1、STP-FJGY-006-00核糖霉素(Ribostamycin ) 發(fā)酵生產(chǎn)工藝規(guī)程25-7原料藥事業(yè)部*生物工程有限公司題 目：核糖霉素(Ribostamycin )發(fā)酵工藝規(guī)程第1頁共25頁制定人：黃啟鵬日期：編 碼：STP-JZGY-006-00審核人：日期：生效日期：批準(zhǔn)人：日期：頒發(fā)部門：質(zhì)量部分發(fā)部門：生產(chǎn)副總、總工程師、生產(chǎn)部、品保部、發(fā)酵車問l目的建立核糖霉素發(fā)酵工藝規(guī)程，作為制定核糖霉素發(fā)酵部分SOP勺依據(jù)；供生產(chǎn)管理人員統(tǒng)一操作，保證工藝要求明確可行，產(chǎn)品質(zhì)量合格，保證發(fā)酵持續(xù)穩(wěn)定生產(chǎn)。2適用范圍核糖霉素發(fā)酵生產(chǎn)。3責(zé)任者核糖霉素發(fā)酵車間工藝員、車間負(fù)責(zé)人、生產(chǎn)部負(fù)責(zé)人、

2、品保部負(fù)責(zé)人、總工程師 對此工藝規(guī)程負(fù)責(zé)。目 錄1 產(chǎn)品概述 22 原材料質(zhì)量規(guī)格 33生物合成過程、生產(chǎn)工藝、設(shè)備流程 54工藝過程 65 生產(chǎn)控制和技術(shù)檢查 136 技術(shù)安全及防火 197 綜合利用及“三廢”治理 208 操作工時(shí)與生產(chǎn)周期 209勞動(dòng)組織、崗位定員 2110主要生產(chǎn)設(shè)備一覽表 2211原材料、動(dòng)力消耗定額和技術(shù)經(jīng)濟(jì)指標(biāo) 2312物料平衡 2413附頁 251產(chǎn)品概述核糖霉素(Ribostamycin)在20世紀(jì)70年代初被發(fā)現(xiàn)并用于臨床，其產(chǎn)生菌核糖甘鏈霉菌(S.ribosidificus )也被成功篩選出來。我公司該產(chǎn)生菌源于*-*,經(jīng)過一系列的菌種選育與工藝探索，己成

3、功篩選出一些新的較高產(chǎn)、組分 純的菌種，其中0*-8 , P*0等菌種作為現(xiàn)今生產(chǎn)菌；而培養(yǎng)基配比與用料等 工藝條件也有很大改進(jìn)。其半合成抗生素硫酸核糖霉素在我公司批量生產(chǎn)。抗生素名稱核糖霉素化學(xué)名稱O-3-D- 吠喃核糖-(15)-O-2 2, 6-二氨基-2,6-二脫氧-D-叱喃葡糖-(14)-2-去氧鏈霉胺。結(jié)構(gòu)式核糖霉素及其主要小組分、衍生物主要產(chǎn)品產(chǎn)品名稱分子式硫酸核糖霉素Ci7H34N4Q0 nH2SQ (n<2)抗菌譜核糖霉素是一種廣譜抗菌素，抗菌譜與卡那霉素(Kanamycin)相似,對結(jié)核桿菌作用強(qiáng)大，對 G一細(xì)菌，如鼠疫桿菌、流感桿菌、痢疾桿菌、肺炎桿 菌抗菌作用較強(qiáng)

4、。2.原材料質(zhì)量規(guī)格序 號原材料名稱規(guī)格控制項(xiàng)目質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)備注1飴糖工業(yè)外觀含量 水分淺黃色粘稠液體，無異味，透 明無渾濁。70.0 %20%2固體葡錮糖工業(yè)外觀含量 水分無色結(jié)晶或白色結(jié)晶性或顆粒性粉末，無臭、味甜。75.0 %14%3玉米淀粉工業(yè)外觀含量 水分潔白的粉末，具有光澤。78%20%4黃豆餅粉工業(yè)外觀 蛋白質(zhì) 水分含油量細(xì)度淡黃色粉末，無霉味37.0 %12 %冷榨：9% 13%熱榨： 10.0 %80目通過 72%5碳酸鈣(輕質(zhì))工業(yè)外觀含量白色粉末97.0 %6磷酸二氫鉀工業(yè)外觀含量白色結(jié)晶性粉末96%7硫酸俊工業(yè)外觀含量白色結(jié)晶性粉末96%8氯化鈉工業(yè)外觀含量白色結(jié)晶96%9

