1、第5章實驗動物的選擇和動物實驗的準備第一節 醫學動物實驗課題設計 的基本原則第二節 生物醫學研究的基本途徑第三節 實驗動物的選擇原則第四節 選擇實驗動物應注意的問題第五節 動物實驗準備與描述第六節 影響動物實驗效果的 動物實驗技術環節因素主要內容第一節醫學動物實驗課題設計的基本原則 一、醫學科學研究設計的基本原則二、醫學科研工作基本程序三、醫學科研中對實驗動物和動物實驗的 有關要求 一、醫學科學研究設計的基本原則 1需要性原則 選擇在醫療衛生保健事業中有重大意義或迫切需要解決的關鍵問題。 2目的性原則 選題必須目的明確，應目標集中，不含糊，不籠統。 3創新性原則 選擇前人沒有解決或沒有完全解決

2、的問題，善于捕捉有價值的線索，勇于探索、深化； 4先進性原則 創新性與先進性是密切相關的，創新往往指科學而言，而先進多對技術而言。 5科學性原則 選題必須有依據，要符合客觀規律，科研設計必須科學，符合邏輯性(手段、方法、實驗)。6可行性原則 要求科研設計方案和技術路線科學可行外，還必須具備一定的條件，如：人員、儀器、動物、試劑等。 7效能性原則 研究中所消耗的人力、物力、財力同預期成果的科學意義、水平、社會和經濟效益等綜合衡量。 上述設計原則可歸納為： 創新性和先進性； 科學性和重復性； 有用性和可控性； 經濟性易行性。二、醫學科研工作基本程序 醫學科學研究就方法來說是提出假說，驗證假說的過程

3、，其工作程序是緊緊圍繞這條主線進行的。 1提出假說、確定題目，是戰略性決定： （1）初始意念或提出問題(Original idea or problem)； (2)文獻檢閱,調查訪問(Critical review of literatures)；（3）假說形成，提出設想(Formulation of hypothesis)；（4）陳述問題，開題討論(Statement of the problem)2安排實驗，驗證假說，是戰術組織。 (1)實驗設計(Experimental design)； (2)實驗觀察(Experimental investigation) (3)數據資料積累(Accu

4、mulation of raw data)。3總結工作，完成論文，是拿出戰果。 （1） 數據資料處理(Treatment Of raw data)； （2）統計分析(Statistic analysis)； (3) 提出結論(Conclusions)。 醫學科研工作基本程序及相互關系見下圖 初始意念，提出問題文獻查閱，調查訪問假說形成，提出設想陳述問題，開題討論確定研究題目實驗設計實驗觀察整理實驗結論分析實驗得出結論專業設計統計學設計5預實驗正式實驗6調整實驗設計7 數據資料積累重復8數據處理9統計分析10寫出論文三、醫學科研中對實驗動物和動物實驗的有關要求 醫學科研中應用的實驗動物應當具備下

5、列完整的資料品種、品系及亞系的確切名稱；遺傳背景或其來源；微生物檢測狀況；合格證書；飼育單位負責人簽名。 應用實驗動物應當根據不同的實驗目的，選用相應的合格實驗動物。應用不合格實驗動物，實驗結果是不被承認的。 撰寫醫學論文時有關實驗動物和動物實驗方面的描述，規范與否在一定程度上影響論文的質量。所描述的主要內容應包括種系、名稱、背景資料、規格，甚至飼養條件和某些處理方式（如麻醉劑的種類、劑量與方法，給藥途徑與方法，動物的處死方法等）。實驗動物品系或品種描述要準確，避免使用通俗稱謂。如Wistar大鼠、SD大鼠不能俗稱為大白鼠，昆明種小鼠不能俗稱小白鼠。背景資料中應包括動物來源、遺傳學分類及微生物

