1、體外診斷試劑注冊檢測中的溯源性要求 溯源的意義1溯源的定義 溯源的要求3目錄23溯源意 義溯源是IVD最基本的要求沒有溯源的IVD測量系統會存在哪些問題?1.量值準確度無法表達（不確定度）2.測量結果之間不具有可比性3.導致錯誤的診斷和治療4.產品質量控制的缺乏溯源的意義測量結果的溯源性可靠性結果可比量值傳遞準確度有效性空間時間輔助診斷TG項目舉例：以各自校準物校準后測量同一份正常血清為什么要溯源-舉例計量可比性檢驗醫學的目標臨床樣本測量結果具有溯源定 義術語和定義溯源性的說明1.參照對象；2.校準等級序列；3.時間順序（技術更新）；4.多輸入量情況；5.不能保證不發生錯誤；6.隱形校準情況；

2、7.規范表述：計量溯源性校準物質質量控制物質參考物質有證參考物質測量標準參照對象不確定度和互換性溯源相關術語質量控制物質校準物質有證參考物質H&SIQC&EQAH&SCAL參考物質CAL、ME測量標準C&UC&U參考物質測量標準參照對象關系溯源就是校準物x的量值通過校準向測量結果y傳遞的過程溯源就是使用同一源進行校準系統的測量結果，要在最大程度上保證所得到的測量結果之間具有可比性溯源通過校準將計量學高一級的物質/程序的真實度傳遞給下一級的物質/程序溯源基本要求 GB/T21415-2008溯源性1 YY/T 0638-2008溯源性-酶學2 CNAS-CL06:2014要求3 CNAS-GL1

3、8:2008實施指南4 GB/T 15000.3-2008統計原則5 GB/T 219192008參考實驗室6 GB/T 197022005參考測量程序7 GB/T 197032005參考物質8 JJF 1059.12012不確定度91.通過校準實現2.估計結果分散性計量學有效不確定度賦值測量結果的可靠程度溯源的總體要求溯源1.處于不同校準等級的校準物、正確度控制物質的量值溯源2.只要求到產品校準物等級（ISO17511：2003已經把樣本結果列入溯源鏈，樣本測量終端用戶實施，沒有明確提及溯源性）1.處于不同校準等級的校準物、正確度控制物質、樣本測量結果的溯源（修訂中）2.試劑“標準化”，試劑

4、與校準物的關系3.測量終端用戶進行，但測量結果的溯源主體是生產者2013年ILAC-P10：作為有效的計量溯源性證明的證書中應包含溯源性和測量不確定度信息 測量結果量值1.定量測量（Ratio&interval scales）2.定性測量（以定量結果為基礎）適用范圍首先通過文件規定的不間斷的校準鏈：各級校準文件定義測量結果與參照對象聯系起來的特性：量值的傳遞，從上到下在文件中要有量值，也就是賦值文件對于一個產品而言，性能驗證是建立在量值準確可靠（也就是具有溯源性）的前提下，當然，“具有溯源性”這詞包含的情況較多定義每一校準等級對不確定度的貢獻要考慮：不確定度的評定文件，每一校準等級又包括兩個方

5、面的來源（校準物質、校準過程）除了校準貢獻外，同時還應有校準物特性和方法特性方面的貢獻：主要有均勻性、穩定性。定義建立溯源性的過程就是賦值的全過程（各校準等級）測量：方法學考察統計處理：合理、有效的統計方法（賦值和性能評價中數據的取舍）不確定度評估：科學、有效、合理結果報告：表述正確、嚴謹技術方面計量溯源性的描述：簡潔而不簡單校準等級：各等級校準方案，應包括物質、方法、影響因素的研究、每個階段賦值不確定度的評估、所用統計技術的描述溯源、量值傳遞：參照-測量結果/賦值結果ISO 175111.當測量項目參照對象（測量標準）具有較高級別（非產品級）的計量學水平時（源頭表述）：試劑盒測量結果或校準物

6、賦值溯源至XXX國家參考物質（試劑盒標準化或校準物賦值時，使用XXX國家標準物質作為校準物，進行校準傳遞，保證測量結果或校準物賦值的溯源性）規范的表述2.當測量項目參照對象（單位定義、程序）具有較高級別的計量學水平時：試劑盒測量結果或校準物賦值溯源至SI單位或XXX參考測量程序（參考測量程序的有效性、地位）規范的表述3.1測量項目的參照對象（測量標準、程序）沒有明確的計量等級時：工作校準物賦值時使用純物質工作校準物賦值時使用血清使用替代物質（聲稱溯源至制造商的工作校準品）規范的表述3.2測量項目的參照對象（測量標準、程序）沒有明確的計量等級時：EIA、ID-MS等定值方法：不應聲稱溯源至EIA