5、淀粉酶工業(yè)外觀 酶沼活棕黑色液體2000u/ml10豆油食用外觀酸值淡黃色粘稠液體4.0mgKOH/g11泡敵G.P.E工業(yè)外觀酸值無色至淡黃色透明油狀液體0.5mgKOH/g12片堿工業(yè)外觀含量白色片狀99.5 %3 生物合成過程、生產(chǎn)工藝、設(shè)備流程3.1生物合成過程途徑：(b)(C)新霉胺核糖霉素(a)加入D葡萄糖胺(b) C 6':胺化(c) 加上D核糖(在該合成過程中，由于少量中間產(chǎn)物未與D核糖結(jié)合，殘留在發(fā)酵產(chǎn)物中,其含量在0.5-2 %,在精制提煉過程當(dāng)中，必須去除) 3.2工藝流程33.5 C 1 C子斜面 10- 11d331 C45h 1h33.5 C 1 C 沙土管

6、母斜面11- 12d33.5 C 1 C搖瓶種子> 一級種子培養(yǎng)液33 C 1 C,中間補(bǔ)料2次.發(fā)酵液放罐發(fā)酵周期100 120h40h3h29.5 1 C二級種子培養(yǎng)液28h 1h3.3發(fā)酵設(shè)備流程圖壓絡(luò)空氣J過房O效鎮(zhèn)至美煉補(bǔ)料罐 aTJK fxCcOo4.工藝過程核糖霉素采用生物合成法，本公司產(chǎn)生菌源于0*-*。核糖霉素生產(chǎn)采用純種深層、通氣攪拌及液體發(fā)酵。培養(yǎng)基消毒沿用飽和蒸 汽實(shí)消法。各級培養(yǎng)基以玉米淀粉、 麥芽糖或葡萄糖為碳源， 黃豆餅粉為主氮源。 4.1 培養(yǎng)基配方1.1.1 菌種培養(yǎng)基配方配級別名稱、固體培養(yǎng)基I(%)RIBS-I搖瓶種子培養(yǎng)基II (%)RIBS- I

7、I搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基III( %)RIBS-III可溶性淀粉22.0玉米淀粉4麥芽糖6葡錮糖2.0硫酸俊0.30.3磷酸二氫鉀0.010.01磷酸氫二鉀0.05黃豆餅粉2.53氯化鈉0.050.20.2硫酸鋅0.01硫酸鎂0.05硫酸亞鐵0.001碳酸鈣0.30.5硝酸鉀0.1瓊脂2.4消前pH7.2 -7.47.2 0.057.2 0.051.1.2 生產(chǎn)培養(yǎng)基配方級別 配比規(guī)格RIBF-I一級種子罐%RIBF-II二級種子罐%RIBF-III發(fā)酵罐%RIBF-IV補(bǔ)料罐%黃豆餅粉工業(yè)2.52.53.03.0麥芽糖工業(yè)1.06.06.0玉米淀粉工業(yè)2.03.04.04.0葡萄糖工業(yè)21.0磷酸二

8、氫工業(yè)0.010.01硫酸錢工業(yè)0.30.30.50.5氯化鈉工業(yè)0.20.50.5碳酸鈣工業(yè)0.30.30.50.5豆油食用0.050.050.020.02泡敵工業(yè)0.020.02淀粉酶工業(yè)0.1 ml/kg 干淀0.1 ml/kg干淀粉消前pH7.2 0.057.2 0.057.2 0.057.2 0.05STP-FJGY-06-00核糖霉素發(fā)酵生產(chǎn)工藝規(guī)程25-84.2 菌絲形態(tài)劃分：抗生素發(fā)酵生產(chǎn)過程中，產(chǎn)生菌菌絲在不同代謝階段體現(xiàn)不同。核糖霉素發(fā)酵 生產(chǎn)亦然，經(jīng)過長期鏡檢總結(jié)，我們將其劃分為六個(gè)階段。編號菌絲形態(tài)階段菌絲特征號I絲狀、輪狀分枝、小朵（并存）絲狀彎曲而走勢舒展，分枝不定

