1、 院內感染監測與操作院內感染監測與操作 醫院感染又稱醫院內獲得性感染，指患者在入院時既不存醫院感染又稱醫院內獲得性感染，指患者在入院時既不存在，又不處于潛伏期，而在醫院內發生的感染，包括在醫院在，又不處于潛伏期，而在醫院內發生的感染，包括在醫院獲得而于出院后發病的感染。獲得而于出院后發病的感染。一、醫院感染的定義 1、 外源性感染又稱交叉感染，病原體來自患者體外，即來自外源性感染又稱交叉感染，病原體來自患者體外，即來自其他住院患者、醫務人員、陪護家屬和醫院環境等。其他住院患者、醫務人員、陪護家屬和醫院環境等。 2、 內源性感染又稱自身感染，病原體來自患者自身貯菌庫內源性感染又稱自身感染，病原體

2、來自患者自身貯菌庫（皮膚、鼻咽口腔、泌尿生殖道、腸道）的正常菌群或外來（皮膚、鼻咽口腔、泌尿生殖道、腸道）的正常菌群或外來的定植菌。在醫院中當人體免疫功能下降、體內微生態環境的定植菌。在醫院中當人體免疫功能下降、體內微生態環境失衡或發生細菌易位時即可發生感染。失衡或發生細菌易位時即可發生感染。二 、 醫院感染的分類 醫院感染可發生在與醫院相關的人群中，如門診和住院患醫院感染可發生在與醫院相關的人群中，如門診和住院患者、醫務人員、陪護家屬、探視者等均可發生。者、醫務人員、陪護家屬、探視者等均可發生。 三、醫院感染的對象1、手的微生物監測、手的微生物監測 采樣時間：在接觸患者或從事醫療活動前進行。

3、采樣時間：在接觸患者或從事醫療活動前進行。 采樣方法：被檢人五指并攏，將浸有無菌生理鹽水的棉拭子采樣方法：被檢人五指并攏，將浸有無菌生理鹽水的棉拭子一支在雙手曲面從指根到指端來回涂擦各兩遍（一只手涂擦一支在雙手曲面從指根到指端來回涂擦各兩遍（一只手涂擦面積約面積約30 c ），并隨之轉動采樣棉拭子，剪去手接觸部），并隨之轉動采樣棉拭子，剪去手接觸部位，將棉拭子放入裝有位，將棉拭子放入裝有5ml采樣液的試管內送檢。采樣面積采樣液的試管內送檢。采樣面積按平方厘米按平方厘米 (c ) 計算。計算。四、醫院感染監控中常用的檢測方法細菌菌落總數檢查：細菌菌落總數檢查： 1ml采樣液放入滅菌平皿內，用普通

4、營養采樣液放入滅菌平皿內，用普通營養瓊脂培養，放瓊脂培養，放35溫箱內溫箱內2448 h計數菌落。計數菌落。 手細菌菌落總數（手細菌菌落總數（cfu/ c ）= 平板上菌落數平板上菌落數采樣液稀釋倍數采樣液稀釋倍數 30X2（ cfu：是菌落形成單位，將稀釋后的一定量的菌液通過涂布：是菌落形成單位，將稀釋后的一定量的菌液通過涂布的方法，讓其內的微生物單細胞分散在瓊脂平板上，待培養的方法，讓其內的微生物單細胞分散在瓊脂平板上，待培養后，每一活細胞就形成一個菌落。后，每一活細胞就形成一個菌落。 就表示每毫升菌液中含有就表示每毫升菌液中含有多少單細胞。）多少單細胞。）采樣時間：消毒處理后采樣時間：消

5、毒處理后4 h內采樣。內采樣。采樣面積：被采表面采樣面積：被采表面30 ，設，設東、西、南、北、中東、西、南、北、中5點，其中東、西、南、北點均距墻點，其中東、西、南、北點均距墻1m。采樣方法：用采樣方法：用9cm直徑的普通營養瓊脂平板，在采樣點將平板直徑的普通營養瓊脂平板，在采樣點將平板蓋打開，把蓋子扣在平板的邊緣上，暴露蓋打開，把蓋子扣在平板的邊緣上，暴露5 min后送檢培養，后送檢培養，每個被監測的房間菌落數以平均數計算。每個被監測的房間菌落數以平均數計算。 3、空氣消毒效果的監測1、采樣時間、采樣時間 類環境在潔凈系統自凈后與從事醫療活動前取樣；類環境在潔凈系統自凈后與從事醫療活動前取

