1、臨床生物化學實驗室基本技術與管理 一、重點 (一)實驗室基本技術 1常用臨床生物化學技術如光譜、電泳、離心、層析、電化學等技術在臨床生化檢測中的應用原理、應用方法和應用注意事項。 2常用免疫學技術如免疫透射比濁分析、放射免疫分析、酶免疫分析、化學發光免疫分析、時問分辨熒光免疫分析和流式細胞免疫分析等在臨床生化檢測中的應用原理、應用方法和應用注意事項。 3生物芯片和生物傳感技術的原理、分類和在臨床生化檢測中的應用優勢及應用注意事項。 4酶蛋白分離純化、純度鑒定和保存。 (二)實驗室全面質量控制 1實驗標本的質量要求、采集方法和影響因素。 2實驗方法的分級、選擇原則、評價方法及診斷性能，標準品的分

2、級使用原則。 3實驗試劑的類型、選擇原則、性能指標和評價方法。 4實驗室全面質量控制的主要內容、室內質控和室問質評方法及胛方案等。 二、難點 HPLC、電化學技術；化學發光免疫分析、時間分辨熒光免疫分析；生物芯片和生物傳感技術的原理；實驗方法的評價及診斷性能；實驗試劑的性能指標和評價方法；室內質控和室間質評方法及胛方案。三、常見題型與習題 (一)單項選擇題(A型題)1為了維持移動速度恒定，進行蛋白電泳 時常固定的參數是 A電壓 B電阻 C電流 D時問 E介質長度 【本題答案】 A2分光光度法中吸光度(A)與透光率(T)的 關系是 A T=2一lglA B T=2一lgA C A=2一lglT

3、D A=2一lgT E A=1一lgT 【本題答案】 D3利用流動相中的離子能與固定相進行可逆的交換性質來分離離子型化合物的方法是A凝膠層析法 B吸附層析法 C分配層析法 D親和層析法 E離子交換層析法 【本題答案】 E4下列何者為含有層析法、吸光度、熒光等的儀器 A氣相色譜儀 B高效液相色譜儀 C電泳儀 D超速離心機 E全自動生化分析儀 【本題答案】 B5通過在波片或硅片上制作各種微泵、閥、微電泳以及微流路，將生化分析功能濃縮固化在生物芯片上稱 A基因芯片 B蛋白質芯片 C細胞芯片 D組織芯片 E芯片實驗室 【本題答案】 E6進行離心時，離心機轉頭的旋轉速度為20 000rmin，相對離心為

4、40 000g，可稱之 A低速離心 B平衡離心 C高速離心 D超速離心 E等密度離心 【本題答案】 C 7不屬于生物傳感器的是 A電化學傳感器 B微生物傳感器 C組織傳感器 D免疫傳感器 E酶傳感器 【本題答案】 A8由實驗室自己配置或為商品，其中有關物質的量由參考方法定值的標準品為 A一級標準品 B二級標準品 C控制物 D參考物 E原級參考物 【本題答案】 D9用于發展及評價參考方法和一級標準品的方法稱為 A決定性方法 B參考方法 C指定參考方法 D常規方法 E經典方法 【本題答案】 A10測定光線通過溶液混懸顆粒后的光吸收或光散射程度的定量方法是 A熒光定量分析法 B散射光譜分析法 C發射

5、光譜分析法 D吸收光譜分析法 E原子吸收光度法 【本題答案】 B 11可見一紫外分光光度法的理論基礎為 A LambertBeer定律 B Nelmst方程式 C Rayleigh方程式 DHeidelberger曲線 E ROC曲線 【本題答案】 A 12離心技術中對顆粒沉降速度無直接影響的因素是 A介質的粘滯度 B顆粒直徑 C離心加速度 D顆粒偏離球形的程度E顆粒多少 【本題答案】 E13代表診斷試劑盒劑型研制的主要發展方向是 A液體型單試劑 B液體型雙試劑 C固體粉型試劑 D固體片型試劑 E固體型單試劑 【本題答案】 B14有一蛋白質水解產物在用pH 6陽離子交換劑層析時，第一個被洗脫下

6、來的氨基酸是 A纈氨酸(pI 596) B賴氨酸(pI 974) C天冬氨酸(pI 277) D精氨酸(pI 1076) E酪氨酸(pI 566) 【本題答案】 A15能分析出有機化合物的元素組成及構造的儀器是 A原子吸收分光光度儀 B火焰光度計 C高效液相色譜儀 D質譜議 E毛細管電泳儀 【本題答案】 D16進行樣品分析時，下列情況屬偶然誤差的是 A分析中存在干擾物 B吸管未經校正 C分析儀器波長不準 D標本量加錯 E天平未經校正 【本題答案】 D17使用高效液相色譜分析儀進行定量分析時，最能代表分析物的量的是 A延滯時問 B峰高 C峰面積 D溶解度 E達峰時間 【本題答案】 C18根據蛋白