9、點(diǎn)，長短 不一，分枝漸多成小朵。形狀不一，染色較深。II小朵、中朵（并存）小朵繼續(xù)分枝達(dá)到中朵，染色較深。III大木、局郃成網(wǎng)、疏網(wǎng)狀大朵繼續(xù)分枝擴(kuò)展,根基部出現(xiàn)二至三倍 于原菌絲寬度的粗菌絲。朵朵相連，局部成網(wǎng)， 而后整體成疏網(wǎng)狀。染色仍較深，有些空抱。IV密網(wǎng)狀疏網(wǎng)很快生長成密網(wǎng)。染色較深，有些空 抱。V父聯(lián)密網(wǎng)狀密網(wǎng)進(jìn)一步生長，互相交聯(lián)。染色由深漸 淺。鏡檢涂片應(yīng)攤薄，或以無菌水稀釋，以分 辨菌絲。菌絲空抱明顯增多。VI菌絲自溶菌絲染色淺，鏡檢菌絲模糊難辨，可見空 抱點(diǎn)點(diǎn)。稀釋鏡檢，方可分辨菌絲形狀，視野 背景仍清晰。STP-FJGY-006-00核糖霉素(Ribostamycin )

10、發(fā)酵生產(chǎn)工藝規(guī)程25-264.3 種子制備4.3.1 沙土管制備4.3.1.1 砂：取河沙60目過篩后洗滌，用10% HCl溶液浸泡23小時(shí)，再用水沖洗至中 性，曬干后烘干，以磁鐵吸去鐵屑備用。4.3.1.2 土：取離地面一米深的有機(jī)質(zhì)少的土，制成漿，去沉底砂粒和懸浮物，讓懸 浮泥漿靜置過夜。棄上清液，把沉淀泥挖出曬干，烘干，破碎成粉狀，80目過篩備用。4.3.1.3 沙：土= 2: 1混合裝于12X 120mm、試管中，每支1克左右，用棉花塞塞住試 管口，并用牛皮紙?jiān)凇Ｓ?0.13MPa （124C）飽和蒸汽高壓滅菌，間歇三次，每次 1 小時(shí)，滅菌后124c電烘箱烤4小時(shí)冷卻備用。4.3.

11、1.4 取高單位新鮮斜面一支（試管22 X 200mrm,加無菌水0.8ml ,用無菌不銹鋼環(huán)刮下抱子制成懸浮液。再用無菌吸管吸取0.1ml加入沙土管內(nèi)，搖勻，塞上棉塞。置于裝有無水氯化鈣的真空干燥瓶中，用真空泵抽干。至振動(dòng)時(shí)沙土?xí)㈤_（最好在6小時(shí)內(nèi)完成抽干），放4c冰箱保存，使用期半年至一年。取用前應(yīng)做無菌測試并測定其生 產(chǎn)能力。4.3.2 母斜面抱子制備（F1）4.3.2.1 按F1配方配制培養(yǎng)基。每個(gè)茄子瓶裝量60ml,以0.11MPa, 121oC滅菌30分鐘， 制成斜面。空白斜面置于 37c培養(yǎng)間預(yù)培養(yǎng)7天，需無雜菌。4.3.2.2 在無菌操作條件下，將一小勺沙土管中沙土均勻涂布于

12、空白合格茄子瓶斜面， 于32.5 34.5 oCW養(yǎng)6 8天，抱子呈灰褐色，抱子豐富。4.3.3 子斜面抱子制備（F2）4.3.3.1 按F2配方配制培養(yǎng)基，分裝于22X200mmt試管中,每支18ml,滅菌與預(yù)培養(yǎng) 方法同母斜面。4.3.3.2 在無菌操作條件下，用接種環(huán)將F1斜面抱子移接到F2空白斜面，于32.5 34.5 0ct養(yǎng)6-7天，抱子呈灰褐色，抱子層厚，抱子豐富，無雜菌，置4c冰箱保存?zhèn)溆谩?.3.4 搖瓶種子制備4.3.4.1 按搖瓶種子配方配制培養(yǎng)基，500ml三角瓶各分裝50ml培養(yǎng)基，塞好棉塞（每個(gè)棉塞約2.2克），包好牛皮紙，以0.1 0.11MPa飽和蒸汽，1201

13、21oCM菌30分鐘。 4.3.4.2 在無菌操作條件下，用不銹鋼環(huán)將子斜面以挖塊法（5mm< 5mm接入三角瓶，置32.5 -34.5 oCW養(yǎng) 4650小時(shí)。4.3.4.3 每6瓶搖瓶種子并成1大瓶（約300ml菌液），經(jīng)無菌檢測，pHM定合格后，送 車間進(jìn)種子罐，并進(jìn)行無菌試驗(yàn)。4.4 種子罐接種當(dāng)一級種子罐罐溫按規(guī)定時(shí)間達(dá)到工藝規(guī)定要求時(shí)，先關(guān)閉門窗與通風(fēng)裝置，并 用過氧乙酸噴灑接種罐周圍空間。用火焰接種法接種，即在接種口圍上一圈酒精棉， 點(diǎn)燃后，將罐壓放至零磅并迅速關(guān)閉排氣口，同時(shí)擰開接種帽，將種子液倒入罐內(nèi)， 立即擰緊接種帽，通入無菌空氣，使罐壓調(diào)節(jié)在工藝要求范圍開車運(yùn)轉(zhuǎn)。4

