1、口腔生態(tài)系的影響因素1、物理化學因素： 1）、溫度：微生物可分為嗜冷微生物、嗜熱微生物及嗜溫微生物，口腔菌叢對溫度變化具有一定適應能力，能夠在短時間內(nèi)經(jīng)受較大幅度的溫度變化。2）、氧張力：細菌代謝的能量來源為通過細菌的生物氧化作用而獲得，需氧呼吸以游離O2為受氫體，厭氧呼吸以其他無機物為受氫體，發(fā)酵以各種有機物位受氫體，細菌可分為絕對需氧菌、絕對厭氧菌、兼性厭氧菌、耐氧厭氧菌及微嗜氧菌，口腔主要是一個厭氧環(huán)境，所以口腔菌叢主要成員是微需氧菌、兼性厭氧菌和厭氧菌。3）、PH：口腔內(nèi)PH相對恒定在58，這個PH是通過唾液的緩沖系統(tǒng)和由唇、頰、舌所起的機械因素維持的。外源性物質(zhì)的酸堿性、細菌發(fā)酵產(chǎn)生

2、H+、唾液的沖刷和緩沖能力能中和菌斑酸度，上述三個因素影響口腔PH。4）、營養(yǎng)物質(zhì)的利用：細菌對營養(yǎng)物質(zhì)的利用與其寄居部位有關，齦上菌斑營養(yǎng)依靠外源來的飲食和內(nèi)源營養(yǎng)物質(zhì)經(jīng)唾液蛋白酶降解成的糖和氨基酸，齦下菌斑和牙周袋內(nèi)細菌沐浴在血漿中，內(nèi)源性營養(yǎng)物質(zhì)是他們唯一營養(yǎng)來源。宿主的牙周組織本身也是齦下菌斑細菌的另一內(nèi)源性營養(yǎng)來源。2、宿主因素1）、抗體：唾液中主要抗體為SIgA，有凝集口腔細菌的能力，齦溝液中主要為IgG，起調(diào)節(jié)素的作用。2）、唾液蛋白質(zhì)：在防御細菌、病毒侵襲、調(diào)節(jié)微生物定植等方面起重要作用。唾液粘蛋白對口腔細菌生長具有選擇性，影響細菌粘附，血鏈菌為最早定植菌。還含許多非特異性抑制

3、因素，如溶菌酶、乳鐵蛋白、乳過氧化物酶。唾液素經(jīng)口腔細菌代謝產(chǎn)生堿性產(chǎn)物調(diào)節(jié)口腔酸堿度。 3、細菌因素： 1）、細菌的粘附：（1）鈣橋?qū)W說：細菌以電荷間靜電引力粘附，細菌帶負電，與唾液中帶正電的Ca2+與帶負電的牙表面獲得性薄膜相連。（2）脂磷壁酸-葡聚糖-葡糖基轉(zhuǎn)移酶復合體學說：菌體表面的脂磷壁酸和葡聚糖是葡糖基轉(zhuǎn)移酶的受體，該受體將三者結(jié)合。（3）識別系統(tǒng)學說：牙或粘膜表面與細菌附著器起作用的分子稱為受體，細菌表面的附屬裝置如菌毛等與宿主表面形成氫鍵或疏水鍵聯(lián)結(jié)。 2）、細菌間作用：同種類型細菌間吸附為聚集，異種細菌間積聚為共聚集，通過聚集和共聚集作用在生態(tài)系中細菌互相協(xié)同、競爭、拮抗，維

4、持口腔生態(tài)系的平衡。 4、宿主可控制因素：1）、飲食習慣：糖消耗的頻率、量及消耗方式。2）、口腔衛(wèi)生：刷牙等可機械的移去牙菌斑。菌斑的形成牙面上獲得性薄膜的覆蓋：在牙面清潔后，唾液的一些成分很快會吸附其上，形成一層結(jié)構均勻無細胞的薄膜。成分大致有粘蛋白、糖蛋白、血族抗原和免疫球蛋白，其中有些成分能促進細菌對牙表面的粘附，起受體作用。唾液薄膜是細菌附著于釉質(zhì)表面的必須條件，另個主要作用是其選擇性吸附。細菌附著：1）、蛋白質(zhì)：細菌本身表面蛋白與牙表面獲得性膜上唾液蛋白通過蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)作用吸附。2）、多糖：促進鏈球菌在牙面定植的主要物質(zhì)，通過植物凝集素-糖的機制聚集。3）、脂磷壁酸：細菌胞壁上脂磷

5、壁酸和葡糖基轉(zhuǎn)移酶上均有葡聚糖受體，這三者結(jié)合成復合體。菌斑成熟：纖毛菌定植于菌斑后代替原先的鏈球菌，并與牙面成垂直排列，使菌斑內(nèi)氧含量減少，有利于厭氧菌生長，形成柵欄狀結(jié)構是成熟菌斑的標志，成熟菌斑結(jié)構包括1）、基底層為無細胞均質(zhì)結(jié)構，為獲得性薄膜2）、細菌層位于中間，絲狀菌彼此平行，與牙面垂直，中間堆積有大量球菌和短桿菌3）、表層含松散的G+和G-菌，脫落的上皮，食物殘屑和衰亡的細胞。由牙菌斑的形成簡述生態(tài)連續(xù)1、牙菌斑的形成中，先形成牙面上的獲得性薄膜：這是細菌附著于釉質(zhì)表面的必須條件，它還有個作用是選擇性吸附能力，薄膜中一些唾液分子與細菌表面分子相互作用的特異性即粘附受體與粘結(jié)素之間的

