1、FISH技術(shù)在血液腫瘤中的應(yīng)用技術(shù)在血液腫瘤中的應(yīng)用vFISH-目前新興的分子遺傳學技術(shù)分子遺傳學技術(shù)，原理是采用熒光標記的采用熒光標記的DNA探針探針，利用探針與檢測樣本中DNA堿基對的互補性，在探針與標本的DNA雜交后，通過熒光顯微鏡檢測熒光信號而得出結(jié)果，從而檢測細胞、組織樣本中的染色體和基因異常。熒光原位雜交熒光原位雜交Fluorescence In Situ Hybridization, FISH探針DNA加入熒光標記解螺旋，雜交樣本預處理樣本預處理探針、樣本變性探針、樣本變性探針樣本雜交探針樣本雜交雜交后洗滌雜交后洗滌結(jié)果觀察結(jié)果觀察FISH基本實驗過程基本實驗過程FISH探針種類

2、探針種類根據(jù)標記顏色的不同，常用探針主要有：根據(jù)標記顏色的不同，常用探針主要有：v單色探針單色探針（single color probe, SC）v雙色探針雙色探針（dual color probe, DC）v三色探針三色探針（triple color probe, TC）v雙色分離探針雙色分離探針（ dual color, break apart probe, DC, BCR）v雙色單融合探針雙色單融合探針（ dual color, single fusion probe, DC, SF Trans）v額外信號探針額外信號探針（extra signal, ES）v雙色雙融合探針雙色雙融合探針

3、（ dual color, dual fusion probe, DC, DF Trans）v單色探針單色探針（SC）：v雙色探針雙色探針（DC）：v三色探針三色探針（ TC）：D7S486CEP7CEP18YX正常正常正常正常正常正常異常異常異常異常異常異常FISH技術(shù)的應(yīng)用技術(shù)的應(yīng)用vFISH檢測在臨床上主要應(yīng)用于：檢測在臨床上主要應(yīng)用于：血液系統(tǒng)疾病：白血病、血液系統(tǒng)疾病：白血病、MDS、MM等；等；實體瘤：乳腺癌、膀胱癌等；實體瘤：乳腺癌、膀胱癌等；產(chǎn)前遺傳篩查：唐氏綜合癥（產(chǎn)前遺傳篩查：唐氏綜合癥（21三體）等三體）等v臨床意義：臨床意義：從遺傳學角度檢測從遺傳學角度檢測染色體和基因

4、染色體和基因的異常的異常輔助診斷，判斷預后，療效檢測及微小殘留檢測輔助診斷，判斷預后，療效檢測及微小殘留檢測FISH技術(shù)在血液腫瘤中的應(yīng)用技術(shù)在血液腫瘤中的應(yīng)用 血液系統(tǒng)腫瘤是我國十大高發(fā)腫瘤之一。大量研究表明，不同類型的血液血液腫瘤往往有其特異的染色體異常腫瘤往往有其特異的染色體異常，對腫瘤分型、診斷、治療和預測用預后都具有重要意義。常規(guī)細胞遺傳學分析（CC）方法只能分析中期染色體，而對間期細胞、復雜核型細胞和染色體微缺失無法進行診斷。FISH技術(shù)彌補了CC在這方面的不足，因此被廣泛應(yīng)用于血液腫瘤的研究、診斷等方面。FAB分型分型細胞遺傳學異常細胞遺傳學異常分子異常分子異常M0核型異常常見且

5、復雜，常累及核型異常常見且復雜，常累及5、7、8和和13染色體染色體M1t(9;22), inv(3)M2t(8;21), t(6;9),t(12p)AML1-ETOM3t(15;17)PML-RARAM4+4, 11q23重排，重排， M4Eo inv(16)/t(16;16)MLL-AF9M5t(11q), t(8;16)Pre-B/B-ALL(L1/L2)t(9;22)(q34;q11)BCR-ABLB-ALL(L3)t(8;14)(q24;q32)MYC-IGH白血病的細胞遺傳學異常白血病的細胞遺傳學異常血液腫瘤的血液腫瘤的FISH檢測檢測v臨床上對血液腫瘤的臨床上對血液腫瘤的FISH