7、、ID-MS等方法（聲稱溯源至制造商的工作校準品）規范的表述3.3測量項目的參照對象（測量標準、程序）沒有明確的計量等級時：比對方式：屬于內部程序（工作校準品）；如果沒有通過比對確定校準物量值和或不確定度，只是簡單的比對，原則上不屬于溯源。規范的表述校準（與量值直接關聯）舉例：量值傳遞應講究有效， 外推應合理（線性，外推可以，非線性，外推風險較大）什么是有效：IU/ML=NG/ML AFP在AFP 1st RP(IS) 104 IU，在溯源時應考慮其實際含量（純度、水分等）、分子量（預期用途、細胞培養和腫瘤來源的是否有區別）等 信息后可以進行這兩個單位的換算盡量縮短溯源中的校準等級溯源性保證產

8、品級（溯源鏈中最低級別）校準物的使用：1.不符合量值溯源要求，沒有任何機構賦予校準物該功能；2.使用者實驗室（制造商）無法進行質量控制；3.校準物說明書給出的只是標示值（同有證參考物質區分），產品級別的校準物不是測量標準（計量上更高級別）；4.在其說明書上明確了預期校準的系統（兩個方面的問題不清楚，系統由儀器和試劑組成，儀器是明確的，試劑信息在其說明書中并未明確。這其中存在兩種情況：1.XXX系統，指XXX儀器及其聲稱配套的試劑所賦的值；2. XXX儀器、校準物制造商自己的試劑，第二種情況比較常見溯源性保證產品級（溯源鏈中最低級別）校準物的使用：對于測量而言，儀器大部分只是提供測量信號輸出（相

9、對、比較），其量值傳遞的關鍵在于試劑本身, 加上產品校準物的量值亦真亦假，因此使用最低級別的校準物進行的量值傳遞無法保證量值可靠性；同時應考慮校準物的互換性（不同廠家試劑的反應性可能盡不相同）從量值溯源的角度看：如果試劑盒使用的是標準化的方法（參考方法），那么每個廠家的結果在線性范圍內是可比的。但事實上，每個廠家試劑成分、原料來源、穩定性、配制方法、以及樣本試劑體積比等方面各有差異，在同樣的線性范圍下、使用該校準物校準后測量結果之間還是否可比。溯源性保證溯源圖不確定度基質效應及互換性研究ML常設的測量程序賦 值ML選擇的測量程序溯源參照選擇對溯源的要求溯源實 施參考測量系統 標準化（參考系統）

10、參考測量方法一致化參考物質參考實驗室實現溯源的途徑ICP-MS、ID-MS、分光光度法酶學、血脂、代謝物和小分子、無機離子、血細胞參考物質參考測量實驗室參考測量程序我國參考測量體系的建立情況國際上的RMP國際上的CRM溯源鏈一級參考測量程序制造商選擇的測量程序一級參考物質二級參考物質二級參考測量程序工作校準物制造商常設的測量程序產品校準物樣本結果用戶的常規測量程序定義等級組成：基本與原版保持一致溯源圖：類別的重新劃分（JCTLM2008年會議）系統（校準物+試劑）：測量結果的溯源性溯源標準修訂進展情況一級參考測量程序一級參考物質一級/適用的RM&RMP：絕大多數情況下指純品定義一級參考測量程序

11、一級參考物質二級參考物質二級參考測量程序二級/較高級RM&RMP：考慮互換性，參考物質或血清盤定義一級參考測量程序一級參考物質二級參考物質二級參考測量程序RM：符合ISO 15194 RMP：符合ISO 15193定義一級參考測量程序定義用戶的常規測量程序一級參考物質二級參考物質二級參考測量程序有效的系統（校準物和試劑）一級參考測量程序制造商選擇的測量程序一級參考物質二級參考物質二級參考測量程序工作校準物制造商常設的測量程序產品校準物樣本結果用戶的常規測量程序1老版修訂SI制造商選擇的測量程序二級參考物質二級參考測量程序工作校準物制造商常設的測量程序產品校準物樣本結果用戶的常規測量程序2老版一

12、級參考物質一級參考測量程序非SI一級參考測量程序制造商選擇的測量程序一級參考物質二級參考物質二級參考測量程序工作校準物制造商常設的測量程序產品校準物樣本結果用戶的常規測量程序修訂2SI制造商選擇的測量程序二級參考測量程序工作校準物制造商常設的測量程序產品校準物樣本結果用戶的常規測量程序3老版一級參考物質一級參考測量程序二級參考物質非SI一級參考測量程序制造商選擇的測量程序一級參考物質二級參考物質CAL二級參考測量程序WHO工作校準物制造商常設的測量程序產品校準物樣本結果用戶的常規測量程序3非SI修訂制造商選擇的測量程序二級參考物質工作校準物制造商常設的測量程序產品校準物樣本結果用戶的常規測量程

