1、5 消毒滅菌16、自己選擇的路、跪著也要把它走完。17、一般情況下)不想三年以后的事，只想現在的事。現在有成就，以后才能更輝煌。18、敢于向黑暗宣戰的人，心里必須充滿光明。19、學習的關鍵-重復。20、懦弱的人只會裹足不前，莽撞的人只能引為燒身，只有真正勇敢的人才能所向披靡。5 消毒滅菌5 消毒滅菌16、自己選擇的路、跪著也要把它走完。17、一般情況下)不想三年以后的事，只想現在的事。現在有成就，以后才能更輝煌。18、敢于向黑暗宣戰的人，心里必須充滿光明。19、學習的關鍵-重復。20、懦弱的人只會裹足不前，莽撞的人只能引為燒身，只有真正勇敢的人才能所向披靡。第5章 消毒滅菌與生物安全 環境改變

2、環境適宜 環境劇變微生物生長繁殖變異死亡第5章 消毒滅菌與生物安全物理消毒滅菌法熱力滅菌法原理：破壞菌體蛋白質與核酸，使其肽鏈斷裂，蛋白質變性凝固，核酸解鏈崩解，導致細菌死亡。 最常用于消毒 和滅菌（563060分鐘；80510分鐘）可以分成干熱和濕熱兩大類焚燒-最徹底的滅菌方法燒灼-直接用火焰滅菌方法干烤-加熱160-180 2小時 干熱滅菌法濕熱滅菌法高壓蒸汽滅菌法最有效的滅菌方法 1.05kg/cm2 121.31520min煮沸消毒法水煮100 5分鐘(繁殖體)2小時(芽胞)流動蒸汽消毒法巴氏消毒法間隙蒸汽滅菌法水蒸汽100 1530分鐘(繁殖體)反復多次流動蒸汽間歇加熱滅菌較低的溫度

3、（71.7 15-30秒/61.162.8 30分鐘）殺滅致病菌濕熱滅菌與干熱滅菌的比較同一溫度下，濕熱滅菌比干熱滅菌效果好原因1、濕熱中細菌菌體蛋白較易凝固2、濕熱的穿透力比干熱大3、濕熱的蒸汽有潛熱 常用熱力滅菌法種類方法效果用途干熱焚燒點燃或焚燒爐 滅菌廢棄污物、尸體燒灼火焰燒灼 滅菌接種環，試管口干烤紅外線 干烤箱，熱空氣 160-170C 2h 電磁波熱效應 滅菌 滅菌玻璃器皿等耐高溫的物品醫療器械濕熱煮沸法100C，5-10min，沸水 消毒飲水. 食具. 注射器高壓蒸氣滅菌法 高壓蒸氣滅菌 器 1.05kg/cm2、 121.3C 15-20min 滅菌耐高溫、耐濕物品如：NS

4、.培養基. 手術衣 常用熱力滅菌法種類方法 效果 用途濕熱巴氏消毒法 61.1- 62.830 min， 72 15sec （常用） 消毒（殺死病 原菌，不破壞 營養成分）流通蒸氣滅菌法 80- 100 蒸氣 1530min牛奶，酒類消毒（殺死細菌繁殖體，不殺死芽胞）不耐高溫、高壓物品間歇滅菌法反復多次流動蒸氣滅菌不耐高溫、高壓物品輻射殺菌法 紫外線:殺菌機理：波長240300nm的紫外線具有殺菌作用干擾DNA的復制與轉錄紫外線穿透力較弱 不耐熱物品的表面消毒特 點：應用范圍： 空氣消毒手術室、傳染病房、細菌實驗室 波長380780nm為光波（可見電磁波） 紫 紅: 265nm-266nm（最

5、佳殺菌波長） 電離輻射：如高速電子， X-ray，-ray 機理：自由基及自由基離子 破壞微生物 蛋白質、核酸、酶 死亡 適用物品：不耐熱的物品（藥品及醫療用品）微波（microwave) 機理：熱效應 適用物品：非金屬物品、食品濾過除菌法(filtration) 機理：用物理阻留的方法將液體或空氣中的細菌 除去,以達到無菌目的 器具：濾菌器（filter） 適用物品：不耐高溫物品（血清、 毒素、抗生素）以及空氣 等的除菌。 干燥與低溫抑菌法在低溫狀態下真空抽去水分冷凍真空干燥法：用途：保存菌種干燥法：抑菌，用于：保存食物化學消毒滅菌法作用機制常用種類菌體蛋白變性或凝固酚類、醇類、重金屬鹽類(