7、質分子的配基專一性進行分離的方法是 A離子交換層析 B凝膠過濾 C分子篩效應 D親和層析 E分配層析 【本題答案】 D19Westgard多規則質控法中屬警告規則的是 A 12s B 13s C 24s D 4ls E l 0x 【本題答案】 A20Westga耐多規則質控法中表示有隨機誤差的規則是 A 12s，22sB 13s，R4s C 22s，R4s D 22s，4ls E 4s, 10x 【本題答案】 B21我國室間質評系統中所規定“優良”的變異指數得分(VIS)是 A <50 B <80 C <100 D <150 E <200 【本題答案】 B22可用

8、平均值加減2個標準差(又±2s)作為參考值范圍的血清生化檢驗項目是 A鉀 B葡萄糖 C TG D ALP E ALT 【本題答案】 B23通過實驗室間的比對，觀察其結果的準確性、一致性、并采取一定措施使各實驗室趨向一致的是 A室內質控 B室問質評 C實驗室評審 D實驗室認可 E實驗室認證 【本題答案】 B24ROC曲線中的橫軸表示 A假陽性率 B真陽性率 C靈敏度 D準確度 E特異性 【本題答案】 A25在方法比較試驗中，統計求得的回歸系數b代表的是 A偶然誤差 B系統誤差 C恒定誤差 D比例誤差 E兩法相關性 【本題答案】 D26通過測定基因的豐度來確定基因的表達 模式和表達水平的

9、芯片是 A基因芯片 B蛋白質芯片 C芯片實驗室 D組織芯片 E細胞芯片 【本題答案】 A27進行回收試驗的樣品濃度最好用 A病理標本的最高濃度值 B病理標本的最低濃度值 C參考范圍內的濃度值 D醫學決定水平的濃度值 E參考范圍的上限濃度值 【本題答案】 D28臨床自動生化分析儀配套用的標本條碼下有10個阿拉伯數字，表示標本號的是 A第13位 B第45位 C第6位 D第78位 E第910位 【本題答案】 A29不是影響熒光定量分析中熒光強度的因素是 A光物質的濃度 B溶劑的性質 C熒光物質的摩爾吸光系數 D溫度 E溶液的pH值 【本題答案】 C30下列蛋白質通過凝膠層析柱時，最后被洗脫的是 A過

10、氧化氫酶(分子量247 500) B血清白蛋白(分子量685 00) C乳球蛋白(分子量35 000) D肌紅蛋白(分子量16 900) E牛胰島素(分子量5700) 【本題答案】 E31離子交換樹脂層析法無法除去下列哪種物質 A清蛋白 B甘氨酸C乙醇 D CKMB E LD【本題答案】 C32影響測定準確度的最重要的因素是 A干擾物的影響 B人員素質 C標本處理 D所用校準品 E所用儀器【本題答案】 D 33類固醇、兒茶酚胺、腎上腺素等物質測定時，尿標本防腐劑應選用 A濃鹽酸 B甲醛 C甲苯(二甲苯) D麝香草酚 E濃硫酸 【本題答案】 A34測定比例系統誤差的試驗是 A重復性試驗 B干擾試

11、驗 C線性試驗 D回收試驗 E檢測能力試驗 【本題答案】 D35用于純化酶和受體蛋白的最好方法是 A鹽析法 B凝膠層析 C親和層析 D離子交換層析 E有機溶劑沉淀法 【本題答案】 C36自動化特種蛋白分析儀多采用 A散射比濁分析技術 B透射比濁分析技術 C熒光分析技術 D電化學分析技術 E酶免疫分析 【本題答案】 A 37診斷試驗臨床應用價值評定過程中，選擇研究對象時的樣本量一般要求 A >30 B >60 C >90 D >100 E >150 【本題答案】 D 38ROC曲線的主要作用不包括 A易于查出任意界限值時對疾病的識別能力 B選擇最佳的診斷界限值 C比

