1、蛋白酶酶切位點(diǎn) 蛋白酶的分類及作用位點(diǎn)蛋白酶分類作用位點(diǎn)已知抑制物氨基肽酶金屬蛋白酶帶有自由氨基的L-氨基酸氨基末端；不分解由X-Pro、D或Q組成的肽鍵2，2，雙吡啶，11()-菲咯啉菠蘿蛋白酶巰基蛋白酶無特異性2巨球蛋白，TPCK，TLCK，烷化羧肽酶A鋅金屬蛋白酶帶有自由氨基酸的L-氨基酸羧基端；不能分解R、P或羥脯氨酸EDTA，EGTA羧肽酶B鋅金屬蛋白酶K- Lys，R- Arg羧基端EDTA，EGTA，堿性氨基酸羧肽酶Y絲氨酸羧肽酶氨基酸羧基端PMSF組織蛋白酶C琉基蛋白酶氨基端雙肽，可通過K，R或P氨基端作為第二或第三個(gè)氨基酸封閉醋酸碘， 甲醛胰凝乳蛋白酶絲氨酸蛋白酶在F- Ph

2、e,T- Thr或Y- Tyr之后抑肽酶,PMSF,TPCK,-巨球蛋白膠原酶金屬蛋白酶在P-X-G-P肽鏈中X之后EDTA,EGTA,還原劑,但無血清存在dispase金屬蛋白酶無特異性EDTA，EGTA，Hg2+，重金屬內(nèi)肽酶Arg-C絲氨酸蛋白酶在R- Arg之后巨球蛋白，TLCK內(nèi)肽酶Asp-N金屬蛋白酶在D- Asp和C-Cys半胱氨酸之前EDTA，菲咯啉內(nèi)肽酶Glu-C絲氨酸蛋白酶在E- Glu/Gln或D- Asp之后巨球蛋白，TLCK內(nèi)肽酶Lys-C絲氨酸蛋白酶在K- Lys之后TLCK，抑肽酶，抑蛋白酶醛肽腸激酶絲氨酸蛋白酶在D-D-D-D-K-肽鏈中K之后Xa因子絲氨酸蛋白

3、酶在R- Arg之后PMSF,APMS,大豆胰蛋白酶抑制物無花果蛋白酶琉基蛋白酶無特異性TPCK，TLCK，-巨球蛋白激肽釋放酶絲氨酸蛋白酶在一些R- Arg之后抑肽酶，抑蛋白酶醛肽木瓜蛋白酶巰基蛋白酶長期孵育時(shí)具有廣泛特異性arg、lys、gly、L-CitrullineTPCK，TLCK，抑蛋白酶醛肽巨球蛋白，烷化劑胃蛋白酶酸蛋白酶廣泛特異性phe、trp、tyr等疏水a(chǎn)a胃蛋白酶抑制素纖溶酶絲氨酸蛋白酶在K- Lys或R- Arg之后PMSF,TLCK,抑肽酶,-巨球蛋白鏈霉蛋白酶混合型無特異性BM完整藥片蛋白酶K絲氨酸蛋白酶廣泛特異性PMSF，PefablocSc枯草桿菌蛋白酶絲氨酸蛋

4、白酶無特異性PMSF，巨球蛋白，苯甲脒熱溶素鋅金屬蛋白酶在非極性殘基之前EDTA凝血酶絲氨酸蛋白酶在K- Lys之后TLCK，PMSF，抑蛋白酶醛肽抑肽酶，巨球蛋白，苯甲脒胰蛋白酶絲氨酸蛋白酶在K- Lys或R -Arg之后arg、lysTLCK，PMSF，抑蛋白酶醛肽抑肽酶，巨球蛋白蛋白酶 分類 作用位點(diǎn) 已知抑制物 木瓜蛋白酶 巰基蛋白酶 具有廣泛特異性 TPCK,TLCK,抑蛋白酶醛肽-巨球蛋白,烷化劑 胃蛋白酶 酸蛋白酶 廣泛特異性 胃蛋白酶抑制素 胰蛋白酶 絲氨酸蛋白酶 在K或R之后 TLCK,PMSF,抑蛋白酶醛肽抑肽酶,巨球蛋白人體20種氨基酸及其英文縮寫名稱 三字符號 單字符號

5、 丙氨酸 Ala A 精氨酸 Arg R 天冬氨酸 Asp D 半胱氨酸 Cys C 谷氨酰胺 Gln Q 谷氨酸 Glu/Gln E 組氨酸 His H 異亮氨酸 Ile I 甘氨酸 Gly G 天冬酰胺 Asn N 亮氨酸 Leu L 賴氨酸 Lys K 甲硫氨酸 Met M 苯丙氨酸 Phe F 脯氨酸 Pro P 絲氨酸 Ser S 蘇氨酸 Thr T 色氨酸 Trp W 酪氨酸 Tyr Y 纈氨酸 Val V【生化】特異性蛋白酶的酶切位點(diǎn)胰蛋白酶arg、lys，得到以arg、lys為C末端殘基的肽段。 胰凝乳蛋白酶phe、trp、tyr等疏水a(chǎn)a。 胃蛋白酶phe、trp、tyr等疏

