1、會計學1生物學分解纖維素的微生物的分離生物學分解纖維素的微生物的分離一、基礎知識一、基礎知識纖維素酶纖維素酶纖維二糖纖維二糖C C1 1酶、酶、CxCx酶酶葡萄糖苷酶葡萄糖苷酶葡萄糖葡萄糖纖維素纖維素一、基礎知識一、基礎知識濾濾紙紙崩崩潰潰法法體會纖維素酶作用的實驗：體會纖維素酶作用的實驗：（2 2）纖維素分解菌的篩選）纖維素分解菌的篩選1、篩選纖維素分解菌的方法、篩選纖維素分解菌的方法_。該方法可以通過該方法可以通過_反應直接篩選。反應直接篩選。剛果紅染色法剛果紅染色法顏色顏色2、其原理是：剛果紅可以與纖維素形成、其原理是：剛果紅可以與纖維素形成_，當纖維素被，當纖維素被_分解后，分解后，紅

2、色復合物無法形成，出現以紅色復合物無法形成，出現以_為中心的為中心的_，可以通過，可以通過_ 來篩選纖維素分解菌。來篩選纖維素分解菌。紅色復合物紅色復合物纖維素酶纖維素酶纖維素分解菌纖維素分解菌 透明圈透明圈是否產生透明圈是否產生透明圈可根據是否可根據是否產生產生透明圈透明圈來篩選纖維來篩選纖維素分解菌素分解菌練一練：練一練：1.1.下列關于纖維素酶的說法，錯誤的是下列關于纖維素酶的說法，錯誤的是A. 纖維素酶是一種復合酶，至少包括三種纖維素酶是一種復合酶，至少包括三種B. 纖維素酶可把纖維素分解成葡萄糖纖維素酶可把纖維素分解成葡萄糖C. 纖維素酶可用于去掉植物的細胞壁纖維素酶可用于去掉植物的

3、細胞壁D. 葡萄糖苷酶可把纖維素分解成葡萄糖葡萄糖苷酶可把纖維素分解成葡萄糖2.利用剛果紅染色法可以篩選出纖維素利用剛果紅染色法可以篩選出纖維素分解菌，下列說法錯誤的是分解菌，下列說法錯誤的是A. 剛果紅能與纖維素形成紅色復合物剛果紅能與纖維素形成紅色復合物 B. 剛果紅能與纖維二糖形成紅色復合物剛果紅能與纖維二糖形成紅色復合物 C. 剛果紅不能與葡萄糖形成紅色復合物剛果紅不能與葡萄糖形成紅色復合物D. 若培養基上產生了透明圈，則說明已篩若培養基上產生了透明圈，則說明已篩選出了纖維素分解菌選出了纖維素分解菌土壤取樣土壤取樣選擇培養選擇培養梯度稀釋梯度稀釋將樣品涂布到鑒將樣品涂布到鑒別纖維素分解

4、菌別纖維素分解菌的培養基上的培養基上挑選產生挑選產生透明圈的透明圈的菌落菌落（操作流程（操作流程）（此步可省略（此步可省略）旁欄思考題旁欄思考題本實驗流程與課題本實驗流程與課題2中中的實驗流程有哪些異同？的實驗流程有哪些異同？課題課題2是將土樣制成的菌懸液直接涂布是將土樣制成的菌懸液直接涂布在以尿素為唯一氮源的選擇培養基上在以尿素為唯一氮源的選擇培養基上，直接分離得到菌落，直接分離得到菌落本課題通過選擇培養，使纖維素分解本課題通過選擇培養，使纖維素分解菌得到增殖以后，再將菌液涂布到選菌得到增殖以后，再將菌液涂布到選擇培養基上。擇培養基上。【資料一資料一】土壤取樣土壤取樣 富含富含纖維素纖維素旁

5、欄思考題旁欄思考題為什么要在富含纖維為什么要在富含纖維素的環境中找纖維素分解菌？素的環境中找纖維素分解菌？在富含纖維素的環境中纖維素分在富含纖維素的環境中纖維素分解菌的含量相對提高解菌的含量相對提高旁欄思考題旁欄思考題將濾紙埋在土壤中有將濾紙埋在土壤中有什么作用？你認為濾紙應該埋進土壤什么作用？你認為濾紙應該埋進土壤多深？多深？ 人工設置纖維素分解菌生存的適人工設置纖維素分解菌生存的適宜環境，使纖維素分解菌相對聚集宜環境，使纖維素分解菌相對聚集。將紙埋于深約。將紙埋于深約10cm的腐殖土壤中的腐殖土壤中。【資料二資料二】選擇培養選擇培養閱讀資料二閱讀資料二“選擇培養基選擇培養基”，回，回答以下