12、較兩種及其以上的不同診斷試驗對疾病的識別能力 D能提供一個比較直觀、全面的關于靈敏度、特異度的情況 E能提供一個比較直觀、全面判斷測定結果是否準確的情況 【本題答案】 E 39與聚丙烯酰胺凝膠電泳的濃縮效應無關的因素是 A凝膠層的不連續性 B緩沖液離子成分的不連續性 C電位梯度的不連續性 D pH的不連續性 E蛋白質分子大小 【本題答案】 E 40分離分子量相近但等電點不同的蛋白質的首選方法為 A醋酸纖維薄膜電泳 B圓盤電泳 C密度梯度離心 D等電聚焦電泳 E瓊脂糖凝膠電泳 【本題答案】 D 41凝膠過濾分離蛋白質的原理所利用的是 A蛋白質所帶電荷的多少 B蛋白質是清蛋白還是球蛋白 C蛋白質所

13、含酸性氨基酸的多少 D在某個體系內該蛋白質含量的多少 E蛋白質的分子大小 【本題答案】 E42基于元素所產生的原子蒸氣中待測元素的基態原子對所發射的特征譜線的吸收作用進行定量分析的技術是 A吸收光譜分析法 B散射光譜分析法 C發射光譜分析法 D熒光定量分析法 E原子吸收光度法 【本題答案】 E 43由于標本中與被測物共存物質也能和測定試劑發生反應所引起的誤差原因是 A主觀因素 B不遵守光吸收定律 C化學因素 D光學因素 E有色物質的生成受到影響 【本題答案】 C 44綜合光學、流體力學、電子計算機技術，利用熒光素產生熒光的特點，快速靈敏的對單個細胞進行多參數定量測定和分選的技術稱 A免疫透視比

14、濁分析 B放射免疫分析 C化學發光免疫分析 D酶免疫分析 E流式細胞免疫分析 【本題答案】 E 45下列情況均可引起誤差，屬于系統誤差的是 A反應溫度調高 B試劑的保質期已過 C分析儀器波長不準 D標本量加錯 E反應時間記錄錯誤 【本題答案】 C46判斷方法學能否接受的誤差指標是 A RE<EA B PE<EA C CE<EA D SE<EA E TE<EA 【本題答案】 E 47由權威機構對實驗室有能力執行特定任務的正式承認稱 A室內質量控制 B室間質量評價 C能力比對分析 D實驗室認可 E實驗室認證 【本題答案】 D 48診斷試驗檢出陽性患病者的百分率的指標是

15、 A檢測精密度 B檢測靈敏度 C檢測準確度 D臨床敏感度 E臨床特異度 【本題答案】 D 49WhiCh formula desCribes the potential Change of the surfaCe 0f ion seleCtive eleCtrodes (ISE) A Von Slyke B Nernst formula C Van I)eemter f0Imla D Hemderson一HassellbalCh formula E Friedewald formula 【Key】 B (二)單項選擇題(B型題) (15題共用備選答案) A原子吸收分光光度法 B散射比濁法 C熒

16、光分析法 D電化學分析技術 E電泳技術1微量元素檢測常用的技術是 【本題答案】 A2激素檢測常用的技術是 【本題答案】 C3蛋白質分離與鑒定常用的技術是 【本題答案】 E4血清鈉鉀檢測常用的技術是 【本題答案】 D5微量蛋白檢測常用的技術是 【本題答案】 B (610題共用備選答案) A偶然誤差 B比例誤差 C恒定誤差 D系統誤差 E靈敏度6重復性試驗檢測的是 【本題答案】 A7回收試驗檢測的是 【本題答案】 B8檢測能力試驗檢測的是 【本題答案】 E9干擾試驗檢測的是 【本題答案】 C10方法比較試驗檢測的是 【本題答案】 D (1114題共用備選答案) A決定性方法 B參考方法 C常規方法

17、 D推薦方法 E經典方法 F干擾已知的方法 G文獻介紹的方法11用于評價常規方法和試劑盒 【本題答案】 B 12用于發展及評價一級標準品 【本題答案】 A 13用于實驗室中的常規檢測 【本題答案】 C14用于鑒定二級標準品 【本題答案】 B (1519題共用備選答案) A麗春紅S B考馬斯亮藍R250 C溴化乙錠 D伊紅 E結晶紫 F SDS G過硫酸銨 H四甲基乙二胺 I冰醋酸一乙醇 J甲叉雙丙烯酰胺15制備聚丙烯酰胺凝膠的催化劑 【本題答案】 G16制備聚丙烯酰胺凝膠的加速劑 【本題答案】 H17醋酸纖維素薄膜常用的染料 【本題答案】 A18核酸電泳常用的染料 【本題答案】 C19蛋白質電

