1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上2014-2015（2）醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)復(fù)習(xí)題一、名詞解釋DNA及基因組（2015年）：Tm，核小體，Split gene，多基因家族，EST，SNPTm值：就是DNA熔解溫度，指把DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)降解一半時(shí)的溫度。一般DNA在生理?xiàng)l件下Tm值在85-95。不同序列的DNA，Tm值不同。DNA中GC含量越高，Tm值越高。核小體（nucleosome）：是的基本結(jié)構(gòu)單位，核小體由DNA和組蛋白(histone)構(gòu)成。由4種組蛋白H2A、H2B、H3和H4， 每一種組蛋白各二個(gè)分子，形成一個(gè)組蛋白八聚體，約200 bp的DNA分子盤(pán)繞在組蛋白八聚體構(gòu)成的核心結(jié)構(gòu)外面，形成

2、了一個(gè)核小體。斷裂基因（Split gene）：真核生物結(jié)構(gòu)基因,有若干個(gè)編碼區(qū)和非編碼區(qū)互相間隔開(kāi)但又連續(xù)鑲嵌而成,去除非編碼區(qū)再連接后,可翻譯出由連續(xù)氨基酸組成的完整蛋白質(zhì),這些基因稱(chēng)為斷裂基因或間隔基因.（expressed sequence tags,ESTs）通過(guò)從cDNA文庫(kù)中隨機(jī)挑選的克隆進(jìn)行測(cè)序所獲得的部分cDNA的5'或3'端序列稱(chēng)為表達(dá)序列標(biāo)簽（EST），一般長(zhǎng)300-500bp左右。其意義在于有效反映在正常或受控條件中表達(dá)的全基因的時(shí)空?qǐng)D，EST除提供序列信息外，同時(shí)也提供了該基因表達(dá)的組織、生理狀況與發(fā)育階段的信息。(single nucleotide

3、polymorphism，SNP),是由于單個(gè)核苷酸改變而導(dǎo)致的核酸序列多態(tài)性。它成為一種信息量非常大的遺傳標(biāo)記系統(tǒng)，并且可以直接以序列的差異作為標(biāo)記。它的意義在于是定位基因的重要手段，大致了解各個(gè)基因或DNA片斷之間的相對(duì)距離與方向，同時(shí)是研究人類(lèi)基因組遺傳與變異的重要手段多基因家族(multigene family),是指一組具有類(lèi)似功能，核苷酸序列又有同源性的基因。多基因家族是真核生物基因組最顯著的特征之一。它的家族成員在核酸上的同源性提示它們是由同一個(gè)祖先基因進(jìn)化而來(lái)的。RNA（2015年）：校正突變與校正tRNA，SD序列和Kozak序列，polyA與polyA signal，單順?lè)?/p>

4、子和多順?lè)醋樱琑NA編輯，RNA再編碼，RNA依賴的RNA聚合酶，反義RNA校正突變（mutations correction）：發(fā)生在非起始突變位點(diǎn)上，能夠抵消或中和起始突變的第二次突變。校正tRNA（correction tRNA）：通過(guò)tRNA分子的突變來(lái)校正mRNA上的有害突變就屬于基因間的校正，能夠校正mRNA中有害突變的tRNA也稱(chēng)為校正tRNASD序列（Shine-Dalgarnosequence）：原核生物mRNA5端AUG上游一段富含嘌呤的保守序列。位于起始密碼上游25個(gè)核苷酸，處，與16SrRNA的3，末端相應(yīng)的富含嘧啶序列互補(bǔ)，是在翻譯過(guò)程中核糖體與mRNA識(shí)別與結(jié)合的部

5、位，在IF3、IF1促進(jìn)下和30S亞基結(jié)合Kozak序列是位于真核生物mRNA 5端帽子結(jié)構(gòu)后面的一段核酸序列，它可以與翻譯起始因子結(jié)合而介導(dǎo)含有5帽子結(jié)構(gòu)的mRNA翻譯起始。對(duì)應(yīng)于原核生物的SD序列。polyA真核生物mRNA 3端的一段約20250個(gè)腺苷酸（polyA）的序列。polyA-signal：在結(jié)構(gòu)基因的最后一個(gè)外顯子中有一個(gè)保守的AATAAA序列，此位點(diǎn)下游有一段GT豐富區(qū)或T豐富區(qū)，這兩部分序列共同構(gòu)成poly(A)加尾信號(hào)。mRNA轉(zhuǎn)錄到此部位后，產(chǎn)生AAUAAA和隨后的GU（或U）豐富區(qū)。與RNApol結(jié)合的延長(zhǎng)因子可以識(shí)別這種結(jié)構(gòu)并與之結(jié)合，然后在AAUAAA下游10-

6、30個(gè)堿基的部位切斷RNA,并加上poly(A)尾.polyA-site：mRNA的多聚 A添加位點(diǎn)，RNA轉(zhuǎn)錄本上的位點(diǎn),通過(guò)轉(zhuǎn)錄后聚腺苷酸化該位點(diǎn)將被加上腺嘌呤殘基。多順?lè)醋樱╬olycistronicmRNA）：多個(gè)結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄在一條mRNA上。原核生物單順?lè)醋?monocistron)：一個(gè)結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄在一條mRNA上。真核生物依賴性 RNA 聚合酶（RNA dependent RNA polymerase）： RdRp以單鏈RNA為模板合成與模板互補(bǔ)的核苷酸序列的RNA的酶mRNA編輯（mRNA editing）許多真核生物基因轉(zhuǎn)錄后有一個(gè)對(duì)mRNA外顯子加工的過(guò)程，可通過(guò)特定堿基的