6、水a(chǎn)a。 木瓜蛋白酶arg、lys。 葡萄球菌蛋白酶，磷酸緩沖液ph7.8時(shí)斷裂glu、asp。碳酸氫銨緩沖液ph7.8或醋酸銨緩沖液ph4.0時(shí)斷裂glu。 梭菌蛋白酶arg，用于不溶性蛋白的長時(shí)間裂解。 CNBr斷裂Met。 羥胺斷裂a(bǔ)sngly間的肽鍵。 二硫鍵可以用巰基化合物還原法或者過甲酸氧化法斷裂.。木瓜蛋白酶（Papain），又稱木瓜酶，是一種蛋白水解酶。木瓜蛋白酶是番木瓜（Carieapapaya）中含有的一種低特異性蛋白水解酶，廣泛地存在于番木瓜的根、莖、葉和果實(shí)內(nèi)，其中在未成熟的乳汁中含量最豐富。木瓜蛋白酶的活性中心含半胱氨酸，屬于巰基蛋白酶，它具有酶活高、熱穩(wěn)定性好、天然

7、衛(wèi)生安全等特點(diǎn)，因此在食品、醫(yī)藥、飼料、日化、皮革及紡織等行業(yè)得到廣泛應(yīng)用。木瓜蛋白酶是一種蛋白水解酶，分子量為23406，由一種單肽鏈組成，含有212個(gè)氨基酸殘基。至少有三個(gè)氨基酸殘基存在于酶的活性中心部位，他們分別是Cys25、His159和Asp158，另外六個(gè)半胱氨酸殘基形成了三對二硫鍵,且都不在活性部位。純木瓜蛋白酶制品可含有：（1）木瓜蛋白酶，分子量21000，約占可溶性蛋白質(zhì)的10%；（2）木瓜凝乳蛋白酶，分子量26000，約占可溶性蛋白質(zhì)的45%；（3）溶菌酶，分子量25000，約占可溶性蛋白質(zhì)的20%；及纖維素酶等不同的酶。番木瓜未成熟果實(shí)中含有木瓜蛋白酶(Papain)、木

8、瓜凝乳蛋白酶A(Chymopapain A )、木瓜凝乳蛋白酶B(Chym opapain B )、木瓜肽酶B (PapayaPeptidase B ) 等多種蛋白水解酶。且已知四種半胱氨酸蛋白酶的一級結(jié)構(gòu)具有高度的同源性。其中，木瓜蛋白酶屬巰基蛋白酶，可水解蛋白質(zhì)和多肽中精氨酸和賴氨酸的羧基端，并能優(yōu)先水解那些在肽鍵的N-端具有二個(gè)羧基的氨基酸或芳香L-氨基酸的肽鍵。木瓜蛋白酶papain屬巰基蛋白酶，具有較寬的底物特異性，作用于蛋白質(zhì)中L-精氨酸、L-賴氨酸、甘氨酸和L-瓜氨酸殘基羧基參與形成的肽鍵。此酶屬內(nèi)肽酶，能切開全蛋蛋白質(zhì)分子內(nèi)部肽鏈CO-NH生成分子量較小的多肽類。最適合pH值5

9、.7(一般39.5皆可)，在中性或偏酸性時(shí)亦有作用，等電點(diǎn)I= 8.75；最適合溫度5560(一般1085皆可)，耐熱性強(qiáng)，在90時(shí)也不會(huì)完全失活；受氧化劑抑制，還原性物質(zhì)激活。胃蛋白酶為什么不水解自身_百度文庫胃蛋白酶是一種酸性蛋白酶。由胃部中的胃粘膜主細(xì)胞釋放出沒有活性的胃蛋白酶原。酶原 在遇到由胃壁細(xì)胞所釋放的胃酸中的鹽酸后切去 44個(gè)氨基酸殘基將被激活，其最適pH值約為 1.52.2，在中性或堿性pH值的溶液中，胃蛋白酶 會(huì)發(fā)生解鏈而喪失活性。胃蛋白酶在對蛋白質(zhì)或 多肽進(jìn)行水解時(shí)，具有一定的氨基酸序列特異性， 傾向于水解氨基端或羧基端為芳香族氨基酸（苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸）或亮氨酸的肽鍵。胰蛋白酶和糜蛋白酶：糜蛋白酶潛在切點(diǎn)太多了，你