6、檢測主要集中在以下幾個方面：檢測主要集中在以下幾個方面：染色體易位形成的融合基因檢測染色體易位形成的融合基因檢測：如CML的BCR-ABL、M3的PML-RARA、M2b的AML1-ETO融合基因等；基因缺失檢測：基因缺失檢測：如CLL的P53基因缺失提示患者預后很差，而13q單一缺失則提示預后較好；對異性間造血干細胞移植的植入狀態(tài)檢測：對異性間造血干細胞移植的植入狀態(tài)檢測：通過性染色體計數(shù)探針動態(tài)監(jiān)測供/受者混合性嵌合體比例變化對異性間異基因造血干細胞移植后植入狀態(tài)進行監(jiān)測；微小殘留病灶（微小殘留病灶（MRD）的檢測：）的檢測：通過對腫瘤細胞特異的染色體異常進行跟蹤監(jiān)測，預測疾病進展和有無復

7、發(fā)跡象。血液腫瘤熒光原位雜交探針血液腫瘤熒光原位雜交探針疾病名稱疾病名稱探針名稱探針名稱漿細胞疾病漿細胞疾病多發(fā)性骨髓瘤（MM）GLP P53，GLP RB1 ，GLP D13S319 GLP IGH ，GLP 1q21白白血血病病慢性淋巴細胞白血病（CLL）GLP P53 GLP RB1 GLP D13S25 GLP ATM CSP 12 慢性粒細胞白血病（CML）GLP BCR/GLP ABL；GLP ASS急性早幼粒細胞白血病（AML-M3）GLP PML/GLP RARA 急性原始粒細胞白血病部分分化型（AML-M2）GLP AML1/GLP ETO粒單核細胞白血病 (AML-M4)G

8、LP CBFB小兒急性淋巴細胞白血病（ALL）GLP 4/10,GLP 17, GLP BCR/GLP ABL,GLP MLL GLP TEL/AML1MDS骨髓增生異常綜合癥GLP CSF1R/ GLP D5S23，D5S721GLP EGR1/ GLP D5S23，D5S721GLP D7S486/CSP7;GLP D7S522/CSP7;GLP D20S108/CSP8 ;CSP X/CSP Y；性染色體錯配骨髓移植CSP X/CSP Y 淋淋巴巴瘤瘤B細胞淋巴瘤GLP IGH濾泡性淋巴瘤（FL）GLP IGH/GLP BCL2套細胞淋巴瘤（MCL）GLP IGH/GLP CCND1彌漫

9、性大B細胞淋巴瘤（DLBCL）GLP BCL6伯基特淋巴瘤（BL）GLP C-MYC粘膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤（MALT）GLP MALT1GLP MALT1/GLP API2多發(fā)性骨髓瘤（多發(fā)性骨髓瘤（MM）檢測）檢測vMM常涉及多種染色體異常，主要為數(shù)目異常，分為超二倍體（+3、+5、+7、+9等）和非超二倍體（-8、-13、-14、-17等）；染色體結(jié)構(gòu)異常較少見，主要有1號（1p、1q，部分缺失或1q三體）、13q-、14q（多為與14q32有關(guān)的幾種互補易位）等。vMM FISH檢測位點：P53、RB1、D13S319、IGH基因及基因及1q21位點位點。v推薦樣本：骨髓v適用人群：已確

10、診為已確診為MM，需評估預后、進行個體化治療的患者，需評估預后、進行個體化治療的患者v以p53探針模式圖為例，17號染色體1區(qū)3帶1亞帶包含p53的區(qū)域標記了一段含綠色熒光的260kb DNA序列；D13S319指13號染色體上獨一無二的編號319的DNA片段，標記了一段含紅色熒光的220kb DNA序列。正常情況下顯示2R2G信號，發(fā)生D13S319位點缺失時顯示1R2G。vIGH的探針在基因的兩端分別標記了紅色和綠色熒光，正常情況下顯示紅色綠色重疊信號或黃色信號，當IGH發(fā)生易位時顯示為紅色和綠色的分離熒光信號。P53/D13S319探針探針（雙色探針：（雙色探針：D13S319紅紅/ P