13、序4老版一級參考物質二級參考測量程序一級參考測量程序非SI一級參考測量程序制造商選擇的測量程序一級參考物質二級參考物質二級參考測量程序（H）工作校準物制造商常設的測量程序產品校準物樣本結果用戶的常規測量程序修訂4非SI制造商選擇的測量程序工作校準物制造商常設的測量程序產品校準物樣本結果用戶的常規測量程序5老版非SI一級參考測量程序一級參考物質二級參考物質二級參考測量程序一級參考測量程序制造商選擇的測量程序一級參考物質二級參考物質（pools or panels）二級參考測量程序工作校準物制造商常設的測量程序產品校準物樣本結果用戶的常規測量程序非SI修訂5計量學溯源校準應具備以下條件：1.測量的

14、量2.程序結果之間的關系3.校準物互換性不滿足時，不能保證常規樣本結果向參考測量程序的溯源溯源校準確認計量學溯源校準確認：1.工作校準物的互換性評估2.產品校準品考慮互換性（實際樣本）3.斜率與截距4.產品校準品定值（使用人源樣本組）溯源校準確認建立溯源性時的考慮測量結果/賦值結果量值通過參照對象進行量值傳遞測量程序存在多個輸入量，每個輸入量均應分別溯源關鍵影響因素應進行相關驗證/確認法定計量范圍內的設備的計量，其他內部確認數據處理的科學性考慮校準物互換性科學合理評定不確定度報告的規范性總體考慮技術局限性（物質的量）分析物的異質性（亞型、衍生物）描述困難（酶、抗體、糖蛋白）特異性與選擇性不同（

15、膽紅素）分析物復雜性（總蛋白）樣本特殊處理（修飾）被測量定義的不足（血清、血漿、尿液）校準鏈例如，測量模型：對象：所有輸入量例如，試劑純度、稱量、溫度（測量、試劑、樣本）、pH、時間、波長對象：關鍵影響量互換性：考慮其互換性，不是必須具有互換性互換性與基質效應：數學關系一致性可修正(CRM)30年前，酶互換性與可互換物質互換性舉例-工作校準物互換性舉例-產品校準物賦值及不確定度賦值1.賦值方法的選擇2.統計技術的選擇（M&M）3.可接受標準的制定4.賦值方式的選擇校準值修正系統偏移2.評估關鍵因素：1/3、1/101.識別影響因素：可能影響結果的所有方面3.正確表達：末位對齊、有效位數、擴展因

16、子不確定度4.預期用途：確認不確定度是否滿足終端用戶要求總結通過減少校準次數來降低不確定度不確定度規定每個校準等級的目標不確定度正確理解、看待不確定度建立溯源性的基本要素建立溯源性的基本要素描述被測量質量、濃度、活性量的類/特性除分析物之外的組分該量的基質可測量特性樣本組分（按照預期用途選擇）分析物（單位）對于化學結構清楚：被測量明確(Glu、Crea)對于生物大分子：存在不同亞型，每個型別的測量在臨床應用上意義不大(HCG、HGB)，此時被測量代表一組分子（生理屬性），通常選用其片段嵌入方式(單抗、多抗)、分離(酶解)被測量對于被測量復雜/不穩定：(TP、TBIL)溯源首先要確定被測量該情況

17、下，盡管聲稱不同程序測量結果會有差異，但仍假設：測量部分代表整個分子被測量當被測量和測量的量不一致時，在說明書中一定要注明！例如，當被測量為代表時，應在說明書及溯源文件中明確其代表部分(CYK-19、CYFRA21-1)被測量選擇參照對象SI單位單位定義參考測量程序：JCTLM列表國家/行業標準發布其他測量程序CRMRM（CNAS：RMP）（非質量控制物質）純物質其它（主成分）測量標準SI單位國際計量委員會（CIPM）在1994年成立了物質的量咨詢委員會（CCQM），臨時確認以下測量原理可能會作為一級參考測量程序：同位素稀釋/質譜（ID/MS）、庫侖法、重量法、滴定法，用于重量摩爾滲透濃度測定

18、的冰點降低法等。測量程序選擇參考測量程序：“決定性方法”與一級參考測量程序測量程序CRMRM:RMP（ISO Guide 34 and/or ISO 15194）被測量特性值不確定度預期用途注意事項測量標準更替測量標準選擇舉例發布權威機構證書情況材料來源性狀和制備情況基質效應和互換性參考物質（標準物質）公認水平預期用途物質、分析物確認程序的考察、科學性、嚴謹性(沒有明確的溯源和不確定度，制造商負責證明符合預期用途)測量標準：工作校準品測量程序：內部程序溯源的最后一種情況：無更高級別測量標準和程序選擇參照對象回收/修正常規方法之間的比對，不屬于溯源范疇但建立溯源性后可以通過比對等方式進行確認(試

