1、第四章 藥物定量分析與 分析方法驗證第一節 定量分析樣品的前處理方法藥物定量分析與分析方法驗證最新一、概述 含鹵素有機藥物系指藥物分子結構中所含鹵素直接與芳環或脂肪鏈相連者，而不包括某些有機藥物的鹵酸鹽或氫鹵酸鹽結構特點ArXRX藥物定量分析與分析方法驗證最新（一）鹵原子的活潑性1. 鹵原子與其相連接的烴基的結構（1）乙烯型鹵和芳鹵 不活潑藥物定量分析與分析方法驗證最新（2）烯丙型鹵和芐鹵 活潑（3）鹵代烷型 介于兩者之間CH2CH(CH2)nX n2藥物定量分析與分析方法驗證最新2. 分子中所含鹵原子的個數（n） 分子中所含鹵原子的個數越多，活潑性越強，特別是同一碳上含多個鹵原子或一個苯環上

2、含多個鹵原子時，活潑性增強更加明顯藥物定量分析與分析方法驗證最新3. 鹵素的種類 活潑性IBrClF常見的含鹵素有機藥物藥物定量分析與分析方法驗證最新CCH3OHCH3CCl3三氯叔丁醇藥用輔料、防腐劑含量測定堿性回流銀量法藥物定量分析與分析方法驗證最新泛影酸診斷用藥含量測定堿性還原銀量法藥物定量分析與分析方法驗證最新碘苯酯-診斷用藥含量測定氧瓶燃燒法間接碘量法I藥物定量分析與分析方法驗證最新醋酸氟輕松氟檢查氧瓶燃燒法氟檢查藥物定量分析與分析方法驗證最新磺溴酞鈉診斷用藥含量測定硫和溴氧瓶燃燒法藥物定量分析與分析方法驗證最新(二)、含金屬有機藥物 含金屬的有機藥物：金屬原子不與碳原子直接相連，通

3、常為有機酸及酚的金屬鹽或配位化合物 如葡萄糖酸銻鈉、富馬酸亞鐵藥物定量分析與分析方法驗證最新酒石酸銻鉀藥物定量分析與分析方法驗證最新CCHCCOOOFeO硬脂酸鎂富馬酸亞鐵藥物定量分析與分析方法驗證最新葡萄糖酸銻鈉藥物定量分析與分析方法驗證最新二、不經有機破壞的分析方法 適用于含金屬有機藥物或結合不牢固的含鹵素等藥物的分析。藥物定量分析與分析方法驗證最新 適用于金屬原子不直接與碳原子相連的含金屬有機藥物或某些CM鍵結合不牢固的有機金屬藥物。（一）. 直接測定法藥物定量分析與分析方法驗證最新1.氧化還原滴定法富馬酸亞鐵的含量測定 Ch.P (2010) 取本品約0.3g，精密稱定，加稀硫酸 15

4、ml，加熱溶解后，放冷，加新沸過的冷水50ml與鄰二氮菲指示液2 滴，立即用硫酸鈰滴定液(0.1mol/L)滴定，并將滴定的結果用空白試驗校正。每1ml硫酸鈰滴定液(0.1mol/L)相當于16.99mg 。藥物定量分析與分析方法驗證最新原理Fe2+ + Ce4+ Ce3+ + Fe3+ Fe2+ + e-Fe3+紅色淺藍色OOCCHOHCCO+Fe2+藥物定量分析與分析方法驗證最新例 葡萄糖酸銻鈉的含量測定 Ch.P（2005） 取本品約0.3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加水100ml、鹽酸15ml與碘化鉀試液10ml，密塞、振搖后，在暗處靜置10min，用硫代硫酸鈉滴定液(0.1mol/

5、L)滴定，至近終點時，加淀粉指示液，繼續滴定至藍色消失，并將滴定的結果用空白試驗校正。2. 利用藥物中金屬離子的氧化性測定法 藥物定量分析與分析方法驗證最新藥物定量分析與分析方法驗證最新 本法適用于含鹵素有機藥物結構中鹵素原子結合不牢固的藥物二. 經水解后測定法 藥物定量分析與分析方法驗證最新RX 溶劑NaOH回流水解X-銀量法（Volhard法）鐵銨釩指示劑法1.堿水解后測定法藥物定量分析與分析方法驗證最新例：三氯叔丁醇的含量測定 Ch.P（2005）本品適量乙醇、NaOH 回流H2O HNO3定量過量AgNO3 (0.1mol/L)鄰苯二甲酸二丁酯Fe3+指示劑 振搖 NH4SCN(0.1

