1、熱療聯(lián)合放療對(duì)盆腔惡性腫瘤患者血清中細(xì)胞因子表達(dá)的研究熱療聯(lián)合放療對(duì)盆腔惡性腫瘤患者血清中細(xì)胞因子表達(dá)的研究2013級(jí)研究生級(jí)研究生 腫瘤內(nèi)科腫瘤內(nèi)科 顏贊芳顏贊芳 開開 題題 報(bào)報(bào) 告告開題報(bào)告開題報(bào)告課題研究的背景課題研究的背景課題研究的目的和意義課題研究的目的和意義 預(yù)期研究成果預(yù)期研究成果Text研究內(nèi)容及具體步驟研究內(nèi)容及具體步驟擬解決的問題擬解決的問題課題創(chuàng)新之處課題創(chuàng)新之處第一第一 、課題研究背景、課題研究背景既往研究多為既往研究多為觀察放療聯(lián)合觀察放療聯(lián)合熱療后的臨床熱療后的臨床療效，而放療療效，而放療聯(lián)合熱療治療聯(lián)合熱療治療實(shí)體腫瘤的療實(shí)體腫瘤的療效與血清中相效與血清中相關(guān)免

2、疫細(xì)胞因關(guān)免疫細(xì)胞因子水平的關(guān)系子水平的關(guān)系研究仍不多見研究仍不多見。 在腫瘤熱療過在腫瘤熱療過程中發(fā)現(xiàn)，不程中發(fā)現(xiàn)，不僅腫瘤原發(fā)灶僅腫瘤原發(fā)灶經(jīng)熱療后消失經(jīng)熱療后消失，轉(zhuǎn)移灶也隨，轉(zhuǎn)移灶也隨之消失，這使之消失，這使人們認(rèn)識(shí)到熱人們認(rèn)識(shí)到熱療引起的免疫療引起的免疫反應(yīng)對(duì)腫瘤消反應(yīng)對(duì)腫瘤消退起著重要作退起著重要作用。用。 許多研究已經(jīng)證實(shí)許多研究已經(jīng)證實(shí)熱療能夠誘導(dǎo)機(jī)體熱療能夠誘導(dǎo)機(jī)體免疫相關(guān)因子分泌免疫相關(guān)因子分泌產(chǎn)生改變。我們選產(chǎn)生改變。我們選取取2個(gè)新型細(xì)胞因子個(gè)新型細(xì)胞因子（IL-33/IL-35）進(jìn)）進(jìn)行研究。本課通過行研究。本課通過觀察觀察w晚期盆腔惡性晚期盆腔惡性腫瘤的臨床療效及腫

3、瘤的臨床療效及副反應(yīng)與血清中相副反應(yīng)與血清中相關(guān)細(xì)胞因子之間的關(guān)細(xì)胞因子之間的聯(lián)系來指導(dǎo)熱療在聯(lián)系來指導(dǎo)熱療在腫瘤治療中的應(yīng)用腫瘤治療中的應(yīng)用，從而從分子水平，從而從分子水平研究熱療對(duì)腫瘤的研究熱療對(duì)腫瘤的治療免疫機(jī)制，治療免疫機(jī)制，tow one第二、研究的目的和意義第二、研究的目的和意義根據(jù)試驗(yàn)設(shè)計(jì)測(cè)定治根據(jù)試驗(yàn)設(shè)計(jì)測(cè)定治療療患者患者不同時(shí)期細(xì)胞不同時(shí)期細(xì)胞因子（因子（IL-35、IL-33）在血清中表達(dá)，并）在血清中表達(dá)，并以受試者治療前相應(yīng)以受試者治療前相應(yīng)的細(xì)胞因子水平做參的細(xì)胞因子水平做參照，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)合理照，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)合理分析觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果。分析觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 建立放療聯(lián)合熱療建立

