1、第十四章 蛋白質(zhì)的生物合成一：填空題 1.蛋白質(zhì)的生物合成是以_作為模板，_作為運(yùn)輸氨基酸的工具，_作為合成的場所。 2.細(xì)胞內(nèi)多肽鏈合成的方向是從_端到_端，而閱讀mRNA的方向是從_端到_端。 3.核糖體上能夠結(jié)合tRNA的部位有_部位、_部位和_部位。 4.ORF是指_，已發(fā)現(xiàn)最小的ORF只編碼_個氨基酸。 5.蛋白質(zhì)的生物合成通常以_作為起始密碼子，有時也以_作為起始密碼子，以_、_和_作為終止密碼子。 6.SD序列是指原核細(xì)胞mRNA的5-端富含_堿基的序列，它可以和16SrRNA的3-端的_序列互補(bǔ)配對，而幫助起始密碼子的識別。 7.含硒半胱氨酸的密碼子是_。 8.原核生物蛋白質(zhì)合

2、成的起始因子(IF)有_種，延伸因子(EF)有_種，終止釋放因子(RF)有_種；而真核生物細(xì)胞質(zhì)蛋白質(zhì)合成的延伸因子通常有_種，真菌有_種，終止釋放因子有_種。 9.密碼子的第2個核苷酸如果是嘧啶核苷酸，那么該密碼子所決定氨基酸通常是_。 10.原核生物蛋白質(zhì)合成中第一個被參入的氨基酸是_。 11.真核生物細(xì)胞質(zhì)蛋白質(zhì)合成對起始密碼子的識別主要通過_機(jī)制進(jìn)行。 12.無細(xì)胞翻譯系統(tǒng)翻譯出來的多肽鏈通常比在完整的細(xì)胞中翻譯的產(chǎn)物要長，這是因為_。 13.蛋白質(zhì)的半壽期通常與_端的氨基酸性質(zhì)有關(guān)。 14.tmRNA是指_。 15.同工受體tRNA是指_。 16.瘋牛病的致病因子是一種_。 17.已

3、發(fā)現(xiàn)體內(nèi)大多數(shù)蛋白質(zhì)正確的構(gòu)象的形成需要_的幫助，某些蛋白質(zhì)的折疊還需要_和_酶的催化。 18.SRP是指_，它是一種由_和_組成的超分子體系，它的功能是_。 19.蛋白質(zhì)定位于溶酶體的信號是_。 20.分子伴侶通常具有_酶的活性。 21.某些蛋白質(zhì)基因的編碼鏈上并無終止密碼子，但可以通過Pre-mRNA的_和_兩種后加工方式引入終止密碼子。 22.蛋白質(zhì)內(nèi)含子通常具有_酶的活性。 23.已有充分的證據(jù)表明大腸桿菌的轉(zhuǎn)肽酶由其核糖體的_承擔(dān)。 24.決定蛋白質(zhì)進(jìn)入過氧化物酶體的信號肽是_。 25.噬菌體基因60在翻譯的過程中經(jīng)歷_過程。 26.某一tRNA的反密碼子是GGC，它可識別的密碼子為

4、_和_。 27.mRNA上編碼區(qū)內(nèi)密碼子的突變可造成致死作用，但生物體可通過tRNA反密碼子的突變而得以成活。這種tRNA的突變又稱為 _，而這種tRNA稱為_。 28.以(UAG)n作為模板在無細(xì)胞翻譯系統(tǒng)中進(jìn)行翻譯可得到_種多肽。 29.環(huán)狀RNA不能有效地作為真核翻譯系統(tǒng)的模板是因為_。 30.常見的無細(xì)胞翻譯系統(tǒng)有_、_、_和_等。二：是非題 1. 氨酰-tRNA合成酶可通過其催化的逆反應(yīng)對誤載的氨基酸進(jìn)行校對。 2. 在蛋白質(zhì)生物合成中，所有的氨酰-tRNA都是首先進(jìn)入核糖體的A部位。 3. 由于遺傳密碼的通用性，所以真核細(xì)胞的mRNA可在原核翻譯系統(tǒng)中得到正常的翻譯。 4. 核糖體

