1、    慢性粒細(xì)胞白血病骨髓網(wǎng)狀纖維與巨核細(xì)胞增生的觀察        摘要目的為了解慢性粒細(xì)胞白血病(CML) 骨髓中巨核細(xì)胞和網(wǎng)狀纖維的增生情況及其關(guān)系。方法觀察33例CML患者 的骨髓活檢組織(塑料包埋、HGF和Gomori染色)的病理學(xué)改變。結(jié)果發(fā)現(xiàn) 所有患者的骨髓組織均存在網(wǎng)硬蛋白纖維增多，且隨CML進(jìn)展其程度加重；大多數(shù)患者巨核 細(xì)胞過度增生，在CML不同階段中巨核細(xì)胞數(shù)比較未見顯著差異。結(jié)論提 示CML繼發(fā)性的骨髓纖維組織增生主要與病情演進(jìn)有關(guān)，并涉及巨核細(xì)胞的

2、增生。關(guān)鍵詞慢性白血病；骨髓纖維化；網(wǎng)硬蛋白纖維；巨核細(xì)胞；骨髓 活組織檢查中分類號R733.72文獻(xiàn)標(biāo)識碼B文章編號1005-8664(2000)06-19-02 Proliferation of reticulin fibre and megakaryocyte in bone marr ow of Guangix,patients with chronic myelogenous leukemia.LIU Tao-wen, ZHOU Ruan-hua,MA Yie,et al.Second Peoples Hospital of Guangxi Autonomous Re gion,Gu

3、ilin 541002AbstractObjectiveTo determine the distribution of reticu lin fibre and megakaryocyte in bone marrow biopsy(Trephine biopsy)of chronic mye logenous leukemia (CML).MethodsThe histopathological features were investigated in sec tions of embedded core biopsies of 33 patients with CML.Results

4、The reticulin fibre proliferated in all specimen and most of them occured mega karyocytosis.The myelofibrosis was severer along with the progress of CML,while megakaryocyte counts didnt change significantly.ConclusionsMyelofibrosis secondary to CML is mainly related to its clinical stage and implica

5、ted megakaryocytosis.Key wordschronic Leukemia;myelofibrosis;reticulin fibre;m egakaryocyte.bone marrow biopsy慢性粒細(xì)胞白血病(Chronic Myelogenous Leukemia,CML)是一種起源于造血多能干細(xì)胞的腫 瘤性疾患，90%以上患者存在特征性染色體t(9；22)(q34；q11)易位。CML骨 髓呈異質(zhì)性增生，按粒系、巨核系的異常增生程度不同而將其分為粒系細(xì)胞型和粒-巨核細(xì) 胞型，常伴有網(wǎng)硬蛋白成分增多1。骨髓中巨核細(xì)胞和網(wǎng)狀纖維的增生程度均涉及CML的進(jìn)展及預(yù)后。本

6、文報道了 一組CML患者的骨髓活檢組織中網(wǎng)狀纖維和巨核細(xì)胞的分布，并探討其兩者關(guān)系。材料和方法一、觀察對象33例CML，均為1994.41998.9桂林醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院收治患者，男21例，女1 2例，年齡1660歲，中位年齡41歲；其中慢性期19例，加速期8例，急變期6例，診斷均符 合國內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)2。二、取材與處理以骨髓活檢針于髂后上棘按一步法取2mm×8mm12mm骨髓組織，立即置Bo uin液固定，經(jīng)常規(guī)脫水后塑料包埋。2um3um厚切片作HGF染色，5um厚切片作Gomori染色 3。三、觀察指標(biāo)(一)骨髓增生程度骨髓組織切片經(jīng)HGF染色，借助網(wǎng)形測微器(10×10規(guī)格 )

