1、一、名詞解釋1. 氣溶膠（aerosol ）液體或固體懸浮于氣體介質(zhì)中粒徑一般為0.001-100卩nm勺固態(tài)或液態(tài)微小粒子形成的穩(wěn)定的分散體系2. 實(shí)驗(yàn)室生物安全對(duì)（課指在從事病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的實(shí)驗(yàn)室中避免病原微生物對(duì)工作人員和相關(guān)人員的危害，環(huán)境的污染和對(duì)公眾的危害，為了保證試驗(yàn)研究的科學(xué)性還要保護(hù)被試驗(yàn)因子免受污染。 本第1頁(yè)）1. 簡(jiǎn)述實(shí)驗(yàn)室生物安全的重要意義。1. 開(kāi)展病原微生物研究的需要2. 生物防護(hù)（國(guó)防）的需要3. 傳染病預(yù)防與控制的需要4. 動(dòng)物防疫工作的需要5. 出入境檢驗(yàn)檢疫工作的需要6. 醫(yī)院感染控制的需要2. 試述我國(guó)微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全有哪些相關(guān)的法律法規(guī)?1.

2、中華人民共和國(guó)傳染病防治法2. 病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例3. 人間傳染的病原微生物名錄4. 醫(yī)療廢物管理?xiàng)l例5. 實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求（GB19489-2008）6. 生物安全實(shí)驗(yàn)室建設(shè)技術(shù)規(guī)范（GB50346-2011）7. 微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則（WS233-2002）8. 可感染人類(lèi)的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸管理規(guī)定3. 試述微生物菌毒種及樣本的運(yùn)輸與保藏方法。一、 運(yùn)輸1. 感染性物質(zhì)運(yùn)輸?shù)娜匕b體系內(nèi)層容器：將樣品采用防水、防漏的內(nèi)層容器包裝并貼上指示內(nèi)容物的標(biāo)簽中層包裝：內(nèi)層容器和中層容器間應(yīng)放置足量的吸水性材料外層包裝：硬質(zhì)2. 托運(yùn)人培

3、訓(xùn)如果不采用路運(yùn)，而采用航空，則按照國(guó)家民用航空總局批準(zhǔn)培訓(xùn)中介空運(yùn)咨詢(xún)服務(wù)有 限公司承運(yùn)3. 運(yùn)輸審批3.1申請(qǐng)資料3.1.1.填寫(xiě)樣本運(yùn)輸申請(qǐng)表；3.1.2 法人資格證明材料（復(fù)印件）；3.1.3 接收樣本單位同意接收的證明文件；3.1.4 容器或包裝材料的批準(zhǔn)文號(hào)、合格證書(shū)（復(fù)印件）或者高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸容器或包裝材料承諾書(shū)；3.1.5 其它有關(guān)資料。4. 專(zhuān)人護(hù)送4.1運(yùn)輸高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本，應(yīng)當(dāng)有專(zhuān)人護(hù)送，護(hù)送人員不得少于兩人；4.2申請(qǐng)單位應(yīng)當(dāng)對(duì)護(hù)送人員進(jìn)行相關(guān)的生物安全知識(shí)培訓(xùn)；4.3在護(hù)送過(guò)程中采取相應(yīng)的防護(hù)措施。5. 運(yùn)輸后續(xù)工作規(guī)定第十六

4、條在運(yùn)輸結(jié)束后，申請(qǐng)單位應(yīng)當(dāng)將運(yùn)輸情況向原批準(zhǔn)部門(mén)書(shū)面報(bào)告。二、保藏方法（請(qǐng)大家自己發(fā)揮）1. 保藏機(jī)構(gòu)：實(shí)驗(yàn)室在相關(guān)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)結(jié)束后，應(yīng)及時(shí)將病原微生物菌（毒）種和樣本就地銷(xiāo)毀或送交保藏機(jī)構(gòu)保管。2. 保藏管理：帳目（總帳和分類(lèi)帳）和實(shí)際庫(kù)存相符；有進(jìn)出和操作記錄：編號(hào)（唯一標(biāo)示號(hào)）來(lái)源；名稱(chēng)（種名和株名）；保存方法和保存日期； 批號(hào)或代次；分發(fā)。4. 生物安全實(shí)驗(yàn)室根據(jù)安全等級(jí)不同可分為幾個(gè)類(lèi)型？（四類(lèi)）一級(jí)生物安全防護(hù)水平（BSL 1）適合于已知其特征的、在健康成人中不引起疾病的、對(duì)實(shí)驗(yàn)室 工作人員和環(huán)境危害性最小的生物因子的工作。許多通常與人類(lèi)疾病不相關(guān)的病原微生物是條件致病性的。 對(duì)于