7、插入、缺失或置換，使mRNA序列中出現(xiàn)移碼突變、錯(cuò)義突變或無(wú)義突變，導(dǎo)致mRNA與其DNA模板序列不匹配，使同一前體mRNA翻譯出序列、功能不同的蛋白質(zhì)。這種基因表達(dá)的調(diào)節(jié)方式稱(chēng)為mRNA編輯RNA的再編碼（RNA recording）：mRNA，科學(xué)上把RNA編碼和讀碼方式的改變稱(chēng)為RNA的再編碼，包括重復(fù)閱讀或跳過(guò)不讀。反義RNA（antisense RNA）：在細(xì)菌和病毒中存在一類(lèi)調(diào)節(jié)基因，從基因組中非編碼區(qū)轉(zhuǎn)錄的一段，能與目標(biāo)mRNA序列互補(bǔ)配對(duì)的單鏈RNA，從而阻斷該目標(biāo)mRNA翻譯成蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)（2015年）：Anfinsen定律， 分子病， 超二級(jí)結(jié)構(gòu) ，朊病毒， 分子伴侶An

8、finsen定律：蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)決定其空間結(jié)構(gòu)的正確折疊，包括二硫鍵的正確配對(duì)形成。相似一級(jí)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)必有相似的空間結(jié)構(gòu)和功能。分子病（molecular diseases）：由于遺傳上的原因而造成的分子結(jié)構(gòu)或合成量的異常所引起的。實(shí)際上任何由遺傳原因引起的蛋白質(zhì)功能異常所帶來(lái)的都是分子病，但習(xí)慣上把分子催化功能異常引起的疾病歸屬于先天性代謝缺陷而把除了酶蛋白以外的其他蛋白質(zhì)異常引起的疾病稱(chēng)為分子病。超二級(jí)結(jié)構(gòu)（super-secondary structure）：在一級(jí)結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上，相鄰二級(jí)結(jié)構(gòu)單位（螺旋、折疊等）在三維折疊中相互靠近，形成超二級(jí)結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)分子中的一些二級(jí)結(jié)構(gòu)單元，有規(guī)則地

9、聚集在一起形成全由a螺旋、全由b片層或a螺旋與b片層混合、均有的超二級(jí)結(jié)構(gòu)基本形式，具體地說(shuō)，形成相對(duì)穩(wěn)定的a a、 b b b、 b a b、 b2 a和 a Ta (HTH)、 a La (HLH)等超二級(jí)結(jié)構(gòu)，又稱(chēng)模體(motif)。朊病毒（prion）：為蛋白類(lèi)感染顆粒的縮寫(xiě)，又稱(chēng)蛋白質(zhì)病毒。是一類(lèi)能侵染動(dòng)物并在細(xì)胞內(nèi)復(fù)制的蛋白質(zhì)，不含核酸。（chaperone;molecular chaperone）： 分子伴侶是細(xì)胞內(nèi)一類(lèi)保守蛋白質(zhì)，可識(shí)別肽鏈的非天然構(gòu)象、促進(jìn)各功能域和整體蛋白質(zhì)的正確折疊。主要有：和熱休克蛋白復(fù)制（2015年）：半不連續(xù)復(fù)制， 大腸桿菌DNA聚合酶I， DNA連

10、接酶 ， 點(diǎn)突變半不連續(xù)復(fù)制（Half a discontinuous replication）：DNA復(fù)制時(shí),以35走向?yàn)槟０宓囊粭l鏈合成方向?yàn)?3,與復(fù)制叉方向一致,稱(chēng)為前導(dǎo)鏈；另一條以53走向?yàn)槟０彐湹暮铣涉溩呦蚺c復(fù)制叉移動(dòng)的方向相反,稱(chēng)為隨從鏈, 前導(dǎo)鏈上DNA的合成是連續(xù)的，隨從鏈上是不連續(xù)的, 先形成許多不連續(xù)的片斷（岡崎片斷）,最后連成一條完整的隨從鏈，故稱(chēng)為半不連續(xù)復(fù)制大腸桿菌DNA聚合酶1（E.Coli DNA polymerase）原核細(xì)胞中的一種多功能DNA聚合酶，主要有3種作用：把底物形成3-5磷酸二酯鍵，53的聚合作用。但不是復(fù)制染色體而是修補(bǔ)DNA，填補(bǔ)DNA上的空

11、隙或是切除RNA引物后留下的空隙。35的外切酶活性。消除在聚合作用中摻入的錯(cuò)誤核苷酸。53外切酶活性，切除受損傷的DNA。它在切口平移（nick translation）中應(yīng)用。DNA連接酶（DNA Ligase）催化兩段DNA之間的連接，也就是催化一段DNA鏈的5磷酸根與另一段DNA鏈的3-OH形成磷酸二酯鍵，需要ATP供能（注：底物一定是雙鏈的底物）點(diǎn)突變（ point mutation）：指基因中只有一個(gè)堿基對(duì)發(fā)生改變。也稱(chēng)作單堿基替換（base substitution）。堿基替換又分為轉(zhuǎn)換（transitions）和顛換（transversions）兩類(lèi)。轉(zhuǎn)換：和嘌呤之間的

12、替換，或和嘧啶之間的替換。顛換：嘌呤和嘧啶之間的替換。轉(zhuǎn)錄（2015年）： s亞基(s subunit)，選擇性剪接(alternative splicing)， RNA編輯(RNA editing)，cDNA，啟動(dòng)子(promoter)s亞基(s subunit)：原核生物RNA聚合酶的一個(gè)亞基，是轉(zhuǎn)錄起始所必需的因子，主要影響RNA聚合酶對(duì)轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)的正確識(shí)別。它是核心酶和啟動(dòng)子之間的橋梁.。一旦轉(zhuǎn)錄開(kāi)始，因子就被釋放，而鏈的延伸則由四聚體（core enzyme）催化。所以，因子的作用就是識(shí)別轉(zhuǎn)錄的起始位置，并使RNA聚合酶結(jié)合在部位。選擇性剪接（也叫可變剪接）（alternative

13、 splicing）是指從一個(gè)mRNA前體中通過(guò)不同的剪接方式（選擇不同的剪接位點(diǎn)組合）產(chǎn)生不同的mRNA剪接異構(gòu)體的過(guò)程，而最終的蛋白產(chǎn)物會(huì)表現(xiàn)出不同或者是相互拮抗的功能和結(jié)構(gòu)特性，或者，在相同的細(xì)胞中由于表達(dá)水平的不同而導(dǎo)致不同的表型。RNA編輯(RNA editing)：指轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA分子中，由于核苷酸的缺失，插入或置換，使成熟RNA序列與編碼鏈DNA外顯子序列不同，改變翻譯生成的的組成，擴(kuò)大了mRNA遺傳信息量。許多真核生物基因轉(zhuǎn)錄后有一個(gè)對(duì)mRNA外顯子加工的過(guò)程，可通過(guò)特定堿基的插入、缺失或置換，使mRNA序列中出現(xiàn)移碼突變、錯(cuò)義突變或無(wú)義突變，導(dǎo)致mRNA與其DNA模板序列