4、放療聯(lián)合熱療及單純放療及單純放療2組試組試驗(yàn)對(duì)照模型，通過驗(yàn)對(duì)照模型，通過觀察熱療聯(lián)合放療觀察熱療聯(lián)合放療及單純放療的臨床及單純放療的臨床療效及毒副反應(yīng)來療效及毒副反應(yīng)來指導(dǎo)熱療在臨床上指導(dǎo)熱療在臨床上面的應(yīng)用。面的應(yīng)用。已通過省衛(wèi)生廳查新資料顯示：在國內(nèi)已通過省衛(wèi)生廳查新資料顯示：在國內(nèi)外尚無類似研究報(bào)道外尚無類似研究報(bào)道 。 既往的研究多為觀察熱療治療腫瘤臨床療效，較少從熱療免疫方面探討具體實(shí)體腫瘤的治療，因而設(shè)計(jì)了本研究課題。 IL-35是新發(fā)現(xiàn)的免疫抑制炎癥細(xì)胞因子，既往研究表明IL-35與多種腫瘤等有密切的關(guān)系，然而在具體實(shí)體腫瘤中IL-35的作用機(jī)制尚有待進(jìn)一步研究。 IL-33可

5、作為分泌型細(xì)胞因子，參與TH2型免疫和炎癥反應(yīng)，也可作為定位于細(xì)胞核的核因子，起轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用，國內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)其可能為腫瘤的免疫抑制和免疫逃逸提供了必要條件。 觀察腫瘤單純放療及放療聯(lián)合熱療組。評(píng)價(jià)療效，分析不同的治療手段對(duì)細(xì)胞因子分泌水平的影響及其關(guān)系，從而為采用生物免疫方式治療腫瘤提供新的依據(jù)。該設(shè)計(jì)思路新穎，方法可靠，操作性強(qiáng)。第三、課題創(chuàng)新之處第三、課題創(chuàng)新之處 第四、研究的具體內(nèi)容及步驟第四、研究的具體內(nèi)容及步驟v 研究對(duì)象為中晚期盆腔惡性腫瘤患者（中晚期直腸癌、宮頸癌、前列腺癌），具體為：放療聯(lián)合熱療組及單純放療組2個(gè)試驗(yàn)組進(jìn)行試驗(yàn)，分病種按時(shí)間先后順序完全隨機(jī)設(shè)計(jì)，標(biāo)號(hào)單號(hào)放于放療

6、組，雙號(hào)放于熱放療組。v 在治療前應(yīng)對(duì)兩組患者細(xì)胞因子（IL-35，IL-33）表達(dá)水平進(jìn)行測(cè)定。每位入組患者血清中細(xì)胞因子初始水平作為原始數(shù)據(jù)，之后兩組患者分別于放療后1周、2周、4周、放療結(jié)束進(jìn)行多次抽取患者血清測(cè)定相關(guān)細(xì)胞因子水平分析，同時(shí)評(píng)價(jià)治療后患者的臨床療效及不良反應(yīng)與患者血清中不同時(shí)期的相關(guān)細(xì)胞因子水平的比較得出結(jié)論。v 血清中細(xì)胞因子檢測(cè)方法為ELISA法，數(shù)據(jù)分析軟件采用軟件統(tǒng)計(jì)。研究方案和具體操作研究方案和具體操作一般資料直腸癌宮頸癌TEXT本試驗(yàn)入選本試驗(yàn)入選8080例患例患者（者（4040例放療組，例放療組，4040例熱療聯(lián)合放療例熱療聯(lián)合放療組），同時(shí)以組），同時(shí)以4

