1、特異性、陽性預測值、陰性預ELISA-(HCV驗方法驗證報告檢測方法明確診斷陽性陰性總數陽性ABA+B陰性1CDC+D總數A+CB+DN=A+B+C+D一、準確度驗證采用與明確診斷的結果進行對比獲得準確度包括敏感度、 測值等相關指標。檢測方法與明確診斷比較的2X2列聯表?靈敏度(sens) =100%A/(A+C)?特異性(spec) =100%D/(B+D)? 陽性預測值(PVP尸100%A/(A+B)? 陰性預測值(PVN尸100%D/(C+D)?檢驗效能=100%(A+D)/N注：預測值：測定為陽(陰)性樣本實際為陽(陰)性的可能性。檢驗效能：估計檢測結果與明確診斷總一致程度的指標，為所

2、有檢測結果中真正的陽性結果與真正的陰性結果所占的比例。靈敏度與特異性95%得分可信區間的計算方法如下：100% (Q1-Q2)/Q3,100%(Q1+Q2)/Q3按照下列公式計算 Q1, Q2, Q3:靈敏度：Q1=2A+1.962=2A+3.84Q2=1.961.962+4AC/(A+C)=1.963.84+4AC/(A+C)Q3=2(A+C+1.9，)=2(A+C)+7.68特異性：Q1=2D+1.962=2D+3.84Q2=1.961.962+4BD/(B+D)=1.963.84+4BD/(B+D)Q3=2(B+D+1.962)=2(B+D)+7.68注：公式中1.96為標準正態曲線下對

3、于 95%可信區間所對應的變量值。檢測100例新鮮臨床樣本，包含 HCV陽性樣本，數據如下表所示:HCV檢測準確性驗證數據試劑批號：2016075815恒溫箱編號：01- 口 -F00卜0966洗板機編號：01- 口 -F00卜1432酶標儀編號：OB-02-13實驗人：夏詩附實驗日期 20160815OD值健康人血清健康人血清健康人血清健康人血清健康人血清健康人血清0102030405060.0040.0070.0070.0080.0080.008陰性陰性陰性陰性陰性陰性健康人血清07健康人血清08健康人血清09健康人血清10健康人血清11健康人血清120.0100.0100.0030.00

4、90.0070.008陰性陰性陰性陰性陰性陰性健康人血清13健康人血清14健康人血清15健康人血清16健康人血清17健康人血清180.0030.0080.0120.0080.0030.008陰性陰性陰性陰性陰性陰性健康人血清19健康人血清20健康人血清21健康人血清22健康人血清23健康人血清240.0040.0080.0070.0080.0080.006陰性陰性陰性陰性陰性陰性健康人血清25健康人血清26健康人血清27健康人血清28健康人血清29健康人血清300.0030.0070.0050.0060.0060.008陰性陰性陰性陰性陰性陰性健康人血清31健康人血清32健康人血清33健康人血

5、清34健康人血清35健康人血清360.0070.0060.0040.0070.0080.005陰性陰性陰性陰性陰性陰性健康人血清37健康人血清38健康人血清39健康人血清40健康人血清41健康人血清420.0060.0070.0090.0080.0040.008陰性陰性陰性陰性陰性陰性健康人血清43健康人血清44健康人血清45健康人血清46健康人血清47健康人血清480.0070.0080.0060.0070.0080.008陰性陰性陰性陰性陰性陰性健康人血清49健康人血清50健康人血清51健康人血清52健康人血清53健康人血清540.0030.0060.0070.0050.0060.006陰

6、性陰性陰性陰性陰性陰性健康人血清55健康人血清56健康人血清57健康人血清58健康人血清59健康人血清600.0060.0070.0040.0060.0040.005陰性陰性陰性陰性陰性陰性HCV P01HCV P02HCV P03HCV P04HCV P05HCV P060.5982.5462.6983.0470.1962.772陽性陽性陽性陽性陽性陽性HCV P07HCV P08HCV P09HCV P10HCV P11HCV P122.8942.9480.7583.1823.4152.555陽性陽性陽性陽性陽性陽性HCV P13HCV P14HCV P15HCV P16HCV P17HC

