1、大孔吸附樹脂分離純化地黃中梓醇工藝的研究論文作者：張秀麗報告人：江南報告時間：2018.4本論文利用大孔吸附樹脂分離提取地黃中梓醇。以地黃粗提液中梓醇含量為指標，高效液相色譜（HPLC）為含量測定方法，考察9種不同極性大孔吸附樹脂 對梓醇的吸附和解吸附性能, 篩選出最佳樹脂D101 進行分離實驗。結果表明,D101 大孔吸附樹脂的靜態吸附容量為69. 2mg /g 干樹脂 , 其吸附等溫線符合Langmuir 和 F reundlich 吸附等溫式。采用5%乙醇作為洗脫劑, 洗脫液減壓濃縮后進行硅膠柱層析分離, 氯仿、甲醇梯度洗脫得到梓醇單體, 純度達 90% 以上 ,梓醇得率為6%。本論文的

2、主要內容包括：1 地黃提取液的制備；2.梓醇含量的測定；3.靜態吸附解吸實驗；4.吸附等溫線實驗取 D 101、 H PD 100 型大孔吸附樹脂適量（相當于 1g 干樹脂 ）, 處理后置于小錐形瓶內, 取地黃粗提液倍比稀釋后, 各取20m l 加入錐形瓶中, 于室溫下放入120r /min 的搖床中充分振蕩, 測其平衡濃度,以平衡濃度和吸附量為橫縱坐標繪制吸附等溫線；5.吸附動力學實驗取 D 101、H PD 100型大孔吸附樹脂適量（相當于1g干樹脂）,處理后置于小錐形瓶，取 20ml 地黃粗提液加入錐形瓶內, 置于搖床恒溫振蕩18h, 在 0. 5、 1、 2、 4、 8、18h 取樣測

3、定 , 計算樹脂對梓醇的吸附量, 繪制吸附動力學曲線。6.動態吸附解吸實驗準確稱取D101 大孔吸附樹脂適量（相當于5g 干樹脂 ）, 預處理后濕法裝于 1.2cmx40 cm 小層析柱內, 用一定濃度的地黃粗提液通入柱中, 控制吸附條件 , 定時接收流出液, 貫穿后 , 依次用 5 倍柱體積水、5% 乙醇、10%乙醇、20%乙醇、 40%乙醇、60%乙醇、80% 乙醇、 95% 乙醇洗脫, 對上樣液、殘余液及洗脫液定容取樣, 0. 22Lm 微孔濾膜過濾, HPLC 測定峰面積, 計算對應梓醇含量,確定最佳洗脫溶劑。本論文與本人課題相似，雖然梓醇的得率較低，但純度很高，這也提示說如果要得到高

4、純度小批量的梓醇可以選擇最后的純化工藝為硅膠層析。總結其實驗步驟的工藝流程圖為：怫fe頻憶像一城）1參懦浸泡一次合做液川川保樹脂吸附一柱層析圖5梓醇的分離純化工藝流程圖F ig 5 Separation and pur ification p roc csschart ofcata 明。1生地黃中梓醇純化工藝優選論文作者：楊菁報告人：江南 報告時間：2014.12.12本文采用高效液相色譜法檢測梓醇含量。以梓醇含量為指標，比較不同型號的大孔樹脂、活性炭對梓醇的分離效果，再對所含梓醇的部分應用不同的葡聚糖 凝膠進行分離。結果：優選確定的工藝為：用15%活性炭對梓醇粗提物吸附后， 活性炭用20%乙

5、醇洗脫，將收集洗脫液濃縮后用葡聚糖凝膠G-15進行分離，所得產物中梓醇含量在 85%以上。梓醇化學性質不穩定，易受酸堿等條件影響，這為梓醇的純化增加了難度， 本文在地黃中梓醇提取工藝條件優化的基礎上，應用活性炭及葡聚糖凝膠對地黃 醇提取物進行分離，以期獲得純度較高的梓醇。本課題的主要內容包括：1.梓醇粗提物的制備取生地黃 500 g適當粉碎，加入12倍量95%乙醇，回流提取 2次，每次1h;合并兩次濾液，減壓濃縮至 500m L,過濾，得地黃醇提物備用； 2.量取100 m L樣品，向其中加入15 g粉末狀活性炭，攪拌，靜置2 h,濾過， 收集濾液，高效液相分別檢測濾液和活性炭吸附前藥液中梓醇

