1、精選優質文檔-傾情為你奉上基因工程習題集一、名詞解釋Southern blotting；Cosmid；cDNA library；RACE；RT-PCR；MCS ；cDNA；插入失活；反義RNA；PCR，mRNA差異顯示技術；巢式PCR；實時熒光定量PCR；基因文庫；星號活性；載體；轉化；轉染2、 填空題1.基因工程的四大要素是 、 、 、 2.在基因工程中，切割載體和含有目的基因的DNA片段中，一般需使用 酶3.用冷的氯化鈣處理對數生長期的大腸桿菌細胞，可以誘導細胞進入稱為 態的生理狀態進行遺傳轉化。4.寫出在質粒載體圖譜上下列符號表示的含義：Amp , LacZ , ori ,MCS 。5.

2、 PCR包括三個步驟_ ， ， 。6. 限制性內切酶酶切DNA片斷后通常有兩類末端： 、 。7. 目的基因與噬菌體DNA進行重組時，可采用 重組方式，也可采用 重組方式。 8. 柯斯質粒是一類人工構建的質粒-噬菌體雜合載體，它的復制子來自 ，cos位點序列來自 9分離目的基因常采用 從基因組DNA中擴增含目的具有的DNA片斷，或者用分子雜交等方法從構建的 或 中獲得含目的基因的克隆子。10. 在 的作用下，將含目的基因的DNA片斷與克隆載體連接成為重組DNA分子11. 載體根據功能可以分為 和 12. 常用的DNA連接酶有 和 ，前者即可以連接粘性末端又可以連接平末端，后者只可以連接粘性末端。

3、13.據圖回答： 圖中基因組文庫 （填“小于”、“等于”或“大于”）cDNA文庫。B過程需要的酶是 ；A、C過程中 （填“可以”或“不可以”）使用同一種探針篩選含目的基因的菌株。目的基因和除從構建的文庫中分離外，還可以分別利用圖中 和 為模板直接進行PCR擴增，該過程中所用酶的顯著特點是 。二、選擇題1.基因工程的設計操作是在什么水平進行的（ ）A.細胞 B.分子 C.細胞器 D.原子2.基因工程的單元操作順序是（ ）A 增，轉，檢，切，接B 切，接，轉，增，檢C 接，轉，增，檢，切D 切，接，增，轉，檢 3.分離純化基因組DNA應保證核酸一級結構的完整性，下列哪些因素可能導致一級結構被破壞（

4、 ）A. PH 8.0 B.EDTA C.PH 14 D.70%乙醇4.分離純化基因組DNA應盡量去除蛋白質的污染，實驗過程中我們通常采用什么方法去除與DNA結合的蛋白質（ ）A.等電點沉淀法 B.鹽析法 C.有機溶劑變性法 D.強酸強堿法5.分離純化基因組DNA時，我們通常選用以下哪種試劑來沉淀基因組DNA（ ）A.水 B.乙醇 C.氯仿 D.苯酚6.關于不同構象的質粒DNA的電泳速率，下列排列順序正確的是 ( )A ocDNA >lDNA>scDNA B scDNA >ocDNA> lDNAC ocDNA >scDNA > lDNA D scDNA &g

5、t;lDNA>ocDNA7.PCR技術的操作步驟依次是 （ ）A高溫變性、中溫延伸、低溫復性 B高溫變性、低溫復性、中溫延伸C中溫延伸、高溫變性、低溫復性D中溫延伸、低溫復性、高溫變性8. PCR的主要步驟不包括（ ）A. 設計一對特異性引物B. 高溫使模板DNA變性C. 降溫到合適的溫度使模板DNA與引物雜交D. 加熱使DNA聚合酶失活9.PCR反應體系不包括（ )A.DNA模板 B.引物 C.dNTP D.NTP10.核酸分子雜交實驗不能用于（ ）A. 單鏈DNA分子之間雜交B. 單鏈RNA分子之間雜交C. 單鏈DNA分子與RNA之間的雜交D. 抗原與抗體分子之間的雜交11.用作探針

6、的DNA分子必須（ ）A. 在雜交前變性B. 在雜交前復性C. 是雙鏈分子D. 能形成頸環結構12.Southern blotting是 （ ）A. 將DNA轉移到膜上所進行的雜交B. 將RNA轉移到膜上所進行的雜交C. 將蛋白質轉移到膜上所進行的雜交D. 將多糖轉移到膜上所進行的雜交13.確切地講，cDNA文庫包含（ ）A. 一個物種的全部基因信息B. 一個物種的全部RNA信息C. 一個生物體組織或細胞的全部基因信息D. 一個生物體組織或細胞所表達的mRNA信息14.要了解某一基因在某組織細胞中的mRNA表達水平時，采用哪種方法最合適A. Southern blottin B.Norther