6、鍵合決定細菌附著的選擇性。2、細菌附著：當獲得性薄膜覆蓋牙面后，口腔中的細菌通過蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)、植物凝集素-糖、脂磷壁酸-葡聚糖-葡糖基轉(zhuǎn)移酶等作用機制陸續(xù)附著其上，最早定植的是血鏈球菌，在菌斑形成26小時內(nèi)血鏈菌明顯增多，最早定植的稱為先鋒菌，先鋒菌初始定植后，出現(xiàn)快速生長的態(tài)勢，鏈球菌生長成鏈并開始與牙表面垂直，如此導致牙表面環(huán)境的改變，從而允許新的不同種屬的細菌進入發(fā)育著的菌斑，這些后繼菌中包括放線菌和韋榮軍，此即為生態(tài)連續(xù)。如血鏈菌和黏放菌之間，通過植物凝集素-糖的作用機制特異性聚集，血鏈菌在兩株互不起作用的細菌如放線菌和齲齒羅氏菌之間起搭橋作用，由此導致菌斑中多種屬細菌的聚集。3、菌

7、斑成熟：纖毛菌定植后替代鏈球菌，并與牙面垂直排列呈柵欄狀，遂使菌斑內(nèi)氧含量減少，有利于厭氧菌的生長，菌層日漸增厚。成熟菌斑結(jié)構分三層：基底層為無細胞均質(zhì)結(jié)構，系獲得性薄膜；中間層為細菌層，絲狀菌彼此平行，與牙面垂直，中間堆積大量球菌和短桿菌；表層為松散的G+、G-菌、脫落的上皮、食物殘屑和衰亡的細胞。牙周病中牙齦膠原的變化1、膠原含量減少：主要為酸溶性膠原的下降，而鹽溶性膠原無明顯下降。有兩方面機制：1）、在炎癥過程中，成纖維細胞、中性粒細胞、單核巨噬細胞對膠原纖維的吞噬活性增強，膠原的破壞增加；2）、膠原的產(chǎn)生受抑制。2、膠原類型的變化：V型膠原含量上升，出現(xiàn)I型膠原三聚體，III型膠原含量

8、下降。原因：1）、不同類型膠原對膠原酶的敏感性不同，III型膠原敏感性高，故含量下降，V型膠原敏感性低，故相對增加。2）、炎癥部位牙齦成纖維細胞生物行為改變，其分泌的膠原蛋白也有類似改變。3、參與膠原破壞的因素：1）、膠原酶：細菌來源、宿主來源的膠原酶降解膠原。2）、牙周袋內(nèi)揮發(fā)性巰基復合物（VSCs），引起口臭的原因：抑制脯氨酸轉(zhuǎn)運降低膠原合成，巰基（S）直接結(jié)合到膠原肽鏈上，增加膠原對酶降解的敏感性，促進膠原分解。3）、細菌內(nèi)毒素：深入牙周組織，直接作用于成纖維細胞或間接通過所刺激產(chǎn)生的細胞因子如前列腺素、LT-1、腫瘤壞死因子等促進膠原吞噬和降解唾液對口腔菌群的影響（唾液的生物學作用）1

9、、消化及營養(yǎng)功能：1）、協(xié)助咀嚼和吞咽：唾液為咀嚼提供液體，使食物變成食團2）、直接參與消化作用：存在多種消化酶3）、維持味覺功能：唾液為化學物質(zhì)的溶解提供了溶劑4）、提供各種營養(yǎng)來維持口腔軟硬組織的代謝平衡：唾液中有水、電解質(zhì)、蛋白等對軟硬組織提供必要的營養(yǎng)。2、唾液的保護功能1）、潤滑作用：唾液中黏蛋白起潤滑作用2）、維持黏膜的完整：免受各種有害物質(zhì)直接作用于黏膜3）、軟組織修復作用：唾液內(nèi)表皮生長因子和神經(jīng)生長因子加快傷口愈合4）、清除作用：清除排泄口腔內(nèi)物質(zhì)，保持口腔相對清潔狀態(tài)5）、調(diào)節(jié)口腔菌群平衡：唾液有抑制微生物生長的因子如溶菌酶、乳鐵蛋白、過氧化物酶等，還有殺菌的化學物質(zhì)如氟化

10、物、氯化物、硝酸鹽等，另一方面，唾液中有聚集細菌的因子，如黏蛋白。6）、維護口腔緩沖能力：主要為碳酸氫鹽和磷酸鹽，維持菌斑PH。7）、維持牙齒礦化：唾液在牙表面形成一層獲得性膜，為釉質(zhì)提供保護，免于機械和化學損害，并且唾液對鈣沉積及溶出過程有調(diào)節(jié)作用。3、唾液蛋白質(zhì)功能：1）、保水作用2）、潤滑作用3）、維持味覺4）、形成軟組織表面膜5）、形成釉質(zhì)獲得膜6）、消化作用7）、軟組織修復8）、保護和修復牙組織9）、調(diào)節(jié)菌斑PH10）、抑制微生物4、診斷作用：1）、口腔疾?。悍置诹考俺煞指淖?，涎腺炎癥、齲病、牙周病等2）、全身性疾?。毫髀屎统煞郑岣駛惥C合征、糖尿病、肝炎等3）、藥物監(jiān)測4）、測定激

