1、藥物分析：巴比妥類分析SYSH結(jié)構(gòu)性質(zhì)與鑒別特殊雜質(zhì)檢查含量測定體內(nèi)藥物分析10-1+C ONNCCCR1R2HHHHOOOHOHC NCNCCOOHHOR1R2一、巴比妥類藥物的結(jié)構(gòu)剖析一、巴比妥類藥物的結(jié)構(gòu)剖析 Interpretation of Chemical Structure 丙二酸脲素123456 三類：三類： 5, 5-二取代巴比妥類二取代巴比妥類 1, 5, 5-三取代巴比妥類三取代巴比妥類 代表物見表代表物見表10-1 (P265.) 硫代巴比妥類硫代巴比妥類巴比妥類10-2123456巴比妥類巴比妥類5,5-二取代巴比妥類二取代巴比妥類 R1 R2 巴比妥巴比妥 C2H5

2、- C2H5- 苯巴比妥苯巴比妥 C2H5- 戊巴比妥戊巴比妥 C2H5- 異戊巴比妥異戊巴比妥 C2H5- 司可巴比妥司可巴比妥 - C2H5-1,5,5-三取代巴比妥類三取代巴比妥類 （少數(shù)）（少數(shù)） 如：己瑣巴比妥如：己瑣巴比妥硫代巴比妥類硫代巴比妥類 硫噴妥鈉硫噴妥鈉 5-3CH3CH2CH2CHCH3CH3CHCH2CH2CH3H2C CHCH2NNHOO CH3OH3CNNHOO CH3SNaC2H5H3CH2CH2CHCCH3電離，弱酸性電離，弱酸性與金屬離子反應(yīng)與金屬離子反應(yīng)氫活潑，與香草醛反應(yīng)氫活潑，與香草醛反應(yīng)UV，隨電離級數(shù)變化，隨電離級數(shù)變化IR，巴比妥類結(jié)構(gòu)，巴比妥類

3、結(jié)構(gòu)1. 環(huán)狀母核部分環(huán)狀母核部分 （決定巴比妥類藥物的特性）：（決定巴比妥類藥物的特性）：丙二酰脲（丙二酰脲（1, 3-二酰亞胺基團）二酰亞胺基團）堿性條件水解堿性條件水解2. 取代基部分取代基部分 （區(qū)別各種巴比妥類藥物）：（區(qū)別各種巴比妥類藥物）：苯環(huán)、不飽和鍵苯環(huán)、不飽和鍵(烯丙基烯丙基)、硫元素、硫元素硫元素反應(yīng)硫元素反應(yīng)碘、溴、碘、溴、高錳酸鉀反應(yīng)高錳酸鉀反應(yīng)硝化、硫酸硝化、硫酸-亞硝酸鈉、亞硝酸鈉、甲醛甲醛-硫酸反應(yīng)硫酸反應(yīng)5-4(一一) 性狀性狀白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉未，具有固定的熔點。白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉未，具有固定的熔點。空氣中穩(wěn)定，加熱多升華。空氣中穩(wěn)定，加熱多升華。1.游離巴

4、比妥類藥物微溶或極微溶于水，易溶于乙醇及有機游離巴比妥類藥物微溶或極微溶于水，易溶于乙醇及有機溶劑；其鈉鹽則易溶于水，而不溶于有機溶劑。溶劑；其鈉鹽則易溶于水，而不溶于有機溶劑。二、性質(zhì)與鑒別二、性質(zhì)與鑒別Properties and Identification示例示例10-8 ChP中苯巴比妥鈉的熔點鑒別法：取本品約0.5g，加水5ml溶解后，加稍過量的稀鹽酸，即析出白色結(jié)晶性沉淀，濾過，沉淀用水洗凈，在105干燥后，熔點應(yīng)為174178。 特征熔點行為特征熔點行為(P271.)鑒別、純度 測定藥物本身、鈉鹽酸化析出產(chǎn)物、衍生物的熔點 方法：鈉鹽 + 酸 游離巴比妥類藥物 過濾、 洗滌、干