5、蛋白不僅僅參與蛋白質(zhì)的生物合成。 5. 在翻譯起始階段，由完整的核糖體與mRNA的5-端結(jié)合，從而開始蛋白質(zhì)的合成。 6. 所有的氨酰-tRNA的合成都需要相應(yīng)的氨酰-tRNA合成酶的催化。 7. EF-Tu的GTPase活性越高，翻譯的速度就越快，但翻譯的忠實性就越低。 8. fMet-與Met-的合成由同一種氨酰-tRNA合成酶催化。 9. 對于某一種氨酰-tRNA合成酶來說，在它的催化下，被識別的氨基酸隨機(jī)的與其相應(yīng)的tRNA的3-端CCA的3-OH或5-OH形成酯鍵。 10. tRNA的個性即是其特有的三葉草結(jié)構(gòu)。 11. 含硒半胱氨酰-tRNA是由游離的含硒半胱氨酸與合成而來。 12

6、. 含硒半胱氨酸的參入需要一種新的延伸因子。 13. 泛素是一種熱激蛋白(HSP)。 14. 氨酰-tRNA進(jìn)入A部位之前，與EF-Tu結(jié)合的GTP必須水解。 15. 從DNA分子的三聯(lián)體密碼可以毫不懷疑地推斷出某一多肽的氨基酸序列，但從氨基酸序列并不能準(zhǔn)確地推導(dǎo)出相應(yīng)基因的核苷酸序列。 16. 已發(fā)現(xiàn)許多蛋白質(zhì)的三維結(jié)構(gòu)不是由其一級結(jié)構(gòu)決定的，而是由分子伴侶決定的。 17. 多肽鏈的折疊發(fā)生在蛋白質(zhì)合成結(jié)束以后才開始。 18. 在線粒體內(nèi)的翻譯系統(tǒng)中，第一個被參入的氨基酸也都是甲酰甲硫氨酸。 19. 蛋白質(zhì)翻譯一般以AUG作為起始密碼子，有時也以GUG為起始密碼子，但以GUG為起始密碼子，則

7、第一個被參入的氨基酸為Val。 20. 大腸桿菌丙氨酰-tRNA的合成并不需要具有完整的三葉草結(jié)構(gòu)。 21. 與核糖體蛋白相比，rRNA僅僅作為核糖體的結(jié)構(gòu)骨架，在蛋白質(zhì)合成中沒有什么直接的作用。 22. 甲硫氨酸能夠刺激蛋白質(zhì)的生物合成。 23. 絕大多數(shù)含硒蛋白是氧化還原酶。 24. 人工合成多肽的方向也是從N端到C端。 25. 在大腸桿菌里表達(dá)人組蛋白，可直接從人基因組中獲取目的基因。 26. 細(xì)胞內(nèi)的tRNA只參與蛋白質(zhì)的合成。三：單選題 1. 預(yù)測一下哪一種氨酰-tRNA合成酶不需要有校對的功能。 A.甘氨酰-tRNA合成酶 B.丙氨酰-tRNA合成酶 C.精氨酰-tRNA合成酶 D

8、.谷氨酰-tRNA合成酶 E.色氨酰-tRNA合成酶 2. 預(yù)測一下哪一種蛋白質(zhì)的半壽期最長。 A.醛縮酶 B.葡萄糖激酶 C.HMGCoA還原酶 D.丙酮酸激酶 E.檸檬酸合成酶 3. 某一種tRNA的反密碼子為5IUC3，它識別的密碼子序列是 A.AAG B.CAG C.GAG D.GAA E.AGG 4. 根據(jù)擺動學(xué)說，當(dāng)一個tRNA分子上的反密碼子的第一個堿基為次黃嘌呤時，它可以和mRNA密碼子的第三位的幾種堿基配對？ A.1 B.2 C.3 D.4 E.5 5. 如果遺傳密碼是四聯(lián)體密碼而不是三聯(lián)體，而且tRNA反密碼子前兩個核苷酸處于擺動的位置，那么蛋白質(zhì)正常合成大概需要多少種tR

9、NA？ A.約256種不同的tRNA B.150250種不同的tRNA C.小于20種 D.與三聯(lián)體密碼差不多的數(shù)目 E.取決于氨酰-tRNA合成酶的種類 6. 以下蛋白質(zhì)除了哪一種以外不屬于G蛋白家族？ A.IF-1 B.IF-2 C.EF-G D.EF-Tu E.EF2 7. 以下哪一種抑制劑只能抑制真核生物細(xì)胞質(zhì)的蛋白質(zhì)合成？ A.氯霉素 B.紅霉素 C.放線菌酮 D.嘌呤霉素 E.四環(huán)素 8. 既能抑制原核又能抑制真核細(xì)胞及其細(xì)胞器蛋白質(zhì)合成的抑制劑是 A.氯霉素 B.紅霉素 C.放線菌酮 D.嘌呤霉素 E.蓖麻毒素 9. 白喉毒素能夠抑制真核生物細(xì)胞質(zhì)的蛋白質(zhì)合成，是因為它抑制了蛋白