6、檢查合格證號和飼養環境合格證號。醫學論文中有關實驗動物描述的要求第二節 生物醫學研究的基本途徑臨床研究實驗室研究一、臨床研究 研究的對象是病人，目的是研究疾病的發生和發展過程，提高診斷水平，改進治療方法。 特點它是前瞻性研究，即必須直接跟蹤。單純回顧性病例分析并不是臨床試驗，因為它沒有從一開始就直接觀察。同樣，臨床流行病學調查中的病例對照研究不是臨床試驗，因為它也是回顧性研究。在臨床試驗中必須有一種或多種處理。作為處理因素的可以是預防或治療某種疾病的方法、設備或制度等。臨床試驗必須有對照組，使處理的效應可與之對比。在臨床試驗中，可用接受安慰劑或不接受任何處理者作為對照，也可接受當時認為是標準的

7、治療者作為對照。臨床實驗是以人為對象，因此必須考慮對象的安全及某些倫理問題。二、實驗室研究 研究的對象是實驗動物和微生物及試管試驗，這些都離不開實驗動物。與臨床試驗相比，動物實驗具有以下獨特的特點和優點：可以更嚴格地控制實驗條件可以縮短研究周期可以最大限度地獲取反映實驗效果的樣本和資料可以進行藥物的長期療效和遠期效應的觀察可以進行臨床上難以做到或完成的實驗 1、臨床研究和實驗室研究的不同點研究對象不同：臨床研究對象是病人，實驗室研究的對象是動物和細菌等；實驗對象的健康情況不同：臨床：不健康；實驗室：健康并可排除各種病因的作用(可選用無細菌動物、純系動物等)，動物可用一種病因作用而發生某一疾病；

8、實驗的具體要求(年齡、性別、體重)不同：動物可達到要求而臨床研究則不能達到(動物的遺傳性質、特異性可以選擇)；實驗條件的選擇不同：實驗室的溫度、光線、飲食、活動范周等可以嚴格控制；而臨床病人很難達到；關于藥物遠期效應：動物可以不考慮，而病人則不行；藥物的長期效果觀察：動物可以長期進行，而病人則較難進行。 三、臨床研究和實驗室研究比較2、動物實驗的優點 在人體不便進行的研究可在動物身上進行：如增加痛苦或疾病；在平時見不到的疾病可在動物身上復制出來：如急性放射病及燒傷和凍傷等；可以根據需要觀察疾病全過程：可細致的觀察疾病是怎樣發生、發展，最后怎樣結局的；實驗室條件可以嚴密控制并且可以進行嚴密對照；

9、動物實驗符合多快好省，可以大大縮短研究周期：很多在自然條件下潛伏期或病程長的疾病(如腫瘤、肺心病等)可以用動物復制成與人類各種相似的疾病模型。 動物實驗也有一些缺點，如動物機體結構和代謝特點和人有較大差異，所以動物實驗的結果不能完全照搬照抄用于人；有些因素在動物身上不易觀察如頭痛及其它精神因素，這是由于動物沒有語言，不能表達主觀察覺；實驗動物往往是在麻醉情況下進行實驗和觀察的，與正常清醒情況下有一定區別，所以在動物實驗設計時必須選擇與人相似的實驗動物做實驗，實驗時注意麻醉濃度適中和其他各種因素的控制，來克服上述動物實驗的缺點。 3、動物實驗的缺點第三節 實驗動物的選擇原則 不同的實驗有不同的目

10、的、要求，而各種動物又有各自的生物學特性和解剖生理特征，因而不能隨便選一種動物來進行某項實驗研究。事實上，每項科學實驗都有其最適合的實驗動物，如果選擇得當，則可節省人力、動物和時間，以最小的代價最大限度地獲得可靠的實驗結果。否則，不僅會造成不必要的浪費，而且會影響實驗結果的判斷。因此，掌握正確的實驗動物選擇方法非常重要。一、相似性原則 二、差異性原則三、易化性原則四、相容或相匹配原則五、可獲性(或易獲得性)原則六、重復性和均一性原則實驗動物的選擇原則一、相似性原則結構、功能及代謝的相似性 醫學領域內研究的根本目的是解決人類疾病的預防和治療，因此應選擇那些結構、功能、代謝和人類相似的動物進行實驗

