1、北京市第二類體外診斷試劑臨床試驗指導原則（2016 年版） （征求意見稿）本原則適用于指導北京市第二類體外診斷試劑檢測方法等效性臨床 研究，對臨床試驗機構和參比系統的選擇、樣本要求、臨床實驗方案、臨 床試驗數據分析等提出了一般性要求。申請人應在完成產品分析性能評 估、擬定產品標準后，方可申請該產品的臨床評價。臨床評價開始前，申 請人應根據產品特點及使用目的，確定臨床評價的項目和方法，制定合理 可靠的臨床評價方案。申請人應根據國家相關法律法規、標準及技術指導原則的要求合理評 價產品的安全性和有效性。一、臨床試驗機構的選擇 臨床評價開始前，申請人應根據申報產品特點選擇臨床試驗機構。臨 床試驗機構應

2、當具有與申報產品相適應的條件及能力。試驗機構的選擇應 符合以下要求：（一）應選擇至少兩家獲得國家食品藥品監督管理總局資質認可的醫 療機構。醫療機構的臨床實驗室（簡稱實驗室）應符合醫療機構臨床實 驗室管理辦法（衛醫發 2006 73 號）的要求，并優先考慮經中國合格 評定國家認可委員會（ CNAS ）依據醫學實驗室質量和能力認可準則（CNAS-CL02等同ISO15189）或檢測和校準實驗室能力認可準則（CNAS-CL01等同ISO17025）認可的實驗室。（二）實驗室應有完善的室內質控程序，并應優先選擇連續兩年以上 室間質量評價相關專業結果合格的實驗室。整個實驗過程都應處于有效的 質量控制下，

3、并有措施保證試驗數據的準確性及可重復性。（三）實驗室的檢測人員應具有相應資質（項目負責人至少具有相關 專業中級或以上技術職稱）（四）實驗室應有能力提供臨床評價所需的各類樣本。（五）臨床試驗必須獲得臨床試驗機構倫理委員會的同意。二、參比檢測系統的選擇 以下將申報產品的檢測系統稱為考核系統，所選擇的對照檢測系統稱 為參比系統。（一）實驗室應保證所用檢測系統的完整性和有效性。考核系統和對 照系統的主要分析性能指標（如準確性、精密度、線性范圍等）應滿足臨 床要求。（二）參比系統的試劑、儀器、校準品均應已取得醫療器械注冊證； 考核系統的儀器、校準品應已取得醫療器械注冊證或與考核試劑同步注 冊，且進度基本

4、一致。（三）參比系統應選擇與考核產品方法學原理相同（如同為酶聯免疫 反應、同為化學發光免疫反應等）或相似的，其方法學分析性能應優于或 近似于考核產品。（四）對于定量產品，參比試劑的性能技術指標（如線性范圍、精密 度等）應與考核試劑近似或更優，兩者的參考區間不宜差別過大；對于定 性產品，兩者檢出限 /臨界值應基本一致；對于半定量產品，兩者的分段區 間應基本一致。（五）定性產品可選性能更優的半定量或定量產品作為參比試劑（統 計數據時應先將定量 /半定量測試結果按照其自身說明書中確定的參考區 間/臨界值分別劃歸陰性、 陽性結果后， 再進行兩個試劑測試結果間的等效 性分析）。同理，半定量產品可選擇定量

5、產品作為參比試劑。三、試驗樣本的選擇（一）應明確臨床樣本要求，考核系統與參比系統所用樣本及其要求 應一致。應注明樣本采集、預處理、保存、輸送的要求及條件（如明確采 血管種類、抗凝劑要求等）。注：推薦使用新鮮樣本，如果使用貯存樣本時，應注明貯存條件及時 間，在數據分析時應考慮其影響并說明。應明確樣本納入及排除的準則，對廠家聲稱的可能對檢測結果有明顯 干擾作用的樣本，如溶血、脂血或黃疸等樣本盡量避免使用（分析干擾因 素時除外）。（二）應考慮樣本中被測量的分布。樣本量及其分布應符合統計學及 具體產品相關指導原則的要求。定量測試的產品，樣本中待測物濃度原則上應覆蓋考核系統檢測范圍 且均勻分布，并應包含