10、質(zhì)合成的哪一個階段？ A.氨基酸的活化 B.起始 C.氨酰-tRNA的進(jìn)位 D.轉(zhuǎn)肽 E.移位反應(yīng) 10. 一個N端氨基酸為丙氨酸的20肽，其開放的閱讀框架至少應(yīng)該由多少個核苷酸殘基組成？ A.60 B.63 C.66 D.57 E.69 11. 真核細(xì)胞的蛋白質(zhì)可經(jīng)歷泛酰化修飾，被修飾的氨基酸殘基是 A.Gly B.Ala C.Lys D.Arg E.Gln 12. 使用(GUA)n作為模板在無細(xì)胞翻譯系統(tǒng)中進(jìn)行翻譯，可得到幾種多肽？ A.1種 B.2種 C.3種 D.4種 E.不確定 13. 在蛋白質(zhì)分子中下面所列舉的氨基酸哪一種最不容易突變？ A.Arg B.Gly C.Val D.As

11、p E.Met 14. 大腸桿菌素Col能夠抑制原核細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成，其抑制的機(jī)理是 A.作為一種核酸內(nèi)切酶切掉16SrRNA的3-端的一段核苷酸序列 B.作為一種核酸內(nèi)切酶切掉16SrRNA的5-端的一段核苷酸序列 C.作為一種核酸內(nèi)切酶切掉23SrRNA的3-端的一段核苷酸序列 D.作為一種核酸內(nèi)切酶切掉23SrRNA的5-端的一段核苷酸序列 E.作為轉(zhuǎn)位酶的抑制劑 15. 以下哪一種蛋白質(zhì)因子在GTP的存在下，至少可以局部地保護(hù)防止核酸酶對它的降解？ A.EF-Ts B.EF-Tu C.EF-G D.IF-2 E.RF-3 16. 以下哪一種氨基酸發(fā)生的取代突變最容易出現(xiàn)表現(xiàn)型的改變？

12、A.ArgLys B.AspGlu C.SerThr D.ValIle E.TrpPro 17. 新合成的分泌蛋白和細(xì)胞膜蛋白需要經(jīng)歷哪一種形式的翻譯后加工？ A.Stop-transfer序列的去除 B.在高爾基復(fù)合體上對N-聯(lián)結(jié)的寡糖鏈進(jìn)行修飾 C.在離開高爾基體之前填加磷酸多萜醇 D.粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中分泌結(jié)合蛋白(BiP) E.激活水解KDEL序列的肽酶 18. 一個突變細(xì)胞系的甘露糖-6-磷酸的受體基因缺失，預(yù)測該細(xì)胞系將發(fā)生： A.在高爾基體內(nèi)不能發(fā)生O-聯(lián)結(jié)的寡糖鏈的填加 B.溶酶體酶將不能正確地定向 C.受體介導(dǎo)的內(nèi)吞事件將增加 D.細(xì)胞液中的甘露糖-6-磷酸的濃度將提高 E.從內(nèi)質(zhì)

13、網(wǎng)上產(chǎn)生的小泡將不能和高爾基體順面融合 19. 美國洛克菲勒大學(xué)的Blobel因提出什么學(xué)說而獲得1999年的諾貝爾醫(yī)學(xué)生理學(xué)獎？ A.信號肽學(xué)說 B.氧化磷酸化學(xué)說 C.第二信使學(xué)說 D.癌基因?qū)W說 E.分子伴侶學(xué)說四：問答題 1.什么是無細(xì)胞翻譯系統(tǒng)？經(jīng)常被使用的無細(xì)胞翻譯系統(tǒng)有那些？一個無細(xì)胞翻譯系統(tǒng)中需要那些成分才能滿足翻譯條件？ 2.大腸桿菌某一多肽基因的編碼鏈的序列是：5ACAATGTATGGTAGTTCATTATCCCGGGCGCAAATAACAAACCCGGGTTTC3<br>寫出該基因的無意義鏈的序列以及它編碼的mRNA的序列。<br>預(yù)測它能編碼多少