11、素、毒物水平齦溝液生理作用及臨床意義齦溝液的抗菌防齲作用1）、沖洗：通過緩沖作用將細菌及其代謝產(chǎn)物帶出齦溝2）、存在有活性的白細胞、溶菌酶、乳鐵蛋白等吞噬抑制或殺滅細菌3）、存在抗體來調(diào)理、趨化吞噬細胞，以及激活補體系統(tǒng)來發(fā)揮抗菌作用2、齦溝液成分變化作為牙周病變的評判指數(shù)：雖然齦溝液成分較多，但是只有少數(shù)幾種成分的含量與局部牙周病變程度密切相關，主要包括堿性磷酸酶、-葡萄糖苷酸酶、天門冬氨酸基轉(zhuǎn)移酶、前列腺素（PGE2）等。釉質(zhì)礦化與牙本質(zhì)礦化的區(qū)別：牙釉質(zhì)生物礦化：機制：牙本質(zhì)晶體誘導釉質(zhì)晶體的釉質(zhì)結(jié)晶，釉質(zhì)基質(zhì)的蛋白成分降解，有機質(zhì)和水分排除步驟：1、成釉細胞分泌釉原蛋白和非釉原蛋白HA

12、晶體產(chǎn)生，包在非釉原蛋白中，其外是連續(xù)的釉原蛋白，晶體長軸與釉牙本質(zhì)界垂直延伸成釉細胞后退，留出空隙，釉柱在空隙中形成，長軸與空隙方向平行釉原蛋白減少，晶體成熟長大，最后留下非釉原蛋白作基質(zhì)牙本質(zhì)生物礦化：機制：成牙本質(zhì)細胞合成膠原蛋白形成前期牙本質(zhì)，并以此為支架，發(fā)生礦物晶體沉積步驟：1、成牙本質(zhì)細胞分泌膠原蛋白合成磷蛋白部分磷蛋白與膠原蛋白結(jié)合，部分降解磷酸鈣與磷蛋白結(jié)合形成HA晶體，按膠原纖維排成有序結(jié)構外顯子、內(nèi)含子的概念及其與mRNA的關系1、外顯子：基因中與成熟的mRNA相對應的DNA片段，它不僅包括為蛋白質(zhì)編碼的部分，而且包括5和3末端不翻譯的前導序列和尾隨序列。2、內(nèi)含子：即插

13、入序列，它是位于基因的內(nèi)部，能夠被轉(zhuǎn)錄的一段DNA。但在轉(zhuǎn)錄之后，與之相應的那部分轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物在拼接（剪切）中被去掉了。3、與mRNA的關系：轉(zhuǎn)錄后新生的mRNA中含有內(nèi)含子和外顯子的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，但經(jīng)拼接后，成熟的mRNA只有與外顯子對應的部分，內(nèi)含子的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物被剪切去掉了。粘蛋白的分類、結(jié)構、組成 1、MG1：1000kD，高分子量，有大量疏水結(jié)構，與HA（羥基磷灰石）有親和力，結(jié)合牙面，參與獲得性膜形成，覆蓋牙面和黏膜，形成屏障，減少摩擦，保護口腔組織。2、MG2:250kD，無疏水結(jié)構，與HA親和力不高，含大量神經(jīng)氨酸，能與一些細菌特異性作用，促進細菌粘附集聚成團，有利于從口腔中清除；調(diào)節(jié)菌叢

14、，防止齲病和牙周病。PCR的應用分離已知基因：如果已知一條目的基因兩外側(cè)的DNA序列，可以通過PCR技術大量擴增該基因，使原樣本中微量的靶基因迅速增加至樣本中的主要成分，避免了重組后海底撈針式的靶基因篩選過程。檢測微量DNA：通過PCR技術可以對微量DNA樣品中可能存在的某特定序列大量擴增，并隨后經(jīng)DNA指紋或核酸雜交進行進一步檢測。這種方法在古生物學及法醫(yī)學上有著重要價值。遺傳性疾病、腫瘤的診斷：有些人類遺傳病和腫瘤與單一基因的突變有關，通過PCR技術將可疑基因擴增并進行分析，有利于疾病早期診斷。什么是southern雜交1、經(jīng)限制性核酸內(nèi)切酶消化DNA片段2、用凝膠電泳分離3、然后在原位將

15、DNA片段轉(zhuǎn)移至固相基質(zhì)如硝酸纖維素膜上4、經(jīng)變形及干烤固定，用核酸探針進行雜交5、經(jīng)放射自顯影顯示雜交結(jié)果6、Southern雜交的最大優(yōu)點是能根據(jù)雜交帶的位置判斷待測樣品中與探針雜交的DNA片段的分子量。中心法則物種的遺傳信息及表型（即物種的多樣化）是由DNA決定的。DNA可進行自我復制并將復制的遺傳信息傳遞給子代，使物種維持高度的穩(wěn)定。以DNA序列為模板，“復制”多套mRNA用于蛋白質(zhì)合成，在這一點上，DNA相當于遺傳信息的儲存原件，mRNA為可直接使用的“復印件”。以mRNA序列為氨基酸裝配藍圖，合成特定蛋白質(zhì)，通過后者展示出豐富多彩的生命變形鏈球菌致齲性的測定 通過分子生物學手段，可

