1、 19961996年年7 7月月5 5日日, ,世界上第一只體細胞克隆世界上第一只體細胞克隆動物動物-克隆羊克隆羊多利多利誕生于英國。誕生于英國。利用菊花花瓣微型繁殖培養(yǎng)的菊花利用菊花花瓣微型繁殖培養(yǎng)的菊花細胞工程植物細胞工程植物細胞工程植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng) 植物體細胞雜交植物體細胞雜交動物細胞工程動物細胞工程1.植物組織培養(yǎng)的原理是什么？植物組織培養(yǎng)的原理是什么？閱讀教材閱讀教材P33-34頁頁 回答下列問題回答下列問題2.什么是細胞的全能性什么是細胞的全能性?4.為什么體內(nèi)細胞沒有表現(xiàn)出全能性，而是分化成為不同的組為什么體內(nèi)細胞沒有表現(xiàn)出全能性，而是分化成為不同的組織、器官？織、器官？

2、細胞的全能性3.3.全能性大小比較全能性大小比較受精卵受精卵 生殖細胞生殖細胞 體細胞體細胞 第二組第二組第一組第一組植物細胞植物細胞 動物細胞動物細胞基因在特定空間和時間條件下基因在特定空間和時間條件下選擇性表達選擇性表達的結(jié)果。的結(jié)果。具有某種生物具有某種生物_ _ _的任何一個細胞，都具有的任何一個細胞，都具有_的潛能。的潛能。全部遺傳信息全部遺傳信息發(fā)育成完整生物體發(fā)育成完整生物體離體的植物器官、組織或細胞（外植體）離體的植物器官、組織或細胞（外植體）愈傷組織愈傷組織根、芽根、芽植物體植物體脫分化脫分化再分化再分化無菌無菌營養(yǎng)：營養(yǎng)：有機物有機物 無機鹽無機鹽 水分水分一定的外界條件一

3、定的外界條件植物激素：植物激素： 細胞分裂素細胞分裂素 生長素生長素遮光遮光一定的光照一定的光照芽發(fā)育成葉，葉芽發(fā)育成葉，葉肉細胞中葉綠素肉細胞中葉綠素的合成需要光照的合成需要光照排列疏松而無規(guī)排列疏松而無規(guī)則，高度液泡化的則，高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄呈無定形狀態(tài)的薄壁細胞壁細胞如：胡蘿卜的形成層、菊花如：胡蘿卜的形成層、菊花幼莖段、月季的花藥幼莖段、月季的花藥植物組織培養(yǎng)技術(shù)植物組織培養(yǎng)技術(shù)植物組織培養(yǎng)的概念 植物組織培養(yǎng)就是在無菌和人工控制條件下，植物組織培養(yǎng)就是在無菌和人工控制條件下，將離體的植物器官、組織、細胞，培養(yǎng)在人工配將離體的植物器官、組織、細胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給

4、予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其產(chǎn)制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株。生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株。牛刀小試牛刀小試1.1.下列屬于組織培養(yǎng)的是下列屬于組織培養(yǎng)的是（ ）A.A.花粉培養(yǎng)成單倍體植株花粉培養(yǎng)成單倍體植株B.B.芽發(fā)育成枝條芽發(fā)育成枝條C.C.根尖分生區(qū)發(fā)育成成熟區(qū)根尖分生區(qū)發(fā)育成成熟區(qū)D.D.未受精的卵發(fā)育成植株未受精的卵發(fā)育成植株A2.2.在離體的植物器官、組織或細胞脫在離體的植物器官、組織或細胞脫分化形成愈傷組織的過程中，下列分化形成愈傷組織的過程中，下列哪一項條件是不需要的哪一項條件是不需要的（ ）A.A.消毒滅菌消毒滅菌B.B

5、.適宜的溫度適宜的溫度C.C.充足的光照充足的光照D.D.適宜的養(yǎng)料和激素適宜的養(yǎng)料和激素C3.3.要將胡蘿卜韌皮部細胞培養(yǎng)成完要將胡蘿卜韌皮部細胞培養(yǎng)成完整植株，不需要整植株，不需要（ ）A.A.具有完整細胞核的細胞具有完整細胞核的細胞B.B.離體狀態(tài)離體狀態(tài)C.C.導(dǎo)入外源基因?qū)胪庠椿駾.D.一定的營養(yǎng)物質(zhì)和激素一定的營養(yǎng)物質(zhì)和激素C4 4、植物組織培養(yǎng)形成的愈傷、植物組織培養(yǎng)形成的愈傷組織進行培養(yǎng)，組織進行培養(yǎng)， 又可以分又可以分化形成根、芽等器官，這一化形成根、芽等器官，這一過程稱為：過程稱為： A A、脫分化、脫分化 B B、去分化、去分化 C C、再分化、再分化 D D、脫分化

