1、n一.考試題型介紹n二.內(nèi)容串講n三.每章重點n四.習(xí)題講解總復(fù)習(xí)一.考試題型介紹(一). 名詞解釋題（310=30）(二). 簡答題（665=30）(三)計算題（2-3題,20）(四). 闡述題(102=20) 二.內(nèi)容串講n第一章 緒論（一）生化產(chǎn)品檢測與分析的目的和意義（二）生化產(chǎn)品檢測與分析的內(nèi)容（三）生化產(chǎn)品檢測與分析的方法第二章 生物工程分析的基礎(chǔ)知識（一）樣品的采集、制備和保存（二）生物樣品預(yù)處理的方法（三）誤差及分析方法的選擇重點：進行樣品分析的流程，樣品的制備與預(yù)處理方法，分析方法的選擇原則。從哪些方法來保證測定結(jié)果的準(zhǔn)確度。第4章 化學(xué)分析法n（一）概述n（二）酸堿測定法n

2、（三）氧化還原滴定法n（四）重量法n重點：蛋白質(zhì)及氨基酸的測定中的凱氏定氮法、還原糖的直接滴定法以及脂類測定的經(jīng)典方法（索氏提取法）的原理、方法及注意事項。第5章 紫外-可見吸收光譜法n（一）紫外-可見吸收光譜定義 檢測范圍n（二）朗伯-比耳定律n（三）紫外-可見分光光度計n（四）分析條件的選擇n（五）測定方法n（六）紫外-可見吸收光譜的應(yīng)用n重點：光的吸收定律；分析條件的選擇。生色團、助色團，紅移、藍移的定義。第6章 熒光分光光度法n（一）熒光的產(chǎn)生n（二）激發(fā)光譜與熒光光譜n（三）熒光分析儀器n（四）熒光分析方法特點及應(yīng)用n重點：激發(fā)光譜與熒光光譜；具有熒光性質(zhì)的分子的結(jié)構(gòu)特征，熒光分析方

3、法與紫外可見分光光度法的區(qū)別與聯(lián)系。第7章 薄層色譜法n（一）概述n（二）薄層色譜的基本原理n（三）薄層色譜的操作技術(shù)n（四）薄層色譜法定量分析n（五）薄層色譜法在生物工程分析中的應(yīng)用n重點：薄層色譜的基本原理和薄層色譜的操作技術(shù)；比移值，分配系數(shù)，分離度的含義及應(yīng)用。第8章 氣相色譜分析法n（一）概述和基本理論n（二）定性分析方法n（三）定量分析方法n（四）氣相色譜檢測器n（五）氣相色譜的應(yīng)用n重點：塔板理論，定量方法的分類特點及適應(yīng)范圍、氣相色譜儀結(jié)構(gòu)組成和氣相色譜檢測器的選擇和應(yīng)用。第9章 高效液相色譜法n（一）高效液相色譜法的特點n（二）高效液相色譜的基本理論n（三）高效液相色譜的固定

4、相和流動相n（四）液相色譜儀n（五）高效液相色譜的應(yīng)用n重點：高效液相色譜儀的組成部分及作用原理；檢測器的分類及應(yīng)用范圍；固定相和流動相的選擇；氣相色譜與液相色譜的區(qū)別與聯(lián)系。第10章 電泳法和高效毛細管電泳法n（一）概述n（二）電泳法和高效毛細管電泳法的基本理論n（三）電泳儀和高效毛細管電泳儀n（四）應(yīng)用示例n重點：電泳法和高效毛細管電泳法的分離模式第12章 酶法分析n12.1 概述n12.2 酶法分析方法和應(yīng)用示例n12.3 酶聯(lián)免疫分析法重點:酶法分析的方法和應(yīng)用范圍第14章 生物傳感器n（一）概述n（二）酶傳感器n（三）核酸傳感器n（四）幾種新型生物傳感器n重點：生物傳感器的定義模型和

5、制作的主要方法以及電化學(xué)方法中常用的電極類型。n生物工程分析的定義： 是一門研究和討論生物工程領(lǐng)域所需要的分析檢驗技術(shù)的方法、原理、儀器裝置、操作要點以及應(yīng)用范圍等為主要內(nèi)容的工具學(xué)科。第1章 緒論三.每章重點2022-4-23分分析析化化學(xué)學(xué)化學(xué)分析儀儀器器分分析析酸堿滴定配位滴定氧化還原滴定沉淀滴定電化學(xué)分析光學(xué)分析色譜分析波譜分析重量分析重量分析滴定分析滴定分析電導(dǎo)、電位、電解、庫侖極譜、伏安發(fā)射、吸收，熒光、光度氣相、液相、離子、超臨界、薄層、毛細管電泳紅外、核磁、質(zhì)譜1.理化檢驗篇(1)生化產(chǎn)品營養(yǎng)成分的測定(2)水分、礦物元素的測定(3)酶活力的測定生物工程分析的主要內(nèi)容生物工程分

6、析的主要內(nèi)容:第第1章章.緒論緒論 2.2. (1) (1)紫外、可見吸收光譜法紫外、可見吸收光譜法 (2)(2)熒光分光光度法熒光分光光度法 (3) (3) 薄層色譜法薄層色譜法 (4) (4)氣相色譜法氣相色譜法 (5)(5)高效液相色譜法高效液相色譜法 (6)(6)電泳法和高效毛細管電泳法電泳法和高效毛細管電泳法 (7) (7)生物傳感器生物傳感器第2章 生物工程分析的基礎(chǔ)知識一.樣品分析流程: 樣品的采集、制備和保存，樣品的預(yù)處樣品的采集、制備和保存，樣品的預(yù)處理，成分檢驗與分析，數(shù)據(jù)處理，整理理，成分檢驗與分析，數(shù)據(jù)處理，整理報告。報告。二二.正確采樣，必須遵守的原則：正確采樣，必須

7、遵守的原則：代表性代表性三三.預(yù)處理方法分類：預(yù)處理方法分類：1.溶解法溶解法2.蒸餾法蒸餾法（1）常壓蒸餾）常壓蒸餾（2）減壓蒸餾（3）水蒸氣蒸餾（4）分餾（5）掃集共蒸餾法）掃集共蒸餾法3.有機物破壞法有機物破壞法干法灰化干法灰化濕法消化濕法消化:是加入是加入強氧化劑強氧化劑（如濃硝酸、（如濃硝酸、高氯酸、高錳酸鉀等），使樣品消化，而被測物質(zhì)呈高氯酸、高錳酸鉀等），使樣品消化，而被測物質(zhì)呈離子狀態(tài)保存在溶液中。離子狀態(tài)保存在溶液中。4.溶劑提取法溶劑提取法溶劑分層法溶劑分層法浸泡法浸泡法鹽析鹽析5.色層分離法色層分離法6.其它的生化分離提純技術(shù)其它的生化分離提純技術(shù)四四. .分析方法的評價