6、mol/L)滴定T = 6.216 mg / ml藥物定量分析與分析方法驗證最新CCl3-C(CH3)2-OH + 4NaOH 回流(CH3)2-CO + 3NaCl + HCOONa + 2H2OAgNO3 + NH4SCNAgSCN + NH4NO3（淡棕紅色）(Ksp=1.561010 )(Ksp=1.010-12 )Fe3+ + SCN Fe (SCN) 2+ NaCl + AgNO3 AgCl + NaNO3 定量過量藥物定量分析與分析方法驗證最新過量的SCN-將發生AgClSCN AgSCN +Cl不能出現Fe(SCN)2紅色，消耗NH4SCN過量，采取消除誤差的辦法：將生成的Ag

7、Cl過濾，再滴定，繁瑣；滴定前加入一定量的有機溶劑，將AgCl包裹。藥物定量分析與分析方法驗證最新三.經有機破壞的分析方法 適用于含金屬及含X、N、S、P等有機藥物結構中的待測原子與碳原子結合牢固者。藥物定量分析與分析方法驗證最新 高溫熾灼法和氧瓶燃燒法 （一）干法破壞藥物定量分析與分析方法驗證最新2. 氧瓶燃燒法應用于含鹵素、硫、磷、硒等有機藥物的分析（1）原理 藥物定量分析與分析方法驗證最新 本法特點是簡便、快速、破壞完全，尤其適用于微量樣品的分析藥物定量分析與分析方法驗證最新 （ 2） 儀器與材料 儀器裝置 燃燒瓶為500、1000或2000ml無色、磨口、厚壁、硬質玻璃錐形瓶；瓶塞空心

8、，底部熔封鉑絲一根，下端呈螺旋狀或網狀,長度為瓶身長的2/3藥物定量分析與分析方法驗證最新稱樣用材料及稱樣 A. 固體樣品 無灰濾紙 B. 液體樣品 無灰濾紙紙袋 C. 軟膏類樣品：將適量樣品置不含被測成分的蠟油紙中包裹嚴密，外層再用無灰濾紙包裹藥物定量分析與分析方法驗證最新藥物定量分析與分析方法驗證最新吸收液 A. 作用：吸收液的作用是將樣品經燃燒分解所產生的各種價態的鹵素、硫、氮、硒等，定量地吸收并轉變為一定的便于測定的價態氧氣藥物定量分析與分析方法驗證最新B. 吸收液的選擇氟 水 氯 H2O-NaOH溶液溴 H2O-NaOH-SO2飽和溶液碘 H2O-NaOH-SO2飽和溶液硫 H2O2

9、 溶液H2O磷 H2O HNO3(少量）硒 HNO3硝酸溶液藥物定量分析與分析方法驗證最新（3）操作方法 吸收液燃燒瓶充O212玻片蓋好 樣品無灰濾紙按折線包好 將紙包夾在鉑絲的螺旋中(尾部在外)點火藥物定量分析與分析方法驗證最新插入燃燒瓶中壓住瓶塞充分燃燒 灰分入吸收液吸收產生的煙霧充分振搖 放置15 沖洗瓶塞及鉑絲合并洗液同法另作空白試驗藥物定量分析與分析方法驗證最新根據被燃燒分解的樣品量選用適宜大小的燃燒瓶。（4）注意事項 ChP（2005）規定的燃燒瓶體積為500、1000或2000ml三種，采用常量或半微量分析藥物定量分析與分析方法驗證最新測定含氟有機藥物時，用石英制燃燒瓶鉑絲燃燒時

10、起催化作用應同時做空白試驗燃燒時要注意防爆燃燒要完全燃燒產生的煙霧完全被吸收藥物定量分析與分析方法驗證最新98：140. 氧瓶燃燒法中的裝置有A. 磨口硬質玻璃錐形瓶B. 磨口軟質玻璃錐形瓶C. 鉑絲D. 鐵絲E. 鋁絲藥物定量分析與分析方法驗證最新96：133（99x：138）選擇氧瓶燃燒法所必備的實驗物品A. 磨口硬質玻璃錐形瓶B. 鉑絲C. 普通濾紙D. 氫氣 E. 無灰濾紙藥物定量分析與分析方法驗證最新99：76氧瓶燃燒法測定含氯有機藥物時所用的吸收液多數為A. H2O2溶液B. H2O2NaOH溶液C. NaOH溶液D硫酸肼飽和液E. NaOH硫酸肼飽和液藥物定量分析與分析方法驗證最