11、。一般來說，實驗動物進化層次愈高，其功能、結構愈復雜，反應也愈接近人類。猴、猩猩、狒狒、長臂猿等靈長類動物是最類似人的實驗動物。它們是研究人類脊髓灰質炎、腦炎、痢疾、肝炎、麻疹等傳染病的理想動物，也是放射醫學、牙科學、生理學、免疫學、營養學的良好動物模型。獼猴生殖生理和人非常相似，是人類生殖課題研究的首選動物。 近年來發現的一種小型靈長類動物，體重僅20250g的樹鼩，在新陳代謝方面比起嚙齒動物與人類更相似，在乙型肝炎、睡眠生理、皰疹病毒等研究中有重要用途。年齡的近似性 選擇實驗動物時必須了解有關動物的壽命并安排與人的某年齡時期相對應的動物進行實驗研究。犬與人的年齡對應動物種類最長壽命平均壽命

12、 猩猩3720狒狒2415猴3010犬2010貓3012家兔158豚鼠75大鼠53小鼠32豬2716山羊189田鼠32犬齡（年）人 齡（年）犬 齡（年）人齡（年）1159522241056328116043412645361368640147274415768481680群體分布的相似性 以群體為對象的研究課題，要選擇群體基因型、表型分布與人相似的實驗動物。如藥物安全性評價、藥物篩選時，應考慮人類與實驗動物群體在代謝類型上的差異。通常以封閉群模擬自然群體基因型動物作為實驗研究對象。生態或健康狀況的近似性 在人的生命過程研究中，尋找與人類生態情況相似的替代模型非常重要。在實驗動物的遺傳背景、營養

13、及環境背景標準化后，其生態和健康狀況對實驗的影響就顯得至關重要。現有的GF（無菌動物）、SPF、CL（清潔動物）和CV（普通動物）及動物分別代表著不同的微生態模式，具有不同的特點，適用于不同的研究。在選擇時應結合課題目的、研究方法、實施條件及經費等作綜合考慮，然后做出正確選擇。疾病特點的相似性 許多自發或誘發性疾病模型能局部或全部的反映出與人類相似的疾病過程及臨床表現。可根據研究目的，選擇合適的疾病動物模型進行實驗研究。操作實感的相似性 為臨床操作打基礎的動物實驗，應選用與臨床操作較接近的動物。如模擬人類心臟移植，練習手術操作的動物實驗，可選擇豬器官作實驗材料，因為豬的心臟形態和大小與人很接近

14、；練習胃腸吻合術、脾切除術等可用犬作實驗材料。 二、差異性原則（盡量選用不同種系存在的某些特殊反應或對刺激敏感的動物） 各種實驗動物在基因型、組織型、代謝型、易感性等特點上的差別也是實驗可比性內容。當研究過程中要求以這種差異為指標或特殊條件時，選用不同種系實驗動物的某些特殊反應，更適合于不同研究目的的需求。 如：家兔頸部的交感神經、迷走神經、減壓神經是分別存在、獨立行走的，而人、豬、犬、貓等減壓神經并不單獨行走，如果要觀察減壓神經對心臟的作用，選擇家兔更合適；家兔的胸腔結構與其他動物不同，很適合做開胸和心臟實驗。大鼠垂體-腎上腺系統發達，應激反應靈敏，適于作應激反應和垂體、腎上腺等內分泌實驗；

15、豚鼠易于致敏，適于作過敏性試驗；研究物質的致癌作用，常選用大、小鼠；研究毒物對皮膚局部作用選用豚鼠和兔；復制動脈粥樣硬化常用兔、雞、鴿；燒傷、燙傷研究中最好選用小型豬。 三、易化性原則（盡量選用結構簡單又能反映研究指標的動物） 在動物實驗過程中，進化程度高、結構功能復雜的實驗動物，有時會給實驗條件控制和實驗結果分析帶來難以預料的困難。有鑒于此，在確保研究目標的前提下，可選擇結構、功能較簡單實驗動物。如選擇兩棲類進行神經反射弧試驗。利用果蠅壽命短(12d)，染色體數目少（2n=8）等特點，成功地進行遺傳學研究，并確定了染色體的連鎖互換定律。而同樣方法若以靈長目動物作為實驗材料，其難度可想而知。