14、不匹配，使同一前體mRNA翻譯出序列、功能不同的蛋白質(zhì)。這種基因表達(dá)的調(diào)節(jié)方式稱(chēng)為mRNA編輯（mRNA editing）。cDNA(complementary DNA): 以RNA為模板，在適當(dāng)引物的存在下，由依賴RNA的（）的作用而合成的DNA，并且在合成單鏈cDNA后，除去與其對(duì)應(yīng)的RNA以后，以單鏈cDNA為模板，可合成雙鏈cDNA。啟動(dòng)子(Promoters)：是位于結(jié)構(gòu)基因5'端上游的DNA序列，能活化RNA聚合酶，使之與模板DNA準(zhǔn)確的結(jié)合并具有轉(zhuǎn)錄起始的特異性。翻譯（2015年）：氨基酰tRNA合成酶，蛋白質(zhì)的靶向輸送，核定位序列，擺動(dòng)配對(duì)，EF-Tu氨基酰tRNA合成

15、酶（aminoacyl-tRNA synthetase）:催化氨基酸的活化及活化氨基酸與特異性tRNA連接反應(yīng)的酶。此化學(xué)反應(yīng)又可分為兩個(gè)步驟完成：第一步是以氨基酸和ATP為底物生成氨基酰-AMP酶復(fù)合體；第二步是AMP酶被tRNA置換，形成氨基酰tRNA。這說(shuō)明氨基酰tRNA合成酶具有絕對(duì)專(zhuān)一性，酶對(duì)氨基酸、tRNA兩種底物都能高度特異地識(shí)別。因有20種氨基酸，故有20種氨基酰- tRNA合成酶。蛋白質(zhì)的靶向輸送(protein targeting):蛋白質(zhì)在核糖體上合成后，必須分選出來(lái)，定向輸送到一個(gè)合適部位才能行使各自的生物學(xué)功能這一過(guò)程稱(chēng)為蛋白質(zhì)的靶向輸送。蛋白質(zhì)的靶向輸送與翻譯后修飾

16、過(guò)程同步進(jìn)行。核定位序列(Nuclear localization signal)：靶向輸送到細(xì)胞核的蛋白質(zhì)多肽鏈中含有特異的信號(hào)序列被稱(chēng)為NLS，NLS為含4-8個(gè)氨基酸殘基的短序列，富含帶正電荷的賴氨酸、精氨酸、脯氨酸，可位于肽鏈的不同部位，而不只在N端，不同的NLS間未發(fā)現(xiàn)共有序列，在蛋白質(zhì)進(jìn)核定位后，NLS不切除。擺動(dòng)配對(duì)(wobble base pairing)： tRNA上反密碼子的第1位堿基與mRNA密碼子的第3位堿基的配對(duì)有時(shí)并不嚴(yán)格遵循常見(jiàn)的堿基配對(duì)規(guī)律，這一現(xiàn)象稱(chēng)為擺動(dòng)配對(duì)mRNA第1，2位堿基固定不變，對(duì)應(yīng)反密碼子2，3位堿基固定不變，但是tRNA第3位堿基要變，故反密碼

17、子的第1位堿基相應(yīng)的跟tRNA變。在這個(gè)過(guò)程中，C和G按A和U原來(lái)的正確方式配對(duì)，在U和G時(shí)，U可以識(shí)別A和G，G可以識(shí)別C和U。EF-Tu：是之一，幫助延長(zhǎng)的安吉酰tRNA進(jìn)入A位，具有GTP酶活性癌基因和抑癌基因（2015年）：1、 癌基因(oncogene)、2、 病毒癌基因(virus oncogene)3、 細(xì)胞癌基因(cellular oncogene)4、 原癌基因(proto-oncogene)5、 抑癌基因(tumor suppressor gene)癌基因(oncogene)：是細(xì)胞基因組內(nèi)正常存在的控制細(xì)胞正常生長(zhǎng)和分化的基因，其編碼產(chǎn)物通常作為正調(diào)控信號(hào)，促進(jìn)細(xì)胞的增殖

18、和生長(zhǎng)。它的結(jié)構(gòu)異常或表達(dá)異常，可誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。即指在體外能引起細(xì)胞轉(zhuǎn)化，在體內(nèi)能誘發(fā)腫瘤的基因。細(xì)胞癌基因(cellular oncogene, c-onc)：存在于生物正常細(xì)胞基因組中的癌基因也稱(chēng)細(xì)胞癌基因，在正常情況下處于靜止或低表達(dá)的狀態(tài)，不僅對(duì)細(xì)胞無(wú)害，而且對(duì)維持細(xì)胞正常功能具有重要作用，但在異常表達(dá)時(shí)，其產(chǎn)物可使細(xì)胞無(wú)限制分裂。原癌基因(proto-oncogene)：將存在于正常細(xì)胞內(nèi)未被激活的癌基因，即與病毒癌基因具有同源性的細(xì)胞癌基因也稱(chēng)為原癌基因(proto-oncogene) 它是基因的正常版本，是活化的癌基因的前體，一類(lèi)編碼關(guān)鍵性調(diào)控蛋白質(zhì)的正常細(xì)胞基因。表達(dá)產(chǎn)