7、V P183.5983.3662.9981.9742.8472.897陽性陽性陽性陽性陽性陽性HCV P19HCV P20HCV P21HCV P22HCV P23HCV P243.1150.4712.8593.0442.8943.447陽性陽性陽性陽性陽性陽性HCV P25HCV P26HCV P27HCV P28HCV P29HCV P302.8472.8543.2413.1543.5412.887陽性陽性陽性陽性陽性陽性HCV P31HCV P32HCV P33HCV P34HCV P35HCV P361.8872.8473.0540.7143.5542.897陽性陽性陽性陽性陽性陽性H

8、CV P37HCV P38HCV P39HCV P402.9542.8323.0590.153陽性陽性陽性陽性HCV-IgM檢測方法與明確診斷比較的2X2列聯表檢測方法明確診斷陽性陰性總數陽性A (40)B (0)A+B(40)陰性c (0)D (60)C+D (60)總數A+C (40)B+D(60)N=A+B+C+D (100)靈敏度(sens) =100%A/(A+C)=100%特異性(spec) =100%D/(B+D)=100%陽性預測值(PVP尸100%A/(A+B)尸100% 陰性預測值(PVN尸100%D/(C+D)尸100% 檢驗效能=100%(A+D)/N=100%靈敏度與

9、特異性95%得分可信區間的計算：靈敏度：Q1=2A+1.962=2A+3.84=83.84Q2=1.961.962+4AC/(A+C)=1.963.84+4AC/(A+C)=3.84Q3=2(A+C+1.962)=2(A+C)+7.68=87.68100% (Q1-Q2)/Q3=91.24%100%(Q1+Q2)/Q3=100%靈敏度95%得分可信區間為(91.24%, 100%)特異性：Q1=2D+1.962=2D+3.84=123.84Q2=1.961.962+4BD/(B+D)=1.963.84+4BD/(B+D)=3.84Q3=2(B+D+1.962)=2(B+D)+7.68=127.

10、68100% (Q1-Q2)/Q3=93.98%100%(Q1+Q2)/Q3=100%特異性95%得分可信區間為(93.98%, 100%)二、重復性驗證1、日內重復性：使用低值、中值、高值樣本，分別在相同的檢測條件下(儀器設備、實驗 人員)，對同一批號試劑進行同一天20次測量，計算均值，SD及CV。試劑批號：2016055811恒溫箱編號：Q1-n-F00-0966洗板機編號：01-口 -F00-1432酶標儀編號：OB-02-13實驗人：夏詩附實驗日期：2016.07.06序號12345678910OD值低值0.5900.6930.6380.6110.7690.6830.5890.5320

11、.6810.619中值1.1881.1541.2171.1741.3391.2381.1311.2401.2481.346高值2.1882.1622.4252.2872.2732.3542.1602.2602.4042.522序號11121314151617181920OD值低值0.5700.6780.6340.5800.6350.5440.6180.6540.5950.546中值1.2531.3831.3521.2861.2291.2781.3221.2351.1761.251高值2.4312.2752.3332.2232.3582.2182.3612.2672.3892.263低值樣本：均

12、值X1=0.623:SD=0.059,CV=9.5%中值樣本：均值X2=1.276、SD2=0.070,CV2=5.5%高值樣本：均值冷=2.312,SDb=0.097,CV3=4.2%2、日間重復性：使用低值、中值、高值樣本，分別在相同的檢測條件下(儀器設備、實驗 人員)，對同一批號試劑進行 20天，每天1次測量，計算均值，SD及CV。試劑批號：2016055811恒溫箱編號：01- 口 -F00-0966洗板機編號：01-口 -F00-1432酶標儀編號：OB-02-13實驗人：夏詩附日期07.0607.0707.0807.0907.1007.1107.1207.1307.1407.15O

13、D值低值0.6120.5560.5600.6500.6390.6250.6040.6080.5010.597中值1.1681.1671.2451.4521.3431.2701.3781.2681.1731.224高值2.2552.1912.2262.3362.1712.1002.1832.3902.2102.207日期07.1607.1707.1807.1907.2007.2107.2207.2307.2407.25OD值低值0.6820.6460.7180.6630.6140.5870.6500.5890.6110.546中值1.2731.1461.2471.1741.2971.2441.2

14、781.2031.2141.208高值2.1962.0982.2722.1832.2832.1642.3082.2672.1692.387低值樣本：均值Xi=0.631,SD=0.050,CVi=7.9%中值樣本：均值為=1.228,SD2=0.077,CV2=6.3%高值樣本：均值X3=2.233,SD3=0.082,CV3=3.7%3、儀器設備重復性：使用低值、中值、高值樣本，分別在相同的實驗人員，不同的儀器設 備中對同一批號試劑進行同一天20次測量，計算均值，SD及CV。試劑批號：2016055811洗板機 01: 01-口-F00-1432洗板機 02: 01-n-F00-1431實驗