8、指標(biāo)分析方法的評價指標(biāo) 在研究一個分析方法的好壞時，通常用在研究一個分析方法的好壞時，通常用精密精密度、準(zhǔn)確度和靈敏度度、準(zhǔn)確度和靈敏度三項指標(biāo)評定。此外還三項指標(biāo)評定。此外還考慮線性和線性范圍、耐用性等考慮線性和線性范圍、耐用性等. .1.精密度精密度 是指對同一樣品多次測定，每次測定是指對同一樣品多次測定，每次測定結(jié)果與均值的符合程度。結(jié)果與均值的符合程度。2. 準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度 指測定值與真值之間的符合程度。指測定值與真值之間的符合程度。3. 靈敏度靈敏度 是指化學(xué)反應(yīng)中是指化學(xué)反應(yīng)中能檢出的最低量。能檢出的最低量。n4. 特異性特異性 指分析測定中對某一成分起反指分析測定中對某一成分起反應(yīng)

9、，其他物質(zhì)對反應(yīng)無影響或基本無影應(yīng)，其他物質(zhì)對反應(yīng)無影響或基本無影響。響。二二. . 提高分析精確度的方法提高分析精確度的方法( (控制和消除誤差的方法控制和消除誤差的方法) )n1 1 正確選取樣品的量正確選取樣品的量 n2 2 增加平行測定次數(shù)增加平行測定次數(shù) n3 3 對照實驗對照實驗n4 4 空白實驗空白實驗n5 5 回收實驗回收實驗n6 6 校正儀器和標(biāo)定試劑校正儀器和標(biāo)定試劑n7 7 嚴(yán)格遵守操作規(guī)程嚴(yán)格遵守操作規(guī)程n（二）回收試驗（二）回收試驗 目的是檢測誤差目的是檢測誤差，以衡量分，以衡量分析方法的準(zhǔn)確度。析方法的準(zhǔn)確度。是在樣品中加入一定量被是在樣品中加入一定量被測物質(zhì)，然后

10、用同樣方法測定，測得值與理測物質(zhì)，然后用同樣方法測定，測得值與理論值之比乘以論值之比乘以100%即為回收率即為回收率，合格的回，合格的回收率應(yīng)為收率應(yīng)為100%5 %。第4章 化學(xué)分析法4.2 酸堿滴定法蛋白質(zhì)系數(shù):表示1份含氮量相當(dāng)于蛋白質(zhì)含量的份數(shù). 不同的產(chǎn)品蛋白質(zhì)其氨基酸構(gòu)成比例及方式不同，故不同產(chǎn)品的蛋白質(zhì)系數(shù)有差異。蛋白質(zhì)的測定方法蛋白質(zhì)的測定方法*凱氏定氮法雙縮脲比色法紫外吸收法Folin-酚比色法染料染色法中性醋酸鉛中性醋酸鉛乙酸鋅和亞鐵氰化鉀溶液乙酸鋅和亞鐵氰化鉀溶液硫酸銅和氫氧化鈉溶液硫酸銅和氫氧化鈉溶液還有堿性醋酸鉛、還有堿性醋酸鉛、氫氧化鋁溶液、活性炭等。氫氧化鋁溶液、

11、活性炭等。糖的測定常用澄清劑的種類糖的測定常用澄清劑的種類鐵氰化鉀法鐵氰化鉀法4.3.1 還原糖的測定-直接滴定法( (斐林氏容量法斐林氏容量法) )n原理原理 將一定量的將一定量的堿性酒石酸銅甲、乙液堿性酒石酸銅甲、乙液等量混合，立即生成天藍色等量混合，立即生成天藍色的氫氧化銅沉淀；沉淀很快與酒石酸鉀反應(yīng)，生成深藍色的可的氫氧化銅沉淀；沉淀很快與酒石酸鉀反應(yīng)，生成深藍色的可溶性酒石酸鉀鈉銅絡(luò)合物。溶性酒石酸鉀鈉銅絡(luò)合物。 在加熱條件下，以次甲基藍作為指示劑，用樣液滴定，樣液中在加熱條件下，以次甲基藍作為指示劑，用樣液滴定，樣液中的的還原糖與酒石酸鉀鈉銅還原糖與酒石酸鉀鈉銅反應(yīng)，生成紅色的反應(yīng)

12、，生成紅色的氧化亞銅氧化亞銅沉淀；沉淀； 這種沉淀與亞鐵氰化鉀絡(luò)合成可溶的無色絡(luò)合物；二價銅全部這種沉淀與亞鐵氰化鉀絡(luò)合成可溶的無色絡(luò)合物；二價銅全部被還原后，稍過量的還原糖把次甲基藍還原，溶液由蘭色變?yōu)楸贿€原后，稍過量的還原糖把次甲基藍還原，溶液由蘭色變?yōu)闊o色，即為滴定終點；無色，即為滴定終點； 根據(jù)樣液消耗量可計算出還原糖含量。根據(jù)樣液消耗量可計算出還原糖含量。4224(1)2()CuSONaOHCu OHNa SO 此法測得的是總還原糖量。此法測得的是總還原糖量。 在樣品處理時，在樣品處理時，不能用銅鹽作為澄清劑，不能用銅鹽作為澄清劑，以免樣液中以免樣液中引入引入CuCu2+2+，得到錯

13、誤的結(jié)果。，得到錯誤的結(jié)果。 堿性酒石酸銅堿性酒石酸銅甲液和乙液應(yīng)分別貯存，用時才混合甲液和乙液應(yīng)分別貯存，用時才混合，否則酒石酸鉀鈉銅絡(luò)合物長期在堿性條件下會慢慢分否則酒石酸鉀鈉銅絡(luò)合物長期在堿性條件下會慢慢分解析出氧化亞銅沉淀，使試劑有效濃度降低。解析出氧化亞銅沉淀，使試劑有效濃度降低。說明與討論說明與討論 滴定必須在滴定必須在沸騰條件沸騰條件下進行，其原因一是可以加快還下進行，其原因一是可以加快還原糖原糖與與CuCu2+2+的反應(yīng)速度；二是次甲基藍變色反應(yīng)是可逆的反應(yīng)速度；二是次甲基藍變色反應(yīng)是可逆的，還原型次甲基藍遇空氣中氧時又會被氧化為氧化的，還原型次甲基藍遇空氣中氧時又會被氧化為氧