7、n blotting C.Western blotting D.Eastern blotting15.DNA序列自動化測序中不正確的描述是（ ）A. 測序原理與手工測序基本相同B. 不需要引物C. 需要模板D. 需要四種熒光染料標記的ddNTP16.Sanger雙脫氧末端終止法中不需要（ ）A. dNTP B.ddNTP C.DNA聚合酶 D.DNA連接酶17.cDNA文庫的建立不需要（ ）A. 逆轉錄酶 B.DNA模板 C.mRNA模板 D.依賴于RNA的DNA聚合酶18.下列哪項不是基因工程中經常使用的用來運載目的基因的載體 A.細菌質粒 B.噬菌體 C.動植物病毒 D.細菌核區的DNA1

8、9.下列哪項敘述不是運載體必須具備的條件A.具有某些標記基因 B.決定宿主細胞的生存 C.能夠在宿主細胞中復制 D.有一個或多個限制酶切點 20.下列有關基因的敘述，錯誤的是（ ）A蛋白質是基因表達的唯一產物 B 基因是 DNA 鏈上具有編碼功能的片段C 基因也可以是 RNA D 基因突變不一定導致其表達產物改變結構21.下列各組專業術語中，含義最為接近的是 （ ）A 終止子與終止密碼子 B 基因表達與基因轉譯C DNA 退火與 DNA 復性 D 重組子與轉化子22.下列有關連接反應的敘述，錯誤的是（ ）A 連接反應的最佳溫度為 37 B 連接反應緩沖體系的甘油濃度應低于 10%C 連接反應緩

9、沖體系的 ATP 濃度不能高于 1mMD 連接酶通常應過量 2-5 倍23.下列各常用載體的裝載量排列順序，正確的是 （ ）A Cosmid >-DNA > Plasmid B -DNA > Cosmid > PlasmidC Plasmid > -DNA > Cosmid D Cosmid > Plasmid >-DNA24.質粒是基因工程最常用的運載體，它的主要特點是：能自主復制不能自主復制結構很小蛋白質環狀RNA 環狀DNA 能“友好”地“借居”A ：B ： C ：D ：25下列黏性末端屬于同一種限制酶切割而成的是：A B C D26下列平

10、末端屬于同一種限制酶切割而成的是A. B. C. D.27作為基因的運輸工具運載體，必須具備的條件之一及理由是A.能夠在宿主細胞中穩定地保存下來并大量復制，以便提供大量的目的基因B.具有多個限制酶切點，以便于目的基因的表達C.具有某些標記基因，以使目的基因能夠與其結合D.對宿主細胞無傷害，以便于重組DNA的鑒定和選擇28.限制性內切核酸酶的星活性是指： A 在非常規條件下，識別和切割序列也不發生變化的活性。 B 活性大大提高 C 切割速度大大加快 D識別序列與原來的完全不同29.下列五個 DNA 片段中含有回文結構的是 A. GAAACTGCTTTGAC B. GAAACTGGAAACTG C

11、. GAAACTGGTCAAAG D. GAAACTGCAGTTTC30.DNA 連接酶是通過形成磷酸二酯鍵將兩段 DNA 片段連接在一起，其底物的關鍵基團是A. 2' -OH 和 5' PB. 2' -OH 和 3' -PC. 3' -OH 和 5' PD. 5' -OH 和 3' -P31.下列哪種克隆載體對外源DNA的容載量最大? A質粒 B黏粒 C酵母人工染色體(YAC) D噬菌體32.考斯質粒（cosmid）是一種 A. 容量最大的一種載體 B. 由 -DNA 的 cos 區與一質粒重組而成的載體 C.是一種單鏈DNA環

12、狀載體 D. 不能在受體細胞內復制，但可以表達34.細菌抗藥性基因存在于 A核DNA B質粒 CRNA D小的直線型DNA35.某科學工作者把兔子的血紅蛋白的信使RNA加入到大腸桿菌的提取液中，在這個細胞的合成系統中能合成兔子的血紅蛋白，這個事實說明A蛋白質合成是在核糖體上進行的 B各種生物共用一套遺傳密碼C兔子和大腸桿菌的基因發生了重組 D兔子的基因發生了突變36.下列不屬于獲取目的基因的方法是A.“鳥槍法” B.轉錄法C.反轉錄法 D.根據已知氨基酸序列合成法37基因工程中常作為基因的運載體的一組結構是A質粒、線粒體、噬菌體 B染色體、葉綠體、線粒體C質粒、噬菌體、動植物病毒 D細菌、噬菌

13、體、動植物病毒38.RT-PCR中，以Oligo(dT)為引物合成cDNA第一條鏈的模板是（ ）A.tRNA B.rRNA C.mRNA D.snRNA39下列不是Southern 印跡步驟的是（ ）A. 用限制性內切酶消化DNAB. DNA與載體的連接C. 用凝膠電泳分離DNA片段D. DNA轉移到硝酸纖維素膜上40.現有一長度為1000個堿基對（bp）的DNA分子，用限制性內切酶EcoRI單獨酶切后得到的DNA分子仍為1000bp，用限制性內切酶KpnI單獨酶切后得到400bp和600bp兩種長度的DNA分子，用EcoRI和KpnI同時酶切后得到200bp和600bp的兩種長度的DNA分子