16、四、相容或相匹配原則 在設計動物實驗時，所選用的動物質量等級要與實驗設計、實驗條件、實驗者的技術、方法及試劑性能等相匹配。避免應用高精儀器、先進的技術方法、高純度的試劑與低質量、非標準化、反應性能低的動物相匹配，或利用低性能的測試手段、非標準化的實驗設施與高質量、高反應性能的動物相匹配。如果將經過微生物控制的SPF動物或無菌動物購回后，飼養在普通環境中進行實驗，無疑也是對實驗動物資源的一種浪費。 五、可獲性(或易獲得性)原則 許多嚙齒類實驗動物，因其繁殖周期短，具有多胎性、飼養繁殖容易、遺傳和微生物控制反變等特點，在生物醫學實驗中應用廣泛。如實驗大鼠、小鼠是在生物醫學領域用量最多，用途最廣的實

17、驗動物。而靈長類大型實驗動物，雖然在許多方面有著不可替代的優越性，但由于繁殖周期長，繁殖率低，飼養管理困難，價格昂貴等因素而影響了其易獲性，能得到普及使用。 在不影響實驗質量的前提下，選用最易獲得、最經濟、最易飼養的動物是實驗研究時必須堅持的原則。 六、重復性和均一性原則 重復性和均一性是實驗結果可靠、穩定的重要保證。若實驗結果不能再現或不穩定，則不能被公認。生物醫學實驗應選用標準化實驗動物，只有選用標準化的實驗動物，才能排除因遺傳上的不均質引起的個體反應差異，排除動物所攜帶微生物、寄生蟲和潛在疾病對實驗結果的影響，獲得可靠的實驗結果，并便于在國際上與同類研究進行比較和交流。在標準化實驗動物中

18、，近交系Fl代動物、突變系動物均有很好的遺傳均質性，個體差異小，而SPF動物則是排除了一切疾病影響的健康動物。醫學科學研究中應杜絕使用隨意交配而來的雜種動物和未經任何微生物控制的非標準動物。第四節選擇實驗動物應注意的問題選擇實驗動物應注意的問題*年齡與體重*性別*生理及功能狀態*健康狀態*品系與等級 一、年齡與體重 年齡是一個重要的生物量，實驗動物的機體反應性隨年齡而有明顯變化。幼年動物往往較成年動物敏感。不同年齡尤其是年齡差距較大的動物，對藥物的毒性反應亦有差異。 大多數實驗都選擇成年實驗動物。因為幼年動物敏感性高，其實驗結果常與成年動物不一致。而老年動物，則因代謝功能降低，反應不靈敏，如非

19、特殊需要亦不宜選用。因此，急性毒性實驗規定小鼠體重在1822g，但有例外，如慢性實驗或長期毒性試驗，由于實驗周期長，大多選擇幼年和體重較小的實驗動物，研究性激素對機體影響的實驗，一定要用幼年或新生的動物。而老年醫學研究，則多選用老年實驗動物。對應人60年的老年小鼠約為1.3年，老年大鼠為1.7年 （文獻記載文獻中記載老年小鼠月齡為1224月；老年大鼠為1524月。） 同一實驗中，動物體重應盡可能一致，若相差懸殊，則易增加動物反應的個體差異，影響實驗結果的準確性。 二、性別 實驗動物對藥物的毒性反應有性別差異，并主要表現在成年動物。一般而言，雌性動物對藥物的敏感性高于雄性，但隨著受試物不同而異。

