1、PTEN和PCNA在胃癌中的表達及其臨床意義【摘要】 目的：檢測PTEN蛋白和PCNA蛋白在胃癌組織中的表達，并研究其臨床病理意義。方法：用免疫組織化學SP法檢測PTEN和PCNA蛋白在80例胃癌組織中的表達，并取30例同期胃炎黏膜標本作為對照。結果：胃炎黏膜PTEN蛋白陽性表達表達率為100.0%(30/30)，胃癌組織PTEN蛋白陽性表達率為40.0%(32/80)；高、中分化腺癌的PTEN蛋白陽性表達率高于低分化腺癌的；期、期胃癌的PTEN蛋白陽性表達率高于期、期的；無淋巴結轉移組胃癌的PTEN陽性表達率高于淋巴結轉移組的；胃癌組織PCNA標記指數為(86.712.3)%，高于胃炎黏膜的

2、PCNA標記指數；PTEN蛋白表達陰性的胃癌細胞PCNA的標記指數高于PTEN蛋白表達陽性者。胃癌患者生存年限5 a PTEN蛋白陽性表達率高于生存年限75%。染色強度與陽性細胞計分乘積0分2分記為(-)，3分5分記為(+)，6分9分記為(+)，10分12分記為(+)。PCNA以細胞核中出現棕黃色顆粒為陽性細胞；連續計數500個腫瘤細胞，以平均每100個瘤細胞中PCNA陽性細胞數作為PCNA標記指數。1.4 統計學處理 采用2檢驗和Spearman等級相關檢驗。2 結果2.1 胃癌組織中PTEN蛋白的表達 80例胃癌組織中有32例PTEN蛋白陽性表達，其中(+)18例，(+)10例，(+)4例

3、，陽性表達率為40.0%；多數陽性表達不強。而30例胃炎黏膜組織全部有PTEN蛋白陽性表達，陽性表達率為100.0%，而且陽性強，其中(+)22例，(+)8例。二者陽性表達率比較，差異有高度顯著性(2=6.42,P0.01)。2.2 胃癌組織中PCNA蛋白的表達 80例胃癌組織中PCNA標記指數為(86.712.3)%；30例胃炎黏膜組織中PCNA標記指數為(41.810.2)%，二者標記指數比較，差異有顯著性(2=5.12,P0.05)。2.3 胃癌組織中PTEN和PCNA蛋白表達的相關性 PTEN蛋白表達陽性的32例中， 平均PCNA標記指數為(58.811.2)%，PTEN蛋白表達陰性的

4、48例中，平均PCNA標記指數為(95.812.4)%。經統計學處理發現，PTEN和PCNA表達呈負相關性(=-0.621,P0.05)。2.4 PTEN蛋白表達與胃癌臨床病理聯系 PTEN蛋白表達與胃癌患者年齡、性別、肉眼分型、病理類型及浸潤深度等臨床病理特征無明顯關系。PTEN蛋白在高、中分化腺癌和低分化腺癌PTEN陽性表達率分別為50.0%(27/54)和19.2%(5/26)，差異具有顯著性(2=6.23,P0.05)。PTNM分期、期胃癌的PTEN蛋白陽性表達率為17.9%(7/39)，期、期胃癌的PTEN蛋白陽性表達率為61.0%(25/41)，二者差異有高度顯著性(2=6.71,

5、P0.01)。胃癌組織的PTEN陽性表達率在淋巴結轉移組為30.0%(15/50)，在無淋巴結轉移組為56.7%(17/30)，差異具有顯著性(2=4.73，P5 a者35例，23例PTEN蛋白表達陽性，表達率為65.7%；生存年限5 a者45例，9例PTEN蛋白表達陽性，表達率為20.0%。經統計學處理，兩表達率差異有顯著性(2=5.93，P0.05)。3 討論抑癌基因PTEN是1997年發現的一種抑癌基因，是至今發現的唯一一種能使脂類去磷酸化的抑癌基因，定位于染色體10 q 23.3，編碼由403個氨基酸殘基組成的蛋白質。PTEN蛋白中與抑癌功能相關的結構域主要是氨基端的磷酸酶結構域和羧基