11、新99：134. 氧瓶燃燒法可用于A. 含鹵素有機藥物的含量測定B. 醚類藥物的含量測定C. 檢查甾體激素類藥物中的氟D. 檢查甾體激素類藥物中的硒E. 芳酸類藥物的含量測定藥物定量分析與分析方法驗證最新（二）濕法破壞 凱氏定氮法：以硫酸硫酸鹽法為基礎的含氮有機藥物定量分析方法。 主要應用含有機氨基或酰胺結構的藥物含量測定。 Ch.P收載常量法（含氮：2530mg,500ml）和半微量法（12mg,3035ml）。藥物定量分析與分析方法驗證最新原理 以撲米酮為例（1）消解(2)堿化蒸餾水蒸汽藥物定量分析與分析方法驗證最新（3）酸溶液吸收氨(4) 酸滴定藥物定量分析與分析方法驗證最新半微量凱氏定

12、氮法1.加入硫酸鉀或者無水硫酸鈉提高硫酸的沸點。2.硫酸銅作為催化劑。藥物定量分析與分析方法驗證最新藥物定量分析與分析方法驗證最新第二節 定量分析方法的特點Ch.P二部含量測定方法主要:容量分析法光譜分析法色譜分析法藥物定量分析與分析方法驗證最新一、容量分析(一)、特點測定準確度高，相對誤差0.2%；操作簡便快速；儀器簡單，廉價；用于高含量或中等含量組分的測定，應用于原料藥的含量測定；專屬性差。藥物定量分析與分析方法驗證最新(二) 計算1、滴定度 每1ml規定濃度的滴定液所相當的被測藥物的質量（mg）。如：每1ml的碘滴定液（0.05mol/L）相當于8.806mg的維生素C。藥物定量分析與分

13、析方法驗證最新2. 滴定度的計算a A + b B c C + d D 被測物滴定液藥物定量分析與分析方法驗證最新a A + b B c C + d D WA WB藥物定量分析與分析方法驗證最新滴定液的摩爾濃度被測物的分子量藥物定量分析與分析方法驗證最新m規碘滴定液0.05mol/Lm實碘滴定液0.05150mol/L 在實際工作中，配制的滴定液的摩爾濃度與藥典規定的有一定的誤差（規定值5）T實T規m實m規藥物定量分析與分析方法驗證最新F為校正因數T實T規 m實m規= T規 F藥物定量分析與分析方法驗證最新配制的高氯酸滴定液(0.0981mol/L)每1ml 高氯酸滴定液(0.1mol/L)相

14、當于32.09mg的C17H20N2S.HCl 。 F=?藥物定量分析與分析方法驗證最新3.百分含量的計算 直接滴定法a . 不做空白試驗例如：阿司匹林直接酸堿滴定法藥物定量分析與分析方法驗證最新W 供試品取量V 消耗滴定液的體積F 滴定液濃度校正因數T實際滴定度T 規定滴定度藥物定量分析與分析方法驗證最新b. 做空白試驗V0 空白試驗消耗滴定液的體積藥物定量分析與分析方法驗證最新 取本品約0.3g，精密稱定，加冰醋酸10ml與醋酸汞試液4ml ，溫熱至完全溶解，放冷至室溫，加結晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，至溶液顯藍色，并將滴定的結果用空白試驗校正。每1ml 高氯酸

15、滴定液(0.1mol/L)相當于32.09mg的C17H20N2S.HCl 。 鹽酸異丙嗪（非水滴定法） 藥物定量分析與分析方法驗證最新 間接滴定法生成物滴定法和剩余滴定法生成物滴定法例如：葡萄糖酸銻鈉的含量測定取本品約0.3g精密稱定置碘瓶100ml+15mlHCl+KI試液10ml 硫代硫酸鈉滴定液（0.1mol/L)滴定 空白試驗校正。藥物定量分析與分析方法驗證最新反應摩爾比：本品：碘：硫代硫酸鈉=1:1:2藥物定量分析與分析方法驗證最新b. 剩余量滴定法（回滴定法）以司可巴比妥鈉的含量測定為例10ml溶解取本品0.1g 250ml碘瓶精密加溴滴定液（0.05mol/L）25ml+HCl