20、如雌性小鼠對四氧嘧啶、葉酸和新胂凡納明等藥物的敏感性高于雄性小鼠，但雄性小鼠對乙醇、氨基比林、氯仿、麥角固醇和煙堿等藥物的敏感性則明顯高于雌性小鼠。麥角新堿在56周齡雄性大鼠可見鎮痛效果，但在雌性大鼠則不出現鎮痛作用。 一般認為，動物對激素的依存性，是其藥物毒性反應性別差異的主要原因。研究發現小鼠對氨基比林、氯仿，大鼠對巴比妥類、野百合堿、印防己毒素和海蔥，犬對地高辛等的毒性反應的性別差異，都與性激素有關。 在醫學科學研究中，通常選擇實驗動物應雌雄各半。若發現有明顯的性別差異時，則應分別測定不同性別實驗動物的LD50值。 三、生理及功能狀態 實驗動物在處于特殊的生理狀態如懷孕、哺乳時，其體重及

21、某些生理生化指指標將有所不同。如在妊娠期間，許多酶的活性降低，肝微粒體單胺氧化酶對某些外來物的代謝作用亦堿弱。此時，它們對外界環境因素作用的反應亦與非懷孕、非哺乳的實驗動物有著較大差異。因此一般實驗研究不宜采用懷孕、哺乳的實驗動物。但為了某種特定的實驗目的。如為了闡明藥物對妊娠及產前胎兒的影響時，就必須選用妊娠和哺乳期的實驗動物（大、小鼠是最適合用的實驗動物）。 動物所處的功能狀態不同，也常影響對藥物的反應。動物在體溫升高時對解熱藥較敏感，體溫不高時對解熱藥就不敏感；血壓高時對降壓藥較敏感，血壓低時對降壓藥就不敏感。四、健康狀態 動物健康狀況對實驗結果正確與否有直接的影響。患病動物對藥物的耐受

22、性較健康動物小，而患病動物容易在實驗過程中中毒死亡。患病或營養不良的家兔不易復制出動脈粥樣硬化模型。犬食量不足，體重下降1020后，麻醉時間顯著延長，甚至因饑餓、創傷等原因導致休克。為確保實驗動物健康，要做好實驗前的動物健康檢查工作。 健康檢查有如下主要項目：眼睛：瞳孔是否清晰，眼睛有無分泌物，眼瞼有無發炎。耳：耳道是否有分泌物溢出；耳殼里有無膿瘡、血痂。鼻：有無噴嚏以及漿性粘膜分泌物流出。皮膚：有無創傷，膿瘍、疥癬、濕疹。頭部：姿勢是否端正(若有歪斜，常證明有內耳疾患)。胃腸道：有無嘔吐、腹瀉、便秘、肛門口被毛是否潔凈。神經系統：是否有震顫、不全性麻痹等。五、品系與等級 品系和等級能分別表示

23、實驗動物按遺傳學控制和微生物控制的標準化條件。 一般情況下，近交系動物的生物反應穩定性和實驗重復性都較封閉群好；F1代動物生命力強，帶有兩個親代品系的特性，雖然遺傳型是雜合的，但個體間的遺傳型和表型都是一致的，應用時能獲得正確的結論。封閉群動物和雜種動物在實驗的重現性上有較大的誤差。 有學者認為動物實驗中的差異，25因遺傳型的差異，75受環境影響。不同品系實驗動物遺傳上的差異，造成其形態與功能的特性，并導致對刺激的不同反應。 等級是指實驗動物的微生物標準化程度。各級動物具有不同特點，分別適用于不同的研究目的。 急性實驗在確信無礙時，可選用微生物級別較低但無疾病的動物；而慢性實驗應選用等級較高動

24、物。移植、接種等實驗的供體和受體應選用級別高、無感染動物。 項目無菌動物SPF動物普通動物傳染病無無有或可能有寄生蟲無無有或可能有實驗結果明確明確有疑問應用動物數少量少量多或大量統計價值很好可能好不準確長期實驗可能好可能好困難自然死亡率很低低高長期實驗存活率約100%約90%約40%實驗的準確設計可能可能不可能實驗結果的討論價值高中低無菌動物、SPF動物和普通動物優缺點比較第五節動物實驗準備與描述*動物實驗的準備與管理*動物的購入*動物實驗的描述家兔一、動物實驗的準備與管理 動物實驗準備應根據實驗目的、實驗規模（實驗動物數目）、動物實驗周期等來確定。應根據所計劃所用的動物等級選擇相應的標準動物