7、計(jì)算造血主質(zhì)面積，將其增生程度分為五級，即增生極度減低、增生減低、增生活躍、增生明顯 活躍、增生極度活躍。(二)巨核細(xì)胞的增生骨髓組織切片經(jīng)HGF染色，10×40放大下計(jì)數(shù)1 mm骨髓面積即64個網(wǎng)形測微器(10×10規(guī)格)視野的巨核細(xì)胞，并仔細(xì)觀察其形態(tài) 。(三)網(wǎng)狀纖維的分布觀察經(jīng)Gomori染色的骨髓組織切片中網(wǎng)硬蛋白含量，以半定量(+ +)表示，積分標(biāo)準(zhǔn)據(jù)改良Manoharan法3。四、結(jié)果處理用Poms2.0統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)，作秩和檢驗(yàn)。結(jié)果一、粒細(xì)胞型及粒-巨核細(xì)胞型CML骨髓網(wǎng)硬蛋白的分布19例慢性期CML中7例(36.8%)為粒 系增生型，表現(xiàn)為各階段粒細(xì)胞

8、增生，主要是嗜中性粒細(xì)胞增生，巨核細(xì)胞正常或減少(<14 個/mm），其中1例網(wǎng)硬蛋白+。12例(63.2%)為粒-巨核系增生型，顯示為粒系及巨 核系均明顯增生，巨核細(xì)胞14個/mm骨髓，其中7/12例網(wǎng)硬蛋白+，且可見侏儒巨 核細(xì)胞(見表1)。二、不同程度的網(wǎng)硬蛋白及其相應(yīng)的巨核細(xì)胞增生情況依骨髓組織切片中所見網(wǎng)硬蛋白的 含量不同而分組，其相應(yīng)的巨核細(xì)胞數(shù)比較未見顯著差異(秩和檢驗(yàn)H=3.50,P=0.32)(見表2) 。三、CML發(fā)展不同階段骨髓組織中巨核細(xì)胞與網(wǎng)硬蛋白的分布加速期CML骨髓組織切片中巨 核細(xì)胞數(shù)(中位數(shù))大于慢性期和急變期，但此三階段的巨核細(xì)胞數(shù)比較未見顯著差異(秩

9、和 檢驗(yàn)：H=1.67,P=0.43)。隨著CML病程進(jìn)展，骨髓網(wǎng)硬蛋白含量增加，即網(wǎng)狀纖維增生加重( 見表3)。表1粒系增殖和粒-巨核系增殖型CML(慢性期)骨髓網(wǎng)硬蛋白的分布比 較分型例數(shù)網(wǎng)硬蛋白+粒系增殖76100粒-巨核系增殖125610表2CML骨髓組織網(wǎng)硬蛋白含量與巨核細(xì)胞增生的比較網(wǎng)硬蛋白例數(shù)巨核細(xì)胞中位數(shù)(范圍)(個/mm2)?+1215(2103)?953(0117)?736(7125)?558(12122)?P>0.05 表3CML不同階段骨髓組織網(wǎng)硬蛋白與巨核細(xì)胞的分布比較分期例數(shù)巨核細(xì)胞中位數(shù)(范圍)(個/mm2)?網(wǎng) 硬蛋白+慢性期1917(10117)1171

10、加速期870(7125)1142急變期649.5(0103)123?P>0.05 討論骨髓間質(zhì)的纖維是造血環(huán)境的組成成分之一，通常位于骨小梁旁及某些血管周圍。網(wǎng)狀纖維 的成 分是網(wǎng)硬蛋白，正常情況下其含量甚微，Gomori染色(嗜銀)呈少量細(xì)絲狀(半定量記為±)。 網(wǎng)狀纖維增生的機(jī)制未明，認(rèn)為由纖維母細(xì)胞產(chǎn)生。纖維組織增生包括纖維母細(xì)胞、纖維細(xì) 胞及網(wǎng)狀纖維增多。骨髓纖維化主要指膠原纖維增生，電鏡下顯示膠原纖維為成束的網(wǎng)硬蛋 白 ，也就是說，先有網(wǎng)狀纖維增生，后出現(xiàn)膠原纖維增生。免疫機(jī)制異常損傷巨核細(xì)胞和血小 板，淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨核細(xì)胞等釋放多種因子，如血小板源性、上皮、