16、 5ml 密塞振搖1分，暗處放置15分微開瓶塞加KI T.S 10ml 密塞搖勻 Na2S2O3滴定液（0.1mol/L）滴定近終點淀粉指示（藍色消失） 空白試驗校正。藥物定量分析與分析方法驗證最新定量過量藥物定量分析與分析方法驗證最新Br2 + 2KI 2KBr + I2I2 + 2Na2S2O3 2NaI + Na2S4O61 ： 2 1 ： 1藥物定量分析與分析方法驗證最新司可巴比妥 Br2 Na2S2O3 = 1 1 2藥物定量分析與分析方法驗證最新對于溴滴定液空白樣品被測藥物的量藥物定量分析與分析方法驗證最新對于硫代硫酸鈉滴定液空白樣品被測藥物的量藥物定量分析與分析方法驗證最新藥物定

17、量分析與分析方法驗證最新二、光譜分析法1.特點靈敏度高，可達104107gml；準確度高，相對誤差為2%5%；應用較廣。（一）紫外可見分光光度法藥物定量分析與分析方法驗證最新2、測定的基本要求儀器校正和檢定；溶劑要求符合規定；吸收波長應在該品種項下規定的波長2nm以內,以吸光度最大作為檢測波長。配制的樣品濃度應使吸收度在0.30.7之間；狹縫寬度的選擇，應以減少狹縫寬度時供試品的吸收度不再增加為準。藥物定量分析與分析方法驗證最新3. 測定方法 對照品比較法 分別配制供試品溶液（x）和對照品溶液（r），對照品溶液中所含被測成分的量應為供試品溶液中被測成分規定量的10010%藥物定量分析與分析方法

18、驗證最新式中：Cx為供試品溶液的濃度； Ax為供試品溶液的吸光度； CR為對照品溶液的濃度； AR為對照品溶液的吸光度； D為稀釋體積； W為供試品取樣量。藥物定量分析與分析方法驗證最新【含量測定】 取本品約50mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加無水乙醇使溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml ，置另一50ml量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻， 照分光光度法（附錄 A），在280nm 的波長處測定吸收度；另精密稱取炔雌醚對照品適量，用無水乙醇稀釋制成每1ml 中約含100g的溶液，同法測定，計算，即得。 炔雌醚藥物定量分析與分析方法驗證最新已知：Ax=0.654 Ar=0.631 W=0.

19、05213g求：含量？97.5102.5藥物定量分析與分析方法驗證最新藥物定量分析與分析方法驗證最新原料藥百分含量：藥物定量分析與分析方法驗證最新2.吸收系數法 按各品種項下的方法配置供試品溶液，在規定的波長處測定其吸收度，再以該品種在規定條件下的吸收系數計算含量。 吸收系數通常大于100，儀器要校正和驗證g100ml藥物定量分析與分析方法驗證最新為供試品在規定條件下的吸收系數(g/ml)藥物定量分析與分析方法驗證最新維生素2 【含量測定】 避光操作。取本品約75mg，精密稱定，置燒杯中，加冰醋酸1ml 與水75ml，加熱溶解后，加水稀釋，放泠，移置500ml量瓶中，再加水稀釋至刻度，搖勻 ；

20、精密量取10ml，置100ml 量瓶中，加1.4 醋酸鈉溶液7ml ，并用水稀釋至刻度，搖勻，照分光光度法（附錄 B），在444nm 的波長處測定吸收度，按C17H20N4O6的吸收系數（ ）為323 計算，即得。 藥物定量分析與分析方法驗證最新已知：Ax=0.479 W=0.07483g求：VB2含量%？藥物定量分析與分析方法驗證最新固體制劑含量標示百分含量標示量為單位制劑的平均重量（或裝量）B 為制劑的標示量藥物定量分析與分析方法驗證最新液體制劑的含量標示百分含量標示量為單位制劑的標示裝量V 為供試品的量取體積B 為制劑的標示量藥物定量分析與分析方法驗證最新 公式方法原料含量固體制劑液體制

