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1、一、遺傳蛋白質(zhì)是由 20 種氨基酸組成的,而 DNA 只是由 A,T,C 和 G 四種核苷酸的,1.但核苷酸殘基序列決定了氨基酸的順序,這是一種的關(guān)系。后來(lái)實(shí)驗(yàn)證明遺傳是 mRNA 上 3 個(gè)連續(xù)的核苷酸殘基的,所以稱(chēng)為三聯(lián)體。共有64 個(gè)子。遺傳子是按照 5-3方向書(shū)寫(xiě)。(子的具體情況可以查閱書(shū)本)證明三聯(lián)體的三個(gè)著名實(shí)驗(yàn)的示意圖2.M. Nirenberg 的試驗(yàn)(一)i.Nirenberg 將poly(Phe)。的多核苷酸 poly(U)加入到無(wú)細(xì)胞翻譯體系中,結(jié)果得到多核苷酸磷酸化酶:這個(gè)酶可以不使用模板、無(wú)引物的情況下(RNA)nNDP (RNA)n1Pi多核苷酸無(wú)細(xì)胞翻譯體系:將大

2、腸桿菌溫和破碎,離心去除細(xì)胞壁和細(xì)胞膜,得到含有DNA、mRNA、核糖體、酶和其它蛋白M. Nirenberg 的試驗(yàn)(二)所必需的成分,然后降解掉 DNA。ii.首先一個(gè)已知序列的核苷酸三聚體,然后與大腸桿菌核糖體和氨酰 tRNA一起溫育。由此確定與已知核苷酸三聚體結(jié)合的 tRNA 上連接的是那一種氨基酸。該實(shí)驗(yàn)對(duì)于幾種Khorana 的試驗(yàn)編碼同一個(gè)氨基酸提供了直接的、最好的證據(jù)iii.化學(xué)譯,具有特定重復(fù)序列的多核苷酸,在體行蛋白質(zhì)。若從 A 翻出多聚 Ile,AUC 編碼 Ile;若從 U 翻譯,則出多聚 Ser,UCA 編碼 Ser;若從C 翻譯,則子的特點(diǎn)大多數(shù)氨基酸都存在幾個(gè)出多

3、聚 His,CAU 編碼 His。3.子(所以遺傳具有簡(jiǎn)并性,同一個(gè)氨基酸的i.不同應(yīng));一個(gè)子稱(chēng)為同義子。的簡(jiǎn)并性可以減少堿基突變?cè)斐傻挠泻πУ念^兩個(gè)核苷酸殘基足可以確定一個(gè)給定的氨基酸(這個(gè)可以解釋為ii.什么 3位的核苷酸殘基突變,仍導(dǎo)致同一個(gè)氨基酸殘基整合到蛋白質(zhì)中);具有類(lèi)似序列的往往指定化學(xué)性質(zhì)類(lèi)似的氨基酸;iii.iv.64 個(gè)子中 61 個(gè)子編碼氨基酸,余下的 3 個(gè)子(UAA,UGA,和UAG)為終止子。終止子一般不能被任何 tRNA 分子識(shí)別,但能被特殊的蛋白質(zhì)識(shí)別(因子 RF-1,RF-2,RF-3),引起新的肽鏈從翻譯機(jī)器上脫落。蛋氨酸子 AUG子,在有些也常常充當(dāng)?shù)鞍?/p>

4、質(zhì)的起始子,所以常稱(chēng) AUG 為起始子。情況下,GUG 也充當(dāng)起始讀碼4.遺傳一般不。如果按不讀碼,在沒(méi)有給定讀碼框時(shí),可以有三種讀碼方式。在少數(shù)大腸桿菌噬菌體的RNA tRNA(一) tRNA 的三維結(jié)構(gòu)組中,子有。二、tRNA 的二級(jí)結(jié)構(gòu)為三葉草形,三級(jí)結(jié)構(gòu)為倒 L 形。tRNA 分子的 5端和 3端附近的堿基配對(duì)形成 tRNA 分子的一個(gè)臂氨基酸臂。一個(gè)成tRNA 分子的 3端的核苷酸序列總是 CCA(3),氨基酸連接在 tRNA 的核苷酸殘基 3端的核糖 2或 3處。5端的核苷酸都是磷酸化的,大多數(shù) tRNA分子 5端的核苷酸殘基為鳥(niǎo)苷酸殘基()。在氨基酸臂對(duì)面的單鏈環(huán)稱(chēng)為反子環(huán),該環(huán)

