1、自身抗體測定在風濕病診斷中的意義 自身抗體與分類命名自身抗體（autoantibodies）： 各種原因造成B細胞產生針對自身組織成分的抗體。生理性（親和力、滴度、閾值），病理性。分類： 按照自身抗體在體內分布分為器官/組織特異性抗體和非器官/組織特異性抗體。按照基質不同分為細胞特異性抗體和非特異性抗體等等。細胞抗體主要為非器官/組織特異性抗體，組織抗體主要為器官/組織特異性抗體。命名： 以抗體在細胞和組織位置命名（胞漿、核、核仁、線粒體），以靶細胞和靶組織命名等等。 以患者名字命名（Sm、Ro） 以疾病名字命名（SS-A、Scl-70） 以抗原的化學性質命名（RNP、DNA） 以抗原的部位命

2、名（Anti-mDNA）。 自身抗體檢測方法 免疫熒光法免疫熒光法（ immunofluorescence , IF) 酶聯免疫吸附法酶聯免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay ,ELISA) 放射免疫法放射免疫法(radioimmunoassay , RIA) 被動血凝法被動血凝法(passive hemagglulination , PHA) 顆粒凝集法顆粒凝集法(particle agglutination , PA) 對流免疫電泳法對流免疫電泳法(countercurrent immunoelectrophoresis , CIE) 免疫雙擴散法

3、免疫雙擴散法(agar gel double immunodiffusion , ID or DID) 免疫印跡法免疫印跡法(immunoblotting , IB) 免疫沉淀法免疫沉淀法(radioimmuno precipitation assy , RIP) 斑點酶免疫滲透試驗斑點酶免疫滲透試驗(dot immunoenzyme filtration assy , DIEFA) 斑點金免疫結合試驗斑點金免疫結合試驗(dot immnuogold filtration , DIGFA)間接免疫熒光法原理原理熒光顯微鏡下ANA的染色型別 均質型：與抗組蛋白和抗均質型：與抗組蛋白和抗DNADN

4、A有關有關 斑點型：與抗斑點型：與抗ENAENA有關有關 周邊型：與抗周邊型：與抗dsDNAdsDNA有關有關 核仁型：核仁型：4-6sRNA4-6sRNA 著絲點型：在著絲點型：在SDSD及及CRESTCREST中出現中出現ANA：均質型 EUROIMMUN抗核抗體抗核抗體ANA：斑點型EUROIMMUN抗核抗體抗核抗體ANA：核膜型EUROIMMUN抗核抗體抗核抗體Westernblot HEp-2 cell extract免疫印跡法檢測免疫印跡法檢測ENA原理原理國內現狀自身抗體的測定不普遍自身抗體的測定不普遍欠規范欠規范對其意義了解尚少對其意義了解尚少缺乏研究缺乏研究自身抗體自身抗體測

5、定測定準確率欠佳的原因分析準確率欠佳的原因分析1. 測定方法不規范測定方法不規范 底物選擇底物選擇(鼠肝、鼠肝、Hep-2); 試驗方法試驗方法(IIF、ELISA、IB)2. 試劑試劑(盒盒)標準化問題標準化問題 廠家不同，質量參差不齊廠家不同，質量參差不齊3. 技術人員專業水平技術人員專業水平 嚴格的培訓；操作方法及結果判定的差異嚴格的培訓；操作方法及結果判定的差異 表1 1 放置放置4 1d4 1d、3d3d、5d5d、7d7d、14d14d時血清時血清APFAPF轉陰率轉陰率Table 1 Lost of positive rate of APF after serum had bee

6、nTable 1 Lost of positive rate of APF after serum had been separately stored for 1,3,5,7,14days at 4 separately stored for 1,3,5,7,14days at 4 a P0.01 vs controls 表表2 2 室溫分別放置室溫分別放置1d1d、2d 2d 、3d3d、5d5d、7d7d時血清時血清APFAPF的轉陰率的轉陰率Table 2 Lost of positive rate of APF after serum had been separatelyTable