6、醫學決定水平。落在參考區間以外的比例應不低于 試驗總量的 30 。定性測試的產品， 應該包含一定數量的陽性、 陰性和接近臨界值樣本， 陽性樣本比例應不低于30%。如果檢測系統同時可給出諸如 OD值、S/CO 值等量化結果，應一并給出，以驗證其數據分布的合理性。半定量測試的產品，樣本在各分段區間的試驗例數應盡量均勻，且各 分段區間內試驗例數不宜低于 30 例。如果陽性樣本數達不到上述要求，應有充分合理的理由，并應由臨床 試驗機構出具解釋說明情況。臨床試驗機構各自的試驗例數不宜低于 100 例。（三）關于樣本類型的選擇。 考核試劑和參比試劑的樣本類型應與其各自產品說明書要求一致。考 核試劑聲稱的不

7、同樣本類型（如血液、尿液），應分別進行臨床試驗。如果聲稱同時適用于血清 /血漿/全血樣本，那么血清（或血漿或全血） 的試驗例數按照體外診斷試劑臨床試驗技術指導原則的要求，并同時 在至少兩家臨床機構共驗證不少于 100例受試者的自身血清、 血漿和/或全 血樣本測試結果間的一致性（采用考核試劑評價），其中不同濃度樣本分 布情況與總例數中分布情況應一致。四、臨床試驗方案本文主要考慮采用已批準上市產品作為參比系統，評價考核系統和參 比系統的等效性。臨床試驗實施前，研究人員應從流行病學、統計學、臨床醫學、檢驗 醫學等多方面考慮，設計科學、合理的臨床試驗方案。各臨床試驗機構的 方案應一致，且保證在整個臨床

8、試驗過程中被遵循實施，不可隨意改動。 整個試驗過程應在臨床試驗機構的實驗室內并由其實驗室的技術人員操 作完成，申報單位的技術人員除進行必要的技術指導外，不得干涉實驗進 程。臨床試驗過程、試驗結果處理及試驗報告應真實、客觀、公正，不受 外來因素的干預。試驗方案中應確定樣本納入 / 排除標準，任何已經入選的樣本再被排 除出臨床試驗都應記錄在案并說明原因。在試驗操作過程中和判定試驗結 果時，應采用盲法以保證試驗結果的客觀性。各試驗單位選用的對照試劑 及第三方復核試劑應保持一致，以便進行合理的統計學分析。五、試驗過程的管理及數據分析對于定量檢測，可以通過分析檢測結果的相關性及偏倚/偏差進行評價；定性

9、/半定量檢測，可以通過分析檢測結果的一致性進行等效性評價。 必要時，臨床試驗研究還應考慮診斷靈敏度、診斷特異性等其他性能的評 估。（一）試驗前的準備 負責臨床試驗的檢測人員應有足夠的時間熟悉檢測系統的各環節（試 劑、質控及儀器操作程序等） ，熟悉評價方案并進行預試驗。考核系統和 參比系統都應建立適當的質控程序，應保證檢測結果的可靠性。（二）試驗過程的管理每天試驗時間應根據被測物在樣本中的穩定性及試驗時間長短決定， 其原則為試驗時間不得長于被測物在樣本中的穩定時間。每批樣本盡可能 在考核系統及參比系統同時開始檢測，并保證同一樣本在規定時間內完成 比對試驗。原則上，每種方法對每個樣本單次測試即可（

10、以下臨床試驗統 計計算方法均基于此原則，如果為雙次測定則可參照 NLSIEP9-A2 ）。 推薦進行平行檢測，試驗過程中要觀察離群值（任一樣本，如其兩種 方法測試的絕對差值 /相對差值超出所有樣本兩種方法測試絕對差值 /相對 差值的均值的 4 倍，則被判斷為離群值）。離群值的個數不得超過 %（比 如，在 100個樣本的臨床試驗中，不得出現 3 個離群值）。若未超限，則 刪除離群值后進行分析；如超出此限又找不到合理原因，應重新收集樣本 進行分析。（三）定量產品回歸及偏倚估計的數據分析 對于定量產品，應至少進行以下數據分析 1絕對偏倚圖 考核系統與參比系統每個樣本測定值之差與相應兩系統測試均值作