5、含有由三個(gè)核苷酸殘基組成的反密碼子,反臂。子與 mRNA 中的互補(bǔ)子結(jié)合。含有反子的臂稱(chēng)為反子含有胸腺嘧啶核苷酸(T)(在 RNA 中很少見(jiàn)到)、假尿嘧啶核苷酸()和胞嘧啶核苷酸(C)殘基的臂稱(chēng)之 TC 臂。含有二氫尿嘧啶核苷酸殘基的臂稱(chēng)為 D 臂,不同tRNA 的 D 臂也稍有不同。在反臂和 TC 臂之間,tRNA 分子中還含有另一個(gè)可變環(huán)(也稱(chēng)為額外環(huán)),可變環(huán)大約由 3 到 21 個(gè)核苷酸組成。tRNA 分子折疊成倒 L 型:氨基酸臂位于 L 型分子的一端,反的一端。大多數(shù)核苷酸都處于兩個(gè)成直角的、堆積的螺旋中。(二) “擺動(dòng)”假說(shuō)子環(huán)則處于相反反子和子之間的堿基配對(duì)并不嚴(yán)格遵守wats

6、on-crick 堿基配對(duì)原則。反密碼子的5位容許其他類(lèi)型的堿基配對(duì)。結(jié)合相同氨基酸的tRNA 分子稱(chēng)為同工tRNA。位于反子 5(擺動(dòng))位的核苷酸位于子 3位的核苷酸CGG、AUCrick 提出了“擺動(dòng)假說(shuō)”:1、一個(gè) mRNA 的前兩個(gè)堿基總是與 tRNA 的反子的相應(yīng)堿基形成嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)堿基對(duì),賦予子的專(zhuān)一性。2、反子的第一個(gè)堿基(按照 53方向閱讀)決定了 tRNA 識(shí)別子的數(shù)目。第一個(gè)堿基為 A 或 C 時(shí),該 tRNA 僅能識(shí)別一個(gè)子。當(dāng)?shù)谝粋€(gè)堿基為 U 或G 時(shí),可閱讀兩個(gè)子,當(dāng)?shù)谝粋€(gè)堿基為 I 時(shí),可識(shí)別三個(gè)子。3、當(dāng)一個(gè)氨基酸有幾個(gè)子時(shí),子的前兩個(gè)堿基不同就需要不同的 tRNA

7、。4、翻譯所有 61 個(gè)氨酰 tRNA 的子最少需要 32 個(gè) tRNA。三、首先氨基酸與 ATP 反應(yīng)被活化,生成氨酰-腺苷酸。氨酰-腺苷酸與tRNA 反應(yīng)生成氨酰-tRNA。氨基酸 tRNA ATP 氨酰-tRNAAMPPPi產(chǎn)物因?yàn)槊傅姆N類(lèi)而有所不同,當(dāng)在類(lèi)氨酰-tRNA酶的催化下生成的是 2-氨酰-tRNA,而在類(lèi)氨酰-tRNA核糖體酶的催化下生成的是 3-氨酰-tRNA。四、蛋白質(zhì)的是通過(guò)由核糖體和附屬的蛋白質(zhì)以及mRNA 和負(fù)載的tRNA 分子組成復(fù)合體完成的,常將該復(fù)合體稱(chēng)之翻譯復(fù)合體。核糖體是由一個(gè)大亞基和一個(gè)小亞基組成的。大腸桿菌中的小亞基是 30S 亞基;而大亞基是 50S