7、 2 Lost of positive rate of APF after serum had been separately stored for 1,2,3,5,7days at room temperature stored for 1,2,3,5,7days at room temperaturea P0.01與對照組轉陰率的比較值 2、抗原底物在不同溫度保存不同時間對血清APF的檢出率影響 將抗原片于4保存保存至3天時已出現APF的檢出率的丟失（10%），無統計學意義；到5天后天后已有35%的檢出率的丟失，具有統計學意義（P0.05）；放置7天后檢出率的丟失為40%，統計學意義顯著（

8、P0.01）； 放置14天檢出率的丟失已有一半（見表3）。而在-20下保存下保存2周內檢出率無變化。周內檢出率無變化。 表表3 4時時 抗原底物保存時間對血清抗原底物保存時間對血清APF的檢出率影響的檢出率影響Table 3 Influence of time of antigenic substrate be stored on the occurrence of APF in serum a P0.05 vs controls, b P0.01 vs controls2004年抗體結果正確率分析年抗體結果正確率分析 0 9.0 0 9.8 13.4 11.1 14.8 14.9 27.86

9、16718 0 7.0 7.865抗抗dsDNA抗抗ENAASMAANA參加參加醫院醫院3/3 2/3 1/3 0/3 結果正確率結果正確率 (%)項目項目85.275.462.761.12002-2004年質控結果的比較年質控結果的比較020406080100120dsDNA抗抗ANA抗抗ENAAMAASMA自身抗體自身抗體檢測的正確率檢測的正確率200220032004ANA檢測的意義 有助于疾病的診斷，如抗Sm是SLE標記抗體；抗ScL-70 是SD的標記抗體，抗Jo-1是PM/DM的標記抗體 觀察疾病活動度和治療反應 研究發病機理幾種核抗原分子特性幾種核抗原分子特性Native DNA

10、(dsDNA) Histone H1,H2A,H2B,H3,H4 Sm u1 u2 u4 u5 u6 Sn RNA 復合物三種主要核蛋白復合物三種主要核蛋白帶帶:B(29), B(28); 三 種 主 要 核 蛋 白 帶三 種 主 要 核 蛋 白 帶 :B(29), B(28); D(16);E(13)Kd;與信使與信使 RNA 前體拼接有前體拼接有關關. RNP(u1RNP) u1SnRNA 復 合 物復 合 物 二 種 主 要 核蛋 白帶二 種 主 要 核蛋 白帶 ： 70kd 22kd(c)及及 33kd(A). SSA/RO Y1-Y5RNA 復合物復合物，60kd 和和 52kd 核

11、蛋白。核蛋白。 SSB/La,Ha 多聚酶轉錄中的多聚酶轉錄中的磷酸蛋白質（主要為磷酸蛋白質（主要為 48kd）. 幾種核抗原分子特性幾種核抗原分子特性Ku 70kd 和和 80kd 與與 DNA 結合的蛋白質結合的蛋白質 rRNP 與胞漿中核糖體有關，與胞漿中核糖體有關，15kd,16kd,38kd 磷磷酸蛋白酸蛋白 PCNA DNA 多聚酶， （多聚酶， （36kd） ScL-70 DNA 拓撲異構酶，拓撲異構酶，100kd 天然蛋白，天然蛋白，70kd變性蛋白變性蛋白 Jo-1 50kd/60kd 組氨酸組氨酸-tRNA 合成酶合成酶 PM-ScL(PM-1) 11 種蛋白質復合物，分子

12、量在種蛋白質復合物，分子量在 110kd-20kd Centromere 17kd,80kd,140kd 三種染色體蛋白， 亦稱著三種染色體蛋白， 亦稱著絲點蛋白絲點蛋白 傳統定義：傳統定義：顧名思義是指抗細胞核抗原成分的自身抗體的顧名思義是指抗細胞核抗原成分的自身抗體的總稱總稱 狹義定義狹義定義 現代定義：現代定義：是指抗細胞內所有抗原成分的自身抗體的總稱。是指抗細胞內所有抗原成分的自身抗體的總稱。對對ANAANA的理解已不再局限于核成分，而是指抗的理解已不再局限于核成分，而是指抗核酸核酸(nucleic acid)(nucleic acid)和核蛋白和核蛋白（nucleoprotein)n