19、物與正常細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖、分化及調(diào)控和發(fā)育等功能相關(guān)，是生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中所不可缺少的。病毒癌基因（viral oncogene）：存在于（大多是逆轉(zhuǎn)錄病毒）基因組中能使發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化的基因。它不編碼病毒結(jié)構(gòu)成分，對(duì)病毒無(wú)復(fù)制作用，但是當(dāng)受到外界的條件時(shí)可產(chǎn)生誘導(dǎo)發(fā)生的作用。抑癌基因(tumor suppressor gene)：是調(diào)節(jié)細(xì)胞正常生長(zhǎng)和增殖的基因，其生物學(xué)功能與癌基因相反：其基因表達(dá)產(chǎn)物對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖起負(fù)調(diào)控作用，并能抑制細(xì)胞的轉(zhuǎn)化。DNA及基因組（2015年）：1、什么是逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子？Alu序列屬于哪一種逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子？請(qǐng)描述Alu序列在基因組轉(zhuǎn)移的可能機(jī)制。真核生物中等重復(fù)序列要

20、先轉(zhuǎn)錄成RNA，再逆轉(zhuǎn)錄生成cDNA，然后重新整合到基因組中，這種通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄旁路的轉(zhuǎn)移元件稱(chēng)為逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子（retroposon），它分兩類(lèi)：一類(lèi)病毒樣逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子，另一類(lèi)非病毒樣逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子，Alu屬于非病毒樣逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子。機(jī)制：Alu序列的兩端有兩個(gè)7-12bp的正向重復(fù)序列，這兩個(gè)序列與Alu插入基因組DNA有關(guān)。在3端正向重復(fù)序列前還有一段poly（A），而在后面也有一段poly（T）作為RNA聚合酶III的轉(zhuǎn)錄終止位點(diǎn)。轉(zhuǎn)錄下來(lái)的RNA就有相應(yīng)的poly（A）和poly（U）序列。Poly（U）可以折過(guò)來(lái)與poly（A）配對(duì)結(jié)合。這樣逆轉(zhuǎn)錄酶就可以識(shí)別這一結(jié)構(gòu)，并在poly（U）的3

21、端游離羥基開(kāi)始合成cDNA，在完成雙鏈cDNA后再整合到基因組2、 試述線粒體基因組和線粒體病的特點(diǎn)。線粒體基因組是線粒體DNA為呈環(huán)狀的雙鏈DNA，不同物種之間大小差別很大。它位于線粒體基質(zhì)內(nèi)，每個(gè)線粒體中含有多個(gè)拷貝。在動(dòng)物的mtDNA中基因之間的空隙很小，轉(zhuǎn)錄是多順?lè)醋樱挥袉蝹€(gè)控制復(fù)制和基因表達(dá)的非編碼區(qū)。人線粒體基因組的特點(diǎn)：(1) mtDNA結(jié)構(gòu)緊密，幾乎都是編碼順序，不含內(nèi)含子，只有87個(gè)核苷酸不參與基因的組成。(2) mtDNA沒(méi)有組蛋白包繞，而且兩條鏈不對(duì)稱(chēng)， H鏈有28個(gè)編碼序列，L鏈有9個(gè)編碼序列。(3) 遺傳密碼子的意義有所不同。甚至不同種屬的線粒體所用的遺傳密也有所不

22、同。(4) mtDNA的突變率高于核DNA，并且缺乏修復(fù)能力。（比核基因大10-20倍，4/1000bp）(5) mtDNA為嚴(yán)格母系遺傳。線粒體疾病以線粒體結(jié)構(gòu)和功能缺陷為主要疾病原因的疾病稱(chēng)為線粒體病。一般情況下，線粒體病主要是由于基因的突變引起的。例如線粒體肌病和腦肌病、線粒體眼病等。線粒體病的特點(diǎn)：1.高突變率2.異質(zhì)性指野生型mtDNA與突變型共存與組織細(xì)胞的現(xiàn)象。3.母系遺傳母親傳給兒子和女兒，女兒繼續(xù)傳遞。4.閾值效應(yīng)能夠引起特定組織器官功能障礙的突變mtDNA的最少數(shù)量。該閾值與組織器官特異性有關(guān)；與發(fā)育階段有關(guān)，新生兒無(wú)癥狀，成年人表現(xiàn)癥狀；與個(gè)體差異有關(guān)。分裂旺盛的細(xì)胞表現(xiàn)

23、出排斥突變型mtDNA趨勢(shì)，表現(xiàn)野生趨同現(xiàn)象。靜止細(xì)胞表現(xiàn)出突變mtDNA復(fù)制優(yōu)勢(shì)，導(dǎo)致突變積累。 RNA（2015年）：1、 試比較miRNA與siRNAmiRNA與siRNA的比較：miRNA與siRNA的聯(lián)系：1) 均為Dicer的切割產(chǎn)物：長(zhǎng)度均為22nt左右，siRNA duplex、miRNA duplex2) 均需Argonaute家族蛋白的存在，同為Risc的組分3) 兩者進(jìn)化關(guān)系上可能的推論：siRNA是miRNA的補(bǔ)充， miRNA在進(jìn)化中替代了siRNA2、 RNA有哪些生物學(xué)功能，試舉例說(shuō)明。1) 參與蛋白質(zhì)的合成：mRNA作為蛋白質(zhì)合成的模板，tRNA識(shí)別mRNA上的

24、密碼子并作為轉(zhuǎn)運(yùn)載體運(yùn)送相應(yīng)氨基酸，rRNA與核糖體蛋白構(gòu)成核糖體，執(zhí)行蛋白質(zhì)的合成功能。ü 信使核糖核酸mRNA（模板）ü 轉(zhuǎn)運(yùn)核糖核酸t(yī)RNA（工具）ü 核糖體核糖核酸rRNA（場(chǎng)所）2) 儲(chǔ)存遺傳信息：RNA病毒3) 參與催化反應(yīng)：核酶是具有催化活性的RNA, 即化學(xué)本質(zhì)是核糖核酸(RNA), 卻具有酶的催化功能。核酶的作用底物可以是不同的分子, 有些作用底物就是同一RNA分子中的某些部位。核酶的功能很多,有的能夠切割RNA, 有的能夠切割DNA, 有些還具有RNA 連接酶、磷酸酶等活性。4) 參與基因表達(dá)調(diào)節(jié)：antisense RNA、siRNA、mic