25、實驗室。飼養動物的器具、器材，應在動物購入前準備好，籠盒及蓋、飲水瓶在使用前應徹底清洗與消毒，并檢查是否完好、配套。還應準備好籠卡、記錄本、墊料、飼料、臺稱、溫度計、濕度計等必須物品。 實驗過程中應按設計要求和飼養操作規程進行飼養管理，定時定量加水加料，定期更換籠盒與墊料，每籠盒動物飼養數適當，墊料、飲水、飼料、籠具、實驗儀器等按要求消毒滅菌，并控制好室內環境條件。動物飼養應有專人負責，并做好詳細記錄。自然死亡或實驗處死的動物尸體，妥善處理。 二、動物的購入 在做好動物實驗的各項準備工作之后，按照所確定的實驗動物數量，從具有相應質量合格證的實驗動物供應單位訂購所需要的實驗動物。購入時，應向供應

26、單位及時索要動物的遺傳背景、微生物背景、質量合格證、動物年齡、體重、健康營養狀況等資料。 動物運輸容器應根據動物等級來選擇。普通動物可用飼養籠運輸，而清潔級以上動物常用帶有過濾介質的瓦楞紙箱裝運，無菌動物則用特制的金屬罐運輸。 購入動物后，不能直接進入動物實驗室，必須先在檢疫區驗收和檢疫。有條件時應進行病原學檢查。檢查驗收時將雌雄動物分開，并分籠在隔離區飼養一段時間，以便動物得以恢復體能并適應新的環境。 動物分組前，應對動物稱重。稱重應在給食前。每次稱重應固定在同一時間。三、動物實驗的描述動物實驗研究報告或論文中關于實驗動物和動物實驗的描述主要有以下內容：實驗動物種名 論文題目應標明實驗動物種

27、名，如大鼠正常心電圖100例分析、家兔細菌性角膜炎動物模型的建立。文中第一次出現實驗動物種名時還應用括號注明其拉丁文學名，并用斜體排印。實驗動物的品種（系） 用不同的實驗動物品種（系）做實驗，由于不同動物其生物學特性不同，會出現不同的實驗結果。因此在論文中應正確而詳細的注明使用實驗動物品種（系）名稱。關于品種（系）的詳細名稱可向動物供應單位咨詢。實驗動物的來源、遺傳背景、微生物背景 所使用的實驗動物來源于何地，是近交系還是封閉群或是雜交F1動物，是近交系第幾代等應在論文中注明，如因其他原因購于市場，也應注明“市售”或購于何地。實驗動物的微生物等級，最近檢測結果也應在論文中注明。實驗動物和動物實

28、驗設施合格證 論文中應將供應單位提供的相應實驗動物及動物實驗設施合格證的名稱、編號、頒發單位在論文中描寫清楚。實驗動物體重、性別、年齡。實驗室環境 溫度、濕度、照明度、季節等描寫清楚。動物飼養方式 如動物飼養密度、籠具規格、飼料及墊料種類、飼料和飲水投喂、消毒等情況。 處理因素的施加方式 如經口灌胃、腹腔注射，手術過程，技術線路等.其他需要說明的問題 如麻醉劑與麻醉方法，取材方法，材料固定液，動物處死方法等。 總之，動物實驗的描述應全面、詳細、準確、簡練。對實驗動物和動物實驗描述清楚的研究論文，不僅可避免學術交流中爭論，而且可提高論文質量，對于從事系列研究和高、精、尖的研究尤為重要。 第六節