5、在體內(nèi)已經(jīng)繁殖多代的疫苗株不要簡(jiǎn)單地認(rèn)為是無(wú)毒的。二級(jí)生物安全防護(hù)水平（ BSL 2） 適用于操作我國(guó)的第三類(lèi)（少量二類(lèi)）危害的致病微生物。 適合于從未知病原的人身上取血、體液和組織。三級(jí)生物安全防護(hù)水平（ BSL 3） 適用于操作我國(guó)第二類(lèi)（個(gè)別第一類(lèi)）病原微生物。四級(jí)生物安全防護(hù)水平（ BSL 4）適用于操作我國(guó)第一類(lèi)病原微生物。 另外， 與四級(jí)生物安全防護(hù)水平的微生物具有相近的 或一致的抗原關(guān)系的微生物也應(yīng)該在該防護(hù)水平進(jìn)行研究。我國(guó)尚未發(fā)現(xiàn)或已經(jīng)滅絕的微生物 5如何建設(shè)一個(gè)生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室？ 在滿(mǎn)足 BSL 1實(shí)驗(yàn)室設(shè)施的基礎(chǔ)上，增加以下內(nèi)容：門(mén)應(yīng)能夠自動(dòng)關(guān)閉，有可視窗。有適當(dāng)?shù)幕馂?zāi)

6、報(bào)警器不需特殊的通風(fēng)設(shè)備。 但在計(jì)劃安裝新的設(shè)備時(shí)， 應(yīng)當(dāng)考慮要設(shè)置通風(fēng)系統(tǒng)， 使空氣向內(nèi) 流動(dòng)而不發(fā)生循環(huán)。 如果沒(méi)有通風(fēng)系統(tǒng)， 那么實(shí)驗(yàn)室窗戶(hù)應(yīng)當(dāng)能夠打開(kāi)， 同時(shí)要安裝防蟲(chóng)的 紗窗。實(shí)驗(yàn)室所在建筑內(nèi)配備高壓蒸汽滅菌器。 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)使用專(zhuān)門(mén)的工作服；戴乳膠手套。有可靠的電力供應(yīng)和應(yīng)急照明。必要時(shí)，重要設(shè)備如培養(yǎng)箱、生物安全柜、冰箱等應(yīng)設(shè)備 用電源。實(shí)驗(yàn)室出口有黑暗中可明確辨認(rèn)的標(biāo)識(shí)。 應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)配備生物安全柜。簡(jiǎn)略版： 可自動(dòng)關(guān)閉門(mén)、 生物安全標(biāo)識(shí)、 可靠的電力供應(yīng)和應(yīng)急照明、 專(zhuān)用個(gè)人防護(hù)設(shè)施 （一 級(jí)防護(hù)）、生物安全柜、高壓蒸氣滅菌器補(bǔ)充 ;BSL-1 的設(shè)施要求應(yīng)為安全運(yùn)行以及清潔和維

7、護(hù) 提供充足的空 間。實(shí)驗(yàn)室的工作區(qū)域外有存放外衣和私人物品的設(shè)備。 應(yīng)該有洗手池，最好安裝在出口處。窗子和門(mén)入口處安裝防媒介昆蟲(chóng)和嚙齒動(dòng)物的實(shí)驗(yàn)室的墻壁、天花板和地板應(yīng)當(dāng)是光滑、易清潔、不滲水以及耐化學(xué)品和消毒劑的腐蝕。地板應(yīng)當(dāng)是防滑的，同時(shí)應(yīng)盡可能地避免管線暴露在外。實(shí)驗(yàn)臺(tái)應(yīng)當(dāng)密圭寸于墻上，不滲水，并可耐消毒劑、酸、堿、有機(jī)溶劑的腐蝕并能適度耐熱。在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行操作時(shí)均應(yīng)保證照明，避免不必要的反光和閃光。6 生物安全柜可分為幾個(gè)等級(jí)？簡(jiǎn)述其基本原理（請(qǐng)大家自己發(fā)揮）。生物安全柜（BSC有三個(gè)級(jí)別，即I級(jí)、n級(jí) （A1、A2、B1、B2型）和川級(jí)一共有6種。川級(jí)為密閉袖套操作，其余為前開(kāi)口操