6、高濃度)損傷細菌細胞膜脂溶劑、酚類(低濃度)、表面活性劑損傷核酸烷化劑（戊二醛、甲醛）、染料等干擾細菌的酶系統及代謝(破壞-SH，酶失活) 氧化劑（過氧乙酸、高錳酸鉀、H2O2,二氧化氯） 、重金屬鹽類(低濃度)改變細胞壁通透性表面活性劑（新潔而滅）常用消毒劑種類作用機制按殺菌能力可將消毒劑可分消毒劑類型種類殺菌機理范圍高效消毒劑含氯消毒劑次氯酸鈉等酶失活和氧化飲用水、地面等過氧化物類過氧化氫等酶活性喪失物品表面和皮膚醛類甲醛、戊二醛蛋白、核酸變性器械環氧乙烷環氧乙烷蛋白、核酸變性醫療器械中效消毒劑含碘消毒劑碘酊、碘伏氧化、沉淀蛋白皮膚、體溫計等醇類乙醇或異丙醇蛋白變性皮膚、體溫計等低效消毒劑

7、季銨鹽類新潔爾滅表面活性劑地面、皮膚等氯己定氯己定表面活性劑皮膚黏膜等高錳酸鉀高錳酸鉀氧化餐具、水果等類別 作用機制 常用種類酚類 蛋白變性，細胞膜損傷 石炭酸醇類 蛋白變性 乙醇（70%-75%）氧化劑 氧化、蛋白沉淀 高錳酸鉀、過氧乙酸 碘酒重金屬鹽 氧化、蛋白酶變性 紅汞、硫柳汞表面活性劑改變細胞壁、膜通透性 新潔爾滅染料 干擾氧化、抑制繁殖 龍膽紫烷化劑 菌體蛋白質及核酸烷基化 甲醛、烷氧乙烷常用消毒劑的種類（按化學成分）常用消毒劑的應用種類使用濃度用途石炭酸3%5%地面、器具表面、皮膚消毒乙醇70%75%皮膚、體溫計消毒高錳酸鉀0.1%皮膚、尿道、蔬菜、水果消毒紅汞2%皮膚、粘膜、小

8、創傷消毒硫柳汞0.1%皮膚消毒、手術部位消毒過氧乙酸0.2%0.3%塑料、玻璃器材消毒碘酒2.0%2.5%皮膚消毒新潔爾滅0.41.6%手術洗手、浸泡手術器械龍膽紫2%4%淺表創傷消毒消毒滅菌的運用使用范圍常用方法室內空氣紫外線；過氧乙酸噴霧；中草藥煙熏皮膚乙醇；肥皂水黏膜3%過氧化氫；1g/L高錳酸鉀病人分泌物及排泄物漂白粉、含50g/L有效氯的次氯酸鈉病人污染物煮沸、過氧乙酸、流通蒸汽飲水氯氣影響消毒劑作用的因素消毒劑微生物 環境種類濃度作用時間物理狀態種類有機物溫度酸鹼度數量選擇適當的消毒劑低毒價廉低破壞易貯藏方便有效生物安全 生物安全（biosafety）是生物技術安全（safety

9、of biotechnology）的簡稱。 狹義地指現代生物技術的研究、開發、應用及轉基因生物可能對生物多樣性、生態環境和人類健康產生潛在的危害。 廣義地指與生物有關的各種因素對社會、經濟、人類健康及生態環境所產生的危害或潛在風險。 病原微生物所致的安全問題，如病原微生物實驗室的安全隱患、生物武器、生物恐怖、重大傳染病的暴發流行等，也是人類社會所面臨的最現實的生物安全問題。 病原微生物實驗室生物安全的核心是防擴散和防感染。 關于病原微生物實驗室生物安全，我國法令包括對病原微生物的分類管理，對實驗室的分級管理，實驗室感染的控制以及監督和法律責任等。 一、病原微生物的分類 根據傳染性、感染后對個體