6、含量。實驗結果可知，活性炭對梓醇具有較強的吸附能力， 平均吸附量為19. 9 mg /g。根據活性炭 特點，選擇不同濃度的乙醇及水對活性炭進行洗脫。取 200 m L樣品，向其中 加入30 g活性炭，攪拌，靜置2 h,濾過，收集活性炭陰干，用1 000 m L水、 1 000 m L 10% 乙醇、1 000 m L 20% 乙醇、1 000m L 40% 乙醇、1 000 m L 95% 乙醇洗脫，分別收集洗脫液，減壓濃縮至體積為 200 m L,薄層跟蹤檢測。實驗 結果提示10%20%乙醇洗脫效果較好，收率在 80%左右，梓醇純度約為45% ， 采用活性炭吸附可作為梓醇的粗分離手段。3.活

7、性碳處理后，選用不同型號的葡聚糖凝膠對梓醇進行分離，取10 m L 樣品，分別緩慢加到葡聚糖凝膠G-15、葡聚糖凝膠G-25、葡聚糖凝膠LH20凝膠柱中，打開活塞，當藥液面接近膠面時加水洗脫，采用部分自動收集器進行收集，流速為0. 5 m L min/min ，每 10 min 收集一管。薄層跟蹤檢測梓醇。通過薄層跟蹤對3 種不同型號的葡聚糖凝膠對梓醇的分離效果進行比較，由試驗結果可見葡聚糖凝膠G-25、葡聚糖凝膠 LH20 對梓醇的分離效果不理想，而葡聚糖凝膠G-15 能將梓醇與其他成分實現較好的分離。結果表明葡聚糖凝膠G-15 分離效果好，收率高達50%以上，純度能達到85% 以上。 4.

8、 梓醇分離純化驗證試驗根據以上試驗結果，采用活性炭吸附、20% 乙醇洗脫及G15 分離的方法，對梓醇粗提物進行了分離純化。生地中梓醇富集純化工藝路線及降血糖活性功能評價論文作者：蒲東報告人：江南報告時間：2014.11.07本文對梓醇的富集純化工藝進行了初步的研究,并對生地及梓醇進行了降血糖活性的功能性評價。 本課題的主要研究內容：1.在建立梓醇含量測定的方法基礎上,以梓醇得率為考察指標,選用正交實驗篩選出梓醇的最佳提取工藝；2.通過對D101、 HPD600等多種吸附材料進行比較,選擇吸附量最大的吸附材料采取乙醇回流的方式對篩選出的吸附材料進行洗脫；3.應用高血糖小鼠模型對提取出的梓醇進行降

9、糖活性等的研究對提取出的梓醇進行急性毒性實驗。 通過以上實驗,得到以下結果:1.梓醇的最佳提取工藝為10倍量乙醇回流提取兩次，每次1h, 2應用高效液相色譜儀檢測 D101、HPD600等十余種樹脂吸附后 剩余梓醇量，選出活性C為實驗用吸附材料，解吸方式為乙醇回流兩次，每次2h, 結果顯示有60%梓醇能被洗脫下來，剩余無法解吸，推測活性C是為不可逆吸附； 3.動物實驗結果表明,梓醇能明顯降低四氧嚓睫致糖尿病小鼠的血糖水平,提高糖尿病小鼠的糖耐量，運用生化試劑盒對小鼠血清進行檢測,結果表明梓醇能明顯提高糖尿病小鼠血液抗氧化能力,且呈劑量依賴關系。該篇論文結構嚴謹，實驗路線清晰，為本人論文-地黃葉