11、53綠）綠）D13S319P53正常正常異常異常IGH探針（雙色分離探針）探針（雙色分離探針） 14161416臨床意義臨床意義v判斷生存期判斷生存期預后較差：P53缺失（24.7個月） 1q21 擴增（21.9個月） IGH發(fā)生t(4;14)，t(14;16)易位（24.7個月） 預后中等（42.3個月）：RB1缺失 D13S319缺失 預后較好（50.5個月）：IGH發(fā)生t(11；14)易位或者其他遺傳改變v指導臨床用藥（個體化治療）指導臨床用藥（個體化治療）：MM的初治治療多選用化療，包括MP方案（馬法蘭、潑尼松）、VAD方案（長春新堿、多柔比星、地塞米松）等；對于難治和復發(fā)的多發(fā)性骨髓

12、瘤，多采用聯(lián)合化療和沙利度胺進行治療；干擾素主要用于維持治療，對上述治療方法無效者可進行造血干細胞移植。對于預后好的患者，使用干擾素、環(huán)磷酰胺或聯(lián)合化療沒有明顯的區(qū)別；對于預后中等的患者，使用干擾素治療反而會縮短患者總生存期。可見，多發(fā)性骨髓瘤基因異常的檢測對臨床有效開展個性化治療提供了重要依據(jù)。白血病白血病FISH檢測檢測1、 慢性淋巴細胞白血病（慢性淋巴細胞白血病（CLL）檢測）檢測v檢測位點：檢測位點： P53、RB1、D13S25、ATM基因以及基因以及12號染色體號染色體。v推薦樣本：推薦樣本：外周血v臨床意義：臨床意義：判斷生存期：判斷生存期：預后差，P53缺失（32個月） 預后較

13、差， ATM缺失（79個月） 預后中等， CSP 12三體（114個月） 預后較好，RB1缺失、 D13S25缺失（133個月）指導臨床用藥（個體化治療）指導臨床用藥（個體化治療）v7-11%CLL伴有P53缺失，預后不良，漂吟類似物治療無效，應(yīng)選用不涉及p53信號傳導系統(tǒng)的藥物；vATM位于染色體11q22-23，11q22.3缺失是CLL另外一個預后較差的核型異常，發(fā)生率12-20%，ATM缺失與CLL進展密切相關(guān)；v+12是最早發(fā)現(xiàn)的B-CLL常見染色體異常，發(fā)生率15-35%，常伴有其他核型異常；v13q缺失是CLL最常見的染色體異常，40-60%的CLL出現(xiàn)該異常。RB1和D13S2

14、5位于此位點，單純del(13q14)預后較好，若伴有+12、11q-等其他染色體異常，則預后通常較差。2、 慢性粒細胞白血病（慢性粒細胞白血病（CML）檢測）檢測v檢測位點：檢測位點： BCR/ABL融合基因、融合基因、ASS基因基因。v推薦樣本：推薦樣本：骨髓v適用人群：適用人群：CML初診及治療監(jiān)測的患者慢性粒細胞性白血病是一種發(fā)生在早期多能造血干細胞上的惡性骨髓增慢性粒細胞性白血病是一種發(fā)生在早期多能造血干細胞上的惡性骨髓增生性疾病（獲得性造血干細胞惡性克隆性疾病）。生性疾病（獲得性造血干細胞惡性克隆性疾病）。對對CML的檢測主要針對的檢測主要針對BCR/ABL融合基因，這種融合基因是

15、通過（融合基因，這種融合基因是通過（9；22）號染色體的基因重排及易位而形成的。）號染色體的基因重排及易位而形成的。 vBCR/ABL融合基因檢測融合基因檢測BCR/ABL融合基因通過t(9;22)號染色體易位而形成。9號染色體上原癌基因(ABL)的斷裂點比較恒定，22號上斷裂點簇集區(qū)(BCR)的斷裂點不恒定。BCR-ABL-210見于95的CML(主要斷裂點斷裂形成)，BCR-ABL-190見于17%-30%的成人急性淋巴細胞白血病和2%-6%的兒童急性淋巴細胞白血病(次要斷裂點斷裂形成)，但從染色體組型與慢性粒細胞白血病的費城染色體在形態(tài)上看不出區(qū)別，F(xiàn)ISH檢測BCR/ABL融合基因可以