16、以構建特定基因失活的突變株，利用這些突變株進行動物實驗，如果因該蛋白或酶的缺失而使細菌喪失或降低其致病力，則這一因子是致病的重要毒力因子。采用這種方法，目前已對多種變鏈菌可疑致齲因子進行了測試。GTFI、GTFSI、細胞內(nèi)多糖合成酶在變鏈致齲過程中起重要作用。乳糖操縱子模型調(diào)節(jié)基因表達在無乳糖的情況下，調(diào)節(jié)基因編碼的阻遏蛋白可以和操縱基因特異性結(jié)合，使RNA多聚酶不能結(jié)合至半乳糖苷酶基因啟動子上而無法轉(zhuǎn)錄，結(jié)構基因被“關閉”。在作為誘導物的乳糖存在時，乳糖能與阻遏蛋白特異性地結(jié)合而改變阻遏蛋白的構象，使阻遏蛋白不能與操縱基因結(jié)合，從而解除對結(jié)構基因表達的抑制，于是基因被轉(zhuǎn)錄、翻譯。乳光牙本質(zhì)的

17、致病基因情況染色體4q21基因所在的關鍵區(qū)域內(nèi)存在4個已知的牙本質(zhì)中特異性表達的基因，骨橋素基因（OPN）、骨唾蛋白基因（BSP）、牙本質(zhì)基因蛋白1基因（DMP1）、牙本質(zhì)涎磷蛋白基因（DSPP）OPN、BSP為僅在骨、牙本質(zhì)等少數(shù)礦化組織中特異表達的磷酸化蛋白，DMP1為酸性細胞外基質(zhì)磷酸化蛋白，主要見于成牙本質(zhì)細胞雖然對SSP1、IBSP、DMP1三個候選基因外顯子編碼區(qū)的突變篩查排除了這三個基因為致病基因的可能，但上述定位工作為最終克隆DGI-II致病基因奠定了基礎。DSPP主要見于成牙本質(zhì)細胞，在前成釉細胞中亦有短暫表達。牙本質(zhì)發(fā)育不全患者牙本質(zhì)磷蛋白DPP含量減少，提示DSPP可能與

18、牙本質(zhì)發(fā)育不全相關，我國科學家用連鎖定位法分析了一個DGI-II家系，選擇4q21位點附近的4個高度多態(tài)性微衛(wèi)星標記將致病基因定位于染色體同一區(qū)域即4q21.根據(jù)定位候選原則，他們對家系中所有患者的DSPP基因進行了突變篩查，最終在外顯子3檢測到一個無義突變，該突變使得編碼谷氨酰胺的密碼子突變?yōu)榻K止密碼子，導致DSPP編碼的部分牙本質(zhì)涎蛋白DSP和全部牙本質(zhì)磷蛋白DPP截斷缺失。DSPP基因含5個外顯子編碼區(qū)，同時編碼兩個與牙本質(zhì)發(fā)育密切相關的蛋白：DSP、DPP。對中國一個DGI-II家系的DSPP基因進行突變檢測，發(fā)現(xiàn)所有患者的外顯子3第45位密碼子由CT的突變，使得正常的Gln（谷氨酰胺

19、）突變?yōu)榻K止密碼子，突變產(chǎn)物僅含極少部分DSP蛋白，丟失了全部DPP蛋白和大部分DSP蛋白免疫防齲概念和分類免疫防齲：運用人工接種方法，使機體產(chǎn)生或獲得特異性免疫能力，達到防齲的目的。分類：人工自動免疫（active immunization for caries）：用人工接種的方法給機體接種抗原物質(zhì) (變鏈菌或其抗原物質(zhì)) 疫苗，刺激機體產(chǎn)生特異性免疫應答，人工自動免疫產(chǎn)生免疫的時間長，免疫力長久，能產(chǎn)生交叉反應。 （1）、防齲疫苗： 滅活疫苗：滅活的變鏈菌。 活疫苗：由毒力高度減弱或無毒的變鏈菌制成的減毒活疫苗。 亞單位疫苗：去除病原菌中對機體有害的成分，保留有效的免疫原成分所制成的疫苗，

20、如變鏈菌GTF、Pac。 多肽疫苗：化學合成的肽抗原與適當載體和佐劑結(jié)合制成的疫苗，如抗（變鏈菌）獨特型抗體疫苗。 基因重組疫苗：將編碼特定抗原的基因片段引入細菌、酵母菌或動物細胞的基因中，以基因工程技術制備只含免疫原性的純化疫苗，包括基因引入、重組、克隆、體外表達蛋白。 核酸疫苗：編碼抗原的外源性基因直接導入動物細胞內(nèi)，誘導對目的基因所表達的蛋白質(zhì)的免疫反應，包括基因引入、體內(nèi)表達蛋白以及針對蛋白產(chǎn)生免疫，GTFPac。 （2）主要免疫途徑：腸道接種、鼻腔接種2、人工被動免疫（passive immunization for caries）：直接給機體輸入由其他個體產(chǎn)生的免疫效應物質(zhì)（抗變鏈

21、菌相關抗原的抗體），使機體獲得特異性免疫力。短時間即可獲得大量抗體，免疫力不持久，免疫排斥。 （1）異種免疫：用防齲疫苗接種奶牛(主動免疫)，在牛奶或乳清中出現(xiàn)抗變鏈的抗體，給機體輸入該抗體，食用或含漱。 （2）、單克隆抗體：抗變鏈GTF或表面蛋白的單克隆抗體，牙面涂抹。 （3）、IgY：雞蛋黃抗體，用變鏈菌免疫母雞，在雞蛋黃中含有的抗變鏈菌抗體，防齲牙膏或含漱。 （4）、轉(zhuǎn)基因植物抗體：將表達特異性抗體分子的基因整合到植物基因中在轉(zhuǎn)基因植物中表達抗體（煙草、番茄、鹽藻）。 口腔特異抗原的分類口腔非特異免疫系統(tǒng)的組成 1、唾液防御 （1）、黏蛋白：MGI與口腔黏膜緊密聯(lián)結(jié)，捕捉唾液防御物質(zhì)，構

