1、轉(zhuǎn)基因食品檢測轉(zhuǎn)基因食品檢測目錄目錄 一、轉(zhuǎn)基因食品簡介 二、轉(zhuǎn)基因食品檢驗流程 三、轉(zhuǎn)基因食品檢驗實驗室工作區(qū)域的設(shè)置 四、轉(zhuǎn)基因食品檢測實驗室儀器配置 五、主要食用菌中轉(zhuǎn)基因食品檢測（舉例） 一、轉(zhuǎn)基因食品簡介轉(zhuǎn)基因食品， 就是通過基因工程技術(shù)將一種或幾種外源性基因轉(zhuǎn)移到某種特定的生物體中，并使其有效地表達出相應(yīng)的產(chǎn)物（多肽或蛋白質(zhì)），此過程叫轉(zhuǎn)基因。以轉(zhuǎn)基因生物為原料加工生產(chǎn)的食品就是轉(zhuǎn)基因食品。根據(jù)轉(zhuǎn)基因食品來源的不同可分為植物性轉(zhuǎn)基因食品，動物性轉(zhuǎn)基因食品和微生物性轉(zhuǎn)基因食品。轉(zhuǎn)基因食品具有很多優(yōu)點，如：可增加作物產(chǎn)量，可以降低生產(chǎn)成本，可增強作物抗蟲害、抗病毒等的能力；提高農(nóng)產(chǎn)品耐

2、貯性。但轉(zhuǎn)基因食品在安全性以及環(huán)境污染等問題使轉(zhuǎn)基因食品一直存在爭議。 二、轉(zhuǎn)基因食品檢驗流程實驗室樣品到樣驗收（確定是否具備檢驗的工作條件） 混樣 獲取測試樣品 測試樣品的制備（待檢狀態(tài)） 核酸和（或）蛋白等目標物質(zhì)的提取 PCR實驗（包括擴增和產(chǎn)物分析）和（或）蛋白質(zhì)檢測 結(jié)果判定 結(jié)果表述，出具檢驗報告。 三、轉(zhuǎn)基因食品檢驗實驗室工作區(qū)域的設(shè)置四、轉(zhuǎn)基因食品檢測實驗室儀器配置儀器設(shè)備儀器設(shè)備功能作用功能作用電子天平（感量1mg）用于樣品的稱量。粉碎機樣品粉碎。液氮罐儲存液氮。磁力攪拌器用于含沉淀物液體樣品或固液混合物的加熱混勻。旋渦振蕩器用于試樣的振蕩混勻。恒溫金屬浴用于試樣的恒溫孵育過

3、程，溫浴溫度常為37和65。臺式離心機用于樣品離心，選用普通高速離心機即可。高速冷凍離心機用于樣品離心。微型離心機用于樣品快速微量離心。pH計用于pH測量。核酸蛋白分析儀用于DNA濃度和純度測定。超凈工作臺用于PCR擴增區(qū)加樣過程，提供局部超凈工作環(huán)境。（垂直流）生物安全柜用于用于PCR擴增區(qū)加樣過程，保護人員、樣品和環(huán)境。四、轉(zhuǎn)基因食品檢測實驗室儀器配置儀器設(shè)備儀器設(shè)備功能用途功能用途PCR基因擴增儀用于相關(guān)基因的擴增分析實時熒光定量PCR儀用于相關(guān)基因的快速、定量分析。微波爐用于瓊脂糖凝膠的制備。電泳儀用于PCR擴增產(chǎn)物的電泳分離。電泳槽凝膠電泳系統(tǒng)的核心部分。凝膠成像系統(tǒng)用于PCR電泳后

4、觀察、拍照、記錄和分析。高溫干燥箱用于樣品、器皿的干燥。高壓滅菌鍋滅菌試劑的制備、器皿滅菌。微量移液器用于PCR板的移液操作。常用實驗量程為0.2L2.0L， 2L20L， 20L200L， 200L1000L。冰箱28冰箱，-20冰箱和-80冰箱。用于樣品、試劑、標本的儲存。純水機實驗用純水、超純水的制備。制冰機用于實驗室冰塊的制備。耗材PCR反應(yīng)管，離心管（1.5mL，2mL，15mL，50mL),移液器槍頭，PE手套等五、主要食用菌中轉(zhuǎn)基因食品檢測（舉例） 主要食用菌（如杏鮑菇、紅菇、姬松茸、香菇、草菇、牛肝菌、雞腿菇、金針菇、雙孢蘑菇、豬肚菇、鳳尾菇、小平菇、秀珍菇、猴頭菇、金頂側(cè)耳、

5、茶樹菇、竹蓀、黑木耳、白木耳等）中轉(zhuǎn)基因成分的檢測。實驗原理：樣品經(jīng)過提取 后，針對轉(zhuǎn)基因食用菌所導(dǎo)入的常見外源基因的基因序列設(shè)計引物，通過 技術(shù)，對外源基因的 片段進行特異性擴增，根據(jù)實驗結(jié)果，判定該食用菌樣品是否含有外源基因成分。五、主要食用菌中轉(zhuǎn)基因食品檢測（舉例）實驗儀器配置：1、電子天平：感量為0.001與0.0001。2、粉碎機。3、鼓風干燥箱。4、微量移液器：體積范圍是0.20L2.0L， 2L20， 20200， 2001000，槍頭用前應(yīng)高壓滅菌處理。5、旋渦振蕩器。6、恒溫金屬浴（或恒溫水浴鍋）：恒溫范圍為室溫100 ，精度為0.5 。7、臺式高速離心機，低溫冷凍高速離心機

6、，微型離心機。五、主要食用菌中轉(zhuǎn)基因食品檢測（舉例）實驗儀器配置：8、 DNA 濃縮儀。 9、核酸蛋白分析儀。10、PCR 儀。 11、電泳儀、電泳槽 12、凝膠分析成像系統(tǒng)。 13、PCR超凈工作臺或生物安全柜。 14、微波爐。 15、高壓滅菌鍋。 16、PH 計。 17、制冰機。 18、純水機。 19、低溫冰箱(-20以下）。 20.真菌NDA提取試劑盒。五、主要食用菌中轉(zhuǎn)基因食品檢測（舉例）實驗主要操作步驟：DNA提取DNA 濃度與純度測定定性定性PCRPCR檢測檢測結(jié)果判斷結(jié)果判斷天平、干燥箱、粉碎機、真菌DNA提取試劑盒、移液器、旋渦振蕩器、金屬浴、高速臺式離心機、高速冷凍離心機核酸蛋白分析儀1、PC