13、ucleoprotein)抗體的總稱抗體的總稱 廣義定義廣義定義 靶抗原分布靶抗原分布： 細胞核細胞核 細胞核、細胞漿、細胞骨架、細胞分裂周期細胞核、細胞漿、細胞骨架、細胞分裂周期ANAANA由來由來中性粒細胞DNP(DNA-Histone)+抗DNP+補體均質體LE細胞LE細胞：并非SLE特有，PM、SD、RA、SS等結締組織病，藥物過敏，慢活肝等亦可陽性。抗DNP取代LE細胞的檢測+抗核抗體的分類抗核抗體的分類 1. 抗抗DNA抗體抗體抗雙鏈抗雙鏈DNA (dsDNA) 抗體抗體抗單鏈抗單鏈DNA (ssDNA) 抗體抗體抗左旋抗左旋DNA (z-DNA) 抗體抗體2. 抗組蛋白抗體抗組蛋

14、白抗體總組蛋白抗體（總組蛋白抗體（AHA） H1、H2a、H2b、H3、H4 3. 抗非組抗非組 蛋白抗體蛋白抗體 抗可溶性核抗原抗可溶性核抗原(ENA)抗體抗體：Sm、RNP、SSA、SSB、Scl70、Jo-1、pM-1、PCNA、RANA、Ku、Mi-1、-2抗體、抗體、DNP抗體等。抗體等。 抗著絲點抗體抗著絲點抗體(ACA) 4. 抗核仁抗體抗核仁抗體: 抗抗5rRNA、核小體、核小體、U3nRNP、Nor-90抗體。抗體。 5. 抗其它細胞成分抗其它細胞成分: 線粒體、中心體等。線粒體、中心體等。抗核抗體抗核抗體組組蛋蛋白白與與DNA的的結結合合類風濕因子（Rheumatoid F

15、actor） 抗人或動物抗人或動物的的IgGIgG的的FCFC片段抗體。其本身片段抗體。其本身是免疫球蛋白，因此是免疫球蛋白，因此，RFRF有有IgGIgG、IgMIgM、IgAIgA型等。型等。RFRF無種族和種屬特異性無種族和種屬特異性 與與DNPDNP及半抗原（二硝基苯）有交叉反應。及半抗原（二硝基苯）有交叉反應。7S IgM(IgG7S IgM(IgG)-RF)-RF主要參與關節外癥狀的免主要參與關節外癥狀的免疫復合物形成，且與疾病活動性有關疫復合物形成，且與疾病活動性有關如何評價類風濕因子 是診斷是診斷RARA的標準之一，不是唯一標準，并非的標準之一，不是唯一標準，并非RARA特有特

16、有 作為血清陰性脊柱關節病區分標準作為血清陰性脊柱關節病區分標準 正常人正常人2%2%陽性，老年人可達陽性，老年人可達5%5%陽性陽性 RFRF與其他蛋白、半抗原有交叉反應與其他蛋白、半抗原有交叉反應 多種結締組織病（多種結締組織病（SLESLE，SDSD，SSSS，PM/DMPM/DM）感）感染疾病染疾病（SBESBE，TBTB，hepatitishepatitis）, ,肝硬化，肝硬化，彌漫性肺纖維化，結節病等均可陽性彌漫性肺纖維化，結節病等均可陽性 病后半年才產生，有關節外表現者，滴度高。病后半年才產生，有關節外表現者，滴度高。持續高滴度持續高滴度RFRF預示疾病嚴重，預后差預示疾病嚴重

17、，預后差類風濕關節炎的自身抗體類風濕關節炎的自身抗體名名 稱稱敏感性敏感性(%)特異性特異性(%)類類風濕因子風濕因子RA33/36抗體抗體Sa抗體抗體抗角蛋白抗體抗角蛋白抗體抗核周因子抗核周因子抗抗CCP抗體抗體抗抗CB10抗體抗體抗抗BiP抗體抗體50-70 25-45373338-6260-7072708693.678-9787-9270-909670-8892自身抗體與自身抗體與風濕病風濕病62.374.384.3405060708090RFCCPRF/CCP敏感度（敏感度（%）不同抗體檢測的敏感度不同抗體檢測的敏感度聚絲蛋白聚絲蛋白抗體群抗體群不同抗體在不同抗體在RA診斷中的意義診斷