6、樣；、類環境在消毒或規定的通風換氣后與從事醫療活動類環境在消毒或規定的通風換氣后與從事醫療活動前取樣。前取樣。2、檢測方法、檢測方法 類環境可選擇平板暴露法和空氣采樣器法，參照類環境可選擇平板暴露法和空氣采樣器法，參照GB50333醫院潔凈手術部建筑技術規范醫院潔凈手術部建筑技術規范要求進行檢測要求進行檢測。空氣采樣器法可選擇六級撞擊式空氣采樣器或其他經驗證。空氣采樣器法可選擇六級撞擊式空氣采樣器或其他經驗證的空氣采樣器。檢測時將采樣器置于室中央的空氣采樣器。檢測時將采樣器置于室中央0.8m-1.5m高度高度，按采樣器使用說明書進行操作。每次采樣時間不應超過，按采樣器使用說明書進行操作。每次采

7、樣時間不應超過30min。房間大于。房間大于10 者，每增加者，每增加10 增設一個采樣點。增設一個采樣點。 、類環境采用平板暴露法類環境采用平板暴露法 室內面積室內面積30 ，設內、中、外對角線三點，內、外點應距墻壁設內、中、外對角線三點，內、外點應距墻壁1M處；室內處；室內面積面積30 ，設，設4角及中央角及中央5點，點，4角的布點部位應距墻壁角的布點部位應距墻壁1m處。將普通營養瓊脂平皿（處。將普通營養瓊脂平皿（90mm）放置各采樣點，采樣）放置各采樣點，采樣高度為距地面高度為距地面0.8m-1.5m；采樣時將平皿蓋打開，扣放于平；采樣時將平皿蓋打開，扣放于平皿旁，暴露規定時間（皿旁，暴

8、露規定時間（ 類環境暴露類環境暴露15min， 、類環類環境暴露境暴露5分鐘）后蓋上平皿蓋及時送檢。分鐘）后蓋上平皿蓋及時送檢。 將送檢平皿置將送檢平皿置36 1 恒溫箱培養恒溫箱培養48h，計數菌落數，計數菌落數，必要時分離致病性微生物。必要時分離致病性微生物。3、結果計算、結果計算 平板暴露法按平均每皿的菌落數報告：平板暴露法按平均每皿的菌落數報告：cfu/皿皿暴露時間。暴露時間。 各類環境空氣、物體表面、醫護人員手細菌菌落總數各類環境空氣、物體表面、醫護人員手細菌菌落總數1. 類區域類區域-潔凈手術室潔凈手術室(分成分成4個等級個等級)： 特別潔凈手術室特別潔凈手術室手術手術區區0.2個

9、個/30min90皿，周邊區皿，周邊區0.4個個/30min90皿皿 ； 標準潔凈標準潔凈手術室手術室手術區手術區0.75個個/30min90皿，周邊區皿，周邊區1.5個個/30min90皿皿；一般潔凈手術室一般潔凈手術室手術區手術區2個個/30min90皿，周邊區皿，周邊區4個個/30min90皿皿 ； 準潔凈手術室準潔凈手術室手術區手術區5個個/30min90皿皿 ； 2. 類區域類區域:非潔凈手術部（室）、非潔凈骨髓移植病房、產房、導非潔凈手術部（室）、非潔凈骨髓移植病房、產房、導管室、新生兒室、器官移植病房、燒傷病房重癥監護病房、血液病管室、新生兒室、器官移植病房、燒傷病房重癥監護病房

10、、血液病病區空氣中的細菌菌落總數病區空氣中的細菌菌落總數4cfu（15min直徑直徑9cm平皿）。平皿）。3. -IV類區域：兒科病房、母嬰同室、婦產科檢查室、人流室、治類區域：兒科病房、母嬰同室、婦產科檢查室、人流室、治療室、注射室、換藥室、輸血科、消毒供應中心、血液透析中心（療室、注射室、換藥室、輸血科、消毒供應中心、血液透析中心（室）、急診室、化驗室、各類普通病室、感染疾病科門診及其病房室）、急診室、化驗室、各類普通病室、感染疾病科門診及其病房空氣中的細菌菌落總數空氣中的細菌菌落總數4cfu/(5min直徑直徑9cm平皿平皿)。 新規范的檢測單位復雜，分別為：新規范的檢測單位復雜，分別為

11、：XXcfu/(5min直徑直徑9cm平皿平皿)、XXcfu(15min直徑直徑9cm平皿平皿)、XXcfu/(30min直徑直徑9cm平皿平皿)。不同的區域采樣時間的。不同的區域采樣時間的要求是不相同的，參考范圍也不相同的。所以，在送檢要求是不相同的，參考范圍也不相同的。所以，在送檢的空氣平板上必須標明采樣的地點和時間。的空氣平板上必須標明采樣的地點和時間。（原參考范圍：（原參考范圍：類區域類區域 細菌總數細菌總數10cfu/,類區域類區域 細菌總數細菌總數200cfu/ ,類區域類區域 細菌總數細菌總數500cfu/ ） a、層流手術室采樣布點在地面上或不高于地面、層流手術室采樣布點在地面