14、化型。此外，氧化亞銅也極不穩(wěn)定，易被空氣中氧所氧型。此外，氧化亞銅也極不穩(wěn)定，易被空氣中氧所氧化。保持反應(yīng)液沸騰可防止空氣進入，避免次甲基藍化。保持反應(yīng)液沸騰可防止空氣進入，避免次甲基藍和氧化亞銅被氧化而增加耗糖量。和氧化亞銅被氧化而增加耗糖量。 滴定時不能隨意搖動錐形瓶，更不能把錐形瓶從熱源滴定時不能隨意搖動錐形瓶，更不能把錐形瓶從熱源上取下來滴定，以防止空氣進入反應(yīng)溶液中。上取下來滴定，以防止空氣進入反應(yīng)溶液中。樣品溶液預(yù)測的目的；一是本法對樣品溶液中還原糖樣品溶液預(yù)測的目的；一是本法對樣品溶液中還原糖濃度有一定要求濃度有一定要求(0.1%(0.1%左右左右) )，測定時樣品溶液的消耗體，

15、測定時樣品溶液的消耗體積應(yīng)與標(biāo)定葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液時消耗的體積相近，通過預(yù)積應(yīng)與標(biāo)定葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液時消耗的體積相近，通過預(yù)測可了解樣品溶液濃度是否合適，濃度過大或過小應(yīng)加測可了解樣品溶液濃度是否合適，濃度過大或過小應(yīng)加以調(diào)整，以調(diào)整，使預(yù)測時消耗樣液量在使預(yù)測時消耗樣液量在 10 mL10 mL 左右左右；5.加速灰化的方法:n(1) 改變操作方法 樣品初步灼燒后取出坩堝冷卻 在灰中加少量熱水?dāng)嚢枋顾苄喳}溶解，使包住的碳粒游離出來 蒸去水分干燥灼燒n(2) 加HNO3(1:1)或30%H2O2 使未氧化的碳粒充分氧化并且使它們生成NO2和水，這類物質(zhì)灼燒時完全消失，又不至于增加殘留物灰分重量。n

16、(3) 加乙酸鎂、硝酸鎂等，使碳粒不被包裹,同時得作空白實驗。4.5.1 總灰分的測定灰分測定步驟n在坩堝中稱取定量樣品在電爐中炭化至無煙 在馬福爐中灼燒到灰白色(灰化) 降至200 放入干燥室內(nèi)冷卻稱重灼燒1小時 冷卻到恒重n灰分%=（灰分重量/樣品重量 ）100三.脂類物質(zhì)提取劑的選擇經(jīng)典方法經(jīng)典方法索氏提取器索氏提取器虹吸管虹吸管聯(lián)接管聯(lián)接管溶劑蒸汽上升管溶劑蒸汽上升管4.常用的脂類提取劑有哪些?5.索氏提取法的原理、儀器構(gòu)造、優(yōu)點和操作過程分別是什么？索氏提取法的原理：脂肪不溶于水，易溶于乙醚、石油醚、氯仿等溶液中。用乙醚等有機溶液提取樣品中脂肪等再經(jīng)蒸發(fā)除去有機溶劑，經(jīng)稱重就可知粗脂

17、肪的含量。優(yōu)點：即用易揮發(fā)溶劑在索氏提取器里不斷地蒸發(fā)、冷凝、溶解被提取物、純?nèi)軇┰僬舭l(fā)、冷凝、溶解被提取物，一直到把被提取物提取干凈。這一方法簡單、提取完全。 儀器：索氏提取器操作過程：球瓶內(nèi)放有機溶劑，經(jīng)水浴加熱使溶劑不斷蒸發(fā)。提取筒內(nèi)裝樣品，溶劑蒸氣經(jīng)冷凝器冷凝后不斷滴入提取筒內(nèi)。溶劑在此與樣品充分接觸，溶解其中的脂肪。經(jīng)過一定時間后，溶劑不斷蒸發(fā)，冷凝，樣品受到一次次新鮮溶劑的浸泡，直到樣品中所有的脂肪完全溶出止。第第5章章 紫外紫外-可見分光光度法可見分光光度法n5.1 紫外-可見吸收光譜n5.2 朗伯朗伯-比耳定律比耳定律n5.3 紫外-可見分光光度計n5.4 分析條件的選擇分析條

18、件的選擇n5.5 紫外-可見吸收光譜的主要用途電子躍遷有哪幾種類型,這些類型各處于什么波長范圍?n,n,躍遷，200nm200nm的光的光) )，但，但當(dāng)它們與生色團相連時，就會發(fā)生當(dāng)它們與生色團相連時，就會發(fā)生n n- -共軛作用，增強生色團共軛作用，增強生色團的生色能力的生色能力( (吸收波長向長波方向移動，且吸收強度增加吸收波長向長波方向移動，且吸收強度增加) )，這，這樣的基團稱為助色團。樣的基團稱為助色團。 Alg（I0/It)=-lgT=bcA：吸光度，描述溶液對光的吸收程度；：吸光度，描述溶液對光的吸收程度；b：液層厚度：液層厚度(光程長度光程長度)，通常以，通常以cm為單位；為

19、單位；c：溶液的摩爾濃度，單位：溶液的摩爾濃度，單位molL-；：摩爾吸光系數(shù)，單位：摩爾吸光系數(shù)，單位Lmol-cm-； 或或:Alg（I0/It)=a b cc：溶液的濃度，單位：溶液的濃度，單位gL-a：吸光系數(shù)，單位：吸光系數(shù)，單位Lg-cm-a與與的關(guān)系為：的關(guān)系為：a=/M（M為摩爾質(zhì)量）為摩爾質(zhì)量）1.1.朗伯朗伯- -比耳定律比耳定律 朗伯朗伯-比耳定律是吸光光度法的理論基礎(chǔ)和定量測定的比耳定律是吸光光度法的理論基礎(chǔ)和定量測定的依據(jù)。應(yīng)用于各種光度法的吸收測量；依據(jù)。應(yīng)用于各種光度法的吸收測量；摩爾吸光系數(shù)摩爾吸光系數(shù)在數(shù)值上等于濃度為在數(shù)值上等于濃度為1mol/L、液層厚度、