22、成一種屏障；MGII阻止某些細菌的定植。 （2）、溶菌酶：水解G+菌胞壁上的肽聚糖，導致細菌溶解。 （3）、乳鐵蛋白：干擾需鐵離子的微生物的生長，如口腔念珠菌、變鏈菌、放線菌等。 （4）、唾液過氧化物酶：增加細菌對其他抗菌成分的敏感性。 （5）、富組蛋白（HRPs）：對白念菌和變鏈菌有殺傷作用，HRP-5有抑制牙齦卟啉單胞菌蛋白酶的作用。2、口腔黏膜防御 （1）、黏膜完整性構成物理屏障。 （2）、黏膜上皮細胞分泌防御素，直接殺滅病原微生物，起免疫防御機能。 （3）、黏膜上皮生理脫落，使細菌無法大量長期定植。 （4）、黏膜上皮和固有層有相對不游走的常住免疫活性細胞，黏膜中還有免疫球蛋白。 （5）

23、、口腔黏膜表面寄居著大量正常菌群，它們可降低PH、競爭營養(yǎng)等方式抑制潛在致病菌生長。 3、口腔淋巴組織 （1）、口外淋巴組織：頜下、頦下、頸深上及咽后淋巴結(jié)等，外來抗原侵入固有層后，可直接經(jīng)淋巴管或由吞噬細胞攜帶進入相應引流淋巴結(jié)，引起機體的免疫應答。 （2）、口內(nèi)淋巴結(jié)：扁桃體、唾液腺淋巴樣組織、牙齦淋巴樣組織、粘膜下彌散的淋巴樣細胞，與黏膜局部免疫密切相關。口腔免疫應答的特點 1、不僅有體液免疫，還有細胞免疫，還有特異性過敏反應和免疫缺陷等疾病存在。2、口腔是個有菌環(huán)境，口腔常駐菌對人體無致病性，但當細菌數(shù)量、寄居部位或機體免疫應答發(fā)生改變時，這些細菌可稱為致病菌。3、口腔健康與口腔黏膜完

24、整性有關，它構成了阻止細菌入侵的物理性屏障。4、口腔中各種分泌液如唾液、齦溝液等有沖洗、稀釋細菌及其致病力的作用，這些分泌液中含有各種免疫球蛋白、補體、白細胞以及其他殺菌成分，能抵抗、阻止細菌入侵，起局部免疫功能。5、口腔免疫應答場所主要位于口腔局部，它所引起病變主要以局部病變?yōu)橹?，但也可影響到全身其他器官，參與的免疫應答有細胞免疫、體液免疫應答，及非特異性免疫系統(tǒng)?？谇火つぜ膊∪缣彀挴?、白塞病等是全身系統(tǒng)疾病在口腔的表現(xiàn)，其發(fā)病往往與全身免疫系統(tǒng)有關。6、在牙髓病、根尖周病以及牙周組織病中，細菌或細菌代謝產(chǎn)物、細菌胞壁成分等作為抗原物質(zhì)引起根尖周和牙周免疫應答，這些免疫應答是使病變局限的保護

25、性反應，但同時不可避免的會導致根尖周和牙周組織的損傷。因此只有徹底去除根管內(nèi)感染物質(zhì)和牙周袋內(nèi)的細菌和菌斑，才能徹底清除抗原、控制感染，使破壞組織修復。SIgA的口腔局部免疫功能黏膜免疫：1）、與黏蛋白在口腔黏膜和牙齒表面形成一種保護性被膜（屏障）2）、凝集細菌，減少細菌或菌斑在口腔組織表面的粘附3）、增強溶菌酶等其他殺菌物質(zhì)的殺菌作用4）、中和病毒的細菌毒素2、抗原調(diào)節(jié)和免疫排斥 1）、調(diào)節(jié)黏膜對抗原的攝取 2）、通過免疫排斥調(diào)節(jié)IgE的產(chǎn)生，過敏癥與IgA缺乏有關3、口腔耐受：機體血清免疫對經(jīng)口腔攝入的抗原的不應答性，機體接觸此種抗原，血清IgG和IgM不會升高，但局部SIgA反應仍在，發(fā)

26、揮黏膜免疫功能4、IgA介導的抗原分泌：抗原進入黏膜下，IgA與之結(jié)合形成復合物，被轉(zhuǎn)運至黏膜表面發(fā)生抗原清除，這種作用也可以導致抗體促進的上皮感染。例如，IgA選擇性缺乏征患者易發(fā)生反復口腔潰瘍和皰疹；唾液中SIgA含量低，患齲率高；鼻咽癌放療后的猛性齲；口干綜合征（自身免疫疾病）：唾液分泌減少，可能導致齲病、牙周病、口腔白念菌感染增加?？谇幻庖叩墓δ?、唾液防御 （1）、黏蛋白：MGI與口腔黏膜緊密聯(lián)結(jié)，捕捉唾液防御物質(zhì)，構成一種屏障；MGII阻止某些細菌的定植。 （2）、溶菌酶：水解G+菌胞壁上的肽聚糖，導致細菌溶解。 （3）、乳鐵蛋白：對鐵離子有高親和力，螯合鐵離子，干擾需鐵離子的微生