18、中的意義陽性抗體陽性抗體RA%(n=114)對照對照%(n=93)敏感度敏感度%特異度特異度%陽性預陽性預測值測值%RF711762.381.780.6CCP84574.394.694.3RF or CCP962084.398.482.7RF+CCP59251.797.896.7聚絲蛋白聚絲蛋白抗體群抗體群系統性紅斑狼瘡的自身抗體系統性紅斑狼瘡的自身抗體抗抗 體體 敏感性敏感性 (%) 特異性特異性 (%) 抗核抗體抗核抗體 (ANA)dsDNA抗體抗體抗抗Sm抗體抗體膜膜DNA抗體抗體核小體抗體核小體抗體U1RNP抗體抗體SS-A 抗體抗體SS-B 抗體抗體抗心磷脂抗體抗心磷脂抗體類風濕因子

19、類風濕因子PCNA抗體抗體組蛋白抗體組蛋白抗體核蛋白抗體核蛋白抗體809599949287-947040753095505099702578855025-351520-4025530-8058自身抗體與自身抗體與風濕病風濕病抗雙鏈DNA抗體（短膜蟲免疫熒光法 1:5） 病例數病例數 陽性率（陽性率（%） 正常人正常人 110 0 系統性紅斑狼瘡系統性紅斑狼瘡 64 活動期活動期 31 93.6 緩解期緩解期 33 3.0 類風濕關節炎類風濕關節炎 60 1.8 硬皮病硬皮病 13 0 多發性肌炎多發性肌炎 8 0 干燥綜合癥干燥綜合癥 15 0 白塞病白塞病 5 0 非結締組織病非結締組織病

20、222 1.7 抗組蛋白抗體（酶聯免疫吸附法X2SD) 系統性紅斑狼瘡系統性紅斑狼瘡 50% 其他結締組織病其他結締組織病23-30% 服異煙肼服異煙肼12月以上月以上53% 服苯妥因鈉服苯妥因鈉6月以上月以上18% 服他巴唑服他巴唑6個月個月0 活動期活動期SLE 90.2%陽性陽性 抗抗H1 H2A H2B H2A-H2B H3 H4H1 H2A H2B H2A-H2B H3 H4系統性紅斑狼瘡系統性紅斑狼瘡 + + + + + + + + + + +長期服異煙肼長期服異煙肼 + + + + + + + + + + +類風濕關節炎類風濕關節炎 + + + + + + + + + + +SL

21、E以以IgG型抗組蛋白抗體為主，而長期服煙肼型抗組蛋白抗體為主，而長期服煙肼及及RA病人以病人以IgM型為主型為主抗組蛋白抗體（免疫印跡法）幾種ENA的由來及同義詞 Sm：病人名：病人名：Smith RNP: u1RNP或或nRNP Nuclear Ribonucleoprotein SSA: RO Sjogrens syndrome A SSB: La, Ha, Sjogrens syndrome B Jo-1: 病人病人John ScL-70: Scleroderma常見結締組織病的抗核抗體的陽性率 ANA dsDNA Histone Sm n RNP SSA SSB ScL-70 Jo-

22、1 著絲點著絲點 核仁核仁SLE 90 （62） 50 （25）40 39 10 0 0 0 6SS 50 15 30 0 14 （75）（）（59） 0 0 0 9SD 75 5 27 0 12 19 5 30 0 （20）（）（39）PM/DM50 13 0 5 0 0 0 (20) 0 10RA 23 10 23 0 0 20 5 0 0 0 15+有指端硬化ANA 1:40（+），抗dsDNA30%(或1：5）（+）磷脂抗體（Phospholipid antibody） 多見于多見于SLESLE（70%70%），），SSSS、白塞病、自身、白塞病、自身免疫性血小板減少、真性紅細胞增多、

23、免疫性血小板減少、真性紅細胞增多、免疫性血管炎、習慣性流產、惡性腫瘤、免疫性血管炎、習慣性流產、惡性腫瘤、多發性硬化、傳染性疾病、腎上腺出血多發性硬化、傳染性疾病、腎上腺出血和和AddisonAddison病均可陽性病均可陽性抗磷脂抗體檢測 包括：狼瘡抗凝物；抗心脂抗體，包括：狼瘡抗凝物；抗心脂抗體，梅毒血清試驗假陽性。梅毒血清試驗假陽性。 抗磷脂抗體還有抗磷脂氨酸（抗磷脂抗體還有抗磷脂氨酸（Anti-Anti-phosphotidylphosphotidyl serine serine）和抗磷脂酸）和抗磷脂酸（Anti-phosphtidilAnti-phosphtidil acid aci