14、，該DNA分子的酶切圖譜正確的是（ ）41下列有關基因工程中常用的限制性內切酶的描述，錯誤的是（ ）A. 有特定的識別序列B. 限制性內切酶的活性受溫度的影響C. 限制性內切酶能識別和切割RNAD. 限制性內切酶可以從原核生物中提取。42.根據基因工程的定義，下列各名詞中不能替代基因工程的是（ ）A. 基因誘變 B.分子克隆 C.DNA重組 D.遺傳工程43. 利用基因工程實現分子克隆是通過（ ）A. SD序列的存在 B.啟動子的存在 C.載體自主復制 D.增強子的作用44. 下列五個DNA片段，最有可能含有II型限制內切酶SstI酶切位點的是（ ）A. GGAGAGCTCT B.GAGCAC

15、ATCT C.CCCTGTGGGA D.AACCTTGGAA45. 下列關于質粒的敘述，錯誤的是（ ）A. 質粒是共價閉合環狀的雙鏈DNA分子。B. 質粒在宿主細胞內能獨立于染色體DNA自主復制。C. 基因工程中使用的質粒載體通常是緊密控制型D. 質粒在細菌內一般以超螺旋形式存在。46. 實現基因工程必須用到的工具及其作用描述正確的是（ ）A限制性內切酶-切割DNA分子，只在獲得目的基因時候用到BDNA連接酶-連接粘性末端或者平末端，即恢復兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵C質粒-將目的基因運輸到宿主細胞后，即解體死亡DDNA聚合酶-分子的“縫合針”47.對解旋酶、DNA連接酶、DNA聚合酶作用的部位

16、理解正確的是（ ）A解旋酶是將DNA的雙螺旋展開，但不能打開兩條鏈堿基對之間的氫鍵BDNA連接酶連接的是粘性末端或者平末端的磷酸二酯鍵和堿基對的氫鍵CDNA聚合酶需要模板，脫氧核苷酸之間脫水后形成磷酸二酯鍵DDNA連接酶和DNA聚合酶都形成磷酸二酯鍵，因此功能一樣48.下列關于DNA連接酶敘述錯誤的是（ ）AEcoliDNA連接酶來自大腸桿菌，只能連接粘性末端BT4DNA連接酶來自T4噬菌體，既能連接粘性末端，也能連接平末端CT4DNA連接酶連接平末端和粘性末端效率一樣DDNA連接酶是“分子縫合針”49.下列不可做基因進入受體細胞的運載體的是（ ）A質粒B動植物病毒C噬菌體D線粒體50.下列對

17、質粒的理解正確的是（ ）質粒是環狀的DNA分子 質粒上的標記基因可以沒有質粒必須有一至多個限制酶切點 質粒必須能自我復制或者整合到DNA上 天然質粒都可直接使用 質粒能將目的基因運輸到宿主細胞中ABCD51.在目的基因和質粒結合的時候，由于使用了相同的限制酶，因此在兩者結合的過程中不可能出現下列哪種情況()A形成環狀的外源DNAB可能形成環狀的載體DNAC可能出現重組DNAD只出現重組DNA52甲、乙兩圖表示從細菌細胞中獲取目的基因的兩種方法，以下說法中錯誤的是（） A甲方法可建立該細菌的基因組文庫 B乙方法可建立該細菌的cDNA文庫C甲方法要以脫氧核苷酸為原料 D乙方法需要逆轉錄酶參與3、

18、判斷題1.質粒的構型中，線性L型是最簡單的構型，因而電泳時泳動的速度最快。( )2.轉化子就是重組子。( )3.只要目的基因進入了受體細胞就能成功實現表達。( )4.載體自主復制是基因工程擴增基因的依據。( )5.對于5kb、10kb和15kb的目的基因在TBE緩沖液的瓊脂糖凝膠中電泳，30分鐘后最接近 負極的是5kb的目的基因。6.基因是不可分割的最小的重組單位和突變單位。（ ）7.cDNA文庫不包含內含子。（ ）8.有一些來源不同的限制性內切酶識別的是同樣的核苷酸序列，這類酶稱為同裂酶。9.cDNA是以DNA為起始材料，經過復制得到的互補DNA。（ ）10.DNA的復制是全保留不連續復制。（ ）11.Western雜交可以檢測外源DNA的導入與否。（ ）12.只有含粘性末端的DNA才可以被連接起來（ ）13.E.coli DNA連接酶只能催化雙鏈DNA片斷互補黏性末端之間的連接。（ ）14.質粒DNA進行電泳時，其三種構型中，開環DNA跑的最快，共價閉環形DNA跑得最慢。（ ）15.一個基因表達載體的組成包括目的基因、啟動子、終止子、標記基因等（ ）16.真核基因表達的調控在多個水平上進行：DNA水平的調控、轉錄水平調控、轉錄后水平調控、翻譯水平調控、蛋白質加工水平的調控（