8、作。所有生物學(xué)污染的管道均為負(fù)壓狀態(tài)或由負(fù)壓的管道通風(fēng)系統(tǒng)包圍。原理（來(lái)源百度百科）：一級(jí)生物安全柜可保護(hù)工作人員和環(huán)境而不保護(hù)樣品。氣流原理和實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)櫥一樣，不同之處在于排氣口安裝有 HEPA過(guò)濾器。所有類(lèi)型的生物安全柜都在排氣和進(jìn)氣口使用HEPA過(guò)濾器。一級(jí)生物安全柜本身無(wú)風(fēng)機(jī)， 依賴(lài)外接通風(fēng)管中的風(fēng)機(jī)帶動(dòng)氣流， 由于不能對(duì)試驗(yàn) 品或產(chǎn)品提供保護(hù)，目前已較少使用。二級(jí)生物安全柜是目前應(yīng)用最為廣泛的柜型。與I級(jí)生物安全柜一樣，n級(jí)生物安全柜也有氣流流入前窗開(kāi)口， 被稱(chēng)作“進(jìn)氣流”，用來(lái)防止在微生物操作時(shí)可能生成的氣溶膠從前窗逃逸。與I級(jí)生物安全柜不同的是， 未經(jīng)過(guò)濾的進(jìn)氣流會(huì)在到達(dá)工作區(qū)域

9、前被進(jìn)風(fēng)格柵俘獲，因此試驗(yàn)品不會(huì)受到外界空氣的污染。n級(jí)生物安全柜的一個(gè)獨(dú)特之處在于經(jīng)過(guò)HEPA過(guò)濾器過(guò)濾的垂直層流氣流從安全柜頂部吹下，被稱(chēng)作“下沉氣流”。下沉氣流不斷吹過(guò)安全柜工作區(qū)域，以保護(hù)柜中的試驗(yàn)品不被外界塵埃或細(xì)菌污染。三級(jí)生物安全柜是為 4級(jí)實(shí)驗(yàn)室生物安全等級(jí)而設(shè)計(jì)的，是目前世界上最高安全防護(hù)等級(jí)的安全柜。柜體完全氣密，100%全排放式，所有氣體不參與循環(huán)，工作人員通過(guò)連接在柜體的手套進(jìn)行操作，俗稱(chēng)手套箱 （Golve box），試驗(yàn)品通過(guò)雙門(mén)的傳遞箱進(jìn)出安全柜以確保不受 污染，適用于高風(fēng)險(xiǎn)的生物試驗(yàn)。7.簡(jiǎn)述正確使用生物安全柜的方法（自由發(fā)揮）應(yīng)安裝在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)氣流流動(dòng)小，人員走

10、動(dòng)少，離門(mén)和中央空調(diào)送風(fēng)口較遠(yuǎn)的地方。生物安全柜的周?chē)鷳?yīng)有一定的空間，與墻壁至少保持30cm的距離，便于清潔環(huán)境衛(wèi)生。注意保潔，每天做完實(shí)驗(yàn)后，清除所有廢棄物，再用75%酉精消毒。一般濾膜有5-10年使用壽命，在儀器壓力表顯示壓力為50%勺時(shí)候，需要更換濾膜。在使用前先開(kāi)機(jī)自?xún)簦㈤_(kāi)啟紫外線滅菌燈， 確保工作區(qū)無(wú)污染達(dá)到百級(jí)狀態(tài)。滅菌時(shí) 應(yīng)關(guān)閉前窗。工作時(shí)前窗開(kāi)啟高度應(yīng)小于 200mm區(qū)域內(nèi)氣壓正常。工作臺(tái)面為304不銹鋼，有污染物殘時(shí)應(yīng)及時(shí)用酒精清理干凈，以確保工作臺(tái)面使用壽命。開(kāi)啟前窗時(shí)應(yīng)注意不使設(shè)備受到強(qiáng)烈振動(dòng)，以保持平板玻璃的完整性。由于剩余的培養(yǎng)基可能會(huì)使微生物生長(zhǎng)繁殖，因此在實(shí)驗(yàn)結(jié)