18、泳中為消除或減少電荷對蛋白質移動的影響常加入 【本題答案】 F (三)多項選擇題(x型題)1按Westgard多規則質控法，質控血清測定值在何種情況下為系統誤差 A 12s B 13s C 22s D 4ls E 10X12 臨床生物化學和生物化學檢驗學習與考試指導 【本題答案】 CDE2酶免疫分析的基本技術組成為 A高活性的酶和高質量的酶標抗體 B最佳固相載體和抗體包被技術 C最佳酶作用的底物 D通過電場來精確控制整個分析過程 E檢測放大系統及再生技術 【本題答案】 ABCE3下列哪些情況可引起l晦床測定中的系統誤差 A樣品中存在干擾物 B天平未經校正 C分析儀器波長不準 D標本量加錯 E吸

19、管未經校正 【本題答案】 BCE 4流式細胞儀接收并分析的信號主要有 A光散射訊號 B光吸收訊號 C熒光訊號 D電流訊號 E生物發光訊號 【本題答案】 AC 5影響血標本成分變化的主要因素有 A生理 B飲食 C藥物 D溶血 E濕度 【本題答案】 ABCD 6二級標準品主要用于 A校正決定性方法 B為次級標準品定值 C評價及校正參考方法 D常規方法的標化 E作為常規檢測的校準品 【本題答案】 DE 7常規方法的選擇在可靠性方面應具有 A較高的檢測精密度 B較大的檢測能力 C較低的檢測費用 D較快的檢測速度 E較好的檢測準確度 【本題答案】 ABE8方法比較試驗測定的是候選方法的 A偶然誤差 B比

20、例誤差 C恒定誤差 D總誤差 E系統誤差 【本題答案】 BCE9診斷試驗項目所確定的醫學決定水平一般包括 A待診值 B確診值 C提示預后的界值 D危急值 E參考值上限 【本題答案】 ABCD 10方法的性能標準應根據不同的目的而異，主要決定因素有 A參考值 B參考范圍 C醫學決定水平 D允許分析誤差 E臨床特異度 【本題答案】 CD 11理想的診斷試驗應具有絕對的 A檢測準確度 B檢測靈敏度 C檢測精密度 D臨床敏感度 E I臨床特異度 【本題答案】 DE 12特異度高的診斷試驗常用于 A擬診患有某病的概率較大時，以便確診 B擬診疾病嚴重但療效與預后均不好的疾病，以防誤診 C擬診疾病嚴重但療效

21、好的疾病，以 防漏診 D擬診疾病嚴重且根治方法具較大損害時，急需確診 E存在多種可能疾病的診斷，可排除某一診斷 【本題答案】 ABD13參考值的確定應著重考慮 A正確選擇受檢對象 B合理規定參考人群的條件 C保證一定數量的受檢人數 D務必保證測定結果的可靠 E以又為參考值，又±3s為參考范圍 【本題答案】 ABCD14終點法試劑盒質量評價要求為 A試劑空白的吸光度應低于規定標準 B試劑空白的反應速度時間曲線應平坦，且無明顯波動 C反應達到平衡的時間應在讀取測定吸光度的時間之前 D反應達到平衡后，吸光度最大并維持不變 E反應速度時問曲線的斜率要大，大而靈敏 【本題答案】 ABCD15連

22、續監測法試劑盒質量評價要求為 A反應速度下降型的試劑空白吸光度應在15左右 B反應速度上升型的試劑空白吸光度越低越好 C試劑空白的酶促反應時間曲線應平坦，吸光度變化應Amin000l D延遲期、線性反應期與設定的實驗參數要相符 E酶促反應速度曲線的斜率要小，否則靈敏度下降 【本題答案】 ABCD16均數一標準差(xs)質控圖的正常分布規律為 A 95數據落在x±2s內 B沒有連續5次結果在x的同一側 C沒有5次結果漸升或漸降 D可出現2次結果在又x±2S外，但應在又±3S內 E允許有一次結果在x±3s外 【本題答案】 ABC17影響光譜分析的主要因素有

23、A化學因素 B主觀因素 C光學因素 D試劑因素 E標本因素 【本題答案】 ABC18做好室內質控工作應注意的事項是 A要熟知室內質控的知識 B要有良好的質控血清 C質控血清要隨標本一起檢測 D質控血清定值方法要可靠，應有參 考實驗室作后盾 E每天應將測定結果反映在質控圖上 【本題答案】 ABCE19做回收試驗應注意的事項是 A吸量要準確 B加入標準液后的濃度最好達到醫學決定水平 C加入標準液后的體積應與基礎樣品的體積相同 D標準液一般須加人高、中、低不同濃度作樣品 E標準液的體積一般在20以內 【本題答案】 ABCD20產生電泳的要素有 A電場 B帶電粒子 C帶電粒子移動的介質 D電泳裝置形式