27、物的生長，如口腔念珠菌、變鏈菌、放線菌等。 （4）、唾液過氧化物酶：與唾液中H2O2和SCN-構成抗菌系統(tǒng)，過氧化物酶利用H2O2將SCN-氧化成OSCN-，OSCN-氧化細菌蛋白的巰基抑制細菌生長，增加細菌對其他抗菌成分的敏感性。 （5）、富組蛋白（HRPs）：對白念菌和變鏈菌有殺傷作用，HRP-5有抑制牙齦卟啉單胞菌蛋白酶的作用。 （6）分泌型IgA（SIgA）：1）、黏膜免疫：SIgA與黏蛋白結(jié)合，形成保護性被膜；SIgA表面的抗原決定簇決定微生物增殖和生存，減少微生物在口腔表面的粘附；此外，SIgA還增強溶菌酶和乳鐵蛋白殺菌作用；還有中和病毒和細菌毒素的作用。2）、抗原調(diào)節(jié)和免疫排斥作

28、用：調(diào)節(jié)黏膜抗原攝??；通過免疫排斥調(diào)節(jié)IgE的產(chǎn)生。3）、口腔耐受：機體血清免疫對經(jīng)口攝入抗原的不應答性。4）、IgA介導的抗原分泌 2、口腔黏膜防御 （1）、黏膜完整性構成物理屏障。 （2）、黏膜上皮細胞分泌防御素，直接殺滅病原微生物，起免疫防御機能。 （3）、黏膜上皮生理脫落，使細菌無法大量長期定植。 （4）、黏膜上皮和固有層有相對不游走的常住免疫活性細胞，黏膜中還有免疫球蛋白。 （5）、口腔黏膜表面寄居著大量正常菌群，它們可降低PH、競爭營養(yǎng)等方式抑制潛在致病菌生長。 3、口腔淋巴組織 （1）、口外淋巴組織：頜下、頦下、頸深上及咽后淋巴結(jié)等，外來抗原侵入固有層后，可直接經(jīng)淋巴管或由吞噬細

29、胞攜帶進入相應引流淋巴結(jié)，引起機體的免疫應答。 （2）、口內(nèi)淋巴結(jié)：扁桃體、唾液腺淋巴樣組織、牙齦淋巴樣組織、粘膜下彌散的淋巴樣細胞，與黏膜局部免疫密切相關。齲病與免疫的關系1、唾液中非特異性物質(zhì)與齲 1）、唾液的有機物：粘蛋白、溶菌酶 無機物：碳酸鹽、磷酸鹽 2）、緩沖作用：中和牙面上細菌代謝糖類產(chǎn)生的酸性物質(zhì) 3）、清除細菌及其代謝產(chǎn)物 4）、減少牙表面理化反應性2、SIgA與齲： 機體對致齲菌能夠產(chǎn)生特異性免疫應答（全身免疫、口腔局部免疫） 口腔局部特異性免疫主要由SIgA介導 血清抗體：齲病發(fā)生時，抗變鏈菌IgG和IgM升高，治療后IgG和IgM降低，SIgA濃度上升 唾液中抗變鏈菌S

30、IgA：SIgA水平低，患齲易感性和患齲率增加，患齲時SIgA濃度增加，齲病活動期增加顯著黏膜的免疫功能1、口腔的健康首先取決于黏膜的完整性，正常情況下，口腔黏膜呈連續(xù)性，構成一種物理屏障。2、口腔黏膜的免疫防御功能：黏膜上皮細胞在病原物刺激下產(chǎn)生具有直接殺滅病原微生物的防御素，防御素具有抗微生物活性，及輔助天然免疫和激活獲得性免疫的作用。3、黏膜上皮細胞生理脫落：黏膜上皮有一定更新周期，一般1014天，上皮的更新脫落使細菌無法在黏膜上大量、長期定植。4、黏膜上皮及固有層中有相對不游走的常住免疫活性細胞，如朗格漢斯細胞、淋巴細胞、樹突狀細胞、肥大細胞等。還存在免疫球蛋白，以IgG最多，這些抗體

31、可通過與相應抗原結(jié)合形成免疫復合物，以減少抗原穿通上皮。5、口腔黏膜表面寄居著大量正常菌群，它們可通過降低PH、降低氧化還原電勢、競爭營養(yǎng)成分、占據(jù)空間及產(chǎn)生多種抗菌物質(zhì)抑制潛在致病菌生長。成骨細胞形態(tài)和功能形態(tài)：單層排列，立方狀單核細胞，直徑2030m，胞質(zhì)嗜堿性，含大量線粒體、高爾基復合體、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，合成蛋白質(zhì)功能活躍，組化染色堿性磷酸酶強陽性功能：1、合成膜結(jié)合型堿性磷酸酶，與礦化過程有關合成骨基質(zhì)分子：I型膠原和多種非膠原蛋白，如骨鈣素、骨涎蛋白、骨橋蛋白、蛋白多糖、激素及生長因子受體破骨細胞的形態(tài)與功能形態(tài)：位于骨吸收陷窩內(nèi)，多核巨細胞，胞體變異大，直徑10100m，無固定形狀，胞