11、散點圖。觀察并分析各點的絕對偏倚分布情況。2相對偏倚圖 考核系統與參比系統每個樣本測定值之比值與相應兩系統測試均值作 散點圖。觀察并分析各點的相對偏倚分布情況。3. 回歸分析 考核系統每個樣本測定值與相對應的參比系統測定值作散點圖（以考 核系統作 Y 軸，參比系統作 X 軸）。目測數據分布的均勻性，對線性段作相關分析，原則上要求 r，不滿 足時應擴大樣本量再評價，若仍然達不到此要求應有充分合理的解釋，并 參照 EP9-A2 的方法進行相應“分部偏倚法”分析（通常將數據分成三組 （低、中、高）進行分析，每組應含大約相同的數據。如果醫學決定水平 與兩組分界值接近，可改變分組以避免在偏倚估計中的不連

12、續性）。計算 a 值及 b 值，列出線性回歸方程式。并計算回歸系數及截距的 95% 可信區間。Y=a+bX（1）4醫學決定水平處的預期偏倚及其可信區間對于任何給定的X值，Y的估計值Y = bX + a（2）在給定的醫學決定水平Xc處的預期偏倚（Be）的估計值，按以下公 式計算：B0 = a + (b-l)Xc（3）Be的95%可信區間（在Xe處的真正偏倚）按以下公式計算:其中估計值的標準誤的計算公式如下:(5)5.結果判斷與解釋將醫學決定水平預期偏倚的可信區間與允許誤差的限值相比較（建議 參照1/2CLIA '8、1/2室間質評可接受范圍、1/2來源于生物變異的總允許差、誤差、衛生行業

13、標準等相關要求設定允許誤差），如達到相關標準，判定 兩檢測系統等效，如未達到該標準，兩檢測系統不等效，需進一步臨床驗 證。（四）定性及半定量產品的等效性數據分析1定性檢測產品應分析陽性符合率、陰性符合率、總體符合率，以及相應的95%可信區間。以交叉表的形式（如表1）總結兩種試劑的定性檢測結果，對定性 結果進行四格表kappa （或卡方）檢驗以驗證兩種試劑定性結果的一致性。表1.配對計數資料統計表參比系統 陽性陰性合計考核陽性aba+b系統陰性cdc+d合計a+cb+da+b+c+d對上述資料進行Kappa一致性分析，Kappa系數，為高度一致，認 為兩系統等效；Kappa系數，認為一致，但需進

14、一步進行相關統計學分 析；Kappa系數，則認為兩系統不一致，兩系統不等效。Kappa系數計算公式如下：Kappa=R P/(1 Pe)(6)其中，Pa為“實際一致率”，Pe為“理論一致率”。以表1為例，計 算方法如下：PA=(a+d)/(升 b+c+d)(7)Pe=(a+b)(ac)+(c+d)(l+d)/(+b+c+d)-(8)陽性/陰性符合率及其95%可信區間應滿足臨床要求，如達不到要求則 需重新設計臨床方案。對兩種系統檢測結果明顯不一致的樣本，應采用臨床診斷金標準方法 或其他方法進行確認試驗，并結合患者的臨床病情對差異原因進行分析。 如果考核系統與參比系統的檢測結果顯示不一致樣本均是位

15、于臨界值附 近且例數很少，則對不一致原因作簡要分析，不需進行第三方復核。如果 有必要選擇第三方試劑復核，建議先對一定數量的考核試劑和參比試劑檢 測結果一致的樣本(包括陽性和陰性結果)進行檢測，以對第三方試劑選 擇的合理性進行評估。2半定量檢測產品應分別評價兩個系統各分段區間的一致性，并采用kappa檢驗以及各分段區間試驗數據的符合率進行驗證。Kappa值計算舉例如下：表2兩方法測定值一致性分析(1、2g表示不同區間)3其他如果臨床診斷明確（如與臨床診斷金標準進行比對時），則臨床試驗 還應關注診斷靈敏度、診斷特異性的相關評價。必要時，應進行 ROC 曲 線分析。六、臨床報告的撰寫根據體外診斷試劑