5、燥 測熔點5-41. 弱酸性弱酸性2. 水解反應(yīng)（在堿性條件下水解，放出水解反應(yīng)（在堿性條件下水解，放出NH3）3. 絡(luò)合反應(yīng)（與重金屬離子絡(luò)合反應(yīng)（與重金屬離子Co, Cu, Ag, Hg反應(yīng)）反應(yīng)）4. 香草醛反應(yīng)（香草醛反應(yīng)（Vanillin反應(yīng)）反應(yīng)）5. 特殊取代基反應(yīng)（苯環(huán)，不飽和取代基，特殊取代基反應(yīng)（苯環(huán)，不飽和取代基，S）（6. 鈉鹽反應(yīng)）鈉鹽反應(yīng)）(二二) 化學(xué)性質(zhì)化學(xué)性質(zhì) 1. 弱酸性弱酸性 1, 3-二酰亞胺基團，烯醇互變，水溶液中發(fā)生二級電離。二酰亞胺基團，烯醇互變，水溶液中發(fā)生二級電離。 藥物具有弱酸性，可與強堿反應(yīng)生成水溶性的藥物具有弱酸性，可與強堿反應(yīng)生成水溶性

6、的(鈉鈉)鹽。鹽。 成鹽后，水溶液呈堿性，加酸后析出結(jié)晶。成鹽后，水溶液呈堿性，加酸后析出結(jié)晶。2. 水解反應(yīng)水解反應(yīng) 酰亞胺結(jié)構(gòu)，堿性條件共沸，釋放氨氣，使紅色石蕊試紙變藍。酰亞胺結(jié)構(gòu)，堿性條件共沸，釋放氨氣，使紅色石蕊試紙變藍。 本類藥物的鈉鹽，在吸濕情況下也能發(fā)生水解。本類藥物的鈉鹽，在吸濕情況下也能發(fā)生水解。pH 11以上以上隨堿度的增加水解速度加快。隨堿度的增加水解速度加快。P266. 示例10-1 JP15巴比妥的鑒別：取巴比妥0.2g，加氫氧化鈉試液10ml，加熱煮沸，則產(chǎn)生具氨臭的氣體，可使紅色石蕊試紙變藍。3. 絡(luò)合反應(yīng)（與重金屬離子絡(luò)合反應(yīng)（與重金屬離子Ag, Cu, Co

7、, Hg反應(yīng)）反應(yīng)）(1) 與銀鹽的反應(yīng)與銀鹽的反應(yīng)(2) 與銅鹽的反應(yīng)與銅鹽的反應(yīng)(3) 與鈷鹽的反應(yīng)與鈷鹽的反應(yīng)(4) 與汞鹽反應(yīng)與汞鹽反應(yīng) C O C C O N H R 1 R 2 N C O N a A g N O 3 A g N O 3 C O C C O R 1 R 2 N N C A g O N a C O C C O R 1 R 2 N N C A g A g O Soluble mono-silver salt Insoluble di-silver salt （5,5-取代）取代）l 銀鹽反應(yīng)：銀鹽反應(yīng)：鑒別取供試品約0.1g，加碳酸鈉試液1ml與水10ml，振搖2分鐘，

8、濾過，濾液中逐滴加入硝酸銀試液，即生成白色沉淀，振搖，沉淀即溶解；繼續(xù)滴加過量的硝酸銀試液，沉淀不再溶解。 NCCOCONNHCOR1R2CCOCONNHCOR1R2CuNSSPurpleCuSO-PyridineBarbital 4紫色或紫色沉淀綠色（含硫巴比妥）5, 5-取代基親脂性，紫色易進入氯仿l 銅鹽反應(yīng)銅鹽反應(yīng)鑒別取供試品50mg，加吡啶溶液(110)5ml，溶解后加銅吡啶試液1ml，即顯紫色或生成紫色沉淀。purple base organicCo Barbital 2CCONHCONCOR1R2CCONHCONCOR1R2CoH2NCH(CH3)2H2NCH(CH3)2l 汞鹽

9、反應(yīng)汞鹽反應(yīng)TSNHinsoluble OH2233eprecipitatwhiteHgClor )Hg(NOBarbitall 鈷鹽反應(yīng)鈷鹽反應(yīng)NNOOOR1R2OOOCH 3H 3COHHHNNOOOR1R2OOOCH 3H 3COCH 3n +棕紅色紫色變藍色加乙醇香草醛+濃硫酸活潑氫OHCHOOCH 3NHHNOOOR1R2H2SO4- H2ONNOOOR1R2OOOCH 33 HCO+ 25. 特殊取代基反應(yīng)特殊取代基反應(yīng)（苯環(huán)，不飽和取代基，（苯環(huán)，不飽和取代基，S） 硝化反應(yīng)硝化反應(yīng)苯巴比妥與KNO3H2SO4反應(yīng)生成黃色 與與NaNO2H2SO4反應(yīng)反應(yīng)苯巴比妥與NaNO2H2

