1、實驗五 發芽測定5.1 發芽測定的意義發芽能力是播種材料最重要的品質， 發芽測定就是人為創造最理想的環境條件， 使種批潛在的發芽能力能夠充分表現出來。 最終目的是了解該種批適于播種的程度， 并比較不同種批的使用價值。為了使測定結果能夠相互比較， 并能在隨機變異的范圍內具有重現性， 發芽測定必須根據統一規定，在標準化的條件下進行。5.2 發芽測定條件發芽測定必須在最適宜供試種子萌芽的條件下進行。種子發芽的必須條件是水分、溫度、氧氣、有些樹種需要光照。5.2.1水分通氣水分是種子發芽的首要條件。發芽的P21頁開啟發芽皿即能滿足發芽所需的氧氣。5.2.2溫度 目前對發芽測定，規定的溫度在致分為兩類，

2、 一類是恒溫， 另一類是變溫。 多數林木種子發 芽的測定使用的是恒溫。 例如25C或30C。有 些樹種則規定采用變溫。例如2030C的變溫， 以模擬晝夜交替的溫度變化，有利于種子發 芽，采用變溫時， 每晝夜有 16小時給予較低溫 度， 8小時給予較高的溫度。5.3發芽測定的方法5.3.1測定樣品的提取發芽測定所需樣品應從凈度測定后的純凈種子中提取， 即使送檢單位不要求測定凈度， 發芽測定樣品也應從純凈種子中提取。首先用四分法將種子分成四份， 從每份中隨機 提取25粒組成 100粒。共取四個 100粒，即為四 個重復。種粒大的可以 50粒或 25粒為一次重 復。樣品數量有限或設備條件不足時， 也

3、可以 采用三次重復， 但應在檢驗證中注明， 特小粒 種子用重復發芽法。 0.10.25克為一次重復。5.3.2測定樣品的預處理發芽測定前種子是否需要預處理， 用什么方法處理，這取決于被測定種子的基本特性， 同時也受種子質量情況的制約。具有休眠習性的種子， 發芽測定之前根據休眠 的原因，采取適當的催芽處理，解除休眠， 一 般樹種可以采取浸種處理加速發芽。例如： 杉 木、馬尾松、黑松、赤松、云南松、油松、水 杉、落葉松、云杉、黃連木、胡枝子等，用始 溫為45C水浸種24小時，皂角用100C浸種所 用的水最好更換幾次。刺槐種子用80 C始溫浸 種 24小時，中間換水 23次。浸種要注意水溫與浸種時間

4、。 種子在水中浸泡 太久，反而對芽不利。5.3.3 置床置床就是將經過預處理的種子安放于發芽基質上。視樹種而不同， 常用的發芽基質有濾紙和細沙。目前除常用的培養皿，尚有培養盒，平板發芽器等。每個培養皿整齊地安放 100粒（種粒大時可為 50粒乃至 25粒）種子。 種粒之間保持的距離大 約相當于種粒本身的 14倍，以減少霉菌蔓延 感染，避免發芽的幼根相互纏繞。發芽種粒的排放應有一定規律， 如下圖， 以便 計算并減少錯誤， 將樣品登記表的號數， 重復 號、姓名和日期用鉛筆， 簡地填寫一張小標簽， 分別貼在培養皿不易磨損的地方， 例如底盤的 外緣，以免引起差錯。5.4發芽測定的管理和觀察載5.4.1

5、管理a. 經常檢查發芽環境的溫度，儀器的溫度同預定的溫度相差不能超過土 1Cob. 保持發芽床的水分。水分不足時應及時加 水，但水分也不能過多， 用指尖輕壓發芽床 （指 紙床）， 如指尖周圍出現水膜，或者種粒四周出現水膜。都表示水分過多。c. 通氣種子發芽需要足夠的氧氣，并會釋放 出大量的二氧化碳。 有蓋的培養皿的缺點之一 就是通氣不良，應當經常揭開蓋子充分換氣。d. 將感染了霉菌的種子取出（不要使它們觸 及健康的種粒）， 用清水沖洗數次， 直到水無 混濁再放回原發芽床。 發霉嚴重時整個濾紙和 座墊，甚至整個培養皿都要更換。 這些情況在發芽記錄表（附表 5.1 ）中應有所記述。圖5.1 100