8、 亞基。在蛋白質(zhì)期間,兩個(gè)亞基結(jié)合形成一個(gè) 70S 核糖體。核糖體含有三個(gè)部位:A(aminoacyl:氨酰)位,P(peptidyl:肽酰)位 ,E(exit:退出)位肽鏈的起始(一) 翻譯起始位點(diǎn)五、起始起始子一般為 AUG,但是要區(qū)別起始和內(nèi)部蛋氨酸的子。子的選擇不僅取決于反子和子的相互作用,也取決于核糖體的小子的上游有一個(gè)富含嘌呤堿基的亞基與 mRNA 模板的相互作用。在 mRNA 中IU、C、AGU、CAU區(qū)域(SD 序列)可以與 16SrRNA 的 3末端的一個(gè)富含嘧啶片斷互補(bǔ),而 SD 序列只出現(xiàn)在子的上游,起始復(fù)合物就只能在起始子處組裝。(二) 起始 tRNA 分子蛋氨酰-tR

9、NA酶催化 tRNAfMet 結(jié)合蛋氨酸,生成 Met tRNAfMet ,然后經(jīng)甲酰轉(zhuǎn)移酶(N10甲酰四氫葉酸作為甲酰供體) 催化甲酰化,生成 fMet tRNAfMet 。( 但是這種甲酰轉(zhuǎn)移酶不識(shí)別游離的蛋氨酸和蛋氨酰-tRNA 。 fMet-tRNAfMet 是唯一一個(gè)結(jié)合在P 位的氨酰-tRNA,在接下來(lái)的肽鏈延長(zhǎng)階段,其它所有進(jìn)來(lái)的氨酰-tRNA 都是先與 A 位結(jié)合,然后再到 P 位和E 位。(三) 起始復(fù)合物的組裝翻譯起始復(fù)合物的形成涉及三個(gè)步驟:IF-1(起始因子-1)結(jié)合在 30S 亞基 A 位上,tRNA 結(jié)合在 A 位。IF-2-GTP 與 fMet-tRNAfMet

10、結(jié)合, fMet-tRNAfMet 與子配對(duì)50S 亞基與 30S 亞基結(jié)合,形成由 30S 與 50S 組成的起始復(fù)合物,起始因子離開(kāi)核糖體。肽鏈的延伸六、正確的氨酰-tRNA 定位在 A 位。核糖體移位。使得二肽酰-tRNA 完全處于P 位。無(wú)負(fù)載 tRNA 從E 位。七、肽鏈的終止因子 RF1 或 RF2 識(shí)別終止并結(jié)合, RF1 或 RF2 與 RF3 聯(lián)合作用,改變了肽酰轉(zhuǎn)移酶的活性,水解肽酰-tRNA 酯,多肽產(chǎn)物從核糖體出來(lái)。mRNA、脫酰基 tRNA 和因子離開(kāi)核糖體,核糖體分解為 30S 和 50S 亞基。八、蛋白質(zhì)修飾和定位所有多肽的都開(kāi)始于一個(gè) N-甲酰蛋氨酸(細(xì)菌)或一個(gè)蛋氨酸(真核生物),結(jié)束后都會(huì)經(jīng)酶催化除去,不出現(xiàn)在最終功能蛋白質(zhì)中。切除信號(hào)肽,在一些蛋白質(zhì)氨基端都帶有確定其最終位置的信號(hào)序列。在引導(dǎo)蛋白質(zhì)到達(dá)最終目的地后被專(zhuān)一肽酶切除。二硫鍵形成,糖蛋白的糖基化,個(gè)別氨基酸的修飾,如氨基酸的磷酸化等。九、蛋白質(zhì)的抑制劑抗生素和毒素嘌呤霉素:由鏈霉菌產(chǎn)生,其結(jié)構(gòu)非常類(lèi)似于氨酰

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