25、roRNA。例如miRNA，廣泛存在于真核細(xì)胞中的一組短小的、不編碼蛋白質(zhì)的RNA家族，由約22nt組成的單鏈RNA。它參與調(diào)節(jié)基因表達(dá)的機(jī)制包括：3UTR 不完全互補(bǔ)，抑制翻譯；與編碼區(qū)完全互補(bǔ)，降解mRNA。3、 什么是Dicer酶？并述Dicer酶各個(gè)結(jié)構(gòu)域的功能。Dicer酶是RNase III家族成員核酸內(nèi)切酶，特異性識(shí)別并切割dsRNA1） PAZ結(jié)構(gòu)域，它具有一個(gè)大的延伸環(huán)，此環(huán)在Dicer序列中保守，能夠促使其對(duì)RNA的識(shí)別，與dsRNA的末端結(jié)合2） RNA解旋酶結(jié)構(gòu)域：RNA解旋酶結(jié)構(gòu)域通利用ATP提供的能量完成dsRNA的解旋功能，便于Dicer酶進(jìn)行切割。3） dsRN

26、A結(jié)合結(jié)構(gòu)域：結(jié)合dsRNA片段，使之作為對(duì)目標(biāo)mRNA識(shí)別的模板。4） RNase III催化結(jié)構(gòu)域：RNase III催化結(jié)構(gòu)域催化dsRNA降解成siRNA1) PAZ結(jié)構(gòu)域：專(zhuān)一和蛋白質(zhì)結(jié)合形成復(fù)合物2) dsRNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域（dsRNA-binding domain,dsRBD）：將dsRNA切割產(chǎn)生含21-25個(gè)核苷酸3) 解旋酶結(jié)構(gòu)域（helicase domain）：帶有正電荷，有利于結(jié)合切割下來(lái)的帶有負(fù)電荷的siRNA4) RNase III催化結(jié)構(gòu)域：把長(zhǎng)的dsRNA切割成短的siRNA蛋白質(zhì)（2015年）：1、 蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系（1）相似一級(jí)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)必有相似

27、的空間結(jié)構(gòu)和功能一級(jí)結(jié)構(gòu)是蛋白質(zhì)發(fā)揮生理功能的分子基礎(chǔ)eg：血紅蛋白與肌紅蛋白；癌蛋白與生長(zhǎng)因子或生長(zhǎng)因子受體（2）認(rèn)識(shí)酶、激素前體一級(jí)結(jié)構(gòu)的局部斷裂與功能激活的分子基礎(chǔ)生物體內(nèi)的某些生化過(guò)程中，蛋白質(zhì)分子的部分肽鏈必須先按特定的方式斷裂才能呈現(xiàn)出生物活性胰蛋白酶原（trypsinogen) ®胰蛋白酶(trypsin)前胰島素原(preproinsulin) 109aa®胰島素(insulin) 51 aa（3）認(rèn)識(shí)蛋白質(zhì)種屬差異和分子進(jìn)化的親緣關(guān)系不同種屬生物的同一種蛋白質(zhì)，一級(jí)結(jié)構(gòu)相似，但有差異，差異決定免疫原性，一般不在活性中心，不影響生物活性，保守區(qū)域決定空間結(jié)構(gòu)

28、和生物學(xué)功能（4）認(rèn)識(shí)蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的變異與“分子病”(molecular disease)的關(guān)系“分子病”指DNA結(jié)構(gòu)改變導(dǎo)致表達(dá)產(chǎn)物蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)改變和功能異常所造成的疾病。基因的有義突變導(dǎo)致其編碼蛋白質(zhì)氨基酸序列的變化，其結(jié)果是該蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和生物活性發(fā)生變化，導(dǎo)致功能的改變。有些改變會(huì)在人體內(nèi)引發(fā)相應(yīng)的疾病，例如鐮刀型貧血等。2、 -螺旋與-螺旋的區(qū)別-螺旋：在多種蛋白質(zhì)中存在，各種蛋白質(zhì)中所占比例各不相同。1) 肽鏈骨架是右手螺旋結(jié)構(gòu)2) 每一螺旋由3.6個(gè)氨基酸殘基組成, 螺距5.4nm，相鄰螺旋間由第1個(gè)氨基酸肽鍵的C=O與第5個(gè)氨基酸肽鍵的N-H形成氫鍵，中間包括13個(gè)原子，又

29、稱(chēng)3.613螺旋。3) 氫鍵方向與螺旋長(zhǎng)軸平行，鏈內(nèi)氫鍵是螺旋穩(wěn)定的主要因素。4) 側(cè)鏈R位于螺旋外側(cè)，其基團(tuán)大小、形狀、帶電狀態(tài)影響螺旋的形成和穩(wěn)定。-螺旋：主要存在于膠原蛋白分子中。1) 比a - 螺旋稍大且疏松的左手螺旋。2) 每圈螺旋含4.4個(gè)氨基酸殘基，與螺旋長(zhǎng)軸基本平行的氫鍵維持穩(wěn)定，氫鍵跨18個(gè)原子，稱(chēng)4.418螺旋，膠原蛋白分子中三股左手螺旋再盤(pán)曲為右手三股超螺旋。-螺旋1) 肽鏈骨架是右手螺旋結(jié)構(gòu)2) 每一螺旋由3.6氨基酸殘基組成, 螺距5.4nm3) 相鄰螺旋間由第1個(gè)氨基酸肽鍵的C=O與第5個(gè)氨基酸肽鍵的N-H形成氫鍵，中間包括13個(gè)原子，又稱(chēng)3.613螺旋4) 氫鍵方

30、向與螺旋長(zhǎng)軸平行，鏈內(nèi)氫鍵是螺旋穩(wěn)定的主要因素5）側(cè)鏈R位于螺旋外側(cè)，其基團(tuán)大小、形狀、帶電狀態(tài)影響螺旋的形成和穩(wěn)定6) 各種蛋白質(zhì)中螺旋所占比例各不相同-螺旋主要存在于膠原蛋白分子中，每圈螺旋含4.4個(gè)氨基酸殘基，與螺旋長(zhǎng)軸基本平行的氫鍵維持穩(wěn)定，氫鍵跨18個(gè)原子，稱(chēng)4.418螺旋，比a - 螺旋稍大且疏松的左手螺旋。膠原蛋白分子中三股左手螺旋再盤(pán)曲為右手三股超螺旋。3、基因組和蛋白質(zhì)組的異同基因組蛋白質(zhì)組數(shù)目恒定種類(lèi)、數(shù)量，結(jié)構(gòu)時(shí)空變化復(fù)制高度保真性翻譯后加工修飾理化性質(zhì)相似理化性質(zhì)差異大PCR，易于序列分析難以擴(kuò)增，重組蛋白操作復(fù)雜復(fù)制（2015年）：1、 半保留復(fù)制實(shí)驗(yàn)的證明同位素實(shí)驗(yàn)