20、液層厚度為為1cm時該溶液在某一波長下的吸光度；時該溶液在某一波長下的吸光度；吸光系數(shù)吸光系數(shù)a相當(dāng)于濃度為相當(dāng)于濃度為1g/L、液層厚度為、液層厚度為1cm時該溶時該溶液在某一波長下的吸光度。液在某一波長下的吸光度。光源單色器樣品室檢測器顯示1.1.單光束單光束 簡單，價廉，適于在給定波長處測量吸光度或透光度，簡單，價廉，適于在給定波長處測量吸光度或透光度，一般不能作全波段光譜掃描，要求光源和檢測器具有很高一般不能作全波段光譜掃描，要求光源和檢測器具有很高的穩(wěn)定性。的穩(wěn)定性。2.2.雙光束雙光束 自動記錄，快速全波自動記錄，快速全波段掃描。段掃描。可消除光源不穩(wěn)可消除光源不穩(wěn)定、檢測器靈敏度

21、變化定、檢測器靈敏度變化等等因素的影響，特別適合于因素的影響，特別適合于結(jié)構(gòu)分析。儀器復(fù)雜，價結(jié)構(gòu)分析。儀器復(fù)雜，價格較高。格較高。第6章 熒光分光光度法n（一）熒光的產(chǎn)生n（二）激發(fā)光譜與熒光光譜n（三）熒光分析儀器n（四）熒光分析方法特點及應(yīng)用n重點：激發(fā)光譜與熒光光譜；具有熒光性質(zhì)的分子的結(jié)構(gòu)特征。熒光與分子結(jié)構(gòu)的關(guān)系熒光與分子結(jié)構(gòu)的關(guān)系（2）共軛效應(yīng)共軛效應(yīng) * * 躍遷躍遷 芳香族化合物。共軛雙鍵結(jié)構(gòu)有利于發(fā)光。芳香族化合物。共軛雙鍵結(jié)構(gòu)有利于發(fā)光。 共軛體系越大共軛體系越大, ,越易產(chǎn)生熒光越易產(chǎn)生熒光, ,熒光效率也增大熒光效率也增大. .(CH=CH)3 =0.68(CH=CH

22、)2=0.28(1)電子躍遷類型大部分熒光化合物電子躍遷的能級是由 * * 躍遷或躍遷或n n * * 電電子躍遷而被激發(fā)的。子躍遷而被激發(fā)的。（3）剛性平面結(jié)構(gòu)剛性平面結(jié)構(gòu)酚酞酚酞(無熒光無熒光)8羥基喹啉羥基喹啉(弱熒光弱熒光)紅色熒光紅色熒光CO-OOCOO-COCOO-ONO-NOMgNO熒光素?zé)晒馑芈?lián)二苯聯(lián)二苯=0.2芴芴=1.03,4-苯并芘苯并芘(強熒光物質(zhì)強熒光物質(zhì))CH2 剛性平面結(jié)構(gòu)：可降低分子振動，減少與溶劑的相互作用，故具有很強的熒光。如熒光素和酚酞有相似結(jié)構(gòu)，熒光素有很強的熒光，酚酞卻沒有。（4）取代基的影響）取代基的影響 給電子基增強熒光給電子基增強熒光： OH,O

23、R,NH2,NHR,NR2,CN吸電子基減弱熒光吸電子基減弱熒光： COOH,C=O,NO2,NN,Cl,Br,I與與 體系作用小的取代基影響不明顯：體系作用小的取代基影響不明顯： SO3R,NH3,SH,F,R。COOHNO2I無熒光無熒光NH2OH比比熒光強熒光強50倍倍 取代基之間若發(fā)生氫鍵，增強分子平面性和取代基之間若發(fā)生氫鍵，增強分子平面性和剛性會加強熒光剛性會加強熒光: :有熒光有熒光COOHOH無熒光無熒光OHCOOH水楊酸水楊酸有熒光有熒光OHOHCO測量熒光的儀器主要由四個部分組成：激發(fā)光源、樣品池、測量熒光的儀器主要由四個部分組成：激發(fā)光源、樣品池、雙單色器系統(tǒng)、檢測器。雙

24、單色器系統(tǒng)、檢測器。 特殊點：特殊點：有兩個單色器；光源與檢測器通常成直角；單色器位置不同；比色皿不同(熒光要用四面透光的)6.3.1 熒光分光光度計第7章 薄層色譜法n（一）概述n（二）薄層色譜的基本原理n（三）薄層色譜的操作技術(shù)n（四）薄層色譜法定量分析n（五）薄層色譜法在生物工程分析中的應(yīng)用n重點：薄層色譜的基本原理和薄層色譜的操作技術(shù)。7.2 薄層色譜法的基本原理n1.保留參數(shù)（Rf值）n用來表征斑點位置的基本參數(shù)是保留因子，通常稱作比移值，用Rf表示。原點SRWLsL。Lr原點參比樣品前沿0sfLRL原點中心至斑點的距離原點中心至展開劑前沿的距離 3.3.分配系數(shù)分配系數(shù)K=K= c

25、 cS S / c / cm m ，表示，即分離達到平衡時，組，表示，即分離達到平衡時，組分在固定相和流動相的濃度之比。分在固定相和流動相的濃度之比。4.4.分離度分離度2101212122()22SSfRLLLRdWWWWWW兩個斑點中心距離兩峰頂距離兩個斑點寬度的平均值兩峰底寬度的平均值7.3.4 流動相與展開體系1.液-固吸附 在該色譜中，溶質(zhì)的保留和分離選擇性決定于三個因素：溶溶解解能能力力流動相溶質(zhì)吸附劑相互作用相互作用競爭競爭一.展開體系:n定量計算n外標(biāo)法：此法是薄層定量最常用的方法。定量時，點樣量必須準(zhǔn)確，樣品與對照品應(yīng)點在同一塊薄層板上。用已知含量的對照品得出樣品含量的一種方