14、.5 培養(yǎng)基配制4.5.4 一級種子罐配料在洗凈的小罐配料槽內(nèi)加入一定量水，至攪拌葉處，開動(dòng)攪拌。按工藝員所開配 料單，嚴(yán)格檢查倉庫送來的物料，準(zhǔn)確稱取物料，倒入配料槽，攪拌均勻，再加水至 配料體積，調(diào)pH1至工藝要求，加入輕質(zhì)碳酸鈣，攪拌均勻后，經(jīng)泵輸送至一級種子 罐內(nèi)。4.5.5 二級種子罐配料在洗凈的大罐配料槽內(nèi)先放水至攪拌葉處，開動(dòng)攪拌，按工藝員所開配料單，嚴(yán) 格檢查倉庫送來的物料，準(zhǔn)確稱取小料，對不溶解的物料按量由大到小次序投料，再 將可溶性小料投入，最后加消沫油，攪拌均勻并加水至配料體積，調(diào)pHE工藝要求，加入輕質(zhì)碳酸鈣，攪拌均勻后經(jīng)泵輸送至二級罐內(nèi)。4.5.6 發(fā)酵罐配料玉米淀粉

15、先單獨(dú)液化，在配料罐內(nèi)先放水至下層攪拌葉處，在攪拌情況下加入a -淀粉酶，再投入玉米淀粉，攪拌均勻經(jīng)泵發(fā)酵罐內(nèi)，具體積必須達(dá)到最下層攪拌葉 上方處，開發(fā)酵罐攪拌(有工業(yè)控制機(jī)條件下30M3轉(zhuǎn)速70rpm),用蒸汽通入加熱至80-85C,保溫30分鐘左右，再將配料罐其他原料輸送至發(fā)酵罐，達(dá)到總配料體積。4.5.7 補(bǔ)料罐配料補(bǔ)料罐配料按發(fā)酵罐配料進(jìn)行。4.6 培養(yǎng)基消毒4.6.4 一、二級培養(yǎng)基消毒拆檢取樣閥，鎖緊罐蓋，打好料，排盡夾套內(nèi)冷凝水，打開罐上排氣口，依次從 移種管道、空氣管道、取樣管道通入蒸汽進(jìn)行消毒，通過調(diào)整上述三路蒸汽閥門及罐 上排氣閥，直接升溫至罐壓 0.1MPa,罐溫120c

16、時(shí)，開沖視鏡蒸汽閥，保壓 30分鐘。消 毒結(jié)束，再依次關(guān)閉各路進(jìn)汽閥，并調(diào)節(jié)排氣閥。當(dāng)罐壓低于分過濾器壓力O.04-O.05MPa,通入無菌空氣。使罐壓維持在0.01Mpa左右，開啟夾套冷卻水進(jìn)水閥進(jìn)行冷卻。 當(dāng)罐溫達(dá)40 C,開啟冰水進(jìn)行冷卻。待罐溫冷至34 0.5 C即可接種。4.6.5 發(fā)酵培養(yǎng)基消毒拆檢取樣閥，鎖緊罐蓋，第一料液化料打好后，開動(dòng)攪拌，打開自來水回水閥。 打開罐上排氣閥，依次從取樣進(jìn)汽管道、空氣進(jìn)汽管道、罐底進(jìn)汽管道、移種進(jìn)汽罐 底管道通入飽和蒸汽加熱至 80-85C,關(guān)掉各路進(jìn)氣，保溫 30分鐘后，輸送第二料。 待第二料輸送完畢，再依次從取樣進(jìn)氣管道、空氣進(jìn)汽管道、罐底