12、上或不高于地面0.8m的任意的任意 高度上。高度上。 層流手術室空氣監測細菌菌落數，以沉降法為標準：層流手術室空氣監測細菌菌落數，以沉降法為標準：級特別潔凈手術室手術區的菌落數是級特別潔凈手術室手術區的菌落數是0.2個個/30min；周邊；周邊區是區是0.4個個/30min ；級標準潔凈手術室手術區的菌落數是級標準潔凈手術室手術區的菌落數是0.75個個/30min；周邊；周邊區是區是1.5個個/30min 級一般潔凈手術室手術區的菌落數是級一般潔凈手術室手術區的菌落數是2個個/30min；周邊區；周邊區是是4個個/30min 級準潔凈手術室手術區的菌落數是級準潔凈手術室手術區的菌落數是5個個/

13、30min；周邊區是；周邊區是5個個/30min 。層流手術室空氣監測層流手術室空氣監測b、 層流手術室空氣監測細菌菌落數衛生標準（表）層流手術室空氣監測細菌菌落數衛生標準（表） 手術室分類手術室分類 衛生標準（以沉降法為標準）衛生標準（以沉降法為標準） 手術區手術區 周邊區周邊區 級特別潔凈手級特別潔凈手術室術室 0.2個個/30min 0.4個個/30min 級標準潔凈手級標準潔凈手術室術室 0.75個個/30min 1.5個個/30min 一般潔凈手術一般潔凈手術室室 2個個/30min 4個個/30min 級標準潔凈手級標準潔凈手術室術室 5個個/30min 5個個/30min c、百

14、級手術間每間至少需要平板13個，暴露時間為30分鐘。手術區周邊區d、千級手術室每間至少需要平板、千級手術室每間至少需要平板5個，暴露時間為個，暴露時間為30分鐘分鐘。手術區周邊區e e、萬級手術室，每間至少需要、萬級手術室，每間至少需要3 3個，暴露時間為個，暴露時間為3030分鐘分鐘。手術區周邊區f、 層流手術室空氣監測沉降法空氣采樣選擇平皿數（表）層流手術室空氣監測沉降法空氣采樣選擇平皿數（表）被測區域潔凈度級別 最少培養皿數（9cm，以沉降30min計） 100131000510000310000023000002采樣時間：采樣時間： 采取更換前使用中的消毒劑與無菌器械保存液。采取更換前

15、使用中的消毒劑與無菌器械保存液。 請抽取被檢樣品請抽取被檢樣品5ml送檢送檢醇類和酚類消毒劑用普通營養肉湯作稀釋液。醇類和酚類消毒劑用普通營養肉湯作稀釋液。含氯消毒劑、含碘消毒劑、過氧化物消毒液需在肉湯內加入含氯消毒劑、含碘消毒劑、過氧化物消毒液需在肉湯內加入0.1%硫代硫酸鈉作稀釋液。硫代硫酸鈉作稀釋液。季銨鹽類消毒液需在肉湯中加入季銨鹽類消毒液需在肉湯中加入3% Tween 80和和0.3卵磷脂卵磷脂作稀液。作稀液。含有表面活性劑的各種復方消毒劑需在肉湯中加入含有表面活性劑的各種復方消毒劑需在肉湯中加入3Tween 80作稀釋液。作稀釋液。4 消毒劑和無菌器械保存液的微生物學監測消毒劑和無

16、菌器械保存液的微生物學監測細菌菌落總數檢查：細菌菌落總數檢查： 分別取分別取1ml采樣液放入采樣液放入2只滅菌平皿內，用普通營養瓊脂只滅菌平皿內，用普通營養瓊脂作傾注培養，將平板放作傾注培養，將平板放37溫箱內培養溫箱內培養48 小時計數菌落。小時計數菌落。 平板上有菌生長，證明被檢樣液有殘存活菌，若每個平平板上有菌生長，證明被檢樣液有殘存活菌，若每個平板菌落數在板菌落數在10個以下，仍可用于消毒使用（但不能用于滅個以下，仍可用于消毒使用（但不能用于滅菌）；若每個平板菌落數超過菌）；若每個平板菌落數超過10個，說明每毫升被檢樣液含個，說明每毫升被檢樣液含菌量已超過菌量已超過100個，不宜再用。