6、或去分化、脫分化或去分化（ C）請同學(xué)們討論如何實現(xiàn)請同學(xué)們討論如何實現(xiàn)? ?因為不同種生物之間存因為不同種生物之間存在著在著生殖隔離生殖隔離，所以用，所以用傳統(tǒng)的有性雜交方法是傳統(tǒng)的有性雜交方法是不可能做到這一點的。不可能做到這一點的。二、二、植物體細胞雜交技術(shù)植物體細胞雜交技術(shù)用兩個來自不同植物的體細胞融合成用兩個來自不同植物的體細胞融合成一個雜種細胞，且把雜種細胞培育成一個雜種細胞，且把雜種細胞培育成新的植物體的方法。新的植物體的方法。 馬鈴薯馬鈴薯細胞細胞番茄細胞番茄細胞雜種細胞雜種細胞1.阻礙植物細胞親和的屏障是什么？阻礙植物細胞親和的屏障是什么？怎么去除？怎么去除？融融 合合長壁長

7、壁原生原生質(zhì)體質(zhì)體纖維素酶纖維素酶和果膠酶和果膠酶2.去壁以后的結(jié)構(gòu)叫什么？去壁以后的結(jié)構(gòu)叫什么？3.用什么方法才能讓細胞緊密接觸并發(fā)生融合？用什么方法才能讓細胞緊密接觸并發(fā)生融合？4.融合的過程是怎樣的？其原理是什融合的過程是怎樣的？其原理是什么？么？5.融合完成的標志是什么？融合完成的標志是什么？6.雜種細胞遺傳物質(zhì)有什么特點？雜種細胞遺傳物質(zhì)有什么特點？7.融合后除雜種細胞外還有哪些融合細胞？融合后除雜種細胞外還有哪些融合細胞？人工誘導(dǎo)：人工誘導(dǎo)：物理方法：離心、振動、電物理方法：離心、振動、電擊擊. .化學(xué)方法：聚乙二醇（化學(xué)方法：聚乙二醇（PEGPEG）誘導(dǎo)）誘導(dǎo)細胞膜融合細胞膜融合

8、細胞質(zhì)融合細胞質(zhì)融合細胞核融合細胞核融合細胞膜的流動性細胞膜的流動性單核、單核、長出新的細胞壁長出新的細胞壁雜種細胞雜種細胞愈傷組織愈傷組織雜種植株雜種植株植物細胞植物細胞A A植物細胞植物細胞B B 原生質(zhì)體原生質(zhì)體A A原生質(zhì)體原生質(zhì)體B B正在融合的原生質(zhì)體正在融合的原生質(zhì)體去細胞壁去細胞壁! !（酶解法）（酶解法）再生細胞壁再生細胞壁植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)植物細胞融合植物細胞融合2.2.過程過程脫分化脫分化再分化再分化3 3、問題：、問題： 為什么培育出的為什么培育出的“番茄馬鈴薯番茄馬鈴薯”雜種植株沒有如科雜種植株沒有如科學(xué)家所想象那樣地上長番茄地下長馬鈴薯？學(xué)家所想象那樣地上長番

9、茄地下長馬鈴薯？ 主要原因是：主要原因是：生物基因的表達不是孤立的，它們之間是生物基因的表達不是孤立的，它們之間是相互調(diào)控、相互影響的，相互調(diào)控、相互影響的，所以馬鈴薯所以馬鈴薯番茄雜交植株的細胞番茄雜交植株的細胞中雖然具備兩個物種的遺傳物質(zhì)，但這些遺傳物質(zhì)的表達受中雖然具備兩個物種的遺傳物質(zhì)，但這些遺傳物質(zhì)的表達受到相互干擾，不能再像馬鈴薯或番茄植株中的遺傳物質(zhì)一樣到相互干擾，不能再像馬鈴薯或番茄植株中的遺傳物質(zhì)一樣有序表達，雜交植株不能地上長番茄、地下結(jié)馬鈴薯就是很有序表達，雜交植株不能地上長番茄、地下結(jié)馬鈴薯就是很自然的了。自然的了。4 意義意義：克服了克服了遠源雜交不親和性遠源雜交不親