16、臨床試驗技術指導原則的要求，臨床試驗報告 應該對試驗的整體設計及各個關鍵點給予清晰、完整的闡述，應該對整個 臨床試驗實施過程、結果分析、結論等進行條理分明的描述，并應包括必 要的基礎數據和統計分析方法。建議在臨床總結報告中對以下內容進行詳 述：（一）臨床試驗總體設計及方案描述1. 臨床試驗的整體管理情況、臨床試驗單位選擇、臨床主要試驗人員 簡介等基本情況介紹。2. 樣本納入 /排除標準、不同人群的預期選擇例數及標準。3. 樣本類型，樣本的收集、處理及保存等。4. 統計學方法、統計軟件、評價統計結果的標準。（二）具體的臨床試驗情況1. 考核系統和參比系統所用試劑（含校準 /質控品）的名稱、批號、

17、有 效期及所用儀器型號、編號等信息；2. 對各試驗單位的病例數、人群分布情況進行綜合，建議以列表或圖 示方式給出具體例數及百分比。3. 質量控制、儀器維護、儀器校準和運行情況。4. 試驗過程，樣本檢測、數據收集、樣本保存等。5. 對于受試者的臨床背景情況（如年齡、性別、確診疾病等）及樣本 保存情況應在數據頁中明示。（三）統計學分析1. 數據預處理、對離群值的處理、 試驗過程中是否涉及對方案的修改。2. 數據分析（如相關性、一致性分析等）。（四）討論和結論 進行總結性描述并簡要分析試驗結果，對本次臨床研究有無特別說 明，最后得出臨床試驗結論。七、其他（一）聯檢（或多方法學）產品應將各項目檢測結果

18、分別統計分析。 如存在多項指標聯合判定檢驗結果的情形，臨床試驗應涵蓋其產品說明書 中列出的各種情形并對聯檢結果與臨床診斷結果的一致性進行分析匯總。（二）除匯總數據統計分析（臨床試驗總報告）外，各臨床機構應有 獨立完整的方案、報告（含數據統計），需要進行補充試驗的，應對各自 數據重新進行分析統計并出具補充報告。八、名詞解釋1.線性（ linearity ）在給定測量范圍內，給出的測量結果與樣品中實際存在的被測量物的 值成比例的能力。線性是描述一個測量系統的測量示值或測量結果相關于 樣本的賦值符合直線的屬性。2.精密度（ precision）在規定條件下，對同一或相似被測對象重復測量得到測量示值或

19、測得 量值間的一致程度。測量精密度通常由不精密度的量度以數字表達，如規 定測量條件下的變異系數（ CV ）。3. 參考區間（ referenceinterval） 來自生物參考人群的數值的特定分布區間。示例：健康成年男性和女性人群的血清鈉離子濃度值的 95生物參考區間是 135mmol/L 到 145mmol/L 。4. 臨界值( cut-offvalue )作為判斷特定疾病、狀態或被測量存在或不存在的界限的量值。測量 結果高于臨界值被認為陽性而低于臨界值被認為陰性。測量結果接近臨界 值可被認為是非確定性。注：臨界值的選擇決定檢驗的診斷特異性和診斷靈敏度。5. 診斷靈敏度（ diagnosti

20、csensitivity）體外診斷檢驗程序可以識別與特定疾病或狀態相關的目標標志物存在的能力。診斷靈敏度以百分數表達（數值分數乘以100）。以100X真陽性值數（TP）除以真陽性值數（TP）加上假陰性值數（FN）的和來計算， 即 100XTP/ （TP+FN）。6. 診斷特異性（ diagnosticspecificity） 體外診斷檢驗程序可以識別特定疾病或狀態相關的目標標志物不存在的能力。診斷特異性以百分數表達（數值分數乘以 100）。以100X真陰 性值數（TN）除以真陰性值數（TN）加上假陽性值數（FP）的和來計算， 即100 XTN/ （TN+FP）。7. 偏倚（ bias） 系統測

