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文檔簡介
1、骨骼肌單收縮和復合收縮骨骼肌纖維受運動神經纖維的控制,神經纖維受到刺激后,其興奮延神經纖維以動作電位的形式傳導到相應的肌纖維,觸發肌纖維收縮。若通過神經給予肌肉一次刺激,使肌肉產生一次收縮,稱為單收縮。如果肌肉受到連續的刺激,則其收縮可出現復合現象。本實驗用蟾蜍的坐骨神經-腓腸肌標本,使用機-電換能器,通過powerLab系統來獲得肌肉的收縮曲線,分析單收縮和復合收縮產生的機制與特點。實驗動物:蟾蜍 實驗器材和藥品:PowerLab 8S主機,生物電放大器,鐵架臺,標本盒,任氏液。蛙手術器械,實驗步驟: 1標本制備:蟾蜍坐骨神經標本制備方法參見P18蟾蜍基本技術操作。將標本浸在任氏液中約5 分
2、鐘,待其興奮性穩定后實驗。2儀器裝置及程序設置:. 連接儀器(圖3-4)。圖3-4.骨骼肌單收縮和復合收縮的實驗框圖 其中,S1 和S2為刺激電極,與PowerLab的output I相連。 參數設置:啟動計算機,打開PowerLab主機電源,在桌面上單擊Chart4 for windows圖標,進入Chart應用程序窗口。* 選擇采樣速度為40K/s,顯示比例為500:1。* 在Channel 1顯示骨骼肌收縮曲線。放大器參數設置參見P38放大器參數設置。Range 為200mV, Low Pass為100Hz。如果在Bridge Amplifier設置對話框左側的信號顯示窗口中看不到輸入信
3、號,可用鼠標左鍵單擊右側的zero按鈕,系統自動調整輸入信號的零位。單擊Bridge Amplifier設置對話框下方的units按鈕,進入Units Conversion(單位轉換)對話框。單位轉換的方法參見P39信號幅度范圍的設置和單位的轉換。* 在Channel 2顯示刺激方波。在刺激參數設置對話框下方的Stimulator Marker框中選取Channel 2。刺激設置方法參見P42刺激輸出的設置。設置完畢后,單擊菜單欄的setup,選取Stimulator Panel(刺激面板),彈出Stimulator Panel,在實驗中可以方便地由刺激面板來設置刺激頻率、幅度和波寬等參數。單
4、次刺激:設置Mode為Pulse,單擊Hz選項,Frequency 取1Hz,Pulse Duration選0.1ms。選中Set number of pulse選項,在Number中鍵入1,表示一次刺激輸出1個刺激方波。Output Range為10V ,Amplitude為0,然后可在實驗中逐漸增大刺激幅度。雙次刺激:設置Mode為Pulse,單擊Hz選項,Frequency 取1Hz,Pulse Duration選0.1ms。選中Set number of pulse選項,在Number中鍵入2(雙刺激)。Output Range為10V,Amplitude選擇最大刺激強度。在實驗中通過
5、Stimulator Panel(刺激面板)逐漸增大Frequency(刺激頻率)。連續刺激: Frequency 取1Hz,Pulse Duration選0.1ms。為避免連續刺激使標本受損,故選中Set number of pulse選項,在Number中鍵入5,其余參數同上。實驗中通過Stimulator Panel(刺激面板)逐漸增大Frequency(刺激頻率),使骨骼肌收縮表現為單收縮、不完全強直收縮和完全強直收縮。實驗中如要對標本進行刺激,應先用鼠標左鍵單擊開始/停止切換按鈕,程序開始采樣記錄,然后單擊刺激面板的On按鈕,即可產生刺激輸出,同時Channel 2(2通道)顯示刺激
6、方波。把坐骨神經-腓腸肌標本固定在肌槽上,用棉線把腓腸肌與換能器相連。觀察項目: 1單次刺激:觀察腓腸肌收縮的情況。逐漸增大刺激強度,使肌肉的收縮幅度增大,直至收縮幅度不再隨刺激強度增大而增大。剛使收縮幅度達到最大的最小刺激強度為最大刺激強度。2測量最大刺激強度時骨骼肌收縮的潛伏期、收縮期、舒張期時程和收縮幅度。測量方法參見P46實驗數據的計算、分析和統計。3雙次刺激:逐漸增大Stimulator Panel中的刺激頻率,使第二個收縮波向第一個收縮波靠攏的過程中,逐漸疊加在第一個波的舒張期或收縮期,產生收縮的舒張期復合和收縮期復合。4連續刺激:逐漸增大Stimulator Panel 面板中的刺激頻率,使骨骼肌收縮表現為不完全強直收縮和完全強直收縮。5打印上述實驗結果,打印方法參見P49實驗數據的打印。注意事項: 1分離坐骨神經時,避免過度牽拉神經,絕對不允許用手或鑷子夾神經。2股骨要牢固地固定在肌槽的小孔中。3坐骨神經要與刺激電極和記錄電極緊密接觸,但不要損傷神經。4防止神經、肌肉標本干燥,需經常在神經和肌肉上以任氏液濕潤。5長時間刺激標本可能使骨骼肌的收縮能力下降,因此每個步驟后應讓肌肉休息片刻。6把腓腸肌懸掛
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