10、和性的障礙的障礙5 未解決的問題未解決的問題：(2)克服克服有性雜交的母系遺傳，獲得細胞有性雜交的母系遺傳，獲得細胞質(zhì)基因的雜合子質(zhì)基因的雜合子還不能讓雜種植物按照人們的要求表現(xiàn)出親代性狀。還不能讓雜種植物按照人們的要求表現(xiàn)出親代性狀。5、不能人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方不能人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法是法是A A、振動、振動 B B、電刺激、電刺激 C C、PEGPEG試劑試劑 D D、重壓、重壓( D )牛刀小試牛刀小試6 6、植物體細胞融合完成的標志是植物體細胞融合完成的標志是 A A產(chǎn)生新的細胞壁產(chǎn)生新的細胞壁 B B細胞膜發(fā)生融合細胞膜發(fā)生融合C C細胞質(zhì)發(fā)生融合細胞質(zhì)發(fā)生融合 D D細胞

11、核發(fā)生融合細胞核發(fā)生融合7 7、用不同種植物的兩個體細胞融合成一用不同種植物的兩個體細胞融合成一個雜種細胞的過程。該過程是指個雜種細胞的過程。該過程是指 A A不同植物的精子和卵細胞的融合不同植物的精子和卵細胞的融合 B B不同植物的原生質(zhì)體的融合不同植物的原生質(zhì)體的融合C C完整的兩個體細胞的融合完整的兩個體細胞的融合 D D植物花粉細胞的兩兩融合植物花粉細胞的兩兩融合（A）（B）8、植物體細胞雜交尚未解決的問題有：植物體細胞雜交尚未解決的問題有：A A、去掉細胞壁、去掉細胞壁, ,分離出有活力的原生質(zhì)分離出有活力的原生質(zhì)體體B B、將雜種細胞培育成植株、將雜種細胞培育成植株C C、讓雜種植

12、物按照人們的需要表現(xiàn)出親、讓雜種植物按照人們的需要表現(xiàn)出親代的優(yōu)良性代的優(yōu)良性D D、尚未培育出屬間雜種植物、尚未培育出屬間雜種植物( C )植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)植物體細胞雜交技術(shù)植物體細胞雜交技術(shù)所屬所屬范疇范疇原理原理步驟步驟意義意義聯(lián)系聯(lián)系無性繁殖無性繁殖細胞全能性細胞全能性脫分化脫分化再分化再分化保持優(yōu)良性狀保持優(yōu)良性狀繁殖速度快、大規(guī)模生產(chǎn)繁殖速度快、大規(guī)模生產(chǎn)提高經(jīng)濟效益提高經(jīng)濟效益雜交技術(shù)應(yīng)用了組織培養(yǎng)雜交技術(shù)應(yīng)用了組織培養(yǎng)克服不同種生物遠源雜交克服不同種生物遠源雜交不親和的障礙不親和的障礙去除細胞壁去除細胞壁融合形成雜種細胞融合形成雜種細胞組織培養(yǎng)組織培養(yǎng)膜流動性膜流動性細

13、胞全能性細胞全能性染色體變異染色體變異 如下圖所示為胡蘿卜的韌皮部細胞通過無菌操作，接入試管后，在一定的條件下，形成試管苗的培育過程，請根據(jù)圖回答下列問題：要促進細胞分裂生長，培養(yǎng)基中應(yīng)有營養(yǎng)物質(zhì)和激素。要促進細胞分裂生長，培養(yǎng)基中應(yīng)有營養(yǎng)物質(zhì)和激素。營養(yǎng)物質(zhì)包括營養(yǎng)物質(zhì)包括 和小分子有機物，激素包括細胞分裂素和小分子有機物，激素包括細胞分裂素和和 兩類植物激素。兩類植物激素。此過程依據(jù)的原理是此過程依據(jù)的原理是 。A A和和B B階段主要進行的分裂階段主要進行的分裂方式是方式是 ，B B階段除了細胞分裂外，還進行細胞階段除了細胞分裂外，還進行細胞 等。等。此過程要無菌操作，主要是指對此過程要無菌操作，主要是指對 進行滅菌消毒。進行滅菌消毒。 B B階段需要光照，原因是階段需要光照，原因是 。試