21、量誤差的估計值。其反相關于正確度。偏倚的估計是一系列測量值的平均值減去參考量值。8. 可信區間（ confidenceinterval， CI ）按一定的或（1-a）用一個區間來估計參數所在的范圍， 該范圍通常稱 為參數的可信區間或者置信區間，預先給定的概率（1-a）稱為或者，常取 95%或 99%。九、參考文獻1 醫療器械監督管理條例（中華人民共和國國務院令第650 號）2 體外診斷試劑注冊管理辦法（國家食品藥品監督管理總局令第 5 號）3 體外診斷試劑臨床試驗技術指導原則 （國家食品藥品監督管理 總局通告 2014 年第 16 號）4MethodComparisonandBiasEstim

22、ationUsingPatientSamples;pprovedGui deline SecondEdition(CLSIEP9-A2 )5Invitrodiagnosticmedicaldevices-Informationsuppliedbythemanufacturer( labelling)-Terms,definitionsandgeneralrequirements( ISO18113-1:2009)北京市第二類體外診斷試劑臨床試驗指導原則（2016年版）修訂說明一、修訂的目的和背景2014 年新的體外診斷試劑注冊管理辦法、體外診斷試劑臨床 試驗技術指導原則均已發布并代替舊版法規，

23、北京市第二類體外診斷 試劑臨床試驗指導原則自 2010 年發布以來，經過近五年的執行及意見 反饋，其中部分內容需要進一步完善， 且半定量試劑等相關要求亟待明確， 故而本次進行有針對性的局部修訂。本次指導原則主要明確了臨床試驗機 構的選擇、對照檢測系統的選擇、試驗樣本的選擇、臨床試驗方案、試驗 過程的管理及數據分析、臨床報告的撰寫等相關內容。對于北京市第二類 體外診斷試劑生產企業注冊申報前臨床試驗的合理規范實施提出了指導 性的意見，也有助于相關審核人員把握基本要求和尺度。二、修訂依據 本指導原則主要依據醫療器械監督管理條例、體外診斷試劑注 冊管理辦法、體外診斷試劑臨床試驗技術指導原則的相關要求。

24、其 中統計學相關要求參考了 CLSIEP9-A2 ，在修訂的過程中我們還征求了有 關臨床專家及北京主要診斷試劑生產廠家的意見。三、指導原則中部分修訂內容的說明 本次修訂刪除了原第二部分“檢測前的準備”，將其要求寫入“試驗 過程的管理及數據分析”中，增加“參比檢測系統的選擇”、“臨床試驗 方案”、“臨床報告的撰寫”、“名詞解釋”四部分內容。明確了半定量 產品的相關要求。對于臨床樣本檢測量的分布要求、偏倚圖以及偏倚估計 的計算方法做了相應修訂，刪除了配對 t 檢驗的相關要求。并且明確了實 驗數據應體現的內容以及檢測時應遵循的平行原則。其他具體修訂內容詳 見附表。四、指導原則編寫人員本指導原則的編寫

25、成員由北京市醫療器械注冊技術審評人員、行政審人員、臨床專家共同組成，以充分利用各方面的信息和資源，綜合考慮指導原則中各個方面的內容，盡量保證指導原則的正確、全面、實用。隨著體外診斷試劑產品的發展，以及相關法規和標準的更新，包括人們認知水平及的提高，如果在指導原則執行過程中有任何問題， 請及時向我局反饋。附表北京市第二類體外診斷試劑臨床試驗指導原則修訂內容對照表序 號原內容現內容修改原因1原第二部分為“檢測前的準備”。增加“參比檢測系統的選擇”、“臨 床試驗方案”、“臨床報告的撰寫”、“名詞解釋”四部分內容。將原來“檢 測前的準備”內容加到“試驗過程的管 理及數據分析”中。對于參比系統如何選取專

26、 門列出一部分進行更加細化的 說明。并且對于試驗方案和報口 的撰寫單獨進行必要說明。2試驗系統（檢測系統）與對照系統考核系統和參比系統統一規范表述（參照國家局 近年指導原則以及EP9-A2 ）。3明確考核系統的儀器、校準品應已 取得醫療器械注冊證或與考核試劑同 步注冊；明確參比系統方法學分析性能 應優于或近似于考核產品；明確定量/ 定性/半定量產品選擇參比試劑的基本 要求。此部分內容原來未明示，企 業咨詢較多，也經常因為選擇參 比試劑不合適而需要重新進行 試驗，故而明確提示。4應選擇至少兩家省 級衛生醫療機構，特殊 使用的產品可在市級以 上的疾病控制中心、專 科醫院或檢驗檢疫所、 戒毒中心等臨