11、束時(shí)，包括儀器設(shè)備在內(nèi)的生物安全柜里的所有物品都應(yīng)清除表面污染，并移出安全柜。在每次使用前后，要清除生物安全柜內(nèi)表面的污染。工作臺(tái)面和內(nèi)壁要用消毒劑進(jìn)行擦拭，所用的消毒劑要能夠殺死安全柜里可能發(fā)現(xiàn)的任何微生物。在每天實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，應(yīng)擦拭生物安全柜的工作臺(tái)面、四周以及玻璃的內(nèi)外側(cè)等部位來(lái)清除表面的污染。在對(duì)目標(biāo)生物體有效時(shí)，可以采用漂白劑溶液或 70%酉精來(lái)消毒。在使用如漂白劑等腐蝕性消毒劑后，還必須用 無(wú)菌水再次進(jìn)行擦拭。8舉例說(shuō)明在生物安全實(shí)驗(yàn)室注重操作細(xì)節(jié)的重要性。（自由發(fā)揮）1.1956年，前蘇聯(lián)的一個(gè)實(shí)驗(yàn)室曾有9支裝有感染了委內(nèi)瑞拉馬腦炎病毒鼠腦的安瓿被打破。由于沒(méi)采取必要的措施，結(jié)果在

12、幾天內(nèi)造成24名工作人員感染；2.1998年，我國(guó)某大城市的某高校在使用大白鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，有兩名學(xué)生被大白鼠咬傷，還有一些學(xué)生在給實(shí)驗(yàn)老鼠放血、解剖的過(guò)程中，未按照要求戴手套操作，結(jié)果在29名實(shí)驗(yàn)人員中，有9人感染了流行性出血熱；3. 三起嚴(yán)重的實(shí)驗(yàn)室 SARS病毒感染事件1. 新加坡的實(shí)驗(yàn)室 sars感染事件2. 中國(guó)臺(tái)灣地區(qū)的實(shí)驗(yàn)室感染事件3. 中國(guó)大陸的實(shí)驗(yàn)室感染事件從以上幾起事故中不難看出，發(fā)生感染的一個(gè)共同原因是工作人員主觀上的麻痹大意，沒(méi)有遵守實(shí)驗(yàn)室的安全操作規(guī)則和程序，即使具有完善的設(shè)備和標(biāo)準(zhǔn)的操作程序也不能杜絕事故的發(fā)生，因而加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室的安全監(jiān)督管理是防止此類(lèi)事件發(fā)生的首要任務(wù)

13、。9. 消毒滅菌的方法有哪些？1.化學(xué)消毒滅菌液體化學(xué)試劑殺滅微生物繁殖體或芽孢對(duì)象:物體表面、空氣和污染物等方式：擦洗、熏蒸和浸泡等2. 物理消毒滅菌紫外線、高壓蒸汽滅菌、焚燒和 HEPAi濾除菌等。10. 什么是實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)的危害評(píng)估？對(duì)某一個(gè)特定的操作程序或?qū)嶒?yàn)或微生物種類(lèi)的危險(xiǎn)度進(jìn)行評(píng)估，最有效的工具之一就是列出微生物的危險(xiǎn)度等級(jí)。11. 如何進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)的危害評(píng)估？（自由發(fā)揮）依據(jù)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求（GB19489-2008）,危害程度評(píng)估至少包括以下內(nèi)容；生物因子的種類(lèi)（已知的、未知的、基因修飾的或未知傳染性的生物材料，來(lái)源、傳染性、致病性、傳播途徑、在環(huán)境中的穩(wěn)定性、感染劑量、濃度、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)、預(yù)防和治療。12.13.試述人間傳染的病原微生物名錄對(duì)實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)的危害評(píng)估的 重要性。（自由發(fā)揮）1病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例按危害程度對(duì)病原體進(jìn)行分類(lèi)：四類(lèi)病原微生物，危害逐級(jí)降低；實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求（GB19489-2008），根據(jù)生物因子對(duì)個(gè)體和群體的危害程度將其分為 4級(jí)，危害逐級(jí)增強(qiáng)。以上兩種分類(lèi)方法與國(guó)際不接軌，在使用過(guò)程 中易引起混亂，可采用人間傳染的病原微生物名錄的分類(lèi)方法；2.3人間傳染的病原微生物名錄將380種人間傳染病原微生物分為三大類(lèi)，分別是