32、質(zhì)嗜酸，電鏡下有皺褶緣與清晰區(qū)，與骨吸收功能密切相關。功能：1、行使骨吸收功能的唯一細胞：與骨表面附著，細胞發(fā)生極化，形成皺褶緣和清晰區(qū)，進行物質(zhì)交換胞膜形成封閉區(qū)，使骨吸收陷窩與周圍骨基質(zhì)相對隔離，構成骨吸收的局部微環(huán)境 2、對礦物質(zhì)降解：破骨細胞內(nèi)酸性分泌小泡不斷與皺褶緣的胞膜融合，同時將胞內(nèi)酸性物質(zhì)分泌到骨陷窩中 3、對骨基質(zhì)中的有機質(zhì)降解：通過溶酶體半胱氨酸蛋白酶和基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）進行。皺褶緣、清晰區(qū)超微結(jié)構與骨吸收的關系1、皺褶緣（ruffled border）：指行使骨吸收功能時破骨細胞與骨表面相對的部分細胞膜高度折疊形成皺褶狀，這部分細胞膜上有質(zhì)子泵等結(jié)構，主要承擔細胞

33、內(nèi)外的物質(zhì)交換。2、清晰區(qū)（clear zone）：指行使骨吸收功能的破骨細胞細胞質(zhì)內(nèi)存在的一個沒有細胞器的區(qū)域，在電鏡下由于電子密度低故稱之為清晰區(qū)。清晰區(qū)內(nèi)存在大量微絲、微管，起支撐細胞形態(tài)、傳遞細胞內(nèi)外信息、控制細胞運動的作用。3、清晰區(qū)相對應的細胞膜與骨基質(zhì)緊密附著，在破骨細胞與所附著骨面間通過整合素形成封閉區(qū)，在這進行物質(zhì)交換，4、皺褶緣為行使骨吸收功能的破骨細胞所特有，當破骨細胞離開骨表面，這一形態(tài)便消失，皺褶緣擴大了破骨細胞與骨接觸的面積，皺褶緣胞膜上存在質(zhì)子泵，可以進行物質(zhì)交換。5、封閉區(qū)使骨吸收陷窩與周圍骨基質(zhì)相對隔離，形成一個微環(huán)境，在此PH可降至3，在酸和各種酶的作用下，

34、骨基質(zhì)被降解，形成骨吸收陷窩。前列腺素與骨吸收及骨形成的關系骨吸收：1、前列腺素促進破骨細胞的產(chǎn)生和骨組織的改建 2、前列腺素是機械力引起細胞代謝變化的重要介質(zhì)3、前列腺素食其他細胞激肽、生長因子引起骨吸收的中間介質(zhì)骨形成：1、前列腺素低濃度（10-9mol/l）時，促進人的成骨細胞DNA合成和細胞復制 2、在高濃度（10-6mol/l）時，抑制細胞分化 3、前列腺素受體存在于成骨細胞表面，而不是破骨細胞表面白細胞介素-1（IL-1）對骨組織的作用 1、是目前發(fā)現(xiàn)最強的骨吸收促進因子2、通過兩種方式促進骨吸收：1）、誘導破骨細胞前體分化2）、作用于成骨細胞，使其分泌某種生物活性物質(zhì)，間接作用于

35、成熟破骨細胞，活化其功能3、IL-1的所有生物學作用都是通過I型受體實現(xiàn)的，II型受體消耗體內(nèi)I型受體，阻斷其發(fā)揮生物學作用。腫瘤壞死因子（TNF）對骨組織的作用 1、存在、兩個亞型，為骨吸收促進因子，可抑制骨膠原合成2、TNF可直接作用于破骨細胞，促進破骨細胞前體向破骨細胞分化3、但TNF促進成熟破骨細胞的骨吸收作用必須通過成骨細胞介導4、TNF存在I、II兩種受體，均可發(fā)揮生物學作用轉(zhuǎn)化生長因子1（TGF-1）在骨形成及骨吸收中的作用TGF-1是涉及骨沉積及骨吸收偶聯(lián)過程的關鍵細胞激肽之一。TGF-1是重要的結(jié)締組織改建的調(diào)節(jié)劑，它通過促進基質(zhì)蛋白（膠原、纖維黏連素）的形成，蛋白酶抑制劑的

36、生成及減少基質(zhì)金屬蛋白酶的合成達到促進組織基質(zhì)形成的目的。TGF-1可導致成骨細胞的分化與增殖，抑制破骨細胞前體的形成及骨吸收。胰島素樣生長因子（IGF）對骨組織的作用 1、有I、II兩型2、成骨細胞表面存在IGF受體，IGF促進DNA合成和蛋白質(zhì)合成，促進成骨細胞增殖，加強成骨細胞活性3、IGF與破骨細胞的關系是間接作用，通過成骨細胞介導，促進單核的破骨細胞前體分化，并促進成熟破骨細胞的骨吸收功能成纖維細胞生長因子（FGF）對骨組織的作用 1、成骨細胞經(jīng)FGF處理24h，可促進其膠原合成2、但持續(xù)長時間的FGF處理，可以抑制成骨細胞I型膠原的合成能力3、FGF促進破骨細胞分化與PGE有關，F(xiàn)

37、GF是一個骨吸收的局部調(diào)節(jié)因子成骨細胞分化基質(zhì)成分的名稱1、膜結(jié)合型堿性磷酸酶2、骨基質(zhì)分子：I型膠原，多種非膠原蛋白如骨鈣素、骨涎蛋白、骨橋蛋白、蛋白多糖，以及激素和生長因子受體。成骨細胞在骨改建中的作用 1、成骨細胞與破骨細胞的關系成骨細胞參與破骨細胞在骨表面附著的調(diào)節(jié)：成骨細胞表面有許多促進骨吸收因子的受體，如前列腺素受體、IL-6受體等，而破骨細胞表面則沒有。成骨細胞受到骨代謝調(diào)節(jié)因子作用后，從礦化的骨表面移開，分泌蛋白酶消化骨表面類骨質(zhì)，使礦化的骨表面暴露，為破骨細胞的附著提供條件。成骨細胞合成骨唾酸蛋白和骨橋蛋白，可與破故細胞結(jié)合，提供破骨細胞與骨基質(zhì)附著的位置。成骨細胞合成破骨細