24、 E自動控制系統 【本題答案】 ABC21選擇質控血清的原則 A穩定性好，特別是酶活力值在復溶1周內基本保持不變 B小瓶包裝 C瓶問差異極小 D分析測試項目應滿足需要 E最好用自己定標的血清 【本題答案1 ABCD22Which of the following statement(S)about biochemical tests isare tree A the specificity of the test is equivalent to its falsenegative rate B the sensitivity of a test is the percentage of af

25、fected individuals with positive test results C the accuracy of a test is the ability of the laboratory to achieve the sanle result on a sample in repeat analysis D the nlore tests that are performed on a patient the more likely it is to have at least one result outside the reference E screening for

26、 a disease of high prevalence will require tests of higher specificity than screening for one of lower prevalence 【key】 BD23Regarding the performance characteristic of a laboratory test，the fight one is A prevalence of the disease has no bearing on the predictive Value of a test B sensitivity is the

27、 proportion of patients with the disease who are identified by he test C specificity is the proportion of patients without the disease who are identified by the testD adjustment of the diagnostic cutoffvalue to improve the sensitivity will usually improve specificity as well E ROC(receiver operating

28、 characteristic) curves are ulseful ill the assessment of two or more tests for a given condition 【key】 BCE24Regarding preanalytical factors which influence the clinical chemistry results A treatment with oestrogens will 1cad to raised levels of total thyroxine B treatment with prednisolone yields l

29、ow levels of Cortisol by inmmnoassay C blood stored at 4overnight can lead to increased level of plasma potassium D blood collected in EDTA gives low laboratory results for alkaline phosphatase E heparinized blood removes fibrinogen，thereby reducing interference in protein eleetrophoresis key】 ACD(四

30、)填空題 1親和層析法是利用目的的一類特殊層析技術和它的_、_【本題答案】 待分離物質，特異性配體2酶促反應時間曲線是以_為縱坐標，_具有特異的親和力，從而達到分離_為橫坐標作圖，觀察酶促反應和出現、持續和終止的時間，分析有關的性能指標。【本題答案】 吸光度，反應時間，動態期，平衡期 3均相EIA主要通過_同抗體結合形成_的免疫復合物，改變了標記酶的活性，通過催化_反應，測定酶活性變化，即可推算出被測樣品中待測的方法。 【本題答案】 酶標抗原，酶標記，底物呈色，抗原含量4流式細胞術是綜合光學、流體力學、電子計算機技術，利用_產生熒光的特點，快速靈敏的對_進行多參數_和_的技術。 【本題答案】

31、熒光素，單個細胞，定量測定，分選5實驗室認證指_依據程序對實驗室工作或服務是否符合規定的要求給予確認，給確認合格者出具_，并由_確保認證及其證書使用的_的有效性。 【本題答案】 認證機構，合格證書，認證體系，法規、協議及程序6室間質量評價是通過_的比對，觀察各實驗室結果的 _ 、一致性并采取_，使各實驗室結果漸趨一致。 【本題答案】 實驗室間，準確性，一定措施 7蛋白質微陳列指把制備好的蛋白質樣品固定于經_的玻片、硅片等載體上，蛋白質與_結合，同時仍保留蛋白質的 ，可以高效地大規模獲取生物體中蛋白質的信息。 【本題答案】 化學修飾，載體表面，物化性質，生物活性 8方法學評價是通過_，測定并評價

32、方法的_與_，測定的都是_。 【本題答案】 實驗途徑，精密度，準確度，誤差 9回收試驗即分析方法_加人常規分析樣品中的 _的能力。目的是測定_，以衡量候選方法的。 【本題答案】 正確測定，純分析物，比例系統誤差，準確度 10酶電極是_與_交叉結合，生物學與物理學、化學融為一體的技術。 【本題答案】 生物技術，傳感技術 (五)名詞解釋 1電泳 【本題答案】 在電場中，帶電粒子向所帶電荷相反的電極移動的現象稱為電泳(electrophoresis)。按原理可分為移動界面電泳、區帶電泳和穩態電泳或稱置換電泳三種形式。 2光譜分析 【本題答案】 利用各種化學物質所具有的發射、吸收或散射光譜譜系的特征，