16、區(qū)分。v檢測探針：檢測探針：額外信號探針（ES ）：可區(qū)分BCR/ABL融合基因形成于主要斷裂點（M-BCR位點）或次要斷裂點（m-BCR位點） 。雙色雙融合探針（DF） ：只可檢測是否有BCR/ABL融合基因，不能區(qū)分主次斷裂點。1. ES探針探針 可區(qū)分BCR/ABL融合基因形成于主要斷裂點或次要斷裂點，用于初診和指導格列衛(wèi)用藥。異常結(jié)果顯示為兩紅、一綠、一黃熒光信號。在典型的陽性細胞中，如果有在典型的陽性細胞中，如果有BCR/ABL融合基因且融合基因且BCR斷裂位點為斷裂位點為M-BCR，其信，其信號類型體現(xiàn)為號類型體現(xiàn)為2R1G1F；斷裂位點為；斷裂位點為m-BCR，其信號類型體現(xiàn)為，

17、其信號類型體現(xiàn)為1R1G2F（其中一（其中一個融合信號中的綠點相對較小）；無個融合信號中的綠點相對較小）；無BCR/ABL融合基因，其信號類型體現(xiàn)為融合基因，其信號類型體現(xiàn)為2R2G。 2. DF探針探針 只可檢測是否有BCR/ABL融合基因，不能區(qū)分主、次斷裂點，可用于治療效果監(jiān)測及用藥指導。異常結(jié)果顯示為一紅、一綠、兩黃熒光信號。vBCR/ABL融合基因檢測意義融合基因檢測意義輔助診斷輔助診斷CML NCCN腫瘤學臨床實踐指南（2010年第二版）指出，BCR/ABL融合基因陰性的患者不是CML。這些患者的預后比BCR/ABL融合基因陽性的患者明顯差。因此，對于BCR/ABL融合基因陰性的患

18、者需要進一步考慮其他疾病。指導格列衛(wèi)使用指導格列衛(wèi)使用 格列衛(wèi)是在研究出CML患者高表達BCR/ABL融合基因蛋白產(chǎn)物的基礎(chǔ)上，進一步研發(fā)出的特異性抑制BCR/ABL融合基因產(chǎn)物的分子靶向藥物。采用FISH技術(shù)對CML患者BCR/ABL融合基因進行檢測，一旦確定了BCR/ABL融合基因的存在，就可以考慮使用格列衛(wèi)進行治療。藥物使用效果評估藥物使用效果評估骨髓移植效果評估骨髓移植效果評估鑒別診斷：鑒別鑒別診斷：鑒別CML急變和急變和AL BCR/ABL融合基因檢測顯示，AL的BCR/ABL融合基因由次要斷裂點斷裂形成，CML急變患者的BCR/ABL融合基因由主要斷裂點斷裂形成。檢測BCR/ABL

19、融合基因，區(qū)別其主要斷裂點和次要斷裂點，達到鑒別診斷的目的。vASS基因異常檢測基因異常檢測 ASS為精氨基琥珀酸合成基因,位于9q34.1。vASS基因檢測意義：評估基因檢測意義：評估CML患者預后患者預后 9-28CML患者伴有含ASS基因的9q34區(qū)段的缺失，此種患者預后差，慢性期易急變。 3、急性原始粒細胞白血病部分分化型（、急性原始粒細胞白血病部分分化型（M2）檢測）檢測v檢測位點：檢測位點： AML1/ETO融合基因融合基因。v推薦樣本：推薦樣本：骨髓 AML1/ETO融合基因：競爭性抑制融合基因：競爭性抑制AML1靶基因的活化，干擾細胞正常的增靶基因的活化，干擾細胞正常的增殖與分

20、化。殖與分化。AML1ETOvAML1/ETO融合基因檢測意義融合基因檢測意義輔助診斷輔助診斷M2型型AML AML1/ETO融合基因可見于92%的M2型AML患者中，特別是和我國首先提出的M2b型密切相關(guān)。判斷預后判斷預后 AML1/ETO融合基因陽性是預后好的標志，患者對治療反應(yīng)佳，完全緩解率可達90%，5年無病生存可達50%-70%。4、急性早幼粒細胞白血病（、急性早幼粒細胞白血病（M3）檢測）檢測v檢測位點：檢測位點：PML/RARA融合基因融合基因。v推薦樣本：推薦樣本：骨髓PML基因：早幼粒細胞白基因：早幼粒細胞白血病基因，位于血病基因，位于15號染色號染色體上。體上。RARA基因