31、證實(shí):把大腸埃希菌放在含15NH4CL的培養(yǎng)液中培育，用15N標(biāo)記DNA，由于15N-DNA比14N-DNA重約1%，然后把大腸埃希菌轉(zhuǎn)移到含14NH4CL的培養(yǎng)液中，在培育的不同時(shí)間取出樣本，將大腸埃希菌瞎報(bào)用裂解液裂解，放在CsCL溶液中超速離心20h，此時(shí)從管底到管口CsCL密度形成一個(gè)梯度分布，DNA分子在與它相等的層次中停留，在紫外線下可看到一條吸收帶，而在15NH4CL的培養(yǎng)液中所得到的親代全為重DNA，在轉(zhuǎn)移入14NH4CL的培養(yǎng)液中所得的的第一代DNA密度介于兩者之間的混合鏈DNA，第二子代第三代第四代都會(huì)顯示兩條吸收帶，輕DNA比例不斷增大。兩條輕鏈復(fù)制是，一條輕鏈進(jìn)入子代，

32、一條輕鏈無(wú)限制復(fù)制下去，就是半保留復(fù)制（選擇大腸桿菌原因：選擇一條染色體的DNA的原核生物，大腸桿菌傳代恒定，20min）2、為什么說(shuō)DNA聚合酶III是復(fù)制的主要酶10種亞基組成,不對(duì)稱(chēng)二聚體，全酶分子量900KD。有三個(gè)特點(diǎn)：非常高的續(xù)進(jìn)性（processivity)>500,000 nt，催化活性高>1000 nt /秒，3®5外切酶活性，這三個(gè)特點(diǎn)決定了DNA聚合酶III是復(fù)制的主要酶（校正功能）3、簡(jiǎn)述堿基切除修復(fù)1） DNA糖苷酶識(shí)別損傷的堿基并切割，產(chǎn)生一個(gè)缺嘌呤或缺嘧啶的位置，也稱(chēng)AP位置。2）AP核酸內(nèi)切酶切除AP位置附近的磷酸二酯鍵。3）DNA聚合酶I

33、去除損傷鏈并合成新DNA鏈。4）最后由DNA連接酶封口。（1）DNA糖苷酶 識(shí)別損傷堿基, 切割（2）AP核酸內(nèi)切酶 切AP位置附近磷酸二酯(缺堿基時(shí)會(huì)被激活)（3）DNA聚合酶 除去損傷鏈，合成新DNA鏈（5-3）（4）DNA連接酶封口細(xì)胞中都帶有不同類(lèi)型、能識(shí)別受損核酸位點(diǎn)的糖苷水解酶，它能夠特異性切除受損核苷酸上的N-糖苷鍵，在DNA鏈上形成去嘌呤或去嘧啶位點(diǎn)，統(tǒng)稱(chēng)為AP位點(diǎn)。DNA分子中一旦產(chǎn)生了AP位點(diǎn)，AP核酸內(nèi)切酶就會(huì)把受損核苷酸的糖苷-磷酸鍵切開(kāi)，并移去包括AP位點(diǎn)核苷酸在內(nèi)的小片段DNA，由DNA聚合酶合成新的片斷，最終由DNA連接酶把兩者連成新的被修復(fù)的DNA鏈，這一過(guò)程即

34、為堿基切除修復(fù)(base-excision repair, BER)轉(zhuǎn)錄（2015年）：1、 真核生物mRNA轉(zhuǎn)錄后加工的具體步驟？1) mRNA前體的加工，a) 5端帽結(jié)構(gòu)的形成 5端上加上7甲基鳥(niǎo)苷酸通過(guò)5-5三磷酸酯鍵鏈接：其中在2-OH位加上甲基，由S-腺苷甲硫氨酸提供 使RNA免受核酸酶的攻擊 形成核糖體結(jié)合位點(diǎn)b) 3端的剪切和多聚腺苷酸的加入：作用是提高mRNA穩(wěn)定性，防止降解。和mRNA轉(zhuǎn)運(yùn)（由核胞質(zhì)）有關(guān)，穩(wěn)定翻譯模板，提高翻譯效率。2) mRNA前體剪切a) hnRNP與mRNA前體結(jié)合b) hnRNA參與mRNA前體的加工和運(yùn)輸c) 內(nèi)含子的切除：剪除內(nèi)含子，連接外顯子，

35、形成有功能的mRNA。d) 選擇性剪切：基因的初級(jí)轉(zhuǎn)錄物，通過(guò)選擇性使用外顯子以不同方式加工，可以得到不同的mRNA，翻譯為不同的蛋白質(zhì)。3) RNA編輯：基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA分子中，由于核苷酸的缺失，插入或置換，基因轉(zhuǎn)錄物的序列不與基因編碼序列互補(bǔ)，使翻譯生成的蛋白質(zhì)的氨基酸組成，不同于基因序列中的編碼信息4) 細(xì)胞中mRNA退化的速度不同2、 逆轉(zhuǎn)錄與逆轉(zhuǎn)錄酶的概念？逆轉(zhuǎn)錄與DNA復(fù)制的比較？在分子生物學(xué)中心法則中遺傳信息是由DNA流向RNA的。在某些RNA病毒中遺傳信息是從RNA流向DNA，這種現(xiàn)象稱(chēng)為逆轉(zhuǎn)錄。逆轉(zhuǎn)錄(reverse transcription)是以RNA為模合板成DN