15、人員：夏詩兩恒溫箱編號：01- 口 -F00-0966酶標儀編號：OB-02-13實驗員01010101010101010101OD值低值0.6060.6580.5890.5650.6670.6130.5740.6270.6260.563中值1.1891.2481.1931.2571.2861.2451.2041.2241.1471.203高值2.2462.2932.3002.2572.2462.1952.3152.2752.1682.305實驗員02020202020202020202OD值低值0.6130.5930.5660.6030.6630.6360.5960.5540.5120.57

16、1中值1.2531.1871.2211.2361.3711.2631.2071.2191.1691.280高值2.1842.2512.2362.1682.2712.4152.3292.2932.1842.314低值樣本：均值X1=0.591.SDi=0.040,CV1=6.8%中值樣本：均值X2=1.241、SD2=0.049,CV2=3.9%高值樣本：均值X3=2.264.SD3=0.063,CV3=2.8 %試劑批號：2016055811恒溫箱 01: 01-口-F00-0966恒溫箱 02: 01-n-F06-6172洗板機編號：01-口 -F00-1432實驗人員：夏詩兩酶標儀編號：O

17、B-02-13實驗員01010101010101010101OD值低值0.5580.6590.6290.5470.6740.6380.5570.6270.5640.668中值1.2351.3621.2451.1591.2831.3151.2461.2801.3311.211高值2.3742.4332.2522.1812.2922.3072.2262.2222.1782.317實驗員02020202020202020202OD值低值0.6010.6010.5840.5820.5300.6120.6990.6570.5720.594中值1.3731.2851.2661.2061.1481.1921

18、.2811.2741.3291.248高值2.0872.1882.1862.2262.0912.2972.3832.2722.1662.388低值樣本：均值X1=0.603:SDi=0.047, CV1=7.8%中值樣本：均值X2=1.260:SD2=0.062, CV2=4.9%高值樣本：均值改=2.228, SD3= 0.096, CV3= 4.3 %4、實驗人員操作重復性：使用低值、中值、高值樣本，分別在相同的儀器設備中，不同的實驗人員對同一批號試劑進行 20次隨機測量，計算均值，SD及CV。試劑批號：2016055811實驗員01:夏詩雨實驗員02:張雪芳洗板機編號：01-口 -F00

19、-1432恒溫箱編號：01- 口 -F00-0966酶標儀編號：OB-02-13實驗員01010101010101010101OD值低值0.6310.6110.6760.6270.5930.5450.6490.5900.5070.620中值1.2621.2441.3631.2761.1991.2421.2931.3461.2401.267高值2.5002.2272.1382.2822.1192.1772.2952.3552.2892.196實驗員02020202020202020202OD值低值0.5790.6840.6380.5960.5290.6280.6720.6140.7060.625

20、中值1.2841.3771.2521.2141.1591.3351.2521.2251.1141.193高值2.2302.2932.4522.3582.2802.4342.2782.2042.2912.183低值樣本：均值X1 =0.627,SDi=0.051,CV1 =8.1 %中值樣本：均值X2=1.240,SD2=0.066,CV2=5.3%高值樣本：均值X3=2.300,SD3=0.102,CV3=4.4 %三、臨界點驗證使用有證標準物質，如衛生部臨檢中心或者康側斯坦質控品， 使用正常人血清為基質稀 釋液，進行梯度稀釋，進行重復檢測以確定可以獲得近50噂日性及近50%#性結果的那個稀釋

21、度，確定臨界點（C50）。試劑批號：2016095818標準品名稱：康徹斯坦質控品標準品批號：201302001洗板機編號：01-口 -F00-1432恒溫箱編號：01- 口 -F00-0966酶標儀編號： OB-02-13實驗人：夏詩附實驗日期：2016.09.23序號123456稀釋液量（ul）0200400400500600稀釋比例01:101:201:301:401:50終濃度（NCU/ml）80.80.40.270.20.16檢測Z果S/C.O.2.7300.8950.5260.2910.1680.119預測臨界點曲線方程式：y=1.213x-0.044預測臨界點（C50）： 0.15NCU/ml 臨界值：0.140HCV臨界點驗證數據