33、來確定其性質、結構或含量的技術，稱為光譜分析技術。 3離子交換層析法 【本題答案】 離子交換層析法是以具有離子交換性能的物質作固定相，利用流動相中的離子能進行可逆的交換性質來分離離子型化合物的一種方法。 4電化學分析法 【本題答案】 利用物質的電化學性質，測定化學電池的電位、電流或電量的變化進行分析的方法。有電位法(potential method)、電導法和電容量分析法等多種。 5R0C曲線 【本題答案 診斷指標中以陽性率對假陽性率作圖，并將相對的點連接起來所得到的曲線，稱為受試者工作曲線(R0C曲線)。 6離心技術 【本題答案】 是根據顆粒在作勻速圓周運動時受到一個外向的離心力的行為而發展

34、起來的一種分離技術。這項技術在臨床生物化學中常用來分離化學反應后的沉淀物，和收集生物大分子物質。 7參考值 【本題答案】 指一個地區的健康人群中，規定若干條規格標準，在總體中抽樣進行調查測定，求出均值(x)和標準差(s)，通常將又定為參考值，將又x±2s定為參考范圍。非正態分布用百分位數表示，只能作為它所代表人群的判斷參考。 8臨床靈敏度 【本題答案】 臨床靈敏度(sensitivity)是指診斷試驗檢出陽性病人的百分率(TP率)。計算公式為：臨床靈敏度=(實際上檢測為陽性得病人數÷理論為陽性的病人數)×100。 9條碼技術 【本題答案】 條碼(bar Code)

35、技術是借助計算機為信息管理系統，提供高效、可靠、低成本自動識別和輸人數據、信息的技術。 10醫學決定水平 【本題答案】 醫學決定水平是臨床判斷結果具有意義的被分析物濃度，即臨床按照不同病情給予不同處理的指標閥值。 11散劓比濁法 【本題答案】 散射比濁法(nephelometzy)是利用光線通過混懸溶液時，由于顆粒的散射使通過的光線減弱，根據光線減弱的程度測定溶液中顆粒的濃度，所以，實際上可將散射濁度測定法看成是比色分析的一種特殊情況。 12決定性方法 【本題答案】 決定性方法(tefinitive method)是指確度最高，系統誤差最小，經過詳細的研究，沒有發現產生誤差的原因或在某些方面不

36、夠明確的方法。用于發展及評價參考方法和標準品。 (六)簡答題 1何謂Westgard多規則質控中41s規則與10x規則?兩者有什么相似之處? 【本題答案】 41s規則：當1份質控血清的測定結果連續4次超過+1s或一ls界限，或2份質控血清的測定結果同時連續2次超過+1s或一1s界限時，為“失控；10x規則：當l份質控血清測定結果連續10次偏于均值一側時，或2份質控血清的測定結果同時連續5次偏于又一側時，為“失控”。兩者一般都由系統誤差所致。 2生物傳感技術的原理是什么? 【本題答案】 生物傳感技術測定生物化學物質的原理是：待測定物質經擴散作用，進入固定化生物敏感膜層，經分子識別發生生物化學反應

37、，產生的信息被相應的化學或物理換能器轉變成可定量和可處理的電信號，再經二次儀表放大并輸出，便可經計算系統計算出待測物的濃度。 3臨床常規生化實驗方法選擇的具體要求有哪些? 【本題答案】 國際臨床化學聯合會(IFCC)提出：臨床常規方法應具有實用性和可靠性兩方面的性能指標，至于某一項具體分析方法所應具有的性能標準，可由臨床化學家根據采用這一試驗的目的決定。 (1)實用性一般應具備：微量快速，便于急診；費用低廉；應用安全。 (2)可靠性一般具有較高的精密度和準確度，以及較大的檢測能力。 4診斷試驗的選擇原則是什么? 【本題答案】 用于診斷的任何試驗必須具備靈敏度與特異度二個基本特性，兩者缺一不可。

38、理想的診斷試驗是具有絕對的敏感性和特異性。但由于生物個體差異和疾病過程的多樣性的存在，在許多診斷試驗中，有的敏感性高但特異性低；有的特異性高但敏感性低；有的兩者都較高，但費用昂貴或對人體有較大損害；有的兩者都一般，但簡單易行。這就需要根據初步擬診情況，依照不同試驗目的來選擇。 5影響電泳的主要因素有哪些?瓊脂糖凝膠作固體支持介質的區帶電泳有哪些優點? 【本題答案】 在電泳中，電場、帶電粒子和促使帶電粒子移動的介質是產生電泳的三大要素。因而，影響電泳的主要因素有：顆粒性質、電場強度、溶液性質、PH、離子強度、溶液粘度、電滲焦耳熱和篩孔(支持物)等。瓊脂糖凝膠作固體支持介質的區帶電泳的優點主要有：