17、進(jìn)汽管道、移種進(jìn) 汽罐底管道通入飽和蒸汽進(jìn)行消毒。通過調(diào)節(jié)后三路蒸汽及罐上排氣，將罐溫升至 100 1 C,收小排氣，開移種罐面管道、補(bǔ)料管道進(jìn)汽，打開空氣管道相關(guān)小排汽，微 開沖視鏡蒸汽閥，繼續(xù)將罐壓升至 0.10-O.11MPa（罐溫122 2 C）,保壓30 1分鐘。消毒 結(jié)束，再依次關(guān)閉小排汽、各路蒸汽，調(diào)節(jié)排氣閥，使罐壓低于分過濾器壓力0.04 -O.05MPa,通入無菌空氣，使罐壓保持在 0.01MPa。從蛇管通入工業(yè)水進(jìn)行冷卻，待罐 溫冷卻至4045C （由值班組掌握），開冰水進(jìn)行降溫，罐溫 31 0.5 C即可接種。4.6.6 補(bǔ)料培養(yǎng)基的消毒按發(fā)酵培養(yǎng)基消毒進(jìn)行。4.7 發(fā)酵

18、設(shè)備消毒4.7.4 新型總過濾器介質(zhì)安裝總過濾器罐內(nèi)壁以及下方花板均要求無鐵銹，無油跡，用生漆油漆罐壁內(nèi)封頭蓋，固定螺桿、預(yù)濾芯托板。在下花板裝填15kg棉胎，裝填時(shí)要均勻，靠罐壁處要裝填結(jié)實(shí)，固定花板螺帽要旋牢固。每臺總過濾器安裝350X1000規(guī)格的預(yù)濾濾芯7個(gè)。預(yù)濾芯密封橡皮圈應(yīng)完好。預(yù)濾芯密封圈朝上，并等分對準(zhǔn)空氣出口，上好螺桿，用固定 圓板托住，鎖緊螺帽。安裝預(yù)濾芯，鎖好人孔，上封頭蓋。試壓，無漏，投入使用。4.7.5 分過濾器消毒只消精過濾器，不消預(yù)過濾器。蒸汽管道的冷凝水排盡，精濾及附屬管道泄壓后， 壓力在0.2MPa以上的飽和蒸汽經(jīng)蒸汽過濾器通入精過濾器，調(diào)節(jié)相關(guān)小排汽，使壓力

19、 在0.11 0.15MPa之間，以免損壞超濾膜，消毒 30分鐘，關(guān)蒸汽，通入空氣吹干，直至 無水分，方可使用。4.7.6 空罐消毒（以30噸大罐為例）在洗凈發(fā)酵罐后，打開排氣，打開工業(yè)水排水閥，即可通入蒸汽消毒，先后通入 空氣管、移種管、罐底、取樣管道各路蒸汽，待罐的壓力升至0.100.11MPa,溫度120c 時(shí)，再通入沖視鏡蒸汽，開相關(guān)小排汽，調(diào)節(jié)控制罐壓在0.11-0.12MPa,保壓30分鐘，消毒結(jié)束，依次停止通入蒸汽。打開下水道閥門，關(guān)緊排氣，通入無菌空氣，壓掉罐 內(nèi)冷凝水，備用。4.7.7 移種管道消毒總蒸汽壓力在0.2MPa以上時(shí)，將蒸汽通入接種罐與移種罐之間的管道，待移種末端

20、有蒸汽排出，控制各支路排汽。保持管道有0.10-0.15MPa以上活蒸汽，消毒一個(gè)小時(shí)，即可移種。4.7.8 補(bǔ)料管道消毒總蒸汽壓力在0.2MPa以上時(shí)，將蒸汽通入補(bǔ)料罐和接料罐之間的管道，待接料末端有蒸汽排出，控制各支路排汽。保持管道有0.100.15MPa以上活蒸汽，消毒一個(gè)小時(shí)，即可補(bǔ)料。5.生產(chǎn)控制和技術(shù)檢查5.1 各級工藝控制點(diǎn)條件 工序崗戶、工藝條件控制點(diǎn)斜面孑S子F1培養(yǎng)溫度:保存溫度:33.5 1 C4 C冰箱培養(yǎng)時(shí)間：11 12d使用期：不超過7d斜面孑S子F2培養(yǎng)溫度:保存溫度:33.5 1 C4 C冰箱培養(yǎng)時(shí)間：10 11d使用期：不超過21d搖瓶種子接種量：F2挖塊（約

