1、微生物平板劃線法STEPSTEP1 細菌的培養細菌的培養 細菌培養是一種用人工方法使細菌生長繁殖的技術。細菌在自然界中分布極廣，數量大，種類多，它可以造福人類，也可以成為致病的原因。大多數細菌可用人工方法培養，即將其接種于培養基上，使其生長繁殖。培養出來的細菌用于研究、鑒定和應用。細菌培養是一個復雜的技術。STEPSTEP2 培養基 在土壤、水、食品、空氣以及人和動、植物中，不同種類的細菌混雜地生活在一起。若要研究其中某種細菌，就必須將各種細菌進行分離，以得到只含有這一種細菌的純培養。當細菌分離成純種后，常需要接種到有關的培養基中，以測試其各種生物學性狀，不同的細菌需要不同的培養基進行培養。

2、培養基的種類按其物理性狀分為： 固體培養基 液體培養基 半固體培養基按用途分為： 基礎培養基、加富培養基、選擇培養基、鑒別培養基STEPSTEP3 細菌接種方法常見的幾種細菌的培養和基接種方法舉例 平板劃線接種法斜面培養基接種法液體培養基接種法穿刺接種法菌種 葡萄球菌和大腸桿菌的混合菌液大腸桿菌培養物大腸桿菌培養物枯草桿菌培養物變形桿菌培養物痢疾桿菌培養物培養基 普通瓊脂平板瓊脂斜面培養基普通肉湯培養基半固體瓊脂培養基平板劃線法 平板劃線法主要是借劃線而將細菌在瓊脂平板表面分散開，使單個細菌能固定在某一點，生長繁殖后形成單個的菌落從而達到分離純種的目的。常用于分離單個菌落，也可用于觀察細菌的生

3、長狀況和觀察某些生化反應。平板劃線法接種方法（一）標記 在培養皿底面，用記號筆注明接種的菌名、接種者姓名、日期等。 細菌在自然界中分布極廣，數量大，種類多，它可以造福人類，也可以成為致病的原因。細菌培養是一個復雜的技術。細菌培養是一種用人工方法使細菌生長繁殖的技術。在培養皿底面，用記號筆注明接種的菌名、接種者姓名、日期等。然后將接種環移開火焰，待其冷卻。（5）劃線完畢，將瓊脂平板放進皿蓋，將培養皿倒放，送進37溫箱培養。若要研究其中某種細菌，就必須將各種細菌進行分離，以得到只含有這一種細菌的純培養。液體培養基平板劃線法接種方法平板劃線法接種方法（四）分離劃線接種細菌（四區接種法）（4）旋轉瓊脂

4、平板90度，接種環不必再滅菌，接三區連續平行劃線，劃滿平板其余部分，此視為四區。（四）分離劃線接種細菌（四區接種法）平板劃線法接種方法平板劃線法接種方法平板劃線法接種方法培養出來的細菌用于研究、鑒定和應用。平板劃線法接種方法平板劃線法接種方法（二）滅菌接種環 點燃酒精燈，右手以持筆式握持接種環，并放置火焰中燒灼滅菌，先將接種環的接種絲部分置于火焰中，待金屬絲燒紅并蔓延至金屬端，再直接燒灼金屬環直至燒紅，然后由金屬環至金屬桿方向快速通過火焰，隨后再反方向通過火焰，如此23次。然后將接種環移開火焰，待其冷卻。平板劃線法接種方法（三）取菌種 左手持裝有金黃色葡萄球菌或大腸桿菌菌液的試管，用持有接種環

5、的右手手掌及小指拔取試管塞，將試管管口迅速通過火焰23次進行滅菌。 將已滅菌且已冷卻的接種環伸入菌種管中，取一接種環的菌液，然后退出菌種管，將菌種管管口及試管塞再次通過火焰23次滅菌，塞好試管塞，放至原來的位置。 平板劃線法接種方法（四）分離劃線接種細菌（四區接種法） （1）左手手掌持瓊脂平板培養基，大拇指與中指輕輕將平皿蓋子拿起，右手持接種環在瓊脂平板上端來回劃線，涂成一細菌薄膜（約占平板的1/10），視為一區。劃線時使接種環與接種平板面呈3040度角，以腕力在平板表面行輕而快地來回滑動動作。 平板劃線法接種方法 （2）旋轉瓊脂平板90度，燒灼接種環，以殺滅環上的殘留細菌，將接種環觸及培養基表面以使其冷卻。滅菌接種環通過薄膜處作連續平行劃線（約占平板1/5），此視為二區。平板劃線法接種方法 （3）旋轉瓊脂平板90度，灼燒接種環滅菌并使之冷卻。將滅菌接種環接二區連續平行劃線（約占平板1/4），此為三區。 （4）旋轉瓊脂平板90度，接種環不必再滅菌，接三區連續平行劃線，劃滿平板其余部分，此視為四區。 各區接種線間盡量互不交接，以達到細菌逐漸稀釋的目的。 平板劃線法接種方法平板劃線法接種方法 （5）劃線完畢，將瓊脂