24、d）抗體等。）抗體等。抗磷脂抗體檢測 磷脂基因中具有抗原性：心磷脂、磷脂磷脂基因中具有抗原性：心磷脂、磷脂堿、酰絲氨酸、酰肌醇脂和酰乙醇脂等堿、酰絲氨酸、酰肌醇脂和酰乙醇脂等 2 2GP1GP1（載脂蛋白）與磷脂結合，使其（載脂蛋白）與磷脂結合，使其改變表面結構，暴露中被識別的抗原決改變表面結構，暴露中被識別的抗原決定簇，而呈現磷脂抗體特性定簇，而呈現磷脂抗體特性。2 2GP1GP1是是必需的輔助因子必需的輔助因子，測，測2 2GP1GP1可能比測可能比測ACLACL更有意義。更有意義。干燥綜合征的自身抗體自身抗體自身抗體 陽性率陽性率(%) ANA抗抗SSA抗體抗體抗抗SSB抗體抗體 抗抗a

25、 a-胞襯蛋白抗體胞襯蛋白抗體抗抗M3受體抗體受體抗體 類風濕因子類風濕因子ANCA抗抗M2抗體抗體 ACA抗抗RNP抗體抗體60-8050-7030-60 65-8792 60-8010-251327 自身抗體與自身抗體與風濕病風濕病其他風濕病的自身抗體硬皮病硬皮病(PSS) 皮肌炎皮肌炎/多肌炎多肌炎(DM/PM) 血管炎血管炎 抗磷脂抗體綜合征抗磷脂抗體綜合征 混合性結締組織病混合性結締組織病(MCTD)Scl-70抗體抗體抗著絲點抗體抗著絲點抗體(ACA)抗核抗體抗核抗體(ANA) PM-1抗體抗體Jo-1抗體抗體抗核抗體抗核抗體(ANA) 抗中性粒細胞胞漿抗體抗中性粒細胞胞漿抗體(A

26、NCA)抗內皮細胞抗體抗內皮細胞抗體(AECA) 抗磷脂抗體抗磷脂抗體(Acl)狼瘡抗凝物質狼瘡抗凝物質 U1RNP抗體抗體(70kd)抗核抗體抗核抗體(ANA)自身抗體與自身抗體與風濕病風濕病抗中性粒細胞胞漿抗體(ANCA)靶抗原：中性蛋白酶靶抗原：中性蛋白酶3 3（PR3PR3），髓過），髓過氧化物酶氧化物酶（MPOMPO），殺菌），殺菌/ /通透性增高通透性增高蛋白蛋白（BPIBPI），絲氨酸蛋白酶，人白細），絲氨酸蛋白酶，人白細胞彈性蛋白酶（胞彈性蛋白酶（HLEHLE），乳鐵蛋白），乳鐵蛋白（LFLF），組織蛋白酶），組織蛋白酶G G，葡萄糖醛酸葡萄糖醛酸酶，溶菌酶酶，溶菌酶抗中性粒細

27、胞胞漿抗體（Anti-Neutrophil Cytoplasmic Antibody,ANCA） cANCA(PR3cANCA(PR3蛋白酶蛋白酶) )中性粒細胞胞漿內熒中性粒細胞胞漿內熒光染色，其抗原是中性粒細胞顆粒內的光染色，其抗原是中性粒細胞顆粒內的和單核細胞溶酶體的絲氨酸蛋白酶，此和單核細胞溶酶體的絲氨酸蛋白酶，此種抗體主要種抗體主要與與WegenersWegeners肉芽腫相關，肉芽腫相關，且與疾病活動性相平行，結節性多動脈且與疾病活動性相平行，結節性多動脈炎也可陽性。炎也可陽性。抗中性粒細胞胞漿抗體（Anti-Neutrophil Cytoplasmic Antibody,ANCA