10、中梓醇的純化工藝研究提供了思路。梓醇的化學性質不穩定,對敏感,且地黃中的環烯醚菇昔類物質大都結構類似,給分離造成很大麻煩,常規的純化分離手段分離不易分開。目前較為常用的方法是大孔樹脂分離,但大孔樹脂吸附量較小,容易造成吸附量與樹脂量比例過小,造成成本較大,從而限制了梓醇的工業開發。但在本實驗中,采用活性作為梓醇的吸附劑,不僅吸附量大,且操作簡單,解吸簡便活性的造價也較低,易于應用于工業化生產但應用活性作為吸附材料,梓醇的損失較大,達到,因此,迫切需要需找一種更為簡便,損失量更小的純化分離手段。在本實驗中,利用實驗制備的生地浸膏及梓醇研究了對高血糖小鼠體重、血糖水平、血清SOD 活性、 AR 活

11、性、 MDA 含量的影響。該實驗通過建立高血糖小鼠模型,并分別灌胃陽性藥物和試驗制備的生地浸膏和不同劑量的梓醇,對比各組血糖水平及小鼠血清生化指標。結果顯示,生地的降血糖效果明顯,同時在提高小鼠血液抗氧化能力方面作用顯著,這為下一步糖尿病并發癥的藥物研發提供了一定的實驗基礎。豨薟草抗關節炎作用的研究論文作者：蔣芳萍報告人 : 江南 報告時間：2014.12.20本論文通過小鼠急性損傷性關節炎模型、小鼠急性痛風性關節炎模型、大鼠急性痛風性關節炎模型、單克隆抗體組合誘導類風濕關節炎小鼠模型等四種動物模型研究了豨薟草提取物的抗關節炎作用。結果表明：豨薟草乙醇提取物的抗關節炎作用優于豨薟草水提取物；豨

12、薟草乙醇提取物能顯著降低這四種模型動物的關節腫脹度，能明顯降低急性損傷性關節炎小鼠組織中 IL-1% Rantes IL-10水 平和類風濕關節炎小鼠血清或組織中 IL-1 0、IL-6、IL-17和MMP-3水平，顯著 升高急性痛風性關節炎小鼠組織中IL-4 水平和急性痛風性關節炎大鼠血清中IL-10 水平，提示豨薟草提取物可能是通過調節與關節炎相關的一些炎癥因子而起作用。小鼠急性毒性試驗結果顯示豨薟草乙醇提取物毒性明顯低于豨薟草水提取物。本論文還用正交設計法優化了豨薟草乙醇提取工藝，得到的最優工藝為：用8倍量的70%乙醇提取3次，提取時間依次為2.5h、 1.0h 和 1.0h。本文對豨簽

13、草提取物的藥效學進行了全面的評價，2010 版中國藥典中也以奇壬醇作為豨簽草提取物中的有效成分，但中藥提取物的作用往往是很多或一類物質綜合作用的結果，所以， 該課題如果繼續做下去是不是可以通過柱層析來分離其中同類物質進行藥效學研究，以期提高療效或對其他疾病有療效。關節炎目前尚無特效藥及特效療法，主要以對癥減輕疼痛，控制病情，延緩關節退行性變化。西藥治療不良反應多，價格昂貴，患者難以接受，中醫中藥和天然藥物有效成分具有療效可靠、價格便宜、不良反應少等優點，治療關節炎這種慢性疾病可能比西藥更具有優勢。但中藥及天然藥物有效成分復雜，其治療關節炎的作用機理機制尚未完全明確，有待進一步更深的研究。期待開發出更多安全有效的治療關節炎的中藥新藥。待考察的炎癥因子的篩選也為本人論文即將要進行的急性腎衰竭所要考察的炎癥因子的種類提供了參考。白細胞介素-4( IL-4) 是小鼠巨噬細胞趨化因子，是與急性痛風性關節炎有關的抗炎性白細胞介素類的主要細胞因子之一，主要由T細胞分泌，能減少IL-1和TNF-a的分泌，抑制關節軟骨的腐蝕破壞。IL-4可以促