26、法。n內(nèi)標(biāo)法:選一個純度高、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定、在薄層上能與對照品分開的物質(zhì)作內(nèi)標(biāo)物，并準(zhǔn)確稱取加到被測物中，根據(jù)內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量算出被測物的含量。薄層色譜法分離樣品的步驟.制板活化點樣展開第8章 氣相色譜分析法n（一）概述和基本理論n（二）定性分析方法n（三）定量分析方法n（四）氣相色譜檢測器n（五）氣相色譜的應(yīng)用n重點：塔板理論，定量方法的分類特點及適應(yīng)范圍、氣相色譜儀結(jié)構(gòu)組成和氣相色譜檢測器的選擇和應(yīng)用。二. 氣相色譜法的定義： GC GC是一種以氣體為流動相的柱色譜法是一種以氣體為流動相的柱色譜法. .根據(jù)所用的根據(jù)所用的固定相狀態(tài)不同固定相狀態(tài)不同, ,可分為氣固色譜和氣液色譜可分為氣固色譜和

27、氣液色譜. .n固定相固定相（stationary phase):色譜法中，填入玻璃管色譜法中，填入玻璃管內(nèi)靜止不動的一相（固體或液體）稱為固定相。如離內(nèi)靜止不動的一相（固體或液體）稱為固定相。如離子交換樹脂法中的樹脂相。子交換樹脂法中的樹脂相。n流動相流動相(mobile phase):自上而下運動的一相（一般自上而下運動的一相（一般是氣體或液體）稱為流動相是氣體或液體）稱為流動相。n色譜柱色譜柱(chromatography column):裝有固定相的管子裝有固定相的管子稱為色譜柱稱為色譜柱。四、氣相色譜儀結(jié)構(gòu)及一般流程1-載氣鋼瓶；2-減壓閥；3-凈化干燥管；4-針形閥；5-流量計;6

28、-壓力表；4-針形閥；5-流量計;6-壓力表；9-熱導(dǎo)檢測器；10-放大器；11-溫度控制器；12-記錄儀；載氣系統(tǒng)進樣系統(tǒng)色譜柱檢測系統(tǒng)溫控系統(tǒng)1. 1. 基線與基線漂移基線與基線漂移n基線：在色譜操作條件下，僅有流動相通過監(jiān)測器基線：在色譜操作條件下，僅有流動相通過監(jiān)測器時，由記錄儀得到的信號時間曲線。時，由記錄儀得到的信號時間曲線。n基線漂移：基線隨時間定向緩慢地變化。基線漂移：基線隨時間定向緩慢地變化?；€基線基線漂移基線漂移圖圖8-1某物質(zhì)的色譜圖某物質(zhì)的色譜圖8.2 8.2 基本理論基本理論8.2.1 基本概念2.2.死時間與死體積死時間與死體積n死時間（死時間（dead time

29、dead time）：不被固定相吸附或溶解的惰性）：不被固定相吸附或溶解的惰性組分，從進樣到出峰的峰頂點之間測得的時間，以組分，從進樣到出峰的峰頂點之間測得的時間，以t tM M表表示。示。n死體積（死體積（dead volumedead volume）：死時間內(nèi)流動相流經(jīng)色譜柱）：死時間內(nèi)流動相流經(jīng)色譜柱的體積，又指色譜柱填充固定相后的空隙體積。的體積，又指色譜柱填充固定相后的空隙體積。圖圖8-2某組分的色譜圖某組分的色譜圖3.保留時間、調(diào)整保留時間、保留體積、調(diào)整保留體積保留時間、調(diào)整保留時間、保留體積、調(diào)整保留體積n保留時間（保留時間（retention timeretention ti

30、me）: :從進樣到組分峰頂點之間測得從進樣到組分峰頂點之間測得的時間，用的時間，用t tR R表示。表示。n調(diào)整保留時間（調(diào)整保留時間（adjusted retention timeadjusted retention time）：組分的保留時）：組分的保留時間扣除死時間后的時間。間扣除死時間后的時間。n保留體積（保留體積（retention volumeretention volume）：從進樣開始到監(jiān)測器中樣）：從進樣開始到監(jiān)測器中樣品濃度最大時，流動相流經(jīng)色譜柱的體積。品濃度最大時，流動相流經(jīng)色譜柱的體積。n調(diào)整保留體積（調(diào)整保留體積（adjusted retention volume

31、adjusted retention volume）: :保留體積扣除保留體積扣除死體積后的體積。死體積后的體積。圖圖8-3某組分的色譜圖某組分的色譜圖4.4.相對保留因子與分配因子相對保留因子與分配因子n相對保留因子相對保留因子21 21 （relative retention valuerelative retention value）：組）：組分分2 2與基準(zhǔn)組分與基準(zhǔn)組分1 1的調(diào)整保留時間之比的調(diào)整保留時間之比. .n12. 12. 分配因子分配因子 k k121221RRRRVVttMRMttnnkS的量組分在流動相中的物質(zhì)的量組分在固定相中的物質(zhì)6.分離度分離度n分離度也稱分辯率

32、。它是指相鄰兩色譜峰保留值之差分離度也稱分辯率。它是指相鄰兩色譜峰保留值之差與兩峰底寬平均值之比與兩峰底寬平均值之比。n一般情況下，當(dāng)一般情況下，當(dāng)R1R1時，兩峰總有部分重疊；時，兩峰總有部分重疊；當(dāng)當(dāng)R R1 1時，兩峰能明顯分離；時，兩峰能明顯分離；R R1.51.5時，兩峰已完全分離時，兩峰已完全分離。更大的更大的R R值，分離效果會更好，但會延長分析時間。值，分離效果會更好，但會延長分析時間。 211122RRttRYY6.分離度分離度n分離度也稱分辯率。它是指相鄰兩色譜峰保留值之差分離度也稱分辯率。它是指相鄰兩色譜峰保留值之差與兩峰底寬平均值之比與兩峰底寬平均值之比。n一般情況下，

33、當(dāng)一般情況下，當(dāng)R1R1時，兩峰總有部分重疊；時，兩峰總有部分重疊；當(dāng)當(dāng)R R1 1時，兩峰能明顯分離；時，兩峰能明顯分離；R R1.51.5時，兩峰已完全分離時，兩峰已完全分離。更大的更大的R R值，分離效果會更好，但會延長分析時間。值，分離效果會更好，但會延長分析時間。 211122RRttRYY141有效nR分離方程分離方程22116Rn有效由上式可得由上式可得（二）理論板數(shù)和理論塔板高度的計算（二）理論板數(shù)和理論塔板高度的計算 理論塔板高度理論塔板高度H H為使組分在柱內(nèi)兩相間達到一次分配平為使組分在柱內(nèi)兩相間達到一次分配平衡所需要的柱長衡所需要的柱長理論塔板數(shù)理論塔板數(shù)n n組分流過