21、劑容量法直接滴定直接空白剩余滴定紫外法對照品比較法吸收系數法將計算公式填入下表，并每類編一道計算題藥物定量分析與分析方法驗證最新3. 計算分光光度法4. 比色法： 空白用同體積的溶劑代替對照品或供試品溶液，依次加入等量的相應試劑，并用相同的方法處理。藥物定量分析與分析方法驗證最新特點：靈敏度高、選擇性強、所需試樣量少；廣泛應用于痕量分析，特別適用于生物體液中藥物或代謝產物的分析；干擾因素較多，影響測定的準確度和精密度。（二）熒光分析法藥物定量分析與分析方法驗證最新對照品比較法2. 含量測定藥物定量分析與分析方法驗證最新Ci為供試品濃度Ri、Rib分別為供試品溶液和供試品空白溶液的讀數Cr為對照

22、品溶液的濃度Rr、Rrb分別為對照溶液和對照空白溶液的讀數藥物定量分析與分析方法驗證最新三.色譜分析法（一）高效液相色譜法 本法具有高靈敏度（10121015）、高選擇性、高性能、高速度及應用廣泛。1. 特點藥物定量分析與分析方法驗證最新2. Ch.P的要求流動相：常用甲醇水、乙腈水色譜柱：常用C18柱，其次C8柱；適 用的pH范圍28進樣量：20l，也有10l或5l；柱溫：除另有規定外，為室溫；檢測器：除另有規定外，紫外吸收檢測器。藥物定量分析與分析方法驗證最新反相色譜：C18、C8、氰基、氨基正相色譜：硅膠離子交換色譜：離子交換填充劑填充劑分子排阻色譜：凝膠或高分子多孔微球填充劑立體異構體

23、色譜：手性鍵合填充劑藥物定量分析與分析方法驗證最新檢測器：紫外、二極管陣列、熒光、 示差折光、蒸發光散色、 電化學、質譜選擇性檢測器：紫外、二極管陣列、熒 光、電化學、質譜通用型檢測器：示差折光、蒸發光散色藥物定量分析與分析方法驗證最新不可改變的條件 可改變的條件固定相種類 固定相型號、規格流動相組分 流動相各組分的比 例、流速檢測器類型 柱溫、進樣量、檢 測器靈敏度藥物定量分析與分析方法驗證最新3. 系統適應性試驗 色譜柱的理論板數（n）藥物定量分析與分析方法驗證最新 分離度R1.5藥物定量分析與分析方法驗證最新 拖尾因子T=0.95 1.05藥物定量分析與分析方法驗證最新 重復性 取各品種

24、項下的對照品溶液，連續進樣5次，除另有規定外，其峰面積測量值的相對標準差應不大于2.0%藥物定量分析與分析方法驗證最新藥物定量分析與分析方法驗證最新4. 測定法 外標法 分別配制供試品溶液（x）和對照品溶液（r），對照品溶液的濃度為供試品溶液濃度的10%。測得相應的峰面積為Ax和Ar。藥物定量分析與分析方法驗證最新 藥物定量分析與分析方法驗證最新討論： 外標法操作、計算簡單； 要求實驗條件穩定：靈敏度、流動相流速、組成等；采用定量環或自動進樣為好，進樣量準確，有較好的重復性，保持溶液濃度恒定，減少進樣誤差。 藥物定量分析與分析方法驗證最新 內標法 在同一次實驗操作中，被測物的質量響應值與內標物

25、的質量響應值的比值是恒定的，不隨進樣體積或操作期間所配制的溶液濃度的變化而變化，根據這一原理能夠通過內標法得到未知樣品較準確的定量結果。藥物定量分析與分析方法驗證最新內標法加校正因子 配制校正因子測定液對照品（CR ）內標物 （CS ）混合進樣ARAS藥物定量分析與分析方法驗證最新 配制供試品溶液供試品（Cx)內標物 （CS )混合進樣AxAS藥物定量分析與分析方法驗證最新在給定的色譜條件下含內標物的對照品溶液含內標物的供試品溶液校正因子藥物定量分析與分析方法驗證最新藥物定量分析與分析方法驗證最新內標對比法如：CS = CS藥物定量分析與分析方法驗證最新討論： 內標物的選擇：化學性質穩定，在達

26、到分離度要求前提下，tR與供試品的接近； 內標法較外標法準確，但操作和計算較復雜；藥物定量分析與分析方法驗證最新（二）氣相色譜法原理： 樣品中各組分在固定相與載氣間分配，由于各組分的分配系數不同而分離。藥物定量分析與分析方法驗證最新2.一般要求（Ch.P2005）載氣：N2 ；進樣：直接進樣或頂空進樣；色譜柱：填充柱、毛細管柱；進樣溫度：直接進樣，高于柱溫3050；進樣量：不大于數微升；檢測器：常用氫火焰離子化檢測（FID），檢測溫度一般高于柱溫，不得低于150，以免水氣冷凝，常用250300。藥物定量分析與分析方法驗證最新不可改變的條件 可改變的條件固定液種類檢測器類型特殊指定的色譜柱材料