10、SO4反應(yīng)生成橙黃色橙紅色 與甲醛與甲醛H2SO4反應(yīng)反應(yīng)苯巴比妥與甲醛H2SO4反應(yīng)生成玫瑰紅色環(huán)(1) 芳環(huán)取代基的反應(yīng)(2) 不飽和鍵反應(yīng) 與溴試液或碘試液的反應(yīng)與溴試液或碘試液的反應(yīng) 司可巴比妥可使溴試液或碘試液褪色 與與KMnO4的反應(yīng)的反應(yīng) 可還原紫色的KMnO4為棕色的MnO2（3） 硫元素的反應(yīng) （黑色）白色硫噴妥鈉 PbS PbNaOH2示例示例10-4 ChP中注射用硫噴妥鈉的鑒別：取本品約0.2g，加氫氧化鈉試液5ml與醋酸鉛試液2ml，生成白色沉淀；加熱后，沉淀變?yōu)楹谏?1. UV（紫外）光譜特征（紫外）光譜特征2. IR（紅外）光譜特征（紅外）光譜特征3. TLC（

11、薄層色譜）特征（比移值一致）（薄層色譜）特征（比移值一致）4. 顯微結(jié)晶顯微結(jié)晶(三三) 譜學(xué)性質(zhì)譜學(xué)性質(zhì) A.H2SO4液(0.05mol/L,未電離)緩沖液(一級電離)C.pH13NaOH液(1mol/L,二級電離)(nm)2902702502300.51.01.5A3202802402000.80.50.2(nm)AABC2382873041.巴比妥類藥物紫外吸收光譜特征巴比妥類藥物紫外吸收光譜特征2. 巴比妥類藥物薄層色譜行為巴比妥類藥物薄層色譜行為示例示例10-3 BP2010中苯巴比妥的TLC鑒別：取苯巴比妥供試品和對照品各適量，分別加乙醇制成每1ml中約含1mg的溶液作為供試品和

12、對照品溶液，各量取10l，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以三氯甲烷-乙醇-濃氨水(80155)混合液的下層溶液為展開劑，展開后，晾干，立即于254nm紫外光下檢測。供試品溶液的主斑點位置和大小與對照品溶液的均一致。3.巴比妥類藥物紅外吸收光譜特征巴比妥類藥物紅外吸收光譜特征5,5-二乙基巴比妥鈉二乙基巴比妥鈉5-44. 顯微結(jié)晶顯微結(jié)晶A. 巴比妥結(jié)晶； B. 苯巴比妥結(jié)晶苯巴比妥的特殊雜質(zhì)檢查苯巴比妥的特殊雜質(zhì)檢查 苯巴比妥的合成工藝：苯巴比妥的合成工藝：C2H5OH,H2SO4水解酯化CH2CONH2，CH2COOC2H5C2H5ONaOCOC2H5OC2H5CCONaOC2H5CO

13、OC2H5HCl酸化 ， 消除CHCOOC2H5COOC2H5CHCOOC2H5COOC2H5C2H5Br乙基化CCOOC2H5COOC2H5C2H5CH3ONa環(huán)合CH2NH2NOCCONaC2H5CONHCONCCOC2H5CONHCONH酸析HCl 主要特殊雜質(zhì)：主要特殊雜質(zhì)： 中間體中間體 I、II、III 及反應(yīng)副產(chǎn)物苯基及反應(yīng)副產(chǎn)物苯基丙二酰脲丙二酰脲CHCOOC2H5COOC2H5COHHNHHNCHCOHNCOHNO酸度：酸度： （檢查副產(chǎn)物苯基丙二酰脲）（檢查副產(chǎn)物苯基丙二酰脲） 副副產(chǎn)物產(chǎn)物5-H 活性強，酸性強活性強，酸性強 示例示例10-9 取本品0.20g，加水10m