21、：維甲酸受體基因：維甲酸受體基因，位于基因，位于17號染色體上。號染色體上。15號染色體和號染色體和17號染色體發(fā)生特異位點的斷裂易位，形成號染色體發(fā)生特異位點的斷裂易位，形成PML/RARA融合基因，融合基因，此融合基因可以抑制正常的此融合基因可以抑制正常的RAR 基因功能，從而阻斷早幼粒細胞的進一步分化基因功能，從而阻斷早幼粒細胞的進一步分化成熟，產(chǎn)生大量幼稚的早幼粒細胞，發(fā)生腫瘤。成熟，產(chǎn)生大量幼稚的早幼粒細胞，發(fā)生腫瘤。vPML/RARA融合基因檢測意義融合基因檢測意義輔助診斷急性早幼粒細胞白血病輔助診斷急性早幼粒細胞白血病 PML/RARA融合基因可見于90以上的APL中，成為APL

22、的一個特異標志。指導全反式維甲酸（指導全反式維甲酸（All trans-retinoic acid，ATRA）用藥）用藥ATRA治療APL的主要機制是靶向降解PML/RARA融合蛋白，促進阻滯在早幼粒細胞階段的白血病細胞分化成熟。ATRA是治療APL的首選藥物,緩解率能達90% 。5、粒、粒-單核細胞白血病檢測單核細胞白血病檢測v檢測位點：檢測位點： CBFB基因斷裂重組基因斷裂重組。v推薦樣本：推薦樣本：骨髓CBFB基因（Core binding factor ，CBFB）：核心結(jié)合因子 ,位于16號染色體上。CBFB也是早期造血所必需的轉(zhuǎn)錄因子，通過與也是早期造血所必需的轉(zhuǎn)錄因子，通過與A

23、ML1的的Runt同源結(jié)構(gòu)域同源結(jié)構(gòu)域結(jié)合，由結(jié)合，由AML1將其帶至胞核，增強將其帶至胞核，增強AML1與與DNA的結(jié)合能力，使的結(jié)合能力，使AML1依依賴的基因轉(zhuǎn)錄得以進行。賴的基因轉(zhuǎn)錄得以進行。vCBFB基因斷裂重組檢測意義基因斷裂重組檢測意義輔助診斷輔助診斷M4型型AML CBFB基因斷裂重組是AML的特征性染色體異常，占總AML患者的5%-10%和23的M4患者，通常見于AML-M4E0亞型。現(xiàn)在認為CBFB基因斷裂重組是M4E0特征性的遺傳學改變。評估預后評估預后 CBFB基因斷裂重組的AML患者對化療敏感、預后較好。 6、小兒急性淋巴細胞白血病檢測、小兒急性淋巴細胞白血病檢測v急

24、性淋巴細胞白血病是兒童中發(fā)病率最高的惡性腫瘤，我國l5歲以下小兒白血病的發(fā)病率為2.73/10萬。v兒童急性淋巴細胞白血病在兒童白血病中占75%之多，是兒童白血病中最常見的類型。v探針介紹：序序號號檢測探針檢測探針標記顏標記顏色色探針定位探針定位異常染色異常染色體體1GLP 4/GLP 10綠/紅GLP 4: 4p11.1-q11.1GLP 10: 10p11.1-q11.1+4，+102GLP 17紅GLP 17: 17q11 +173GLP TEL/GLP AML1紅/綠GLP AML1：21q22GLP TEL：12p13 t(12;21)4GLP MLL紅綠GLP MLL：11q23t

