1、第一頁，共18頁。雜雜種種植植株株篩選融篩選融合合AB的原生的原生質體質體再再生生出出細細胞胞壁壁脫脫分分化化愈愈傷傷組組織織再再分分化化植物細胞的融合植物細胞的融合植物組織培養植物組織培養植物細胞植物細胞A原生質體原生質體B原生質體原生質體A雜種雜種細胞細胞AB去去 壁壁去去 壁壁人人工工誘誘導導方法？方法？促進融合促進融合的方法的方法？融合融合完成完成的的標志標志植物細胞植物細胞B植物體細胞雜交技術過程植物體細胞雜交技術過程原理？原理？原理原理？第二頁，共18頁。成果和未解決的問題成果和未解決的問題 成果：克服不同生物遠緣雜交的障礙，出成果：克服不同生物遠緣雜交的障礙，出 現自然界沒有的新

2、品種現自然界沒有的新品種。未解決的問題：未能讓雜種植物按照人們未解決的問題：未能讓雜種植物按照人們 的需要表現出親代的優良。的需要表現出親代的優良。第三頁，共18頁。如果將牛的細胞與植物細胞雜交，得到綠色的小奶牛，如果將牛的細胞與植物細胞雜交，得到綠色的小奶牛，那豈不是只要曬曬太陽就可以擠出牛奶啦！那豈不是只要曬曬太陽就可以擠出牛奶啦！動物細胞也能融合嗎？動物細胞也能融合嗎？第四頁，共18頁。1、動物融合的過程請同學們閱讀課本P52動物融合第五頁，共18頁。不同不同DNADNA的兩個細胞的兩個細胞滅活病毒誘導細胞融合滅活病毒誘導細胞融合融合后的細胞融合后的細胞進行有絲分裂進行有絲分裂1、動物細

3、胞融合過程第六頁，共18頁。1、植物體細胞雜交時首先應用什么方法去掉細胞壁？、植物體細胞雜交時首先應用什么方法去掉細胞壁？酶解法，如纖維素酶或果膠酶酶解法，如纖維素酶或果膠酶2、動物細胞融合時需要進行去壁處理嗎？為什么？、動物細胞融合時需要進行去壁處理嗎？為什么？無需，因為動物細胞無細胞壁無需，因為動物細胞無細胞壁3、植物體細胞雜交誘導原生質體融合常用的方法有哪些？、植物體細胞雜交誘導原生質體融合常用的方法有哪些？離心、電激等物理方法；離心、電激等物理方法；PEG等化學方法等化學方法4、動物細胞融合能利用上述兩類方法嗎？還有其他方法嗎？、動物細胞融合能利用上述兩類方法嗎？還有其他方法嗎？能能

4、還可以利用滅活的病毒進行誘導還可以利用滅活的病毒進行誘導5、植物體細胞雜交應先進行原生質體的融合再進行組織培養形成完整的雜、植物體細胞雜交應先進行原生質體的融合再進行組織培養形成完整的雜種個體，動物細胞融合后能形成雜種動物個體嗎？種個體，動物細胞融合后能形成雜種動物個體嗎？不能不能6、你能歸納出什么叫做動物細胞融合嗎？、你能歸納出什么叫做動物細胞融合嗎？第七頁，共18頁。 動物細胞融合也稱細胞雜交，是指動物細胞融合也稱細胞雜交，是指兩個或多個動物細胞形成一個細胞的兩個或多個動物細胞形成一個細胞的過程過程第八頁，共18頁。主要用于制備主要用于制備單克隆抗體單克隆抗體獲得雜種植株獲得雜種植株用途用

5、途物理、化學方法物理、化學方法（同左）（同左）滅活的病毒滅活的病毒物理（離心、振動、物理（離心、振動、電刺激）電刺激）化學（聚乙二醇）化學（聚乙二醇）誘導方法誘導方法使細胞分散后誘使細胞分散后誘導細胞融合導細胞融合去除細胞壁后誘去除細胞壁后誘導原生質體融合導原生質體融合細胞融合的方法細胞融合的方法細胞膜的流動性細胞膜的流動性細胞膜的流動性、細胞膜的流動性、植物細胞全能性植物細胞全能性原理原理動物細胞融合動物細胞融合植物體細胞雜交植物體細胞雜交比較項目比較項目植物、動物細胞融合的比較植物、動物細胞融合的比較第九頁，共18頁。7、你推測一下動物細胞融合有哪些方面的應用嗎？、你推測一下動物細胞融合有