7、 40 0例例健康人細(xì)胞因子水健康人細(xì)胞因子水平為對(duì)照。根據(jù)本平為對(duì)照。根據(jù)本院腫瘤科治療患者，院腫瘤科治療患者，按照不同部位的實(shí)按照不同部位的實(shí)體的腫瘤根據(jù)入院體的腫瘤根據(jù)入院時(shí)間先后隨機(jī)標(biāo)號(hào)時(shí)間先后隨機(jī)標(biāo)號(hào)（1 1、2 2、3 3、4.4.）, ,單數(shù)單數(shù)進(jìn)入進(jìn)入A A組（熱療聯(lián)組（熱療聯(lián)合放療組），偶數(shù)合放療組），偶數(shù)進(jìn)入進(jìn)入B B組（單純放組（單純放療組），入組患者療組），入組患者均有病理學(xué)或者細(xì)均有病理學(xué)或者細(xì)胞學(xué)確診病例胞學(xué)確診病例。 臨床分期為臨床分期為/期的直腸期的直腸癌術(shù)后患者，入癌術(shù)后患者，入組患者放療前完組患者放療前完善盆腔善盆腔MRIMRI、胸、胸片、腹部片、腹部B B

8、超檢超檢查，放療前查血查，放療前查血常規(guī)、肝腎功能、常規(guī)、肝腎功能、電解質(zhì)、心電圖，電解質(zhì)、心電圖，放療期間定期放療期間定期復(fù)復(fù)查（每周一次），查（每周一次），嚴(yán)格按照嚴(yán)格按照NCCNNCCN指指南進(jìn)行熱療和放南進(jìn)行熱療和放療療中晚期宮頸癌中晚期宮頸癌（IIB-IVIIB-IV期）期）患者，嚴(yán)格按患者，嚴(yán)格按照照NCCNNCCN指南進(jìn)指南進(jìn)行熱療和放療。行熱療和放療。臨床臨床T1-4N0-1MO期前列腺期前列腺癌患者，癌患者，嚴(yán)格嚴(yán)格按照按照NCCNNCCN指南指南進(jìn)行熱療和放進(jìn)行熱療和放療。療。放療后放療后1周、周、2周、周、4周、放周、放療結(jié)束多次抽療結(jié)束多次抽取患者靜脈血取患者靜脈血3m

9、l,均于清晨均于清晨空腹抽取。留空腹抽取。留取標(biāo)本同上進(jìn)取標(biāo)本同上進(jìn)行行ELISA法測(cè)法測(cè)定并記錄定并記錄 。前列腺癌療效的評(píng)估及數(shù)據(jù)處理療效的評(píng)估及數(shù)據(jù)處理v 療效及副反應(yīng)評(píng)估：針對(duì)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組均予以放療結(jié)束后一月復(fù)查盆腔MRI，與熱放療前進(jìn)行療效分析比較，療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)(RECIST)將其分為1、完全緩解（CR）:腫瘤完全消失；2、部分緩解(PR):腫瘤最大直徑減少30%或者腫瘤體積減少50%，其他病灶無增大，無新病灶出現(xiàn)；3、病癥穩(wěn)定（SD）組:腫瘤病灶的兩徑乘積縮小不足 50%，或增大不超過25%，無新病灶出現(xiàn)；4、疾病進(jìn)展組（PD）組：腫瘤病灶的兩徑乘積增大 25% 以上或出現(xiàn)新病灶

10、；以PR+CR計(jì)算有效率，以PR+CR+SD計(jì)算腫瘤控制率,放療期間并同時(shí)觀察記錄放射性腸炎、放射性膀胱炎發(fā)生率：III、IV、V度分別計(jì)數(shù)，骨髓抑制發(fā)生率計(jì)數(shù)：III、IV度，腫瘤標(biāo)志物降低或升高的幅度，胃腸道反應(yīng)程度，均進(jìn)行實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組進(jìn)行對(duì)比統(tǒng)計(jì)。并同時(shí)針對(duì)治療后的副反應(yīng)做相應(yīng)的處理。 v 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有的數(shù)據(jù)均用軟件包進(jìn)行處理。一般資料用XS表示，計(jì)量資料兩兩比較用t檢驗(yàn)，多樣本均數(shù)比較用方差分析，計(jì)數(shù)資料用率表示，率的比較采用2檢驗(yàn)，P差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)果處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)果處理 IL-33/IL-35放療前后及組間對(duì)比（ XS ）盆腔惡性腫瘤熱療組與熱放療組臨床療效及毒副