28、） pANCApANCA（MPOMPO）指核周染色，并非周邊型）指核周染色，并非周邊型核抗體。其抗原是胞漿內髓過氧化物酶，核抗體。其抗原是胞漿內髓過氧化物酶，彈力蛋白酶及某些成分，此種抗體與特彈力蛋白酶及某些成分，此種抗體與特發性新月體腎小球腎炎相關，且與疾病發性新月體腎小球腎炎相關，且與疾病活動度相平行。顯微鏡下多動脈炎，結活動度相平行。顯微鏡下多動脈炎，結節性多動脈炎也與之有關節性多動脈炎也與之有關 類風濕關節炎類風濕關節炎 抗抗CCP抗體抗體、BiP抗體、抗體、AFA、抗、抗GPI抗體、抗抗體、抗CB10抗體抗體 系統性紅斑狼瘡系統性紅斑狼瘡 抗膜抗膜DNA抗體抗體 、抗核小體抗體、抗核

29、小體抗體 、 Hu抗體抗體、SmD1抗體抗體 干燥綜合征干燥綜合征 抗抗M3抗體抗體 、抗、抗a a-胞襯蛋白抗體、抗胞襯蛋白抗體、抗b b-胞襯蛋白抗體胞襯蛋白抗體 其他其他 AECA、抗、抗Sp100抗體、抗抗體、抗Calpastatin抗體、抗抗體、抗a a-enolase抗體抗體新發現的自身抗體新發現的自身抗體自身抗體與自身抗體與風濕病風濕病抗聚絲蛋白抗體群抗聚絲蛋白抗體群1997抗聚絲蛋白抗體群的抗原抗聚絲蛋白抗體群的抗原決定簇與瓜氨酸殘基有關決定簇與瓜氨酸殘基有關 1993APF的抗原為前聚絲蛋白部分的抗原為前聚絲蛋白部分去磷酸化產物去磷酸化產物 1979發現以鼠食管角質層為底物的

30、發現以鼠食管角質層為底物的 RA特異性的抗體特異性的抗體AKA 1964發現以頰粘膜上皮細胞核周圍的角質透明蛋白顆粒發現以頰粘膜上皮細胞核周圍的角質透明蛋白顆粒為底物的為底物的 RA特異性抗體特異性抗體APF 抗聚絲蛋白抗體群抗聚絲蛋白抗體群研究回顧研究回顧1999發現抗發現抗CCP對對RA的特異性的特異性聚絲蛋白聚絲蛋白抗體群抗體群Novel exciting antibodiesin Rheumatoid Arthritis 抗核周因子（抗核周因子（APF）抗角蛋白抗體（抗角蛋白抗體（AKA）抗聚絲蛋白抗體（抗聚絲蛋白抗體（AFA）抗抗CCP抗體抗體 對應抗原對應抗原頰黏膜頰黏膜前聚絲蛋白

31、部分前聚絲蛋白部分去磷酸化產物去磷酸化產物聚絲蛋白的核心抗原聚絲蛋白的核心抗原多肽衍生物多肽衍生物 抗抗聚絲蛋白抗體群聚絲蛋白抗體群食道上皮食道上皮前聚絲蛋白及前聚絲蛋白及其中其中/酸性異構體酸性異構體純化聚絲蛋白純化聚絲蛋白聚絲蛋白聚絲蛋白抗體群抗體群 抗抗P68P68抗體抗體 新的類風濕關節炎特異性抗體新的類風濕關節炎特異性抗體 抗抗BiP抗體抗體 新的類風濕關節炎特異性抗體新的類風濕關節炎特異性抗體 以HeLa細胞為底物，分別加入待測血清和FITC標記的山羊抗人IgG, 各在室溫下孵育1小時，然后在熒光顯微鏡下觀察（4010),圖為抗BiP抗體陽性的熒光核型P68680.00%0.00%

32、10.00%10.00%20.00%20.00%30.00%30.00%40.00%40.00%50.00%50.00%60.00%60.00%70.00%70.00%RARASLESLEASASSSSSOAOAHEALTHHEALTH陽性率陽性率抗抗P68抗體在各種風濕性疾病中的陽性率抗體在各種風濕性疾病中的陽性率抗抗P68抗體在抗體在RA的敏感性和的敏感性和特異性特異性 敏感性為敏感性為 67.76% 特異性為特異性為 91.28%BiP抗抗P68抗體和其他自身抗體敏感性抗體和其他自身抗體敏感性及特異性的比較及特異性的比較類風濕類風濕關節炎關節炎抗抗P68抗體在血清陰性抗體在血清陰性RA患