10、或者群體的危害程度，病原微生物分為四類： 第一類：能夠引起人類或者動物非常嚴重疾病的微生物，以及我國尚未發現或者已經宣布消滅的微生物。如天花、埃博拉病毒等。 第二類：能夠引起人類或者動物嚴重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物。 如乙腦、狂犬病病毒、HIV、脊灰、結核、霍亂等。 一、病原微生物的分類第三類：能夠引起人或動物疾病，但一般情況下對人、動物或環境不構成嚴重危害，傳播風險有限，實驗室感染后很少引起嚴重疾病，并且具備有效治療和預防措施的微生物。如肝炎、風疹、皰疹、流感、破傷風病毒等。 第四類：在通常情況下不會引起人或動物疾病的微生物。如小鼠白血病病毒等。

11、 第一類、第二類統稱為高致病性病原微生物。二、病原微生物實驗室的分級級別處理對象一級對人體、動植物或環境危害較低，不具有對健康成人、動植物致病的致病因子。二級對人體、動植物或環境具有中等危害或具有潛在危險的致病因子，對健康成人、動植物和環境不會造成嚴重危害，具有有效的預防和治療措施。三級對人體、動植物或環境具有高度危險性，主要通過氣溶膠使人類傳染上嚴重的甚至是致命的疾病，或對動植物和環境具有高度危害的致病因子。通常有預防治療措施。四級 對人體、動植物或環境具有高度危險性，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明或未知的危險的致病因子。沒有預防治療措施。 一、二級實驗室不得從事高致病性病原微生物實驗活動

12、。三級、四級實驗室從事高致病性病原微生物實驗活動。 從事高致病性病原微生物相關實驗活動應當有名以上的工作人員共同進行。在同一個實驗室的同一個獨立安全區域內，只能同時從事一種高致病性病原微生物的相關實驗活動。應有健全安全保衛制度。 實驗室工作人員應掌握實驗室技術規范、操作規程、生物安全防護知識和實際操作技能。應有符合要求的防護用品，應建立健康檔案；進行預防接種。 實驗室應有科學、嚴格的管理制度，定期對實驗室設施設備、材料等進行檢查、維護和更新，應對廢水、廢氣以及其他廢物進行合理處置，防止環境污染。 生物安全三、實驗室感染的控制以及監督和法律責任 實驗室感染控制工作包括定期檢查實驗室的生物安全防護

13、、病原微生物菌（毒）種和樣本保存與使用、安全操作、實驗室排放的廢水和廢氣以及其他廢物處置等實施情況。 實驗室發生高致病性病原微生物泄漏時，預防、控制措施包括：封閉被病原微生物污染的實驗室或可能造成病原微生物擴散的場所；開展流行病學調查；對病人進行隔離治療，對相關人員進行醫學檢查；對密切接觸者進行醫學觀察；進行現場消毒；對染疫或者疑似染疫的動物采取隔離、撲殺等措施。 監督的主要內容是監督病原微生物實驗室執行國家有關法律、行政法規、國家標準和要求的記錄、檔案及報告的情況。 法律責任的核心是承擔造成傳染病傳播、流行或者其他嚴重后果的法律責任。思考題 消毒、滅菌、防腐、無菌（操作）的概念 濕熱滅菌有哪

14、些方法? 各有何用途? （溫度、時間、物品） 筒述紫外線殺菌的作用機制和注意事項1.新生兒預防淋球菌所致膿漏眼的消毒劑是A2%4%龍膽紫B0.1%高錳酸鉀C2%紅汞D1%硝酸銀E2%碘伏2.消毒是指 A.殺死病原微生物的方法 B.殺死物體上所有微生物的方法 C.物體中無活菌存在 D.抑制微生物生長繁殖的方法 E.防止表面細菌生長繁殖的方法3.殺死芽胞最常用的有效方法是 A.煮沸5min B.紫外線照射 C.高壓蒸氣滅菌 D.干烤滅菌 E.巴氏消毒4.關于高壓蒸汽滅菌法，不正確的描述是A.滅菌效果最可靠B.適用于耐高溫和耐濕物品的滅菌C.可殺滅包括細菌芽孢在內的所有微生物D.通常滅菌壓力為2.05kg/cm2E.通常滅菌溫度為121.35.在103.4kPa(1.05kg/cm2)蒸氣壓力下，滅菌的標準時間通常是A.15分鐘 B.610分鐘C.1114分鐘D.1520分鐘E.2125分鐘6.紫外線可以殺滅細菌主要是 A.破壞細胞壁 B.干擾蛋白質合成 C.損傷細胞膜 D.干擾DNA的轉錄與復制 E.破壞細菌酶系統7.酒精消毒最適宜的濃度 A.20 B