34、色譜柱時，在兩相間進行平衡分組分流過色譜柱時，在兩相間進行平衡分配的總次數(shù)配的總次數(shù) 理理HLn理理或nLH/221 25.54()16()RRttnYY有效2221)(16)(54. 5YtYtnRR理一一.范第姆特（范第姆特（Van Deemter ）方程式）方程式吸收了塔板理論的有效成果吸收了塔板理論的有效成果H H，并從動力學(xué)角度較好地解釋了影響柱效的因素并從動力學(xué)角度較好地解釋了影響柱效的因素給出給出H H與載氣線速度與載氣線速度u u的關(guān)系的關(guān)系uCuBAH/流速與柱效的關(guān)系最佳流速最佳流速8.4 檢測器檢測器氣相色譜氣相色譜檢測器檢測器n1.熱導(dǎo)池檢測器熱導(dǎo)池檢測器n2.氫火焰離

35、子化檢測器氫火焰離子化檢測器n3.電子捕獲檢測器電子捕獲檢測器n4.火焰光度檢測器火焰光度檢測器氣相色譜中常用的檢測器1.熱導(dǎo)檢測器TCDl對可揮發(fā)性對可揮發(fā)性的的和和都有響應(yīng)都有響應(yīng)根據(jù)各種物質(zhì)和具有不同根據(jù)各種物質(zhì)和具有不同的的熱導(dǎo)率熱導(dǎo)率，采用熱敏元件，采用熱敏元件進行測定進行測定1321熱導(dǎo)檢測器示意圖熱導(dǎo)檢測器示意圖返回靈敏度較低，適應(yīng)于常量和10-6數(shù)量級以上的樣品分析。2.氫火焰離子化檢測器氫火焰離子化檢測器FID被測組分出色譜柱后，與被測組分出色譜柱后，與氫氣混合，進入離子室火氫氣混合，進入離子室火焰區(qū)，生成正負離子，并焰區(qū)，生成正負離子，并向兩極移動，形成離子流，向兩極移動，

36、形成離子流，經(jīng)放大后送至記錄儀記錄經(jīng)放大后送至記錄儀記錄1321氫火焰離子化監(jiān)測器示意圖氫火焰離子化監(jiān)測器示意圖返回3.電子捕獲檢測器電子捕獲檢測器ECD對具有對具有電負性電負性的物質(zhì)，的物質(zhì)，如含鹵素、硫、磷、氮如含鹵素、硫、磷、氮的物質(zhì)有響應(yīng)，而對非的物質(zhì)有響應(yīng)，而對非電負性的物質(zhì)無響應(yīng)。電負性的物質(zhì)無響應(yīng)。放射源將載氣（如放射源將載氣（如N2）電）電離為游離基和低能電子：離為游離基和低能電子：N2N2+e電負性的物質(zhì)進入檢測器后，捕電負性的物質(zhì)進入檢測器后，捕獲低能電子：獲低能電子：AB+e-AB-+E從而使基流下降，產(chǎn)生負訊號從而使基流下降，產(chǎn)生負訊號-倒峰倒峰1322電子捕獲檢測器示

37、意圖電子捕獲檢測器示意圖返回4.火焰光度檢測器火焰光度檢測器FPD含硫有機化合物在富氫焰（含硫有機化合物在富氫焰（H2:O23:1）中燃燒：）中燃燒：RS+O2SO2+CO2SO2+8H2S+4H2OS+SS2（激發(fā)態(tài)：回到（激發(fā)態(tài)：回到基態(tài)時發(fā)射基態(tài)時發(fā)射394nm的特征光的特征光）含磷有機物燃燒形成含磷有機物燃燒形成HPOHPO碎片，發(fā)射碎片，發(fā)射526nm526nm的特征光。的特征光。1323火焰光度檢測器示意圖火焰光度檢測器示意圖返回定量分析方法定量分析方法1.外標(biāo)法外標(biāo)法2.內(nèi)標(biāo)法內(nèi)標(biāo)法3.歸一化法歸一化法三種方法各有其優(yōu)缺點和適用范圍，應(yīng)根據(jù)三種方法各有其優(yōu)缺點和適用范圍，應(yīng)根據(jù)實

38、際情況，具體選用。實際情況，具體選用。continue（4 4）定量分析方法：外標(biāo)法）定量分析方法：外標(biāo)法( (類標(biāo)準(zhǔn)曲線法類標(biāo)準(zhǔn)曲線法) )n將待測組分的純物質(zhì)配成將待測組分的純物質(zhì)配成不同濃度不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，使?jié)獾臉?biāo)準(zhǔn)溶液，使?jié)舛扰c待測組分接近，然后取固定量的上述溶液進行色度與待測組分接近，然后取固定量的上述溶液進行色譜分析，得到各標(biāo)準(zhǔn)樣品的對應(yīng)色譜圖。譜分析，得到各標(biāo)準(zhǔn)樣品的對應(yīng)色譜圖。某組分的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的色譜圖某組分的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的色譜圖n再在同樣的條件下（同樣的色譜操作條件和再在同樣的條件下（同樣的色譜操作條件和進同樣的體積），分析待測試樣，得到色譜進同樣的體積），分析待測試樣，得到色

39、譜圖。圖。圖圖1313某樣品的色譜圖某樣品的色譜圖n以標(biāo)準(zhǔn)樣品的色譜峰面積作圖，得到一條標(biāo)準(zhǔn)曲以標(biāo)準(zhǔn)樣品的色譜峰面積作圖，得到一條標(biāo)準(zhǔn)曲線，再在標(biāo)準(zhǔn)曲線上根據(jù)待測樣品的峰面積查出線，再在標(biāo)準(zhǔn)曲線上根據(jù)待測樣品的峰面積查出待測組分的濃度。待測組分的濃度。圖圖1314標(biāo)準(zhǔn)工作曲線圖標(biāo)準(zhǔn)工作曲線圖n外標(biāo)法的特點：外標(biāo)法的特點： 操作簡單，因而適用于工廠的控制分析和自動分析，但結(jié)果的操作簡單，因而適用于工廠的控制分析和自動分析，但結(jié)果的準(zhǔn)確度取決于進樣量的重現(xiàn)性和操作條件的穩(wěn)定性。準(zhǔn)確度取決于進樣量的重現(xiàn)性和操作條件的穩(wěn)定性。返回內(nèi)標(biāo)法內(nèi)標(biāo)法n方法：方法：準(zhǔn)確稱取樣品，加入一定量的某種準(zhǔn)確稱取樣品，加