33、者的陽性率患者的陽性率項目項目 例例 數數P68抗體陽抗體陽 性性 組組例數 %RFRF（- -）544379.679.6APFAPF（- -）592440.740.7AKAAKA（- -）512243.143.1CCPCCP（- -）845050RA33RA33（- -）131076.976.9HRFIgGHRFIgG（- -）461839.139.1HRFIgAHRFIgA（- -）452248.948.9類風濕關節炎的新抗原類風濕關節炎的新抗原(1)(1)抗原抗原 主要來源主要來源 致病機制致病機制 與臨床的關系與臨床的關系 HCgp-39(YKL-40) 軟骨基質軟骨基質 炎性細胞釋放

34、增加，參與組炎性細胞釋放增加，參與組織重建、基質降解織重建、基質降解 與與RA活動度有關活動度有關 Aggrecan 同上同上 激活激活T細胞及抗體反應細胞及抗體反應 ？ P205 滑膜細胞滑膜細胞 誘導誘導RF產生，刺激產生，刺激T細胞擴細胞擴增增 ？ Osteopontin 骨、軟骨、骨、軟骨、滑膜滑膜 促進細胞粘附、遷移、血管促進細胞粘附、遷移、血管生成及軟骨凋亡和骨重建生成及軟骨凋亡和骨重建 可能與疾病活動有可能與疾病活動有關關 P68 胞漿、內質胞漿、內質網網 結合免疫球蛋白，促進吞噬，結合免疫球蛋白，促進吞噬，激活激活T細胞細胞 抗體陽性率抗體陽性率64%，特異性特異性99%，可見

35、，可見于于RF陰性陰性RA calpastatin 胞漿、胞核胞漿、胞核 對對calpain的抑制減弱，蛋白的抑制減弱，蛋白降解增加降解增加 針對不同結構域的針對不同結構域的抗體陽性率、特異抗體陽性率、特異性報道不一，可見性報道不一，可見于早期于早期RA GPI 胞漿胞漿 關節表面免疫復合物沉積，關節表面免疫復合物沉積，補體激活，介導炎細胞遷移補體激活，介導炎細胞遷移 抗體陽性率抗體陽性率64% FRP 胞核胞核 減少滑膜細胞基質金屬蛋白減少滑膜細胞基質金屬蛋白酶及前列腺素酶及前列腺素E2的產生。的產生。與病情活動有關與病情活動有關 A2hnRNP 胞核胞核 剪接體結構剪接體結構,分子模擬、決

36、定分子模擬、決定基擴展基擴展 抗體陽性率抗體陽性率33.6%，見于早期見于早期RA gp130 IL-6靶向細靶向細胞表面胞表面 即即IL-6受體受體鏈，可溶性鏈，可溶性gp130抗體促進抗體促進IL-6活性活性 與病情活動有關與病情活動有關 HLA-DR4/1片段片段 APC表面表面 含含QK/RRAA，分子模擬和模，分子模擬和模糊識別機制糊識別機制 RA易感基因，與骨易感基因，與骨質破壞、抗體滴度質破壞、抗體滴度有關有關 filaggrin 角質細胞透角質細胞透明顆粒明顆粒 脫亞氨基修飾后誘導脫亞氨基修飾后誘導T、B細細胞免疫胞免疫 與病情活動有關與病情活動有關 變性變性IgG 角質細胞透

37、角質細胞透明顆粒明顆粒 免疫復合物沉積、激活補體免疫復合物沉積、激活補體 RF見于約見于約80%RA，與疾病活動有關與疾病活動有關 HSP60 細菌細菌 高度保守，分子模擬高度保守，分子模擬 ？ gp110 EBV 含含QKRAA表位，分子模擬表位，分子模擬 ？ VP-1/NS-1 細小病毒細小病毒B19 激活激活T、B細胞細胞 ？ MAM 結核桿菌結核桿菌 超抗原，多克隆超抗原，多克隆T細胞激活細胞激活 ？ 類風濕關節炎的新抗原類風濕關節炎的新抗原(2)(2)核小體結構如圖所示核小體結構如圖所示抗核小體抗體和其他抗體的抗核小體抗體和其他抗體的敏感性和特異性比較敏感性和特異性比較 陽性例數陽性

