1、實驗九實驗九 病毒及其他微生物病毒及其他微生物 微生物學(xué)試驗微生物學(xué)試驗 實驗?zāi)康囊髮嶒災(zāi)康囊?u1.1.掌握梅毒螺旋體掌握梅毒螺旋體RPRRPR試驗原理試驗原理u2.2.熟悉雞胚接種方法熟悉雞胚接種方法u3.3.熟悉膠體金標(biāo)記抗體法檢測熟悉膠體金標(biāo)記抗體法檢測HBsAgHBsAg原理原理u4.4.熟悉梅毒螺旋體、鉤端螺旋體的形態(tài)熟悉梅毒螺旋體、鉤端螺旋體的形態(tài)u5.5.了解常用的病毒培養(yǎng)方法了解常用的病毒培養(yǎng)方法u6.6.了解其它常見支原體、衣原體、螺旋了解其它常見支原體、衣原體、螺旋體、立克次體的形態(tài)體、立克次體的形態(tài)RPR試驗試驗RPRRPR試驗：快速血漿反應(yīng)素試驗試驗：快速血漿反應(yīng)

2、素試驗 原理：原理：梅毒患者血清中存在反應(yīng)素，可梅毒患者血清中存在反應(yīng)素，可與生物組織的脂質(zhì)發(fā)生反應(yīng)。則用正常牛心與生物組織的脂質(zhì)發(fā)生反應(yīng)。則用正常牛心肌的心脂質(zhì)代替螺旋體作為抗原，測定病人肌的心脂質(zhì)代替螺旋體作為抗原，測定病人血清中的反應(yīng)素。把抗原類脂質(zhì)吸附炭顆粒血清中的反應(yīng)素。把抗原類脂質(zhì)吸附炭顆粒上，與上，與1 1滴病人血清在滴病人血清在RPRRPR上混合，如出現(xiàn)間上混合，如出現(xiàn)間接凝集炭說明是陽性血清接凝集炭說明是陽性血清RPR試驗結(jié)果試驗結(jié)果1.1.陽性；陽性； 2.2.陰性陰性病毒培養(yǎng)方法病毒培養(yǎng)方法 病毒必須在活細(xì)胞內(nèi)才能增殖，根病毒必須在活細(xì)胞內(nèi)才能增殖，根據(jù)病毒的不同，可選用

3、動物接種、雞據(jù)病毒的不同，可選用動物接種、雞胚接種、組織培養(yǎng)等方法。胚接種、組織培養(yǎng)等方法。 組織培養(yǎng)法有器官培養(yǎng)、移植培組織培養(yǎng)法有器官培養(yǎng)、移植培養(yǎng)、細(xì)胞培養(yǎng)。細(xì)胞培養(yǎng)最常用于培養(yǎng)、細(xì)胞培養(yǎng)。細(xì)胞培養(yǎng)最常用于培養(yǎng)病毒。養(yǎng)病毒。雞胚接種雞胚接種膠體金檢測膠體金檢測HBsAgHBsAg結(jié)果分析結(jié)果分析 鉤端螺旋體鉤端螺旋體u營養(yǎng)要求較高，營養(yǎng)要求較高，常用含常用含1010兔血兔血清的清的KorthofKorthof培養(yǎng)培養(yǎng)基。基。u適宜生長溫度為適宜生長溫度為28283030，最適，最適pH7.2pH7.27.47.4u生長緩慢生長緩慢梅毒螺旋體梅毒螺旋體（T.pallidum）u兩端尖直u人

4、工培養(yǎng)尚未 成功沙眼衣原體沙眼衣原體嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生，有獨寄生，有獨特發(fā)育周期特發(fā)育周期，能通過細(xì)，能通過細(xì)菌濾器的原菌濾器的原核細(xì)胞型微核細(xì)胞型微生物。生物。班疹傷寒立克次體班疹傷寒立克次體 班疹傷寒立克次體班疹傷寒立克次體 支原體支原體 沒有細(xì)胞壁，呈高度多形態(tài)性，能通過沒有細(xì)胞壁，呈高度多形態(tài)性，能通過濾器，可用人工培養(yǎng)基培養(yǎng)增殖的一類最小濾器，可用人工培養(yǎng)基培養(yǎng)增殖的一類最小的原核細(xì)胞型微生物。的原核細(xì)胞型微生物。 問題與討論問題與討論1.病毒的培養(yǎng)方法有哪些？各有何優(yōu)缺點？2.如何觀察病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖的檢測指標(biāo)。3.乙肝金標(biāo)法的檢測原理、結(jié)果判定。4.RPR試驗的原理、結(jié)果判斷及意義如何？5.解