25、(11;v)5GLP BCR/GLP ABL(DF)綠/紅GLP BCR: 22q11.2GLP ABL: 9q34t(9;22)v4、10、17號染色體檢測號染色體檢測兒童ALL約25%有染色體數(shù)目增加，以4、10、17號染色體受累較為多見。4、10和17染色體三體是獨立的預后良好的指標，這類患者7年EFS大于90%。vTEL/AML1融合基因檢測融合基因檢測TEL/AML1在兒童ALL中的發(fā)生率高達20-25，是目前兒童ALL最常見的染色體重排。但由于t(12;21)十分微小，不易被常規(guī)細胞遺傳學發(fā)現(xiàn)。大多數(shù)研究發(fā)現(xiàn)TEL/AML1陽性的兒童ALL治療效果很好，5年EFS和總生存率達到89

26、和97，是預后良好的指標之一。vMLL基因斷裂重組檢測基因斷裂重組檢測MLL基因改變在急性白血病中的發(fā)生率約為510，在嬰兒ALL中則高達79，是預后不良的標志。vBCR/ABL融合基因檢測融合基因檢測BCR/ABL融合基因占兒童ALL的35，是最重要的預后不良因素之一。一旦檢測出BCR/ABL融合基因，患兒需接受更為強烈的化療或造血干細胞移植。但大多數(shù)患兒仍會治療失敗，5年EFS只有28.6。v臨床意義臨床意義預后評估預后評估TEL/AML1基因融合或4、10、17號染色體三體的患者預后較好；MLL基因重排的患者預后較差；BCR/ABL基因融合的患者預后非常差。美國兒童腫瘤組（Childre

27、n oncology group, COG）根據(jù)發(fā)病年齡、初診白細胞數(shù)、染色體和融合基因、初診時CNS或睪丸白血病以及誘導化療的骨髓原始幼稚細胞比例或MRD水平，將兒童ALL分為低危t(12;21)/TEL-AML1或4、10、17號染色體三體、標危、高危（MLL重排）和高高危t(9；22)/BCR-ABL4組。骨髓增生異常綜合征骨髓增生異常綜合征FISH檢測檢測v骨髓增生異常綜合征（MDS）是一組起源于造血干細胞，以血細胞病態(tài)造血、高風險向急性白血病轉(zhuǎn)化為特征的難治性血細胞質(zhì)、量異常的異質(zhì)性疾病。v發(fā)病率：3/10萬 v分類：難治性貧血（RA） 難治性貧血伴環(huán)形鐵粒幼細胞（RARS） 難治性

28、血細胞減少伴多系發(fā)育異常（RCMD） 難治性貧血伴原始細胞增多（RAEB） 骨髓增生異常綜合征，無法分類（MDS，U） 5q-綜合征（MDS，5q-）MDS亞型亞型臨床癥狀臨床癥狀中位生存期中位生存期白血病轉(zhuǎn)化率白血病轉(zhuǎn)化率RA、RAS貧血為主、病情進展緩慢3-6yr5%-15%RAEB、RAEB-t貧血、出血、感染、病情進展快12mo(RAEB)5mo(RAEB-t)40%(RAEB)60%(RAEB-t)CMML 貧血為主、可有感染、出血20mo30%20%的MDS患者死于感染預后預后染色體核型染色體核型好5q-、20q- 、-Y、正常核型中其它異常差-7/7q-,復雜染色體核型異常(3種

29、異常)MDS MDS 染色體核型預后分組染色體核型預后分組vMDS染色體及基因異常染色體及基因異常FISH檢測探針檢測探針序號序號 檢測探針檢測探針標記顏色標記顏色 探針定位探針定位異常染色體異常染色體1GLP CSF1R/GLPD5S23,D5S721紅/綠CSF1R：5q33D5S23，D5S72：5p15-5/5q-2GLP EGR1/GLPD5S23,D5S721紅/綠EGR1：5q31D5S23，D5S72：5p15-5/5q-3GLP D7S486/CSP7紅/綠D7S486：7q31CSP7：7p11-q11-7/7q-4GLP D7S522/CSP7紅/綠D7S522:7q31