39、能產生電荷效應和分子篩效應；幾乎不吸附蛋白質，電泳無拖尾現象；蛋白質可自由穿透，阻力小，分離清晰，透明度高。 6何謂臨床特異度?臨床特異度的診斷試驗有哪些用途? 【本題答案】 臨床特異度(speCmCity)指診斷試驗檢查確定未患病者的陰性百分率。計算公式為：臨床特異度=(檢查結果為陰性的人數÷全部受檢的未患本病的人數)×100。臨床特異度高的診斷試驗，常用于：擬診患有某病的概率較大時，以便確診；擬診疾病嚴重但療效與預后均不好的疾病，以防誤診，盡早解除病人的壓力；擬診疾病嚴重且根治方法是具有較大損害時，需確診，以免造成病人不必要的損害。 7臨床常用的光譜分析類型及其主要影響

40、因素是什么? 【本題答案】 根據光譜譜系的特征不同，可把光譜分析技術分為發射光譜分析、吸收光譜分析和散射光譜分析三大類。在臨床生物化學檢驗中，主要包括：吸收光譜分析法，如可見光及紫外光分光光度法、原子吸收分光光度法；發射光譜分析法，如熒光分析法和火焰光度法；散射光譜分析法，如比濁法。光譜分析的基礎是被測物質的濃度與吸光度成正比，導致誤差的主要原因有化學因素、主觀因素和光學因素等三類。 (七)論述題 1。簡述臨床生化液體雙試劑型試劑盒具的特點。 【本題答案】 液體型試劑的生化試劑組分高度均一、瓶問差異小、測定重復性好和使用方便；它也無需加入任何輔助試劑及蒸餾水，避免了外源性水質對試劑的影響，性能

41、較穩定，測定結果較為準確。但液體單試劑存在抗干擾能力差的缺點，給測定結果帶來相當大的分析誤差。液體雙試劑型試劑盒，增強了抗干擾能力和試劑的穩定性，提高了測定的準確性。 2簡述標本溶血對臨床生化測定的影響及防止的方法。 【本題答案】 待測物在紅細胞內濃度高于血漿時，溶血可使測定結果偏高，有些物質如LD、ACP、AST、K+等在紅細胞內的濃度比血漿高22160倍，輕微溶血都對結果影響很大；血紅蛋白可干擾膽固醇的酶法測定，抑制膽紅素的重氮反應等；溶血也干擾某些光譜分析。因此，應盡量避免溶血。 防止溶血的辦法是：抽血器和容器必須干燥潔凈，盡量使用一次性抽血器(注射器)；不用或短時間使用止血帶；抽血后取

42、下針頭再將血液沿容器壁徐徐注入容器內；若用血漿應輕輕倒轉容器與抗凝劑混勻，切勿用力振搖。 3試述免疫比濁測定的基本原理與注意事項。 【本題答案】 基本原理是抗原抗體在特殊緩沖液中快速形成抗原抗體復合物，使反應液出現濁度。當反應液中保持抗體過剩時，形成的復合物隨抗原量增加而增加，反應液的濁度亦隨之增加，與一系列的標準品對照，即可計算出未知蛋白的含量。臨床常用于免疫球蛋白、載脂蛋白及一些同工酶的檢測。 注意事項：抗原或抗體量大大過剩，可出現可溶性復合物，造成誤差。對單克隆蛋白的測定，這種誤差更易出現；是應維持反應管中抗體蛋白量始終過剩，這個值要預先測定，使儀器的測定范圍在低于生理范圍到高于正常范圍

43、之間；受到血脂的影響，尤其是低稀釋時，脂蛋白的小顆粒可形成濁度，造成假性升高。此外，加入聚合劑(或促聚劑)可促進大的免疫復合物的形成速度。 4試述生物芯片的原理與分類。 【本題答案】 生物芯片(bioChip)是通過微加工技術和微電子技術在固格體芯片表面構建的微型生化分析系統。 測定原理是把制備好的生物樣品固定于經化學修飾的載體上，樣品中的生物分子與載體表面結合，同時又保留其理化性質，在一定條件下，進行芯片上的生物分子反應，并使反應達最佳狀態，然后利用芯片專用監測系統對芯片信號進行監測，即可高效、大規模獲得生物體中待檢測物質的信息。 生物芯片按固定的生物分子及材料不同可分為基因芯片、蛋白質芯片