36、A的過(guò)程，即RNA指導(dǎo)下的DNA合成。此過(guò)程中，核酸合成與轉(zhuǎn)錄(DNA到RNA)過(guò)程與遺傳信息的流動(dòng)方向(RNA到DNA)相反，故稱(chēng)為逆轉(zhuǎn)錄。逆轉(zhuǎn)錄酶以RNA為模板，在4種dNTP存在及合適條件下，能按堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成互補(bǔ)的DNA（cDNA），這種酶是以RNA為指導(dǎo)的DNA聚合酶，也稱(chēng)逆轉(zhuǎn)錄酶比較項(xiàng)目DNA復(fù)制逆轉(zhuǎn)錄場(chǎng)所細(xì)胞核細(xì)胞質(zhì)模 板DNA的兩條鏈RNA的一條鏈引物RNAtRNA原 料4種脫氧核苷酸4種核糖核苷酸酶DNA解旋酶、DNA聚合酶、DNA連接酶等逆轉(zhuǎn)錄酶、DNA聚合酶、DNA連接酶等產(chǎn) 物子代DNA分子cDNA堿基互補(bǔ)配對(duì)原則GC，CGAT，TAGC，CGAT，UA遺傳信息傳

37、遞DNADNARNADNA準(zhǔn)確性存在3-5外切酶活性，準(zhǔn)確性差無(wú)3-5外切酶活性，準(zhǔn)確性高3、試述RNA聚合酶II最大亞基羧基末端結(jié)構(gòu)域（carboxy-terminal domain，CTD）在基因轉(zhuǎn)錄中的作用。CTD具有高度保守性、重復(fù)性、以及RNA聚合酶“專(zhuān)有”特征，其重復(fù)單位的拷貝數(shù)目在不同物種間具有差異，能夠發(fā)生磷酸化和去磷酸化的循環(huán)反應(yīng)。該結(jié)構(gòu)可通過(guò)與mRNA加工因子的相互作用而對(duì)其加工過(guò)程產(chǎn)生直接或者間接的影響，在mRNA的轉(zhuǎn)錄和加工的偶聯(lián)過(guò)程中具有重要的作用。CTD的磷酸化有可能是mRNA轉(zhuǎn)錄作用起始地“開(kāi)關(guān)”，RNA聚合酶正是借助了CTD的磷酸化跨越了啟動(dòng)子障礙，引發(fā)出下游的

38、轉(zhuǎn)錄合成與加工的諸多事件。RNA 聚合酶II是一個(gè)多亞基的蛋白質(zhì)復(fù)合物，CTD 結(jié)構(gòu)是RNA 聚合酶II最大亞基的羧基末端的一段特殊的序列（僅RNA 聚合酶II具有，RNA 聚合酶I、III都不具有）。 CTD 尾具有高度保守的重復(fù)序列，由7個(gè)氨基酸（Tyr - Ser - Pro - Thr - Ser - Pro - Ser）組成重復(fù)單位。 mRNA在轉(zhuǎn)錄后需進(jìn)行加工，有多種加工因子參與加工過(guò)程。CTD 尾可與 mRNA加工因子發(fā)生相互作用，而對(duì)mRNA的加工過(guò)程產(chǎn)生直接或間接的影響。所以CTD 尾在mRNA轉(zhuǎn)錄和加工的偶聯(lián)過(guò)程中發(fā)揮了重要作用。翻譯（2015年）：1、 簡(jiǎn)述mRNA作為翻

39、譯模板的特點(diǎn)基本性質(zhì)1) 遺傳密碼的編碼比例3：1v 64個(gè)遺傳密碼，由3個(gè)堿基組成的三聯(lián)體，三聯(lián)體= 一個(gè)密碼子一個(gè)氨基酸v 起始密碼：AUG，終止密碼：UAA、UGA、UAGv 一些原核生物中的起始密碼：GUG/UUG，人類(lèi)線粒體有特有的密碼子2) 遺傳密碼的重疊性和非重疊性v 非重疊性 模板上的堿基三聯(lián)體在翻譯中運(yùn)用不發(fā)生重疊 特點(diǎn)：讀碼框架固定，翻譯成一種肽v 重疊性 讀碼框架移動(dòng)12個(gè)堿基同一序列的模板具有不同氨基酸序列的多肽 病毒、噬菌體3) 遺傳密碼的簡(jiǎn)并性既有保守性又有靈活性v 61個(gè)密碼子編碼20個(gè)氨基酸v 一個(gè)A.A有多個(gè)密碼v 密碼第1、2位上堿基不變，第3位堿基可改變4

40、) 遺傳密碼的閱讀無(wú)間隔v 連續(xù)閱讀從mRNA53v 肽鏈合成N端C端v 框移突變(frameshift mutation)5) mRNA編輯，可以使單順?lè)醋拥恼婧松飉RNA種類(lèi)大大增加， mRNA作為模板多樣性也大大增加，最終使蛋白質(zhì)的種類(lèi)也增加2、 試比較原核生物、真核生物翻譯起始的異同點(diǎn)相同點(diǎn)：摻入肽鏈前需氨基酸活化mRNA-起始氨基酰-tRNA-核蛋白體類(lèi)別原核生物真核生物起始氨基酰 tRNA fMet-tRNAfMet Met-tRNAiMet 起始因子 三種（ IF-1 、 IF-2 、 IF-3 ） 10 種（ eIF-1 、 2 、 2B 、 3 、 4A 、 4B 、 4E

41、 、 4G 、 5 、 6 ） 翻譯起始復(fù)合物形成時(shí)各成 份的結(jié)合順序 mRNA 先于 fMet-tRNA fMet 結(jié)合小亞基 mRNA 后于 Met-tRNA i Met 結(jié)合小亞基 mRNA 與小亞 基結(jié)合的機(jī)制 S-D 序列 / 16S- rRNA （ RNA-RNA ） 、 rpS-1 辨認(rèn)序列 /rpS-1 （ RNA- 蛋白質(zhì)） 涉及多種蛋白因子形成的復(fù)合物（如 帽子結(jié)合蛋白復(fù)合物 eIF -4F 復(fù)合 物，包括 4A 、 4E 、 4G 各組分） 能量消耗的種類(lèi) GTP ATP 和 GTP 3、 簡(jiǎn)述蛋白質(zhì)因子在原核生物核糖體循環(huán)中的作用肽鏈合成的起始、延長(zhǎng)和終止稱(chēng)核糖體循環(huán)。