14、個氨基酸。<br>標(biāo)出該基因上對紫外線高敏感位點(diǎn)。<br>如果使用PCR擴(kuò)增該基因，需要合成兩段作為引物，請寫出核苷酸序列。 3.一段人工合成的多聚核苷酸的堿基序列是AUAUAUAUAUAU，將此多聚核苷酸作為模板在大腸桿菌無細(xì)胞翻譯系統(tǒng)中進(jìn)行翻譯，你預(yù)期會產(chǎn)生什么樣的多肽？如果將該模板放在從動物細(xì)胞線粒體制備出的無細(xì)胞翻譯系統(tǒng)中進(jìn)行翻譯，得到的產(chǎn)物是 -Met-Tyr-Met-Tyr-Met-Tyr-，那么，線粒體與大腸桿菌的密碼子有什么差別？ 4.為什么能夠抑制真核細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成，但不抑制原核細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成？相反人工合成的SD序列能夠抑制原核細(xì)胞的蛋白質(zhì)合 成，

15、但不抑制真核細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成？ 5.嘌呤霉素和紅霉素都能夠抑制原核細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成，從而抑制細(xì)菌的生長，但嘌呤霉素抑制的效果明顯低于同劑量的紅霉素，試解釋這種現(xiàn)象。 6.盡管蛋白質(zhì)的水解在熱力學(xué)上是有利的，但是由泛素介導(dǎo)的蛋白質(zhì)選擇性降解卻需要消耗ATP。試解釋ATP對于這種形式的降解為什么是必需的。 7.簡述原核細(xì)胞與真核細(xì)胞(細(xì)胞質(zhì))的蛋白質(zhì)生物合成的主要區(qū)別。如果要在原核細(xì)胞中高效表達(dá)真核細(xì)胞的基因，需要注意什么？ 8.什么是跳躍翻譯(Jump translation)和翻譯水平的內(nèi)含子？如何確定一個蛋白質(zhì)基因在翻譯中經(jīng)歷了跳躍？ 9.什么是蛋白質(zhì)內(nèi)含子？如何證明某一種蛋白質(zhì)在后加工反應(yīng)

16、中經(jīng)歷了剪接？ 10.在來源于大腸桿菌的無細(xì)胞翻譯系統(tǒng)之中，使用AUGUUUUUUUUUUUU作為模板，指導(dǎo)fMet-phe-phe-phe-phe的合成，在farsomycin存在下，該模板只能指導(dǎo)fMet-phe合成，試問：<br>(1)farsomycin抑制多肽鏈合成的哪一步？<br>(2)無抑制劑條件下得到的寡肽和有抑制劑條件下得到的二肽，哪一個在反應(yīng)的最后是與tRNA相結(jié)合的，為什么？<br>(3)有那些抑制劑與farsomycin作用方式相似？ 11.使用等摩爾的ADP和UDP在多聚核苷酸磷酸化酶的作用下，得到的隨機(jī)共聚物作為mRNA，放入無細(xì)

17、胞翻譯系統(tǒng)中進(jìn)行翻譯，會有那些氨基酸被參入？各種氨基酸的比率是多少？ 12.假如你純化得到一種新的蛋白質(zhì)因子，但不知道它在細(xì)胞中的功能，你將采取什么樣的方法進(jìn)行研究？ 13.請設(shè)計一個含有原核細(xì)胞必需的翻譯控制位點(diǎn)的編碼八肽Lys-Pro-Ala-Gly-Thr-Glu-Asn-Ser序列的mRNA。 14.你的一位同事聲稱從與接觸過的大腸桿菌細(xì)胞中，分離得到一種能夠校正琥珀型突變的。你相信它的說法嗎？試解釋。 15.血紅素能夠別構(gòu)抑制激活泛素的酶的活性，這種抑制會有什么樣的生理功能？ 16.在大腸桿菌細(xì)胞中從mRNA和游離的氨基酸開始翻譯1分子76肽需要徹底氧化分解多少分子的葡萄糖以提供所需要的ATP？如果在厭氧細(xì)菌內(nèi)合成同樣的多肽，則至少需要消耗多少分子的葡萄糖？ 17.從一個表現(xiàn)型回復(fù)的噬菌體的突變體中，通過蛋白質(zhì)指紋分析得到一變異的9肽，其氨基酸序列是Cys-Glu-Thr-Met-Ser-His-Ser-Tyr-Arg，而野生型噬菌體相當(dāng)于這種9肽的肽段序列是Cys-Glu-Asp-His-Val-Pro-Gln-Tyr-Arg。試問這種突變是怎樣產(chǎn)生的？盡可能寫出指導(dǎo)以上這兩種多肽的mRNA的核苷酸序列。估計以上肽段在蛋白質(zhì)中可能的功能。 18.在使用