1、黃連中小檗堿的研究 黃連，中藥材具有清熱燥濕，瀉火解毒的功效，可用于濕熱內(nèi)蘊(yùn)所致黃疸，嘔吐，瀉痢，溫病高熱，目赤，牙痛，心煩不寐， 心火亢盛，心悸不寧，消渴；外治濕瘡，濕疹，耳道流膿，瘡瘍。姜黃連清胃，止嘔，于寒熱互結(jié)，濕熱中阻，痞滿嘔吐時(shí)施用； 黃連的有效成分主要為生物堿，其中小檗堿的含量最高。小檗堿為一種異喹啉生物堿，又稱黃連素，熔點(diǎn)145。小檗堿對(duì)溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌、淋球菌和弗氏、志賀氏痢疾桿菌均有抗菌作用，并有增強(qiáng)白血球吞噬作用。因此，快速準(zhǔn)確地測(cè)定黃連中小檗堿含量，對(duì)于中草藥有效成分的分析研究有著重要意義。Company Logo黃連中小檗堿的檢測(cè)紅外光譜研究高效液相色譜研

2、究?jī)煞N分析方法的比較原理：黃連所含化學(xué)成分不同，其紅外光譜的特征原理：黃連所含化學(xué)成分不同，其紅外光譜的特征吸收峰的位置、峰形、峰強(qiáng)也就不同。吸收峰的位置、峰形、峰強(qiáng)也就不同。實(shí)驗(yàn)儀器實(shí)驗(yàn)儀器 樣品處理樣品處理實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟數(shù)據(jù)處理數(shù)據(jù)處理紅外光譜研究紅外光譜研究（定性）（定性）實(shí)驗(yàn)儀器： 采用Spectrum Gx型的傅里葉變換的紅外分析光譜，檢測(cè)器為DTGS的檢測(cè)掃描器，紅外光譜范圍為4000400樣品處理： 黃連藥材經(jīng)粉碎后過40目篩，分別稱取適量黃連藥材粉末兩份，各置于250 mI圓底燒瓶中，分別加入8倍量去離子水或80乙醇水溶液浸潤30min，之后加熱回流提取2次，每次l h，趁熱

3、過濾，將濾液濃縮后真空干燥，得到黃連的水提物與醇提物。 1cm實(shí)驗(yàn)步驟： 分別取上述藥材、水提取物、醇提物及化學(xué)對(duì)照品鹽酸分別取上述藥材、水提取物、醇提物及化學(xué)對(duì)照品鹽酸小檗堿粉末少量，與小檗堿粉末少量，與KBrKBr混合，研磨均勻后壓片，放入光混合，研磨均勻后壓片，放入光譜儀中測(cè)定。譜儀中測(cè)定。數(shù)據(jù)處理： 圖圖1 1為黃連藥材及其水提取物、為黃連藥材及其水提取物、8080乙醇提取物和主要成分鹽酸小檗堿的紅外光譜圖乙醇提取物和主要成分鹽酸小檗堿的紅外光譜圖 表表1 1為鹽酸小聚堿的紅外譜峰歸屬情況為鹽酸小聚堿的紅外譜峰歸屬情況。 比較圖比較圖1 1各譜圖的吸收峰可知，鹽酸小檗堿各譜圖的吸收峰可

4、知，鹽酸小檗堿1505 1505 芳環(huán)骨架振動(dòng)峰在整體譜圖中表現(xiàn)的芳環(huán)骨架振動(dòng)峰在整體譜圖中表現(xiàn)的峰越強(qiáng)，峰形越細(xì)長(zhǎng)，則該混合物中的鹽酸小檗峰越強(qiáng)，峰形越細(xì)長(zhǎng)，則該混合物中的鹽酸小檗堿的含量越高。除此之外，各譜圖中堿的含量越高。除此之外，各譜圖中13651365，l277l277，l229l229，l036 l036 的存在也可以幫助判斷小檗堿的存在也可以幫助判斷小檗堿在混合物中含量的高低；另外，通過判斷譜峰之在混合物中含量的高低；另外，通過判斷譜峰之間的比例也能幫助辨別鹽酸小檗堿在混和物中的間的比例也能幫助辨別鹽酸小檗堿在混和物中的比例比例。 1cm1cm原理：乙腈原理：乙腈-0.1%-0.

5、1%磷酸為流動(dòng)相進(jìn)行分離以高效液磷酸為流動(dòng)相進(jìn)行分離以高效液相色譜儀進(jìn)行檢測(cè)，利用峰高進(jìn)行定量分析。相色譜儀進(jìn)行檢測(cè)，利用峰高進(jìn)行定量分析。實(shí)驗(yàn)儀器實(shí)驗(yàn)儀器色譜條件色譜條件供試品制備供試品制備數(shù)據(jù)處理數(shù)據(jù)處理高效液相色譜高效液相色譜（定量）（定量）實(shí)驗(yàn)儀器： Agilent1200高效液相色譜儀色譜條件：色譜柱為L(zhǎng)una C18柱（150mm4.60mm,5m）流動(dòng)相為乙腈乙腈-0.1%-0.1%磷酸（磷酸（25752575）流速為流速為1ml1ml檢測(cè)波長(zhǎng)為檢測(cè)波長(zhǎng)為340nm340nm柱溫為柱溫為2525進(jìn)樣量進(jìn)樣量1010l每1000ml0.1%的磷酸溶液加入50l的三乙胺（掃尾劑）進(jìn)行

6、洗脫1min供試品的制備： 酸性水溶劑煎煮法提取黃連中的鹽酸小檗堿，再利用熱蒸餾水溶解，抽濾，重結(jié)晶，最后用無水乙醇溶解，抽濾，重結(jié)晶，的鹽酸小檗堿精制品。取精制樣品適量，研細(xì)，精密稱取6.3mg，置容量瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理30min，放冷，過濾，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，即得。 標(biāo)準(zhǔn)曲線： 精密稱取鹽酸小檗堿對(duì)照品12.30mg，置50ml量瓶中，加入甲醇，超聲15min溶解，并稀釋至刻度。對(duì)照品貯備液設(shè)進(jìn)樣量為1、2、3、5、7、10l,依次注入色譜儀，測(cè)定峰面積，以鹽酸小檗堿對(duì)照品含量（X）為橫坐標(biāo)，以峰面積（Y）為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。進(jìn)行線性回歸，得回歸方程。鹽酸小檗堿回歸方程及線性系數(shù)見圖1.鹽酸小檗堿含量在0.2462.460g范圍內(nèi)與峰面積積分值呈良好的線性關(guān)系。陰性試驗(yàn)：制備鹽酸小檗堿陰性試液，依所給色譜條件操作，得色譜圖，與對(duì)照品、供試品色譜圖比較，結(jié)果見圖2。表明在、鹽酸小檗堿峰處無干擾。Company LogoIR定性分析定性分析能夠簡(jiǎn)單快速能夠簡(jiǎn)單快速地提供黃連中地提供黃連中主要化學(xué)成分主要化學(xué)成分的的定