6、哪些方面的應用嗎？ 利用動物細胞融合技術誘導形成雜交瘤細胞利用動物細胞融合技術誘導形成雜交瘤細胞8、在生產實際中雜交瘤細胞有怎樣的應用？、在生產實際中雜交瘤細胞有怎樣的應用？ 生產單克隆抗體生產單克隆抗體第十頁，共18頁。提提問問？1.抗體是由何種細胞產生的？抗體是由何種細胞產生的？、一個淋巴細胞、一個淋巴細胞(漿細胞漿細胞)能分泌多種抗能分泌多種抗體嗎？體嗎？、一種抗原侵入機體之后，引起機體免、一種抗原侵入機體之后，引起機體免疫反應產生的抗體只有一種嗎？疫反應產生的抗體只有一種嗎？. 簡述獲得抗體的傳統途徑？簡述獲得抗體的傳統途徑？、這種方法獲得的抗體有什么缺陷？、這種方法獲得的抗體有什么缺

7、陷？第十一頁，共18頁。 抗原抗原 動物體動物體刺激刺激漿細胞漿細胞 抗體抗體抗體不純抗體不純特異性差、純度低；特異性差、純度低；產量低、反應不夠靈敏產量低、反應不夠靈敏抗原不純抗原不純 每個淋巴細胞只能分泌一種抗體，由一個淋巴細胞增每個淋巴細胞只能分泌一種抗體，由一個淋巴細胞增殖產生的細胞群分泌的抗體化學成份是單一的。殖產生的細胞群分泌的抗體化學成份是單一的。如何獲得化學性質單一、特異性強的抗體？如何獲得化學性質單一、特異性強的抗體？體外培養淋巴細胞能無限增殖嗎體外培養淋巴細胞能無限增殖嗎? 體外培養單個淋巴細胞，提取分泌的抗體體外培養單個淋巴細胞，提取分泌的抗體怎樣解決這個問題？怎樣解決這

8、個問題？第十二頁，共18頁。設計方案：設計方案：一個一個B B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體淋巴細胞只分泌一種特異性抗體小鼠骨髓瘤細胞能無限增殖小鼠骨髓瘤細胞能無限增殖雜種細胞雜種細胞第十三頁，共18頁。2.2.制備過程：制備過程：誘導其融合的方法有哪些？誘導其融合的方法有哪些？融合后培養液中有幾種細胞融合后培養液中有幾種細胞怎樣篩選出雜交瘤細胞，雜交怎樣篩選出雜交瘤細胞，雜交瘤細胞有何優點瘤細胞有何優點注射抗原的目的是什么注射抗原的目的是什么為何要進行克隆化培養和專一為何要進行克隆化培養和專一抗體檢測，多次篩選抗體檢測，多次篩選大量增殖雜交瘤細胞獲得單抗大量增殖雜交瘤細胞獲得單抗的方法的方法第

9、十四頁，共18頁。3.單克隆抗體的應用： 在基礎理論研究中具有重要意義在基礎理論研究中具有重要意義 在疾病診斷、治療和預防方面，具有在疾病診斷、治療和預防方面，具有 特異性高、靈敏度高等優越性。特異性高、靈敏度高等優越性。生物導彈生物導彈第十五頁，共18頁。 制備單克隆抗體時，為什么要選用B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合形成雜交瘤細胞？ 假如你掌握了動物細胞融合技術，你想用它來解決什么問題？第十六頁，共18頁。B BB B瘤瘤 瘤瘤瘤瘤 瘤瘤細胞融合后培養液中有幾種細胞？細胞融合后培養液中有幾種細胞？篩選雜種細胞篩選雜種細胞已知細胞合成已知細胞合成DNADNA有有D D和和S S兩條途徑，其中兩條途徑，其中D D途途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細胞中有這兩徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細胞中有這兩條條DNADNA合成途徑，但一般不分裂增殖。鼠骨髓合成途徑，但一般不分裂增