38、例數 敏感性敏感性% 特異性特異性% AnuA 37 67.3 97.4 dsDNA 25 45.5 95 Sm 15 27.3 99 AHA 18 32.7 30 DNP 15 27.3 80 AnuAAnuA與與dsDNA的關系的關系 N AnuA (+) AnuA (-) 陽性率陽性率% dsDNA(-) 30 17 13 56.7 dsDNA(+) 25 20 5 陽性率陽性率% 27.8AnuA0 05 510101515202025250 00.50.51 11.51.52 22.52.5 統計學上差異顯著（統計學上差異顯著（r=0.322, p=0.016）AnuA與與SLEDA

39、I評分的關系評分的關系AnuA抗細胞膜抗細胞膜DNA抗體抗體 (mDNA)新的系統性紅斑狼瘡特異性抗體新的系統性紅斑狼瘡特異性抗體以以Raji細胞為底物抗細胞為底物抗mDNA抗體核型抗體核型抗抗mDNA抗體在不同疾病的陽性率抗體在不同疾病的陽性率 組別組別 例數例數 抗抗mDNA陽性陽性 例數例數 % SLE 207 152 73.4 SS 72 6 8.3 RA 63 3 4.8 AS 32 0 0正常人正常人 82 0 0 注：注：SLE與各組比較與各組比較P值均值均0.01cmDNA 抗抗mDNA抗體和其他抗體的比較抗體和其他抗體的比較 自身抗體自身抗體 檢測例數檢測例數 陽性例數陽性例

40、數 敏感性敏感性% 特異性特異性% mDNA 207 152 73.4 96.4 AnuA 72 103 67.3 97.4 ds-DNA 158 56 35.4 96.9 AHA 139 51 36.7 64.9 DNP 149 46 30.9 81.6 Sm 157 38 24.2 95cmDNA抗抗mDNA抗體在血清陰性抗體在血清陰性SLE中的陽性率中的陽性率 抗體抗體 例數例數 抗抗mDNA抗體陽性抗體陽性 例數例數 % Sm陰性陰性 103 73 70.9 ds-DNA陰性陰性 88 60 68.2 DNP陰性陰性 92 68 73.9 AHA陰性陰性 76 52 68.4 AnuA

41、陰性陰性 24 13 54.2 cmDNA 診斷診斷 例數例數 a a-FA p值值 陽性例數陽性例數 %干燥綜合征干燥綜合征 89 60 67.4 . 原發性原發性 74 54 73 . 繼發性繼發性 15 6 40 .系統性紅斑狼瘡系統性紅斑狼瘡 41 8 19.5 0.01類風濕關節炎類風濕關節炎 44 13 29.5 0.05正常人正常人 59 2 3.8 0.01a a-FAa a-胞襯蛋白多肽抗體與其他自身抗體胞襯蛋白多肽抗體與其他自身抗體的敏感性和特異性的比較的敏感性和特異性的比較 a a-FA 54 73 88.7SSA抗體抗體 3851.3 64 .7SSB抗體抗體 917.

42、9 85ANA 2743.6 42.6抗體類別抗體類別 陽性例數陽性例數 敏感性（敏感性（%） 特異性（特異性（%）a a-FAa a- -胞襯蛋白與其他化驗指標的關系胞襯蛋白與其他化驗指標的關系例數例數 a a-FA陽性陽性 a a- FA陰性陰性 p 例數例數 % 例數例數 %ANA 49 41 75.9 840 0.05SSA抗體抗體 38 34 68.64 20 0.05 SSB抗體抗體 9 8 14.8 1 5 0.05IgG升高升高54 39 72 15 75 0.05IgA升高升高34 24 44.4 10 50 0.05CIC升高升高40 24 44.4 16 80 0.05ESR升高升高49 36 66.7 13 65 0.05WBC降低降低 25 19 35.2 6 30 0.05RBC降低降低21 1