14、l，煮沸攪拌1min，放冷，濾過，取濾液5ml，加甲基橙指示液1滴，不得顯紅色溶液澄清度：溶液澄清度：示例示例10-9 取本品1.0g，加乙醇5ml，加熱回流3min，溶液應(yīng)澄清（檢查中間體（檢查中間體II和和III等乙醇中不溶物）等乙醇中不溶物）中性或堿性雜質(zhì)中性或堿性雜質(zhì) 利用雜質(zhì)與苯巴比妥在堿性下溶解性差異利用雜質(zhì)與苯巴比妥在堿性下溶解性差異（檢查中間體（檢查中間體 I及其副產(chǎn)物以及降解產(chǎn)物等）及其副產(chǎn)物以及降解產(chǎn)物等）示例示例10-11ChP中苯巴比妥的中性或堿性物質(zhì)檢查法：取本品1.0g，置分液漏斗中，加氫氧化鈉試液10ml溶解后，加水5ml與乙醚25ml，振搖1分鐘，分取醚層，用水

15、振搖洗滌3次，每次5ml，取醚液經(jīng)干燥濾紙濾過，濾液置105恒重的蒸發(fā)皿中，蒸干，在105干燥1小時，遺留殘渣不得超過3mg。 有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì)HPLC法法5-6四、含量測定四、含量測定 Assay銀量法銀量法溴量法溴量法酸堿滴定法（醇酸堿滴定法（醇-水中、膠束中、非水）水中、膠束中、非水）紫外分光光度法紫外分光光度法 （直接（直接UV、提取后、提取后UV、差示、差示UV）HPLC法法1、銀量法、銀量法與重金屬離子絡(luò)合反應(yīng)與重金屬離子絡(luò)合反應(yīng) 基于巴比妥類藥物在合適的堿性溶液中基于巴比妥類藥物在合適的堿性溶液中，可與銀離子定量成鹽。，可與銀離子定量成鹽。示例示例10-14ChP中異戊巴比妥的銀

16、量測定法：中異戊巴比妥的銀量測定法：取本品約0.2g，精密稱定，加甲醇40ml使溶解，再加新鮮配制的3%無水碳酸鈉溶液15ml，照電位滴定法，用硝酸銀滴定液(0.1mol/L)滴定，即得。每1ml硝酸銀滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于22.63mg的C11H18N2O3。 溶劑：甲醇、溶劑：甲醇、3無水碳酸鈉無水碳酸鈉電位法判斷終點電位法判斷終點 含量含量TVf /w 100%2、溴量法、溴量法司可巴比妥（不飽和取代基）司可巴比妥（不飽和取代基） 凡在凡在5位取代基含有不飽和鍵的巴比妥類藥物，位取代基含有不飽和鍵的巴比妥類藥物，其不飽和鍵能與溴定量地發(fā)生加成反應(yīng)，故可采用溴其不飽和鍵能與溴定量

17、地發(fā)生加成反應(yīng)，故可采用溴量法測定其含量。量法測定其含量。*指示劑：淀粉指示劑指示劑：淀粉指示劑 5-7示例示例10-15ChP中司可巴比妥鈉的溴量測定法：取本品約0.1g，精密稱定，置250ml碘瓶中，加水10ml，振搖使溶解，精密加入溴滴定液(0.05mol/L)25ml，再加鹽酸5ml，立即密塞并振搖1分鐘，在暗處靜置15分鐘后，注意微開瓶塞，加入碘化鉀試液10ml，立即密塞，搖勻后，用硫代硫酸鈉滴定液(0.1mol/L)滴定，至近終點時，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍色消失，并將滴定結(jié)果用空白試驗校正，即得。每1ml溴滴定液(0.05mol/L)相當(dāng)于13.01mg C12H17N2NaO3。3、酸堿滴定法、酸堿滴定法 非水酸量法非水酸量法弱酸性弱酸性巴比妥類藥物在非水溶劑中酸性增強，用堿性標準液滴巴比妥類藥物在非水溶劑中酸性增強，用堿性標準液滴定，終點明顯定，終點明顯常用溶劑：二甲基甲酰胺常用溶劑：二甲基甲酰胺非水酸量法非水酸量法-弱酸性弱酸性 巴比妥類藥物在非水