲提取、柱層析等，普遍存在操作步驟繁頊，處理時間長，成木高，有機溶劑用量大等缺點。近年來發展了多種新廻樣品麗處理技術。分散液液微萃取技術即是近年來發展起來的一種新型樣品前處理技術，該技術集萃取、濃縮于一體，