21、 5X5mm 裝量：500ml搖瓶裝50ml通氣量：每個(gè)棉塞 22g培養(yǎng)溫度：33.5 1 C培養(yǎng)時(shí)間：40 3hr搖瓶機(jī)轉(zhuǎn)速：220r/min偏心距：25mm搖瓶發(fā)酵（生產(chǎn)能力 測定）接種量： 通氣量：/ 培療時(shí)間: 偏心距：2.5ml (5%)1層紗布56d25mm裝量：50ml/500ml 二角1瓶 培養(yǎng)溫度：33.5 1 C 搖瓶機(jī)轉(zhuǎn)速：220r/min 搖瓶效價(jià)： 5500u/ml一級種子罐接種量：生 培療時(shí)間: 攪拌轉(zhuǎn)速:生罐接 250 4446hr250rpm300ml"溫度：33 1 C罐壓：0.03-0.04MPa通氣量：空氣分過濾器壓降0.03-0.04MPa二級

22、種子罐接種量：培療時(shí)間:攪拌轉(zhuǎn)速:1012%培養(yǎng)溫度：29.5 1 C2729hr罐壓：0.02 0.03MPa200rpm空氣流量：空氣分過濾器壓降 0.03-0.04MPa發(fā)酵罐接種量：培療時(shí)間: 攪拌轉(zhuǎn)速: 發(fā)酵過程1520%培養(yǎng)溫度：33 1 C100120hr罐壓：0.01MPa130 1r/min工：發(fā)酵 28小時(shí)左右補(bǔ)料6n3,發(fā)酵42小時(shí)左右補(bǔ)料6n35.2各級中間質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)崗位級別項(xiàng)目質(zhì) 量 要 求供斜面抱子外觀呈灰褐色或黑褐色，抱子層厚，抱子豐富生產(chǎn)能力搖瓶效價(jià)5500u/ml(F1, F2)無菌檢查種無雜菌菌落外觀菌液粘度適中，顏色姜黃色，外觀均一部搖瓶種子菌絲形態(tài)細(xì)長

23、均勻，分枝多，呈網(wǎng)狀 ，染色深門(菌絲瓶)無菌度鏡檢無雜菌，同時(shí)做無試跟蹤PH6.4-6.7外觀呈黃褐色，較濃稠，有較多小空抱，粘度達(dá)80 CPo以上一消后：pH 6.2 6.7 總糖：3.0 ± 0.5g/100ml級代謝情況氨基氮 20 ± 5mg/100ml;種移前：pH 6.7 7.2 粘度： 80CPo發(fā)子菌絲形態(tài)細(xì)長均勻，長分枝，呈網(wǎng)狀 ，染色較深，有小空抱酵無菌度鏡檢無雜菌，斜面與肉湯檢測呈陰性工外觀呈黃褐色，較濃稠，有較多小空抱，粘度達(dá)200 CPo以上段二消后：pH 6.4 7.0 總糖：3.0 ± 0.5g/100ml級代謝情況氨基氮：20 &

24、#177; 5mg/100ml種移前：pH 6.7 7.2 粘度： 180CPo子菌絲形態(tài)細(xì)長，分枝多，呈網(wǎng)狀，染色深，有小空抱無菌度鏡檢無雜菌，斜面與肉湯無試檢測均呈陰性發(fā)酵工段發(fā)酵罐外觀從黃褐色逐漸加深至棕褐色，較濃稠，粘度約在200800Cpo 之間代謝情況pH:消后 6.4 7.0 , 24 小日至 7.0 7.2 , 48小時(shí)左右升至7.2 7.5 ,而后趨于平穩(wěn)，至I 96小 時(shí)又開始上升，放罐 pH達(dá)7.8-8.2總糖：消后12±1g/100ml ,發(fā)酵前期耗糖較快，后期耗糖較慢，放罐時(shí)殘?zhí)?.0 ± 0.5g/100ml氨基氮：消后 140±10m

25、g/100ml, 1236小時(shí)后， 上升至180mg/100ml左右，而后略有下降， 72小時(shí)左 右F,放罐達(dá) 200-260mg/100ml。效價(jià)：36hr時(shí)起步效價(jià)500u/ml以上，放罐達(dá) 5500u/ml 以上。菌絲形態(tài)初期長，染色深；中期長，密網(wǎng)狀，染色變淺； 后期自溶，斷裂，有部分碎片無菌度鏡檢無雜菌，前84小時(shí)要求做無菌試驗(yàn)，斜面與 肉湯無試檢驗(yàn)呈陰性放 罐 質(zhì) 量 要 求外觀棕褐色，粘度 500Cpo左右生化指標(biāo)pH: 7.8 -8.2殘?zhí)牵?.0 ± 0.5g/100ml 氨基氮：200-260mg/100ml 預(yù)計(jì)效價(jià)：5500u/ml無菌度鏡檢無雜菌5.3中間體