17、個，不宜再用。 a、 所有蒸汽和環氧乙烷氣體的滅菌器至少每周所有蒸汽和環氧乙烷氣體的滅菌器至少每周1次用活芽胞次用活芽胞桿菌作滅菌效果評價，干熱滅菌每月監測桿菌作滅菌效果評價，干熱滅菌每月監測1次。次。采樣時間：與被消毒或滅菌物品同時監測。采樣時間：與被消毒或滅菌物品同時監測。布點方法：小型滅菌器選布點方法：小型滅菌器選1個包裝物品放入指示劑，置最底層個包裝物品放入指示劑，置最底層中央；中型滅菌器選中央；中型滅菌器選3個包裝物品放入指示劑，上層中央放個包裝物品放入指示劑，上層中央放一個，下層前后各一個；大型滅菌器選一個，下層前后各一個；大型滅菌器選5個包裝物品放入指個包裝物品放入指示劑，上、中

18、層中央各放示劑，上、中層中央各放1個，下層前、中、后部各放個，下層前、中、后部各放1個。個。監測方法：采用衛生部批準的化學指示劑和嗜熱脂肪芽胞桿菌監測方法：采用衛生部批準的化學指示劑和嗜熱脂肪芽胞桿菌（ATCC 7953、ATCC 12980或或SSIK31株）作為生物指示株）作為生物指示劑劑 。5、壓力蒸汽滅菌器滅菌效果監測、壓力蒸汽滅菌器滅菌效果監測b 、環氧乙烷氣體滅菌的效果監測、環氧乙烷氣體滅菌的效果監測 （1）采樣時間：與被消毒或滅菌物品同時監測。）采樣時間：與被消毒或滅菌物品同時監測。 （2）監測方法：用環氧乙烷滅菌指示片）監測方法：用環氧乙烷滅菌指示片 ，其由紅色變，其由紅色變

19、成藍色表示滅菌完全。成藍色表示滅菌完全。 枯草芽胞桿菌黑色變種（枯草芽胞桿菌黑色變種（ATCC 9372）作為生物指示劑。）作為生物指示劑。 紫外線燈管輻射強度值的測定：紫外線燈管輻射強度值的測定： 1、開啟紫外線燈、開啟紫外線燈5min后，按說明書操作，將測定波長為后，按說明書操作，將測定波長為253.7 nm的紫外線強度測定儀（指定有效期內）探頭置被的紫外線強度測定儀（指定有效期內）探頭置被檢紫外線燈下垂直檢紫外線燈下垂直1m的中央處，儀表穩定后所示數據即為的中央處，儀表穩定后所示數據即為紫外線燈管的輻射強度值。其中紫外線燈管的輻射強度值。其中30W直管型紫外燈新燈管輻直管型紫外燈新燈管輻

20、射強度值射強度值90微瓦微瓦秒秒/ c ，使用中輻射強度值，使用中輻射強度值70微瓦微瓦秒秒/ c ； 150W高強度紫外線新燈的輻射強度值高強度紫外線新燈的輻射強度值200微瓦微瓦秒秒/ c 。70微瓦微瓦秒秒/ c 。 6、紫外線消毒效果監測、紫外線消毒效果監測 2、紫外線強度指示卡監測法（四環、紫外線強度指示卡監測法（四環R牌）牌）【性能與原理性能與原理】紫外線強度指示卡由紫外線光敏色塊、標準色紫外線強度指示卡由紫外線光敏色塊、標準色塊和卡片紙組成。塊和卡片紙組成。 紫外線光敏色塊以涂有聚乙烯膜的卡片紙為片基，將對波紫外線光敏色塊以涂有聚乙烯膜的卡片紙為片基，將對波長長253.7nm的紫

21、外線敏感的化學物質和輔料均勻的涂布于片的紫外線敏感的化學物質和輔料均勻的涂布于片基上制成涂料卡，并粘貼在卡片紙中央制成。標準色塊的輻基上制成涂料卡，并粘貼在卡片紙中央制成。標準色塊的輻照強度值分別為照強度值分別為90微瓦微瓦秒秒/ c和和70微瓦微瓦秒秒/ c ，印制在，印制在紫外線光敏色塊的兩側。受到規定波長的紫外線照射后，光紫外線光敏色塊的兩側。受到規定波長的紫外線照射后，光敏色塊由乳白色變成不同程度的淡紫色。敏色塊由乳白色變成不同程度的淡紫色。【使用范圍使用范圍】檢測紫外線燈輻照強度值（檢測紫外線燈輻照強度值（ 90微瓦微瓦秒秒/ c和和70微瓦微瓦秒秒/ c ）是否達到使用要求。用于紫外線輻照強度值