6、幾個問題：答以下幾個問題：液體液體沒有添加瓊脂成分沒有添加瓊脂成分2、該培養基對微生物、該培養基對微生物_（具有，不具有）選擇作用。如果具有，不具有）選擇作用。如果具有，其選擇機制是具有，其選擇機制是_。以纖維素粉為唯一碳源，能分解以纖維素粉為唯一碳源，能分解纖維素的微生物可以大量繁殖纖維素的微生物可以大量繁殖 具有具有 若設置一個對照實驗說明選擇培若設置一個對照實驗說明選擇培養的作用，應控制的變量是將養的作用，應控制的變量是將_改為改為_。3、你能否設計一個對照實驗，、你能否設計一個對照實驗，說明選擇培養基的作用？說明選擇培養基的作用？葡萄糖葡萄糖纖維素粉纖維素粉 其目的是增加纖維素分解其目

7、的是增加纖維素分解菌的濃度，菌的濃度，以確保能夠從樣品以確保能夠從樣品中分離到所需要的微生物。中分離到所需要的微生物。【資料三資料三】剛果紅染色法剛果紅染色法方法一：方法一：先培養微生物，再加先培養微生物，再加入剛果紅進行顏色反應入剛果紅進行顏色反應方法二：方法二：在倒平板時就加入剛在倒平板時就加入剛果紅果紅染色法染色法優點優點缺點缺點方法一方法一（后加剛后加剛果紅果紅） 方法二方法二（先加剛（先加剛果紅）果紅） 顏色反應基本顏色反應基本上是纖維素分上是纖維素分解菌的作用解菌的作用 操作繁瑣，剛操作繁瑣，剛果紅會使菌落之間果紅會使菌落之間發生混雜發生混雜操作簡便，操作簡便，不存在菌落不存在菌落

8、混雜問題混雜問題 產生淀粉酶的產生淀粉酶的微生物也產生模糊微生物也產生模糊透明圈，有些微生透明圈，有些微生物能降解色素，形物能降解色素，形成明顯的透明圈。成明顯的透明圈。思考：這兩種方法各有哪些優點與不足思考：這兩種方法各有哪些優點與不足選擇培養的操作方法選擇培養的操作方法將土樣加入裝有將土樣加入裝有30ml選擇培養基選擇培養基的錐形瓶中，將錐形瓶固定在的錐形瓶中，將錐形瓶固定在搖搖床床上，在一定溫度下上，在一定溫度下震蕩震蕩培養培養12天，直至培養液變渾濁。也天，直至培養液變渾濁。也可重復選擇培養。可重復選擇培養。思考：據思考：據“搖床搖床”、“震蕩震蕩”分析纖維分析纖維素分解菌的異化作用類

9、型？素分解菌的異化作用類型？旁欄思考題旁欄思考題為什么選擇培養能為什么選擇培養能夠夠“濃縮濃縮”所需的微生物？所需的微生物？ 在選擇培養的條件下，可以使那些在選擇培養的條件下，可以使那些能夠適應這種營養條件的微生物得能夠適應這種營養條件的微生物得到迅速繁殖，而那些不適應這種營到迅速繁殖，而那些不適應這種營養條件的微生物的繁殖被抑制，因養條件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到此可以起到“濃縮濃縮”的作用。的作用。指微生物的種類少了，而指微生物的種類少了，而某些微生物的數量多了某些微生物的數量多了 1.1.培養基的制作是否合格以及選擇培養基是否篩選培養基的制作是否合格以及選擇培養基是否篩選出菌落出

10、菌落 對照的培養基在培養過程中沒有菌落生長則說明對照的培養基在培養過程中沒有菌落生長則說明培養基制作合格。培養基制作合格。 如果觀察到產生透明圈的菌落，則說明可能獲得如果觀察到產生透明圈的菌落，則說明可能獲得了分解纖維素的微生物。了分解纖維素的微生物。 發酵產纖維素酶發酵產纖維素酶 液體液體 固體固體 葡萄糖葡萄糖 一、基礎知識一、基礎知識纖維二糖纖維二糖C C1 1酶、酶、CxCx酶酶葡萄糖苷酶葡萄糖苷酶葡萄糖葡萄糖纖維素纖維素一、基礎知識一、基礎知識練一練：練一練：1.1.下列關于纖維素酶的說法，錯誤的是下列關于纖維素酶的說法，錯誤的是A. 纖維素酶是一種復合酶，至少包括三種纖維素酶是一種復合酶，至少包括三種B. 纖維素酶可把纖維素分解成葡萄糖纖維素酶可把纖維素分解成葡萄糖C. 纖維素酶可用于去掉植物的細胞壁纖維素酶可用于去掉植物的細胞壁D. 葡萄糖苷酶可把纖維素分解成葡萄糖葡萄糖苷酶可把纖維素分解成葡萄糖 1.1.培養基的制作是否