27、色譜柱規格、型號、固定液涂布濃度、載氣流速、檢測器靈敏度、柱溫、進樣量等。藥物定量分析與分析方法驗證最新3. 系統適應性試驗（參見HPLC）4. 測定法 由于GC進樣在1l左右，易產生誤差，故常采用內標法藥物定量分析與分析方法驗證最新第三節 藥品質量標準分析方法驗證 一、目的及要求 證明所采用的分析方法適合于相應的檢測要求。藥品質量標準起草時，合成工藝變更、制劑的組分變更、原分析方法進行修訂時，分析方法需經驗證。方法驗證過程和結果均應記載在藥品標準起草和修訂說明中。 藥物定量分析與分析方法驗證最新二、需驗證的分析項目1. 鑒別試驗；2. 雜質定量或限度檢查；3. 原料或制劑中有效成分含量測定；

28、4. 制劑中其它成分（降解產物、防腐劑等）的測定；5. 溶出度、釋放度等功能檢查中的溶出量等的測試方法。 藥物定量分析與分析方法驗證最新 驗證內容有：準確度、精密度（重復性、中間精密度和重現性）、專屬性、檢測限、定量限、線性、范圍和耐用性三、驗證內容 藥物定量分析與分析方法驗證最新 （一） 準確度（accuracy） 準確度是指用該方法測定的結果與真實值或參考值接近的程度，用百分回收率表示。 測定回收率R（recovery）的具體方法可采用“回收試驗法”和“加樣回收試驗法”。 藥物定量分析與分析方法驗證最新1. 含量測定方法（1）原料藥的含量測定用已知的對照品或供試品進行測定回收率測得量加入量

29、100藥物定量分析與分析方法驗證最新1. 含量測定方法（2）制劑的含量測定用已知的對照品或供試品進行測定；向已知制劑含量加入“已知量的被測物”。回收率 測得量本底量 加入量100藥物定量分析與分析方法驗證最新 規定的范圍內，至少用9次測定結果評價，如制備三個不同濃度樣品各測三次。2.數據要求藥物定量分析與分析方法驗證最新回收率指標的一般要求UV、HPLC 回收率： 98102 RSD2容量分析 回收率： 99.7100.3 RSD0.2藥物定量分析與分析方法驗證最新 中藥分析的準確度一般用加樣回收試驗衡量。中藥回收率一般要求在95105%范圍內，有些方法操作步驟繁多時，可要求在90110%范圍

30、內。RSD一般在3%以內。 藥物定量分析與分析方法驗證最新RPHPLC二元梯度洗脫法測定魷降鈣噴鼻劑的含量及有關物質 回收率按處方量配制適量的空白輔料溶液，分別加入處方量80%，100%，120%的SCT各3份，按含量測定方法測定SCT的含量，與加入量比較，計算得回收率，平均回收率(n=3)分別為100.4%(RSD)=1.0%)，99.5%(RSD=1.2%)，99.9%(RSD)=1.6%)。藥物定量分析與分析方法驗證最新回收率試驗取本品研細，精密稱取約2.5g，分別加人高、中、低(160、200、240g)不同量的延胡索乙素對照品，各2份，按含量測定方法進行測定，3者的平均回收率和相對偏

31、差分別為97.8%，0.51%;97.6%，0.41%;95.8%，0.35%，總平均回收率為98.1%。高效液相色譜法測定復方胃寧片中延胡索乙素的含量藥物定量分析與分析方法驗證最新 （二）精密度（precision） 是指在規定條件下，同一個均勻樣品，經多次取樣測定所得結果之間的接近程度。1.精密度表示方法藥物定量分析與分析方法驗證最新（1）平均偏差（ ）：（2）相對平均偏差（RD）：藥物定量分析與分析方法驗證最新兩份平行樣：最大相對偏差（允許值）容量分析 0.3重量分析 0.5儀器分析 3藥物定量分析與分析方法驗證最新（3）.標準（偏）差（SD或S）藥物定量分析與分析方法驗證最新（4）.相