40、入一定量的某種純物質(zhì)純物質(zhì)作為作為內(nèi)標(biāo)物內(nèi)標(biāo)物，然后進行色譜分析，根據(jù)被測組分，然后進行色譜分析，根據(jù)被測組分和內(nèi)標(biāo)物在色譜圖上相應(yīng)的峰面積（或峰高）與和內(nèi)標(biāo)物在色譜圖上相應(yīng)的峰面積（或峰高）與相對校正因子，求出待測組分的含量。相對校正因子，求出待測組分的含量。n注意：注意：此處所用內(nèi)標(biāo)物與外標(biāo)法中的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)此處所用內(nèi)標(biāo)物與外標(biāo)法中的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)不同。不同。內(nèi)標(biāo)物一定是樣品中不存在的內(nèi)標(biāo)物一定是樣品中不存在的，內(nèi)標(biāo)峰應(yīng)，內(nèi)標(biāo)峰應(yīng)和各組分的峰分開，并盡量接近待測組分。內(nèi)標(biāo)和各組分的峰分開，并盡量接近待測組分。內(nèi)標(biāo)物可以是測量相對校正因子時所用的基準(zhǔn)物。物可以是測量相對校正因子時所用的基準(zhǔn)物。圖圖13

41、15某化合物的色譜圖某化合物的色譜圖AiiiASSSmA fmA fSSAiSiiAmfAmn內(nèi)標(biāo)法的優(yōu)點：內(nèi)標(biāo)法的優(yōu)點：由于內(nèi)標(biāo)法是通過測量內(nèi)標(biāo)物及由于內(nèi)標(biāo)法是通過測量內(nèi)標(biāo)物及待測組分的峰面積的相對值來進行計算的，因而可待測組分的峰面積的相對值來進行計算的，因而可在一定程度上消除操作條件的變化所引起的誤差在一定程度上消除操作條件的變化所引起的誤差。n內(nèi)標(biāo)法的缺點：在試樣中增加了一個內(nèi)標(biāo)物，這在試樣中增加了一個內(nèi)標(biāo)物，這常常給分離帶來一定的困難。常常給分離帶來一定的困難。返回 （4）定量分析方法）定量分析方法 ：歸一化法：歸一化法要求：要求：樣品中的所有組分都能出峰。樣品中的所有組分都能出峰。

42、圖圖1316某樣品的色譜圖某樣品的色譜圖n歸一化法歸一化法：把試樣中所有組分的含量之和按把試樣中所有組分的含量之和按100%100%計算，以它們相應(yīng)的色譜峰面積或峰高計算，以它們相應(yīng)的色譜峰面積或峰高作為定量參數(shù)，通過下式計算各組分的含量作為定量參數(shù)，通過下式計算各組分的含量%100%100%100%100%100%12211211 niiiiiiAisiAsAsAisiiiiiAAmfAfAfAfAfAfAmmmmmmmniAisAis樣品歸一化法特點歸一化法特點n優(yōu)點優(yōu)點：簡便、準(zhǔn)確、操作條件（如：進簡便、準(zhǔn)確、操作條件（如：進樣量、流速等）變化時，對分析結(jié)果影樣量、流速等）變化時，對分析

43、結(jié)果影響較小，這種方法常用于常量分析，尤響較小，這種方法常用于常量分析，尤其適用于其適用于進樣量很少而其體積不易準(zhǔn)確進樣量很少而其體積不易準(zhǔn)確測量的液體樣品測量的液體樣品。n缺點：缺點：經(jīng)過色譜分離后，樣品中所有的經(jīng)過色譜分離后，樣品中所有的組分都要能產(chǎn)生可測量的峰組分都要能產(chǎn)生可測量的峰返回固定相類型固定相類型極性固定相：正相色譜極性固定相：正相色譜以極性有機基團如胺基（以極性有機基團如胺基（-NH2）、腈基（）、腈基（-CN）、醚基（）、醚基（-O-）等鍵合在硅膠表面制成的）等鍵合在硅膠表面制成的非極性固定相：反相色譜非極性固定相：反相色譜是是C18(ODS)、C8和苯基鍵合相的填料，和苯

44、基鍵合相的填料，反相色譜是當(dāng)今液相色譜的最主要分離模式。反相色譜是當(dāng)今液相色譜的最主要分離模式。流動相的極性小于固定液的極性（正相流動相的極性小于固定液的極性（正相 ）;流動相的極性大于固定液的極性（反相流動相的極性大于固定液的極性（反相 ）。）。溶劑 自動進樣器 HPLC色譜柱廢液1.1.流程圖流程圖第四節(jié)第四節(jié) 高效液相色譜儀高效液相色譜儀n為什么要進行梯度洗脫？在進行多成分的復(fù)雜樣品的分離時，經(jīng)常會碰到前面的一些成分分離不完全，而后面的一些成分分離度太大，且出峰很晚和峰型較差。n為了使保留值相差很大的多種成分在合理的時間內(nèi)全部洗脫并達到相互分離，往往要用到梯度洗脫技術(shù)。 (3) 梯度洗脫

45、梯度洗脫n梯度洗脫操作在液相色譜中流速（壓力）梯度和溫度梯度效果不大，而且還會帶來一些不利影響，因此，液相色譜中通常所說的梯度洗脫是指流動相梯度，即在分離過程中改變流動相的組成或濃度。 n定義：流動相中含有兩種（或更多）不同極性的溶劑，在分離過程中按一定的程序連續(xù)改變流動相的配比和極性，以提高分離效果。n優(yōu)點：分離時間縮短，分辨能力增加，峰形改善a.紫外檢測器紫外檢測器基于基于Lambert-Beer定律，即被測組分對紫外光或可定律，即被測組分對紫外光或可見光具有吸收，且吸收強度與組分濃度成正比。見光具有吸收，且吸收強度與組分濃度成正比。應(yīng)用最廣，對大部分有機化合物有響應(yīng)。應(yīng)用最廣，對大部分有