26、分析檢查崗位檢查 名稱檢查時(shí)間檢查項(xiàng)目要求(標(biāo)準(zhǔn))檢查方法取樣人檢查人沙 土 抱 子 及 種 子 準(zhǔn) 備沙土 抱子管制備后無菌度無雜菌肉湯斜面種子組種子組生產(chǎn)能力效價(jià)5500u/ml搖瓶試驗(yàn)種子組生測組斜面 抱子培養(yǎng)好后外觀灰褐色或黑褐 色，抱子層厚目測種子組種子組無菌度無染菌肉湯斜面種子組種子組生產(chǎn)能力效價(jià)5500u/ml搖瓶試驗(yàn)種子組生測組搖瓶種子培療好后外觀液體濃稠 黃褐色目測種子組種子組菌絲形態(tài)分枝多，網(wǎng)狀鏡檢無菌度無染菌肉湯斜面PH值按中間質(zhì)量 控制標(biāo)準(zhǔn)PH計(jì)測定崗 位檢查 名稱檢查時(shí)間檢查項(xiàng)目要求(標(biāo)準(zhǔn))檢查方法取樣人檢查人一級 種 子 罐種 子 罐 培 養(yǎng) 液消后及接 后每12小

27、 時(shí)一次pH值按中間質(zhì)量 控制標(biāo)準(zhǔn)pH計(jì)測車間化驗(yàn)員化驗(yàn)員消后 移前總糖化測氨基氮化測消后及接后每12小時(shí)一次菌絲形態(tài)按中間質(zhì)量 控制標(biāo)準(zhǔn)鏡檢車間無 試人員工藝員無菌度無雜菌肉湯斜面 鏡檢接后每12 小時(shí)一次及 移前粘度按中間質(zhì)量 控制標(biāo)準(zhǔn)粘度計(jì)車間化驗(yàn)員化驗(yàn)員菌濃離心機(jī)二 級 種 子 罐種 子 罐 培 養(yǎng) 液消后及接 后每12小 時(shí)一次pH值按中間質(zhì)量 控制標(biāo)準(zhǔn)pH計(jì)測車間化驗(yàn)員化驗(yàn)員接后每12小時(shí)一次粘度粘度計(jì)消后及移 前各一次總糖化測氨基氮化測消后及接后每12小 時(shí)一次菌絲形態(tài)按中間質(zhì) 量控制標(biāo)準(zhǔn)鏡檢車間無試人員工藝員無菌試驗(yàn)無雜菌肉湯斜面 鏡檢崗位檢查名稱檢查時(shí)間檢查項(xiàng)目要求(標(biāo)準(zhǔn))檢

28、查方法取樣人檢查人發(fā)酵罐發(fā) 酵 液消后及接 后每12小時(shí) 一次pH值按中間質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)pH計(jì)測化驗(yàn)員化驗(yàn)員總糖化測氨基氮化測菌絲形態(tài)鏡檢車間無試 人員工藝員36小時(shí)后每12小時(shí)一次生物效價(jià)生物測定車間化驗(yàn)員生測組接后每12小 時(shí)一次粘度粘度計(jì)化驗(yàn)貝化驗(yàn)員菌濃離心機(jī)6 .技術(shù)安全及防火技術(shù)安全及防火知識，是企業(yè)生產(chǎn)車間每個(gè)職工必備的。它關(guān)系到國家財(cái)產(chǎn)以及個(gè)人的生命安全。發(fā)酵工段及菌種部門在日常生產(chǎn)中，涉及壓力容器（如水罐、發(fā)酵罐、空氣貯罐等）、電氣設(shè)備、高壓飽和蒸汽、濃酸、強(qiáng)堿、易燃性酒精，以及一 些有毒的化學(xué)誘變劑（如氮疥、NTG?）、強(qiáng)輻射物理誘變劑（如Co-60放射線），這些 對人體都會(huì)帶

