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文檔簡介
1、1原位雜交實驗方法適用方法熒光檢測系統過氧化物酶檢測系統堿性磷酸酶檢測系統石蠟切片冰凍切片細胞涂片和細胞爬片2mRNA 原位雜交前實驗準備w1,無RNA酶水的處理w2,無RNA酶載玻片的處理w3,標本的防RNA酶的固定w4,探針的稀釋和保存w5,DNA探針需變性3原位雜交溶液的配制w1,預雜交液和雜交液的配制w2,20Xssc, 2Xssc, 0.2Xssc緩沖液的配制w3,0.1mol PBS緩沖液的配制w4,0.1mol 枸櫞酸緩沖液的配制w5,0.1mol TBS緩沖液的配制w6,復合消化液的配制w7,組織細胞打孔液的配制w8,雜交漂洗液w9,過氧化氫封閉液4探針設計方案w1,探針名稱
2、:w2,適用種屬:w3,標記方式:3DIG 5FAMw4,模板序列:w5,探針序列:5探針雜交原理w1,組織細胞的通透w2,探針長度w3 , 探針濃度和雜交時間w4,雜交中的Tm值和雜交溫度w5,雜交嚴格度 w6,預雜交原理w7,雜交后處理 6A-石蠟切片mRNA原位雜交步驟w一,過氧化物酶顯色系統w二,堿性磷酸酶顯色系統w三,熒光顯色方法7B-冰凍切片mRNA原位雜交步驟w一,過氧化物酶顯色系統w二,堿性磷酸酶顯色系統w三,熒光顯色方法8C-細胞爬片或涂片mRNA原位雜交步驟w一,過氧化物酶顯色系統w二,堿性磷酸酶顯色系統w三,熒光顯色方法9附錄w1,DAB的配制和使用方法w2 NBT/BCIP的配制和使用方法w3,蘇木素的配制和使用方法w4,核固紅的配制和使用方
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