32、對標準（偏）差（RSD），也稱變異系數（CV）藥物定量分析與分析方法驗證最新（1）重復性 在相同條件下，由同一個分析人員測定所得結果的精密度；在規定的范圍內，至少用9次測定結果評價，如制備三個不同濃度樣品各測三次或把被測物濃度當作100%，至少測6次進行評價。2. 精密度的內容藥物定量分析與分析方法驗證最新 （2）中間精密度 同一實驗室，不同時間由不同分析人員用不同設備所得結果的精密度。 考察隨機變動因素的影響。變動因素為不同日期、不同分析人員、不同設備。藥物定量分析與分析方法驗證最新 （3）. 重現性 不同實驗室，不同分析人員測定結果的精密度。當分析方法將被法定標準采用時，應進行重現性試驗。

33、如建立藥典分析方法時通過協同檢驗得出重現性結果，協同檢驗的過程、重現性結果均應記載在起草說明中。 藥物定量分析與分析方法驗證最新指標一般要求容量分析：n6 RSD0.2HPLC： n6 RSD2UV: n6 RSD1藥物定量分析與分析方法驗證最新HPLC法分析羅紅霉素及其片劑含量和相關物質精密度和準確度的測定取羅紅霉素的片劑，研細，分別按“2.3”項制備6份供試品溶液，在確定的色譜條件下，分別進樣20L，記錄色譜圖，計算其含量，RSD為0.95%。采用加樣回收的方法，將羅紅霉素片研細，分別精密稱定11，14，17mg，再相應地加入羅紅霉素對照品8，10，12mg，置10mL量瓶中，用流動相溶解

34、并稀釋至刻度，分別進樣20L，記錄色譜圖，計算在低、中、高濃度下的平均回收率土RSD(n=3)分別為99.01%士1.0%，99.25士0.98%，99.23%士1.0%。藥物定量分析與分析方法驗證最新 （三）專屬性（specificity） 指有其他成分（雜質、降解物、輔料等）可能存在情況下，采用的方法能準確測定出被測物的特性。 鑒別反應、雜質檢查、含量測定方法均應考察其專屬性。藥物定量分析與分析方法驗證最新對照品 75.15h破壞液 供試品 a SCP;b降鈣素C藥物定量分析與分析方法驗證最新 （四） 檢測限（limit of detection， LOD） 檢測限系指試樣中被測物能被檢測

35、出的最低量。是限度試驗參數，無需定量測定。藥物定量分析與分析方法驗證最新1非儀器分析目視法 用已知濃度的被測物，試驗出能被可靠地檢測出的最低濃度或量。 2. 儀器分析時的測定法如：HPLC S/N=3藥物定量分析與分析方法驗證最新3數據要求 應附測試圖譜，說明測試過程和檢測限結果。 藥物定量分析與分析方法驗證最新（五）定量限（1imit of quantitation，LOQ） 指樣品中被測物能被定量測定的最低量，結果應具有一定準確度和精密度。雜質和降解產物定量時，應確定定量限。藥物定量分析與分析方法驗證最新 常用信噪比法確定定量限，一般以信噪比（S/N）為101時相應的濃度或注入儀器的量進行

36、確定。藥物定量分析與分析方法驗證最新 （六） 線性 在設計的范圍內，測試結果與試樣中被測物濃度直接呈正比關系的程度。 數據要求：應列出回歸方程、相關系數和線性圖。藥物定量分析與分析方法驗證最新UV: n57 相關系數r0.999HPLC: n57相關系數r0.999 藥物定量分析與分析方法驗證最新（七）范圍 指達到一定精密度、準確度和線性的條件下，測試方法適用的高低限濃度或量的區間。藥物定量分析與分析方法驗證最新（八） 耐用性 指測定條件稍有變動時，結果不受影響的承受程度，為常規檢驗提供依據。 變動因素：被測溶液的穩定性，流動相的組成、不同型號的色譜柱、pH、柱溫、流速等。藥物定量分析與分析方法驗證最新 項目內容鑒別 雜質測定含量測定及溶出量測定定量限度準確度-+-+精密度重復性-+-+中間精密度-+-+專屬性+檢測限-+-定量限-+-線性-+-+范圍-+-+耐用性+藥物定量分析與分析方法驗證最新六、各種含量測定方法對效能指標的要求 1. 容量分析法：用原料藥精制品(含量99