29、影響動物實驗效果 的動物實驗技術環節因素*動物的選擇 *實驗季節*晝夜過程 *麻醉深度*手術技巧 *實驗藥物*對照問題一、動物的選擇 選擇好適合研究需要的實驗動物是獲得正確實驗結果和實驗成功的重要環節。應按照不同實驗的要求選擇合適的動物。如做腫瘤的研究工作，就必須了解哪種動物是高癌種，哪種是低癌種，各種動物自發性腫瘤的發生率是多少。如A系、C3H系、AKR系、津白等小鼠是高癌品系小鼠，C3HHe系經產雌鼠有80100的自發性乳腺癌。AKR系89月齡小鼠有8090自發性白血病。 C57BL系、津白等小鼠是低癌品系小鼠。不同動物對同一因素的反應往往相似的，但也常常會遇到動物出現特殊反應的情況。如5

30、歲以上的雌犬常有自發性乳腺腫瘤，如果給犬雌激素，就更容易誘發乳腺腫瘤。雌激素還容易引起犬發生貧血，這在其它實驗動物是很少見的。 二、實驗季節 生物體的許多功能隨著季節產生規律性的變動。目前已有大量資料表明，動物對化學物作用的反應也受到季節的影響。例如在春、夏、秋、冬分別給10只大鼠注入一定量的巴比妥納，發現入睡時間以春季最短，秋季最長，而睡眠時間則相反。大鼠對巴比妥納反應的季節變化季節入睡時間（min）睡眠時間（min）季節入睡時間（min）睡眠時間（min）春56.111.047034.0夏93.511.324214.3秋120.019.019018.7冬66.58.2 36033.0 不同

31、季節，動物的機體反應性有一定改變。如不同季節對輻射效應有影響。家兔的放射敏感性在春夏兩季升高，秋冬兩季降低。在犬的實驗中，在春、夏兩季照射后的死亡率比秋、冬為高。小鼠的放射敏感性，在冬季和初夏顯著升高，而初秋和夏季則降低。大鼠的放射敏感性則沒有明顯的季節性波動。因此，這種季節的波動在進行跨季度的慢性實驗時是必須注意的。 三、晝夜過程 動物對照射的敏感性在晝夜間也有不同的變化，這種變化見于不同性別、種系和年齡的小鼠和大鼠。白天放射敏感性降低(死亡較少，體重下降較少，肝臟損傷較輕)，夜間升高。同時，在小鼠和大鼠實驗除了夜間(2l24點)的高峰外，還發現白天(小鼠912點，大鼠15點)損傷加重情下午

32、和后半夜放射敏感性最低。大鼠與小鼠不同，其放射敏感性雖有晝夜間的明顯動，但不很劇烈。經實驗證明實驗動物的體溫、血糖、基礎代謝率、內分泌激素的分泌均發生晝夜節律性變化。因此，這類實驗的察必須設有相應的對照，并注意實驗中某種處理的時間順序對結果的影響。為了得到可比性的實驗結果，所有實驗組動物應在同一時間內進行照射或其它實驗處理。四、麻醉深度 動物實驗中往往需要將動物麻醉后才行各種手術和實驗。要求麻醉深度要適度，而且在整個實驗過程中要保持始終恒定。不同的麻醉劑有不同的藥理作用和副作用，應根據實驗要求與動物種類而加以選擇，使用合適，麻醉深度的控制是順利完成實驗獲得正確實驗結果的保證。如果麻醉過深，動物處于深度抑制，甚至瀕死狀態，動物各種正常反應受到抑制，那是不能做出可靠的實驗結果的。麻醉過淺，在動物身上進行手術或實驗，將會引起強烈的疼痛刺激，使動物全身，特別是呼吸、循環功能發生改變，消化功能也會發生改變，如疼痛刺激會反射性的長時間中止胰腺的分泌。所以麻醉深度必須合適。由此也不難理解在整個實驗中保持麻醉深度的始終一致是如何必要了。因為麻醉深度的變動，會使實驗結果產生前后不一致的變化，給實驗結果帶來了難以分析的誤差。 五、手術技巧 動物實驗