19、用)CRM&RM校正系數/關鍵點選擇校準方法：所校準方法的建立、確認和驗證（回收）PM（主成分/重組/片段）物質：校準物質的評價和相關聲明溯源性的建立舉例MP（選擇的）GBW&GBW(E)（基質）（生化）產品溯源性-建立GLU測量結果的溯源性工作校準物（基質）MP（常設的）RMP（終端的）產品校準物常規樣本的測量結果MP（選擇的）ERM AD-453（純物質）（生化）產品溯源性-建立LDH測量結果的溯源性RM（IFCC RMP）工作校準物（基質）MP（常設的）RMP（終端的）產品校準物常規樣本的測量結果GBW&GBW(E)(基質)MP（選擇的）ERM AD-455（純物質）（生化）產品溯源性-

20、建立CK-MB測量結果的溯源性工作校準物（基質）MP（常設的）RMP（終端的）產品校準物常規樣本的測量結果回收（修正）內部程序MP（選擇的）分光光度法（生化）產品溯源性-建立TBil測量結果的溯源性SRM 916工作校準物（基質）MP（常設的）RMP（終端的）產品校準物(替代物)常規樣本的測量結果GBW&GBW(E)(基質)MP（選擇的）內部程序（文獻）（生化）產品溯源性-建立IMA測量結果的溯源性工作校準物（基質）MP（常設的）RMP（終端的）產品校準物(替代物)常規樣本的測量結果方法定義的方法標準化內部程序MP（選擇的）純物質（生化）產品溯源性-建立CO2測量結果的溯源性工作校準物（基質）

21、MP（常設的）RMP（終端的）產品校準物(替代物)常規樣本的測量結果檢測原理內部程序MP（選擇的）提純的純物質工作校準物（基質）MP（常設的）RMP（終端的）產品校準物常規樣本的測量結果回收（修正）（體液）產品溯源性-建立RBP（尿液）測量結果的溯源性內部程序純物質（HGB）（體液）產品溯源性-建立潛血（尿液）測量結果的溯源性按照細胞中含量校準尿干化學（終端的）常規樣本的測量結果半定量內部程序MP（選擇的）ICSH RMP,FCM（體液）產品溯源性-建立PLT（血液）測量結果的溯源性工作校準物（基質）MP（常設的）RMP（終端的）產品校準物(模擬物)常規樣本的測量結果RM（RMP）MP（選擇的

22、）國際約定的測量程序（體液）產品溯源性-建立凝血時間（血液）測量結果的溯源性工作校準物（基質）MP（常設的）RMP（終端的）產品校準物(模擬物)常規樣本的測量結果質控血漿MP（選擇的）WHO 賦值方案（免疫）產品溯源性-建立HCG測量結果的溯源性RM（3rd、4th）工作校準物（基質）RMP（終端的）常規樣本的測量結果RM（RMP）MP（選擇的）賦值方案（免疫）產品溯源性-建立AFP測量結果的溯源性RM（RMP）工作校準物MP（常設的）RMP（終端的）產品校準物常規樣本的測量結果5%，正確理解不確定度MP（選擇的）（免疫）產品溯源性-建立TSH測量結果的溯源性工作校準物MP（常設的）RMP（終

23、端的）產品校準物常規樣本的測量結果RM（RMP）不同且相互關聯MP（選擇的）WHO 1978（免疫）產品溯源性-建立Insulin測量結果的溯源性66/304工作校準物MP（常設的）RMP（終端的）產品校準物常規樣本的測量結果RM（RMP）MP（選擇的）純物質（免疫）產品溯源性-建立PCT測量結果的溯源性工作校準物（基質）MP（常設的）RMP（終端的）產品校準物（重組）常規樣本的測量結果內部程序回收（修正）MP（選擇的）1116-NS-19-9（免疫）產品溯源性-建立CA19-9測量結果的溯源性工作校準物（基質）MP（常設的）RMP（終端的）產品校準物常規樣本的測量結果參照RIA內部程序：溯源至使用1116-NS-19-9校準的內部測量程序回收（修正）MP（選擇的）分離、提取、鑒定（核酸）產品溯源性-建立UU測量結果的溯源性核酸：純度、濃度工作校準物MP（常設的）RMP（終端的）產品校準物常規樣本的測量結果UUMWMP（選擇的）06/202（Type 16