6、端結構域。PTEN的酶活性中心有3個堿性氨基酸，從而擴大了PTEN結合底物所需的口袋結構的空間，為特異催化酸性底物奠定了結構基礎。PTEN基因在人類多種惡性腫瘤的發生、發展中起作用。PTEN通過誘導細胞周期阻滯和細胞凋亡等抑制腫瘤發生發展，其突變和異常表達與多種腫瘤的發生、發展、浸潤、轉移顯著相關，是患者預后不良的標志2。國外學者報道，PTEN基因表達缺失可促進胃癌血管生成，并在胃癌的進展和轉移中起關鍵作用3；其下調表達在胃癌的發生、進展、生長、分化和血管生成中起重要作用4。本組研究發現，80例胃癌組織中PTEN蛋白陽性表達率為40.0%，多數陽性表達不強，而對照組胃炎黏膜組織PTEN蛋白陽性

7、表達率為100.0%，而且陽性強，二者差異有高度顯著性；PTEN蛋白表達與胃癌患者年齡、性別、肉眼分型、病理類型及浸潤深度等臨床病理特征無明顯關系；PTEN蛋白陽性表達率隨癌組織的分化程度降低而降低；臨床分期越晚，PTEN蛋白陽性表達率越低；淋巴結轉移組PTEN蛋白陽性表達率低于無淋巴結轉移組；生存年限5 a者。這表明，PTEN蛋白低表達，會促進胃癌的發生、影響胃癌的分化、促進胃癌的轉移，影響胃癌患者的預后。這結果與上述文獻報道相似，并與國內學者范凱5的報道相似。基因的表達缺失可以是基因突變引起，也可以是基因的雜合性丟失(LOH)引起。PTEN基因突變常見于惡性膠質瘤、前列腺癌、子宮內膜癌等多

8、種人類惡性腫瘤，但在胃癌中其突變率較低，且所發現的突變多位于非編碼區2。Sato等6用聚合酶鏈反應一單鏈構象多態性方法(PCRSSCP)分析了10個胃癌細胞系和58例原發胃癌組織，發現PTEN基因突變在胃癌的發生發展中不具有重要作用，推測胃癌中PTEN基因的雜合性丟失(LOH)可能較為常見。李錦毅等7用PCRSSCP檢測進展胃癌中的PTEN圍基因微衛星位點的LOH情況，結果其LOH的總發生率為28.6%。Li8等用免疫組化檢測發現：從不典型增生到進展期胃癌，LOH的發生率從13.3%到33.3%。這些研究都表明，胃癌中PTEN表達缺失主要是由PTEN基因的雜合性丟失(LOH)引起。增殖細胞核抗

9、原(PCNA)可以評估腫瘤細胞的增殖活性，有助于研究細胞的增殖狀態。本組胃癌組織中PCNA蛋白的標記指數顯著比胃炎黏膜組織中的PCNA標記指數高，結果與李菁華9報道的相似。而且，本組研究還發現，PTEN蛋白表達陽性的平均PCNA標記指數較低，PTEN蛋白表達陰性的PCNA標記指數較高，二者表達呈負相關性。這結果也與文獻報道的相似5。本實驗證明：PTEN基因蛋白表達是反映胃癌發生、分化、發展、轉移和預后的重要生物學標記物之一。PTEN基因蛋白和PCNA蛋白表達呈負相關性。【參考文獻】 1 許良中，楊文濤.免疫組織化學結果的判定J.中國癌癥雜志，1996，6(1)：229231.2 馬鵬，談曉紅，

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11、ttic cancer regulated by sxpression of PTEN encoding productsJ.World J Gastroenterol,2003,9(8):1662.5 范凱，馬堅妹，王朝暉，等.胃癌中hMLH1、hMSH2、PTEN和PCNA表達的相關性及意義J.臨床與實驗病理學雜志，2006，22(2)：236237.6 Sato K,Tamum G,Tsuchiya T,et al.Analysis of genetisand epigenetic alterations of the PTENgene in gastricJ.Vimlnws Arch,2002,440(2):160165.7 李錦毅，鄭華川，楊琳，等.胃癌中PTEN異常表達方式與圍基因微衛星的雜合性缺失J.中華腫瘤雜志，2004，26(7)：389392.8 Li YL,Tian Z,Wu DY,et al.Loss of heterozygosity