38、胞骨吸收刺激因子：成骨細胞受機械力作用后，產(chǎn)生PGE2，促進破骨細胞骨吸收，存在于骨基質(zhì)的血小板衍生的生長因子（PDGF）也來源于成骨細胞，促進破骨細胞骨吸收，外源性PDGF又可促進成骨細胞合成大量PGE2和IL-6這兩種新的骨吸收促進因子。成骨細胞參與破骨細胞分化成熟的調(diào)節(jié)：成骨細胞膜上存在誘導破骨細胞前體分化的因子，破骨細胞前體分化成熟的過程中，與成骨細胞的胞體接觸是必不可少的。牽張成骨術的生物學基礎 1、骨切開階段的生物學反應：骨皮質(zhì)的連續(xù)性被破壞，激活了骨折愈合過程，包括成骨細胞的聚集，骨的斷端形成血痂，血痂逐漸被機械強度更好的層板狀骨替代 2、間歇期的生物學反應：骨被離斷到開始加力前

39、，1）、血管斷裂，形成血腫，聚集血凝塊2）、骨斷端出現(xiàn)細胞壞死，新生毛細血管開始向血腫中侵入恢復血供，大量細胞增殖，類似炎癥反應，血凝塊逐漸被炎癥細胞、成纖維細胞、膠原和毛細血管替代3）、進入軟痂期，術后5天在骨折線周圍形成毛細血管網(wǎng)，一些成骨細胞前體聚集在新生毛細血管周圍，成纖維細胞形成纖維樣組織，替換炎癥組織，軟骨逐漸形成，軟骨起暫時支撐斷端的作用 3、牽張期的生物學反應：1）、生長刺激作用：刺激結(jié)締組織中生物活性物質(zhì)釋放，增加成纖維細胞的增殖和生物合成2）、塑性作用：改變成纖維細胞的形態(tài)，使胞體肥大，發(fā)生極化，形成膠原，沿施力方向排列，紡錘狀的成纖維細胞液以相同方向排列在膠原之間。新生毛

40、細血管迅速向纖維性骨痂中心生長，毛細血管末端迅速由纖維組織填入提供低分化細胞，分化為成纖維細胞，成軟骨細胞和成骨細胞。牽張期第2周，編織骨形成，成纖維細胞分泌類骨質(zhì)，類骨質(zhì)礦化。牽張期骨斷端中心礦化度低，是牽張力最大的區(qū)域，膠原纖維、成纖維細胞沿牽張力方向排列，纖維組織和軟骨組織交織存在，說明既有膜性成骨，又有軟骨成骨。 4、固定期的生物學反應：停止牽張到去除牽引器，新生的組織完全鈣化。 5、改建期：骨組織行使全部功能以完成新骨的改建，骨皮質(zhì)和骨髓腔恢復，哈弗系統(tǒng)形成，大約需1年。體外培養(yǎng)成骨細胞的鑒定 1、生化鑒定：1）、堿性磷酸酶：在組織分離過程中去除軟骨和骨髓，堿性磷酸酶染色可認為是成骨

41、細胞的一個特異性標記。2）、I型膠原3）、骨基質(zhì)中的非膠原蛋白，如骨黏連蛋白、骨橋蛋白、骨鈣蛋白等4）、觀察其對鈣調(diào)節(jié)激素的反應2、形態(tài)學觀察：鑒定的補充手段，注意區(qū)分成骨細胞和脂肪細胞3、骨形成能力觀察：形成骨組織中有機成分和礦化物質(zhì)的能力，是鑒定成骨細胞的指征組織培養(yǎng)細胞的生命期： 1、原代培養(yǎng)期：稱初代細胞，從體內(nèi)取出組織接種培養(yǎng)到第一次傳代的階段，一般14周?？梢娂毎至训煌?，細胞與原組織在形態(tài)結(jié)構和功能活動上相似，細胞群是異質(zhì)的，細胞相互依存性強，獨立生存能力差。初代培養(yǎng)細胞多呈二倍體核型，此期是檢測藥物較好的實驗對象。 2、傳代期：一經(jīng)傳代后就稱細胞系，此期持續(xù)時間最長，為保持

42、二倍體細胞性質(zhì)，應在初代培養(yǎng)期或傳代后早期凍存，傳代3050此后，細胞增殖減慢以至完全停止。 3、衰退期：細胞仍然生存，但增殖很慢或不增殖，細胞形態(tài)輪廓增強，最后衰退凋亡。培養(yǎng)細胞的一代生存期： 1、潛伏期：細胞接種培養(yǎng)后，先在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)，為懸浮期，此時細胞回縮，胞體圓球形；接著細胞附著或貼附在底物表面，為貼壁。細胞潛伏期時有運動活動，基本無增殖，少見分裂象。 2、指數(shù)生長期：細胞增殖最旺盛的階段，指數(shù)生長期是細胞一代中活力最好的時期，是進行各種實驗最好和最主要的階段，細胞不斷增多，生長空間漸趨減少，最后細胞相互接觸匯合成片，細胞相互接觸后，能抑制細胞的運動，這種現(xiàn)象為接觸抑制。惡性細胞無接觸抑制。 3、停滯期：細胞數(shù)量達飽和密度后，細胞停止增殖，此時細胞數(shù)量持平，也稱平臺期，仍有代謝活