44、、細胞芯片、組織芯片和芯片實驗室等。臨床生物化學常用的生物芯片主要為基因芯片(gene arrays)、蛋白質芯片(protein arrays)又稱蛋白質微陣列(protein miCroarrays)及芯片實驗室(1ab-on-Chip)三大類。 5簡述室問質量評價中的胛方案及其判斷標準。 【本題答案】 能力對比分析(profiCienCy test，W)是室間質量評價技術方案之一，方法是將未知標本分發給各實驗室，并提供可靠的標準，對回報結果進行分析，判斷實驗室獲得正確測定結果的能力。國際CLIA'88的Pro方案規定，臨床生物化學項目每年至少進行3次PT調查，每次調查至少包括5個

45、不同的質控樣本，frr在一年內，對于任一項至少可得15個測定結果。通過各實驗室間持續的比較，作出結果判斷。 計算公式為：針對某一項目的得分SCore：Sl=(該項目的可接受結果數÷該項目的總測定次數)×100；對調查的全部項目的得分：s2=(全部項目可接受結果總數÷全部項目總的測定次數)×100。 判斷標準：國際CLIA88技術細則規定，s1、S2均應大于80，否則判為不滿意且如果sl或S2連續兩次或兩次以上不滿意，即為失敗，對于某一個接受結果，不再進行優劣分級。 6試述連續監測法試劑盒的評價要求。 【本題答案】 連續監測法試劑盒評價：試劑空白值是否符合

46、規定，反應速度下降型的試劑空白吸光度應在15左右，反應速度上升型的試劑空白吸光度越低越好，不符合說明書中規定值者不宜使用；試劑空白的酶促反應時問曲線應平坦，吸光度變化gAAmi。0001，若大于此值，表明試劑本身分解變化，會使測定結果產生誤差；延遲期、線性反應期與設定的實驗參數是否相符，若不相符應予修改；觀察酶促反應速度曲線的斜率，通過定值血清，分析試劑盒的靈敏度。當試劑盒中底物濃度不足，輔助酶或指示酶的酶量不足或質量不好、反應條件不是最適條件等情況時，酶促反應速度曲線斜率下降，靈敏度低，測定結果有嚴重比例誤差，這種試劑盒無法糾正，不能使用。 7試述臨床實驗室全面質量控制的目的及主要內容。 【

47、本題答案】 臨床實驗室全面質量控制的目的就是檢測分析過程中的誤差，控制與分析有關的各個環節，確保實驗結果的準確可靠。內容主要包括標本分析前、分析中和分析后的三個主要過程的質控。 (1)分析前的質量控制其內容主要為：人員培訓；實驗室設置；實驗儀器的質量保證；檢測方法的選擇和評價；試劑和校準品的選擇和評價；標本準備等。 (2)分析中的質量控制 內容主要包括：建立項目操作程序；室內質控和結果分析。 (3)分析后的質量控制 內容主要有：報告實驗結果；室內質控的數據管理；參加室間評質；投訴調查與反饋。 (八)病例分析 病例l：女，65歲，服用了一段時間的噻嗪類利尿藥物后，采血測定尿素、鉀、鈉濃度。護士抽

48、血后將標本遺忘，次日上午發現后才將標本送到檢驗科。檢驗科檢測結果為：血清尿素118mmolL，K+66mmolL，Na+130mmolL。檢驗人員立即與醫生進行了聯系，試分析出現該結果的原因。 【本題答案】 由于實驗室不知道標本在送檢過程中有延誤，根據檢測結果分析，表明此患者可能處于尿毒癥前期的血Na降低和高K血癥。若標本正確，則為典型的Addison病，一種內分泌系統的急診。實際情況是，沒有及時地分離血清，K+、Na+就順著其濃度梯度發生轉移，使所測的血清K、Na濃度結果不可靠，所以需要重新采血以了解患者的電解質平衡狀態。 Case 2A 43一yearold obese man whose

49、 plasma total Cholesterol ConCentration was 80 mmolLwas put on lipid lowering drugs；After 6 weeks his plasma total Cholesterol was 73 mmolLThe totalCoeffiCient of variation(CV)for plasma total Cholesterol is 61.Has he shown a statistiCally signifiCant response(P<0.05)to treatment【key 】 The probability that the differenCe between two resuIts is statistiCally signifiCant at a leVelof P<00