46、機化合物有響應(yīng)。(6) 檢測器檢測器b. 熒光檢測器熒光檢測器（Fluorescence detector） 高靈敏度、高選擇性；高靈敏度、高選擇性；對多環(huán)芳烴，維生素對多環(huán)芳烴，維生素B、黃曲霉素、卟啉類化合物、黃曲霉素、卟啉類化合物、農(nóng)藥、藥物、氨基酸、甾類農(nóng)藥、藥物、氨基酸、甾類化合物等有響應(yīng)?；衔锏扔许憫?yīng)。用于檢測用于檢測陽離子和陰離子陽離子和陰離子，在離子色譜中應(yīng)用最，在離子色譜中應(yīng)用最多。其檢測原理是根據(jù)組分在某些介質(zhì)中電離后所產(chǎn)生多。其檢測原理是根據(jù)組分在某些介質(zhì)中電離后所產(chǎn)生的電導(dǎo)的變化而測定該組分的含量。的電導(dǎo)的變化而測定該組分的含量。C.電導(dǎo)檢測器（電導(dǎo)檢測器（ECD）D

47、.示差折光檢測器示差折光檢測器 (RID)n又稱折射率檢測器。原理：基于樣品組分的折射率與流動相溶劑折射率有差異，當(dāng)組分洗脫出來時，會引起流動相折射率的變化，這種變化與樣品組分的濃度成正比。是通用型檢測器 E.蒸發(fā)散射光檢測器（蒸發(fā)散射光檢測器（ ELSD）ELSD是基于溶質(zhì)的光散射性質(zhì)的檢測器n因為散射光強只與溶質(zhì)顆粒大小和數(shù)量有關(guān)，而與溶質(zhì)本身的物理和化學(xué)性質(zhì)無關(guān)，所以ELSD屬通用型和質(zhì)量型檢測器。n適合于無紫外吸收、無電活性和不發(fā)熒光的樣品的檢測。與示差折光檢測器相比，它的基線漂移不受溫度影響，信噪比高，也可用于梯度洗脫。 液相色譜與氣相色譜的比較液相色譜與氣相色譜的比較 液相色譜所用

48、基本概念和基本理論基本一致。 液相色譜所用的儀器設(shè)備和操作條件與氣相色譜不同，所以，液相色譜與氣相色譜有一定差別，主要有以下幾方面：（1）應(yīng)用范圍不同）應(yīng)用范圍不同 GC僅能分析在操作溫度下能氣化而不分解的物質(zhì)。對高沸點化合物、非揮發(fā)性物質(zhì)、熱不穩(wěn)定化合物、離子型化合物及高聚物的分離、分析較為困難。致使其應(yīng)用受到一定程度的限制，只有大約只有大約20%的的有機物能用氣相色譜分析有機物能用氣相色譜分析； HPLC則不受樣品揮發(fā)度和熱穩(wěn)定性的限制，它非常適合分子量較大、難氣化、不易揮發(fā)或?qū)崦舾械奈镔|(zhì)、離子型化合物及高聚物的分離分析，大約占有機物的占有機物的70-80%。 （2 2）流動相的作用不同

49、）流動相的作用不同l氣相色譜的流動相載氣是色譜惰性的，不參與分配平衡過程，與樣品分子無親和作用，樣品分子只與固定相相互作用。l液相色譜液相色譜流動相液體也與固定相爭奪樣品分子，為流動相液體也與固定相爭奪樣品分子，為提高選擇性增加了一個因素提高選擇性增加了一個因素。也可選用不同比例的兩種或兩種以上的液體作流動相，增大分離的選擇性。 （4）色譜柱色譜柱： nGC填充柱填充柱16m，毛細管柱，毛細管柱20100m，螺，螺旋型；旋型； nHPLC 15cm或或25cm，直型。，直型。（3）操作條件：操作條件： GCGC需高溫；需高溫； HPLCHPLC通常在室溫下進行通常在室溫下進行。(5)分離效率不

50、同nHPLC：大于：大于3萬塔板萬塔板/米米n（GC：103塔板塔板/米）米）(6)儀器構(gòu)造不同儀器構(gòu)造不同HPLC:脫氣裝置，高壓泵脫氣裝置，高壓泵GC：汽化室，溫控系統(tǒng)：汽化室，溫控系統(tǒng)第第1010章章 電泳法和高效毛細管電泳法電泳法和高效毛細管電泳法(Electrophoresis and High Performance Capillary Electrophoresis, HPCE)毛細管電泳定義毛細管電泳定義 毛細管電泳是帶電粒子在毛細管電泳是帶電粒子在電場力電場力的的驅(qū)動下，在毛細管中按其驅(qū)動下，在毛細管中按其淌度淌度或或分分配系數(shù)配系數(shù)不同進行高效、快速分離的不同進行高效、快速

51、分離的電泳新技術(shù)，也稱為高效毛細管電電泳新技術(shù)，也稱為高效毛細管電泳。泳。 第第10章章毛細管電泳毛細管電泳10.1.3分離模式分離模式1毛細管區(qū)帶電泳（毛細管區(qū)帶電泳（CZECZE） 也稱為毛細管自由溶液區(qū)帶電泳也稱為毛細管自由溶液區(qū)帶電泳 毛細管電泳中最基本的操作模式，應(yīng)用最廣泛，是其它各種操作毛細管電泳中最基本的操作模式，應(yīng)用最廣泛，是其它各種操作模式的母體模式的母體 第第10章章毛細管電泳毛細管電泳10.1.3分離模式分離模式2膠束電動毛細管色譜膠束電動毛細管色譜膠束電動毛細管色譜:是以電滲流驅(qū)動的一種色譜技術(shù)膠束電動毛細管色譜 MECC:是以膠束為假固定相的一種電動色譜，是電泳技術(shù)和色譜技術(shù)的結(jié)合加入高于膠束臨界濃度的加入高于膠束臨界濃度的表面活性劑表面活性劑第第10章章毛細管電泳毛細管電泳10.1.3分離模式分離模式3毛細管凝膠電泳毛細管凝膠電泳CGECGE 是毛細管自由溶液區(qū)帶電泳派生出的一種電泳方式是毛細管自由溶液區(qū)帶電泳派生出的一種電泳方式 用多孔性的凝膠或其它篩分劑作介質(zhì)，網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，按分子用多孔性的凝膠或其它篩分劑作介質(zhì)，網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，按分子的大小分離的大小分離 第第10章章毛細管電泳毛細管電泳10.1.3分分離模式離模式6毛細管等電聚焦毛細管等電聚焦CIEFCIEF: 建立在不同蛋白質(zhì)或多肽之間等電點（建