42、起始因子IFIF1：輔助IF3 IF2：（特異識(shí)別起始tRNA（fmet-tRNAifmet），形成起始tRNA-IF2-GTP復(fù)合物，協(xié)助起始tRNA進(jìn)入核糖體P位與mRNA配對(duì)；（可結(jié)合GTP有GTP酶活性；）IF3：起始時(shí)促進(jìn)30S小亞基結(jié)合mRNA；終止時(shí)促使核糖體解離（一個(gè)IF3分子結(jié)合一個(gè)30S亞基）延長(zhǎng)因子EFEF-Tu：（形成AA-tRNA-Tu-GTP復(fù)合物，）協(xié)助AA-tRNA進(jìn)入核糖體A位；（可結(jié)合GTP并有GTP酶活性）EF-Ts：促進(jìn)EF-Tu的再利用EF-G：（形成EF-G-GTP復(fù)合物，）協(xié)助mRNA前移，并將游離tRNA從E位釋放；（可結(jié)合GTP并有GTP酶活性

43、；）釋放因子RFRF1 RF2：識(shí)別終止密碼子。（RF1識(shí)別UAA、UAG。RF2識(shí)別UAA、UGA）RF3：促進(jìn)釋放肽鏈和tRNA，（可結(jié)合GTP并有GTP酶活性）1) 起始：起始因子a) IF1：輔助IF3b) IF2：有GTP酶活性，特異識(shí)別fmet-tRNAifmet，形成fmet-tRNAifmet- IF2-GTPc) IF3：促進(jìn)30S小亞基結(jié)合mRNA，抗連接因子:終止時(shí)促使核糖體解離,穩(wěn)定游離的30S，一個(gè)IF3分子結(jié)合一個(gè)30S亞基2) 延長(zhǎng)：延長(zhǎng)因子（EF）a) EF-Tu：具有GTP酶活性，協(xié)助AA-tRNA進(jìn)入A位，b) EF-Ts：促進(jìn)EF-Tu的再利用3) 終止：

44、釋放因子：識(shí)別終止密碼子引起完整的肽鏈和核糖體從mRNA上釋放a) RF1：作用于UAA、UAGb) RF2：作用于UGA、UAA c) RF3：結(jié)合GTP/GTP酶活性，促進(jìn)釋放4、 簡(jiǎn)述蛋白質(zhì)翻譯后的加工過(guò)程1) 多肽鏈折疊為天然的三維結(jié)構(gòu)v 促進(jìn)蛋白折疊功能的大分子 分子伴侶（熱休克蛋白/伴侶素）（跟肽鏈進(jìn)行結(jié)合，促進(jìn)各功能域和整體蛋白質(zhì)的正確折疊，Dna J必須的，Dna K-ADP-被折疊蛋白質(zhì)復(fù)合物，GrpE維持ATP狀態(tài)） 蛋白二硫鍵異構(gòu)酶（決定空間結(jié)構(gòu)）（內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，多肽鏈內(nèi)、鏈間二硫鍵的正確形成） 肽-脯氨酰順?lè)串悩?gòu)酶（決定空間結(jié)構(gòu)是否正確）2) 肽鏈一級(jí)結(jié)構(gòu)的修飾v 肽鏈N端的

45、修飾v 個(gè)別氨基酸的修飾v 多肽鏈的水解修飾3) 高級(jí)結(jié)構(gòu)修飾v 亞基聚合v 輔基連接v 疏水脂鏈的共價(jià)連接4) 蛋白質(zhì)合成后的靶向輸送v 保留在細(xì)胞液v 進(jìn)入細(xì)胞器v 分泌到細(xì)胞外5、簡(jiǎn)述干擾素的作用機(jī)制干擾素不能直接滅活病毒，而是通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞合成抗病毒蛋白（AVP）發(fā)揮效應(yīng)。干擾素首先作用于細(xì)胞的干擾素受體，經(jīng)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等一系列生化過(guò)程，激活細(xì)胞基因表達(dá)多種抗病毒蛋白，實(shí)現(xiàn)對(duì)病毒的抑制作用。抗病毒蛋白主要包括2-5A合成酶和蛋白激酶等。前者活化RNaseL，降解病毒mRNA；后者通過(guò)磷酸化elf2抑制病毒多肽鏈的合成，使病毒復(fù)制終止。1) 干擾素誘導(dǎo)eIF2磷酸化而失活 ATP ADPdsR

46、NA干擾素誘導(dǎo)蛋白激酶 eIF2-P eIF2 抑制蛋白質(zhì)合成 磷酸酶 Pi2) 干擾素誘導(dǎo)病毒RNA降解 干擾素 dsRNA 活化 RNaseLATP 2-5腺苷酸 2-5多聚腺苷合成酶 RNaseL 降解mRNA癌基因和抑癌基因（2015年）：1、 試簡(jiǎn)述一下細(xì)胞癌基因有哪些特點(diǎn)？細(xì)胞癌基因是細(xì)胞基因組內(nèi)正常存在的控制細(xì)胞正常生長(zhǎng)和分化的基因，其編碼產(chǎn)物通常作為正調(diào)控信號(hào)，促進(jìn)細(xì)胞的增殖和生長(zhǎng)。它的結(jié)構(gòu)異常或表達(dá)異常，可誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。即指在體外能引起細(xì)胞轉(zhuǎn)化，在體內(nèi)能誘發(fā)腫瘤的基因。1) 廣泛存在于生物界中，從酵母到人的細(xì)胞普遍存在2) 基因序列高度保守3) 作用通過(guò)其產(chǎn)物蛋白質(zhì)來(lái)體現(xiàn)，維持細(xì)胞正常生理功能、調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)和分化起重要作用4) 某些物理、化學(xué)及感染性因等能使原癌基因激活，被激活后，導(dǎo)致正常細(xì)胞癌變5) 既可以被導(dǎo)入逆錄病毒而活化成病毒癌基因，也可因突