27、床機構進 行。應選擇至少兩家獲得國家食品藥品監督管理總局資質認可的醫療機構。按照體外診斷試劑臨床試驗技術指導原則修訂。5定量測試的產品， 盡可能使50%樣本的測 定值處于參考區間以 外。定量測試的產品，落在參考區間以外的比例應不低于試驗總量的 30。降低參考區間外樣本比例。 產品不同，陽性樣本獲取難度不 同，統一要求50%不合適，與國 家局審評中心溝通，他們目前原則上要求30%。6定性測試的產品，陽性樣本比例應 不低于30%。如果檢測系統同時可給出 諸如OD值、S/CO值等量化結果，應 一并給出，以驗證其數據分布的合理 性。明確當定性產品可以給出量化結果時應當明示以驗證其 樣本濃度分布的合理性

28、，防止避 開灰區挑選樣本。7半定量測試的產品，樣本在各分段 區間的試驗例數應盡量均勻，且各分段 區間內試驗例數不宜低于30例。明確半疋量產品數據分布 要求。8對于臨床試驗機構各自的試驗例數不宜低于100例。明確各臨床試驗機構試驗 例數要求，以防止差別過大。9考核試劑和參比試劑的樣本類型 應與其各自產品說明書要求一致。 考核 試劑聲稱的不同樣本類型（如血液、尿 液），應分別進行臨床試驗。如果聲稱同時適用于血清/血漿/全 血樣本，那么血清（或血漿或全血）的 試驗例數按照體外診斷試劑臨床試驗 技術指導原則要求，并同時驗證其中 至少100例受試者自身血清、血漿和/ 或全血樣本測試結果間的一致性 （米用

29、 考核試劑評價），其中不同濃度樣本分 布與總例數中分布情況應一致。明確樣本類型的選擇原則， 特別是同時聲稱適用血清/血漿/ 全血樣本的產品如何進行試驗 作出相應規定。10各臨床試驗機構的方案應一 致，且保證在整個臨床試驗過程中被遵 循實施，不可隨意改動各試驗單位 選用的對照試劑及第三方復核試劑應 保持一致，以便進行合理的統計學分明確臨床試驗方案的嚴謹 性，明示各方方案應一致。析。11原則上，每種方法對每個樣本 單次測試即可（以下臨床試驗統計計算 方法均基于此原則，如果為雙次測定則 可參照 NLSIEP9-A2 ）。明示只要求單次測定即可， 已征求臨床專家意見，認為200 例樣本足夠，沒有必要雙

30、次測定。12可以先用對照 系統進行檢測，再用試 驗系統進行檢測；亦可 反之。每批樣本盡可能在考核系統及參 比系統同時開始檢測，并保證同一樣本 在規定時間內完成比對試驗 推薦 進行平行檢測。臨床專家建議盡量兩個檢測系統平行同步檢測，以減少因 為樣本放置時間不同帶來的檢 測結果影響。13試驗過程中要觀察離群值（任一樣 本，如其兩種方法測試的絕對差值/相對 差值超出所有樣本兩種方法測試絕對 差值/相對差值的均值的4倍，則被判斷 為離群值）。若未超限，則刪除離 群值后進行分析明確如何判斷離群值并對 是否刪除該數據作出規定（舊版 未說明）。14試驗系統與對照系 統每次測定值之差與相 應對照系統均值作圖 （中心水平線為零）1. 絕對偏倚圖考核系統與參比系統每次測定值 之差與相應兩系統測試均值作散點圖。 觀察并分析各點的絕對偏倚分布情況。2. 相對偏倚圖考核系統與參比系統每次測定值 之比值與相應兩系統測試均值作散點 圖。觀察并分析各點的相對偏倚分布情 況。增加相對偏倚圖要求以便 更直觀全面的觀察偏倚分布情 況。絕對偏倚橫軸改用兩系統測 試均值是因為EP9-A2中有段描 述一一“如果比較方法不是參考 方法或不能確定，那么第三張圖 就是各樣品測定的丫與X的均 值之差（丫 一 X）相對于（丫+X ） /2作圖