30、CSP7:7p11-q11-7/7q-5GLP D20S108/CSP8紅/綠D20S108:20q12CSP8：8p11-q1120q-、+86CSP X/CSP Y紅/綠CSP X：Xp11-q11CSP Y：Yp11-q11-Y適用人群：適用人群：臨床經(jīng)常規(guī)檢測排除常見原因?qū)е碌呢氀杞?jīng)骨穿進一步診斷的患者。需借助細胞遺傳學異常確診的可疑MDS患者臨床已經(jīng)診斷為MDS，需結(jié)合遺傳學異常判斷預后的患者。v臨床意義臨床意義鑒別診斷鑒別診斷染色體異常是MDS與其他非克隆性血液系統(tǒng)疾病所致貧血如再生障礙性貧血、缺鐵性貧血、巨幼細胞貧血等鑒別診斷的主要依據(jù)之一。 輔助診斷輔助診斷MDSMDS患者

31、存在的克隆性染色體異常多為缺失性改變， 40%-70%的MDS患者可有細胞遺傳學異常，以-5/5q-、-7/7q-、+8、20q-最為常見。染色體異常是MDS維也納診斷標準的三大確定標準之一。根據(jù)建議，MDS診斷滿足兩個必要標準和一個確定標準即可。預后評估，指導臨床個體化治療預后評估，指導臨床個體化治療正常核型、5q-、20q-、-Y的MDS患者預后較好；-7/7q-、復雜異常的MDS患者預后差；低危組MDS采用促進造血、誘導分化和生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑;高危組MDS采用AML的聯(lián)合化療方案和造血干細胞移植。 性染色體檢測性染色體檢測v用于監(jiān)測異性異基因造血干細胞移植效果用于監(jiān)測異性異基因造血干細胞移

32、植效果男性患者骨髓移植前 男性患者骨髓移植后探針：探針：CSP X/CSP Y淋巴瘤淋巴瘤FISH檢測檢測淋巴瘤類型淋巴瘤類型探針名稱探針名稱涉及基因涉及基因發(fā)生率發(fā)生率臨床意義臨床意義B細胞淋巴瘤GLP IGHIGH50%-85%鑒別B細胞惡性淋巴瘤和淋巴組織良性增生性病變?yōu)V泡性淋巴瘤GLP IGH/GLP BCL2IGH/BCL290%輔助診斷濾泡性淋巴瘤套細胞淋巴瘤GLP IGH/GLP CCND1IGH/CCND1 95%輔助診斷套細胞淋巴瘤彌漫性大B細胞淋巴瘤GLP BCL6BCL640%輔助診斷彌漫性大B細胞淋巴瘤伯基特淋巴瘤GLP C-MYCC-MYC100%輔助診斷伯基特淋巴瘤

33、粘膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤GLP MALT1MALT110%-20%輔助診斷MALT淋巴瘤GLP API2/GLP MALT1API2/MALT140%指導抗HP治療間變性大細胞淋巴瘤GLP ALKALK60%-80%評估預后FISH檢測結(jié)果統(tǒng)計檢測結(jié)果統(tǒng)計異常模式異常模式異常例數(shù)異常例數(shù)陽性率陽性率5q-/-587.07%7q-/-787.07%+887.07%20q-1311.5%-Y21.77%-821.77%FISH-MDS在113例MDS確診病例中，F(xiàn)ISH檢測發(fā)現(xiàn)26例存在染色體異常改變MDS（FISH）檢測報告單）檢測報告單 姓名： 年齡： 性別： 病例號： 申請單號： 科別： 標本

34、種類： 臨床診斷： 送檢時間： CSFIR/D5S23探針 EGR1/D5S23探針 D7S486/CSP7探針（5q33紅/5p綠） (5q31紅/5p綠) （7q31紅/CSP7綠） D7S522/CSP7探針 X/Y探針 D20S108/CSP8探針（7q31紅/CSP7綠） （X綠/Y紅） （20q12紅/CSP8綠）v結(jié)果分析：本次試驗分別計數(shù)200個細胞，各異常細胞百分比分別為：GLP CSFIR探針： 50%，GLP D5S23探針：0%；GLP EGR1探針： 50%，GLP D5S23探針：0%；GLP D7S486探針：0 %，CSP 7探針：0%；GLP D7S522探針：0%，CSP 7探針：0 %；GLP D20S108探針：0 %，CSP8探針：0%；CSP X：0%，CSP Y：0%。v實驗診斷提示:46，XX,5q-， 請結(jié)合其它檢測結(jié)果和臨床癥狀綜合判斷。