29、來不安全因素，因而車間對技術(shù)安全和防火知識教育特別重視，以保 障車間安全生產(chǎn)。6.1 防火規(guī)程6.1.1 一切易燃品不準(zhǔn)隨便放在車間內(nèi)，如生產(chǎn)上需要應(yīng)放在指定的安全處，車間 內(nèi)外通道，嚴(yán)禁堆放物品，應(yīng)保持道路暢通。6.1.2 防爆區(qū)域內(nèi)不能隨便燒焊，如必須焊接則應(yīng)得到安全部門批準(zhǔn)，辦好動(dòng)火證， 將附近易燃品移去，并備好防火用具方可動(dòng)火。6.1.3 蒸汽管路上不得放置棉花、衣服、手套等棉織品，謹(jǐn)防燃燒。6.1.4 在防火防爆區(qū)內(nèi)絕不能有明火，所有人員不得攜帶火種，嚴(yán)禁吸煙。6.1.5 禁止穿鐵釘?shù)男M(jìn)入防爆區(qū)及車間，在防爆區(qū)和生產(chǎn)現(xiàn)場嚴(yán)禁強(qiáng)烈敲打鐵器，搬運(yùn)溶媒桶時(shí)，禁止在地面上拋擲、拖拉、碰撞，

30、避免產(chǎn)生火花。6.1.6 為了防止輸送溶媒時(shí)產(chǎn)生靜電，工藝管道的法蘭、閥門二邊均要以導(dǎo)體相連。有接地裝置，接地總電阻不超過 10。6.1.7 防爆區(qū)、所用電器設(shè)備，如開關(guān)、照明、馬達(dá)均需用防爆型，并均需接地， 電器設(shè)備發(fā)生意外時(shí)要迅速切斷電源，潤濕的物體、手、工具、金屬等不可接觸有 電部位。6.2 如遇以下情況發(fā)生時(shí)，應(yīng)迅速處理。6.2.1 一般化學(xué)品著火，可用泡沫滅火器或用沙土遮蓋，隔絕空氣。6.2.2 電器著火，首先切斷電源后用四氯化碳滅火器滅火。6.2.3 發(fā)現(xiàn)有人觸電，必須先立即切斷電源，千萬不可直接接觸觸電人。6.2.4 被酸燙傷時(shí)，應(yīng)用大量水沖洗后，以10%的碳酸氫鈉溶液洗滌，若濺

31、入口腔或眼內(nèi)，應(yīng)用5 %碳酸氫鈉溶液漱口或沖洗。6.2.5 被堿燙傷時(shí)，用大量水沖洗后，用36%的醋酸溶液或1-2 %鹽酸溶液洗滌，若濺入口腔，用3%的醋酸溶液涮口。若濺入眼內(nèi)，用 1 %的硼酸溶液洗滌。6.2.6 氨中毒時(shí)，應(yīng)把患者抬到室外新鮮空氣里。7 .綜合利用及三廢治理發(fā)酵分廠各車間主要擔(dān)負(fù)核糖霉素生產(chǎn)，根據(jù)市場情況，部分車間生產(chǎn)西索霉素、林可霉素等，具廢液主要是發(fā)酵菌絲體殘液。放罐的發(fā)酵液中含大量的菌絲體及其它未分解物質(zhì)。林可霉素經(jīng)絮凝劑處理，板 框過濾已去除濾渣，濾液經(jīng)溶媒萃取，提取林可霉素溶媒回收后，殘液由泵打入廠內(nèi) 一級污水處理站。核糖霉素、西索霉素發(fā)酵液經(jīng)提煉離子交換吸附后，

32、其菌絲渣過篩， 懸浮液由泵打入廠內(nèi)一級污水處理站。對于染噬菌體、染菌等異常罐批的處理也應(yīng)除 渣，懸浮液送污水處理站。濾渣作固廢處理，污水處理站處理后中性廢液排入*廢液排放標(biāo)準(zhǔn)：*。8 .操作工時(shí)與生產(chǎn)周期：崗位操作單元操作時(shí)間一級罐罐體檢修進(jìn)料、消毒冷卻種子罐培養(yǎng)移種洗罐0.5小時(shí)2.5小時(shí)4446小時(shí)1小時(shí)0.5小時(shí)二級罐（繁殖罐）罐體檢修進(jìn)料、消毒冷卻二級罐培亦移種洗罐0.5小時(shí)4小時(shí)2729小時(shí)1小時(shí)0.5小時(shí)三級罐（發(fā)酵罐）罐體檢修進(jìn)料、消毒冷卻發(fā)酵培養(yǎng)放罐洗罐0.5小時(shí)5小時(shí)100 120 小時(shí)0.5小時(shí)1小時(shí)9 .勞動(dòng)組織、崗位定員9.1 崗位定員崗位名稱班次每班定員總?cè)藛T備注值班43134班二運(yùn)轉(zhuǎn)大班長一人，小班長4人維修144其中班長一人配料224其中班長一人處理特殊情況326其中大班長