11、反應(yīng)對(duì)比（ 2 ）可行性分析可行性分析1本院血液腫瘤科為省重點(diǎn)專科、南華大學(xué)腫瘤學(xué)碩士培養(yǎng)點(diǎn)，擁有直線加速器、熱療設(shè)備、ELISA相關(guān)設(shè)備、流式細(xì)胞儀及血液腫瘤實(shí)驗(yàn)室等，科室擁有博士2名，碩士15名，具有較強(qiáng)大的科研能力，已完成省科技廳、衛(wèi)生廳、省中醫(yī)藥管理局多項(xiàng)科研基金課題。2科研者熟練掌握流式細(xì)胞學(xué)、ELISA技術(shù)。且實(shí)驗(yàn)所有操作均可在本科室進(jìn)行，費(fèi)用估算相對(duì)適中。3科研者具有腫瘤內(nèi)科的基礎(chǔ)及臨床研究經(jīng)驗(yàn)；熟練掌握中晚期盆腔惡性腫瘤放、熱療適應(yīng)癥及禁忌癥；擁有足夠的患者群體，信息資源來源快，有助于課題完成 。證實(shí)在炎癥反應(yīng)過程中，IL-33有促進(jìn)炎癥反應(yīng)的作用，而IL-35有抑制炎癥反應(yīng)的

12、作用。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果可進(jìn)一步探討腫瘤熱療與腫瘤免疫之間的聯(lián)系。通過療效觀察證實(shí)聯(lián)合熱療治療組較單純放療組副反應(yīng)明顯減輕 。研究的細(xì)胞因子在惡性腫瘤治療前后及組間的表達(dá)改變具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，證實(shí)其在惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中具有免疫調(diào)節(jié)作用 。CompanyLOGO第五、預(yù)期研究成果第五、預(yù)期研究成果第六、擬解決的關(guān)鍵問題第六、擬解決的關(guān)鍵問題ONETWOTHREE1確保入組患者依從性良好，并盡可能完成全部治療計(jì)劃。 2成功獲取入組患者血清標(biāo)本并進(jìn)行細(xì)胞因子測(cè)定。3熟練采用ELISA法或流式細(xì)胞學(xué)方法進(jìn)行相關(guān)細(xì)胞因子的檢測(cè)。4.正確分析試驗(yàn)后細(xì)胞因子表達(dá)水平，合理采用相應(yīng)的統(tǒng)計(jì)方法。 5.研究的結(jié)論是否

13、與預(yù)期結(jié)果相符，且能將所研究結(jié)論具體應(yīng)用于臨床治療中，并能獲得滿意的治療效果。參考文獻(xiàn)參考文獻(xiàn)1、張宇輝,耿傳營,高福平,等.腫瘤熱療與免疫相關(guān)因子J.國際病理科學(xué)與臨床雜志.2009,29(5):392-3972、陳 爽，鞠曉紅，鄭文彧,趙良中等，IL-35與人類疾病關(guān)系的研究進(jìn)展J，免疫學(xué)雜志，醫(yī)學(xué)綜述，2014，7(30):645-6493、Olson BM,Jankowska Can E,Becker JT,et al.Human prostate tumor antigen-specific CD8+regulatory T cells are inhibited by CTLA+4

14、 or IL-35 blockadeJ.J Immunol,2012,189(12):5590-56014、Cui G1, Qi H, Gundersen MD, Yang H, Christiansen I, Srbye SW, Goll R, Florholmen J，Dynamics of the IL-33/ST2 network in the progression of human colorectal adenoma to sporadic colorectal cancerJ，Cancer Immunol Immunother.2014,8（20）:78-1025、Jovanovic JP, Pejnovic NN. Radosavljevie GD, et al. IL33/ST2 axis in innate and acquired immunity to tumoJ, 0ncoimmunology,2012,1 (2):229-2316.Ga