11、內(nèi)皮細(xì)胞生長 因子、轉(zhuǎn)化生長因子等可導(dǎo)致纖維母細(xì)胞增生和網(wǎng)狀纖維增生4。本文觀察的19例CML慢性期患者的骨髓活組織病理學(xué)改變與文獻(xiàn)報道相類似 1，進(jìn)一步肯定骨髓組織巨核細(xì)胞增生與網(wǎng)狀纖維逐漸增多有一定關(guān)系。在CML進(jìn)展 過程中，網(wǎng)狀纖維逐漸增多，但未觀察到骨髓巨核細(xì)胞數(shù)的顯著差異；骨髓中不同程度的網(wǎng) 硬蛋白含量相應(yīng)的巨核細(xì)胞數(shù)也未發(fā)現(xiàn)顯著不同。這些結(jié)果提示CML骨髓網(wǎng)狀纖維增多除與 巨核細(xì)胞增生有關(guān)外，更重要的是與CML臨床病情進(jìn)展有關(guān)。隨著CML演進(jìn)，其并發(fā)網(wǎng)狀纖維 增生的程度及可能性均上升。CML晚期，骨小梁旁或小梁間出現(xiàn)片狀幼稚細(xì)胞均一性增生， 而此時患者外周血及骨髓涂片尚未出現(xiàn)幼稚細(xì)

12、胞增多，病理學(xué)稱之為“急變趨勢”。本文所 見CML其中2例出現(xiàn)這種急變趨勢，均于2周左右急變(ALL1和AM2各1例)。另2例CML患者，外 周血表現(xiàn)為“加速期”，但骨髓組織學(xué)呈纖維化改變，并無幼稚細(xì)胞增多。這可能是因骨髓 纖維組織增生破壞微環(huán)境，血竇內(nèi)皮細(xì)胞連接縫隙增大導(dǎo)致幼稚細(xì)胞過早釋放入血所致。CM L繼發(fā)性的網(wǎng)狀纖維增生應(yīng)注意與原發(fā)性骨髓纖維化區(qū)別，前者多有原發(fā)病的特點(diǎn)，尤其是 巨核系、粒系及紅系均增生旺盛，各階段比例大致正常，而原發(fā)性者除骨髓增殖性疾病外， 其它多數(shù)呈巨核細(xì)胞數(shù)減少。CML合并骨髓組織中網(wǎng)狀纖維顯著增生或纖維化，則患者緩解 率低，生存期明顯縮短，易于急變，預(yù)后差5。作

13、者簡介：劉陶文(1965-)，男，廣西博白人，博士生，副主任醫(yī)師，副研究員，從 事血液腫瘤科研與醫(yī)療。劉陶文(廣西壯族自治區(qū)第二人民醫(yī)院 南溪山醫(yī)院桂林 541002)周潤華(桂林醫(yī)學(xué)院血液病研究 室)馬越(桂林醫(yī)學(xué)院血液病研究 室)劉健(桂林醫(yī)學(xué)院血液病研究 室)參考文獻(xiàn)1Lorand-Metze I,Vassallo J,Souza CA.Histological and cytological h etero genecity of bone marrow in Philadelphia-positive chronic myelogenous leukmia at diagnosisJ.Br J Haematol,1987,67:45.2張之南主編.血液病診斷與療效標(biāo)準(zhǔn)M.第2版.北京：科學(xué)出版社，1998 ，219-221.3浦權(quán)，李世俊，楊梅如等.骨髓活檢病理學(xué)M.哈爾濱：黑龍江科學(xué)技 術(shù)出版社，1993，18-35.4Hassan HT,Hanauske AR,Lux E,et al.A new fibroblast