1、藥物血漿濃度的測(cè)定及半衰期的計(jì)算姓名：學(xué)號(hào)：班級(jí)：一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?. 以磺胺嘧啶鈉為例學(xué)習(xí)測(cè)定藥物血漿濃度、藥物血漿半衰期（t1/2）及表觀分布容積（Vd）等藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的基本方法。2. 理解常用藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的臨床意義。二、實(shí)驗(yàn)材料1. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：家兔1只2. 器材：試管24支，移液吸管（10ml1支，1ml2支，2ml7支），移液器1支，吸頭若干，試管夾，試管架，離心機(jī)，722型分光光度計(jì)，手術(shù)剪，眼科剪，止血鉗，動(dòng)脈夾，眼科鑷,縫線，藥棉，紗布，捆扎繩，注射器（10ml1支，5ml1支）。3. 藥品：5%磺膠略啶鈉溶液，7.5%三氯醋酸溶液，0.5%亞硝酸鈉溶液，0.5%麝香草酚鈉溶液（溶于20

2、%氫氧化鈉濃度內(nèi)），草酸鉀結(jié)晶，20%烏拉坦容液，肝索注射液，生理鹽水。三、實(shí)驗(yàn)方法和步驟1. 取試管6支，依次用4、A2、A3A6標(biāo)記，各加入7.5%三氯醋酸2ml備用。12362. 取試管6支，依次用B、B2、B3B6標(biāo)記，各加人草酸鉀結(jié)晶幾粒。12363. 取家兔1只，稱重，以20%烏拉坦溶液1g/kg（5ml/kg）耳緣靜脈注射麻醉，背位固定于手術(shù)臺(tái)上，正中切開頸部皮膚，分離一側(cè)頸總動(dòng)脈，結(jié)扎其遠(yuǎn)心端，并在近心端夾上動(dòng)脈夾，以阻斷血流，再將放血導(dǎo)管向心臟方向插人頸總動(dòng)脈內(nèi)，用線打活結(jié)固定。4. 松開動(dòng)脈夾，放血約1ml,置于B管，迅速搖勻抗凝，然后耳緣靜脈注人5%磺胺嘧啶鈉150mg/

3、kg（3ml/kg），記錄注完時(shí)間（準(zhǔn)確到分鐘）。5. 給藥后5、10、20、30、40min,用同樣方法放血約1ml，分別置于B2、B3、B4、B5、B6管，23456迅速搖勻，記錄取血標(biāo)本的準(zhǔn)確時(shí)間，然后BB管以1500轉(zhuǎn)/min離心5min,準(zhǔn)確吸16取上層血漿50川加人相應(yīng)的各A管，各管以1500轉(zhuǎn)1分離心5min,分別取離心后的上清液1.5ml加0.5%亞硝酸鈉溶液0.5ml搖勾，再加0.5%麝香草酚1ml,可見橙紅色反應(yīng).以給藥前血樣為空白對(duì)照,用722型分光光度計(jì)于525m波長(zhǎng)處進(jìn)行比色,測(cè)定各取血時(shí)間點(diǎn)的光密度,用標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算磺胺嘧啶鈉濃度6.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作用免血配制不同濃

4、度的磺胺嘧啶鈉溶液，按方法5項(xiàng)進(jìn)行重氮化及偶聯(lián)反應(yīng)，分別測(cè)定吸光度。以磺胺嘧啶鈉溶液濃度為橫坐標(biāo)，其吸光度為縱坐標(biāo)，進(jìn)行直線回歸，求標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程。四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果給藥后不同時(shí)間點(diǎn)的磺胺嘧啶鈉濃度管號(hào)123456給藥時(shí)間0.0580.0980.0860.0750.0740.075吸光度值/30.712423.707117.285516.701717.2855磺胺嘧啶鈉濃度/1.48731.37491.23771.22281.2377對(duì)數(shù)磺胺嘧啶鈉濃度/515204060K和換算五、實(shí)驗(yàn)討論1.磺胺類藥物檢測(cè)機(jī)制磺胺類藥物為對(duì)氨基苯磺酰胺類化合物，在酸性溶液中，可與亞硝酸鈉起重氮反應(yīng)，產(chǎn)生重氮鹽。

5、在堿性溶液中，重氮鹽可與酚類化合物（麝香草酚）起偶氮反應(yīng)，形成橙紅色的偶氮化合物。采用分光光度檢測(cè)法，在525nm波長(zhǎng)進(jìn)行比色測(cè)定。根據(jù)Beer-Lambert定律，藥物濃度與光密度呈正比關(guān)系2.一級(jí)消除動(dòng)力學(xué)規(guī)律多數(shù)藥物在體內(nèi)按一級(jí)動(dòng)力學(xué)的規(guī)律而消除，靜脈注射給藥后，不同時(shí)間采血，測(cè)定血漿濃度，以藥物濃度的對(duì)數(shù)值為縱坐標(biāo)，時(shí)間為橫坐標(biāo)，其藥時(shí)曲線常呈直線。A.Zer-oreferklfietdcaBB42Ozedjju里畫蕙“富BrupEuo-d1UO1000Time圖1.零級(jí)&一級(jí)消除動(dòng)力學(xué)曲線該直線的方程為：lgCt=lgC°+(-K/2.203)t根據(jù)此曲線方程可求出斜率b值。消除速率常數(shù)K=-2.303b,進(jìn)而求出血漿半衰期。藥物血漿半衰期為t1/2=0.693/K六、實(shí)驗(yàn)反思實(shí)驗(yàn)過程中，家兔在實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)生死亡，在實(shí)驗(yàn)過程中每次取血后從動(dòng)脈導(dǎo)管中反推肝素，而肝素并不是造成家兔死亡的主因。推測(cè)是由于反復(fù)逆流推送肝素，可能使心肌前