6、粒種子在發芽床上的排放圖例5.4.2觀察記載發芽測定情況要定期觀察記載（見附表 5.1）。為了更好地掌握發芽測定的全過程， 最好每天作一次觀察記載。 至少在規定的統計發芽勢和發芽率的那一天，必須有記載。5.4.3 發芽測定的持續時間 發芽測定的持續天數見天 5.1。表中所列天數 以置床之日起零起算。 且不包括種子預處理的 時間，如果確認某樣品已達到最高發芽率， 也 可在規定的時間以前結束測定。 如到規定的結 束時間仍有較多的種粒萌發， 也可酌情延長測 定時間。發芽測定所用實際天數應在檢驗報告 中填明。記載項目：按發芽床的編號依次記載以下各點（見附表 5.1）。表 5.1 常用樹種發芽測定的主要

7、技術規定（摘要）樹種 溫度（C） 發芽勢終止天數 發芽率終止天數 備注柏木 25 2 35 晝夜光照 8小時福建柏 25 12 28側柏 25 9 20濕地松 2030 11 28思茅松、黑松、云南松 25 10 21馬尾松、杉木 25 10 20金錢松 25 16 25柳杉 25 14 25水杉 25 9 16木麻黃 30 8 15 重量法芽法， 每晝夜光照 8小時烏柏 2030 10 30 除去蠟層，每晝夜光照 8 小時杜仲 23 7 12 在胚根一端將外皮輕劃一刀，室溫水浸 24小時香椿 25 8 12 室溫水浸種 24小時陽思樹 25 7 21100C水浸種2分種桑樹 30 8 15

8、重量發芽法，每晝夜光照 8小時檸檬桉 25 5 11 重量發芽法隆緣桉 25 5 9 重量發芽法蘭桉 2030 5 14 重量發芽法： 每晝夜光照 8小時刺槐 2030 5 10 始溫80C水浸24小時剩余 硬粒再用始溫80C浸24小時每晝夜光照8小時楊屬 2030 3 6 重量發芽法木荷 25 7 30 正常發芽粒：生出正常胚根，且其長度大于該 種粒一半的稱為正常發芽粒， 對、柳、桉等細 粒種子，胚根的長度應不少于該種粒的長度。竹類種子正常發芽粒的幼根應至少同該種粒等長且幼芽的長度超過該種粒長度的二分之一。苦楝、柚木等復粒種子，其中只要有一粒 種子正常發芽即可作為正常發芽數。符合定義 的正常

9、發芽粒用小鑷子取出。異狀發芽粒：指胚根短而生長遲滯；胚根呈負 向地性；胚根萌發異常纖弱； 胚根腐壞；胚根 發自珠孔以外的部位；種殼曝裂或脫落；胚根 拳曲；子葉先出；竹類種子有根無芽、有芽無 根或根短而生長遲滯。有時需將難于判斷的發 芽粒特別提出另外培養，以便確定是否為異狀 發芽。腐爛粒：內含物腐敗成膠狀的無生命種子稱腐 爛粒，應及時提出并在表格中記述， 但不能把 感染霉菌的種子混同為腐爛粒。未發芽粒：每次剔除發芽粒，異狀發芽粒和腐 爛粒之后將余下的未發芽粒重新排放整齊，并點數，以便及時核查，避免差錯。5.4.4到達發芽試驗終止日期后， 分組用切開法 對尚未發芽的種粒進行補充鑒定， 分別歸成以

10、下幾類記入附表。a. 新鮮健康粒；b. 腐爛粒；c. 空粒；d .澀粒（多見天杉木、柳杉）。5.5計算發芽結果 發芽測定結束， 并對尚未發芽的種子用切開法 作了鑒定以后，進行以下各項計算記入附表。 5.5.1發芽率（實驗室發芽率、技術發芽率）式中： n 在規定條件下，規定期內的正常 發芽粒數；N 供試種子數。發芽率計算到小數點后一位，以下四舍五入。表 5-2 發芽百分率的最大容許差距，用以決定是否要重做測定，只考慮隨機取樣的變異平均發芽百分率 最大容許差距99 2 598 3 697 4 896 5 9956 1093-947-81091-929-101189-9011-121287-8813

11、-141384-8615-171481-8318-201578-8021-231673-7724-281767-7229-341856-6635-451951-5546-5020發芽率按組計算，然后計算四組的算術平均值。平均值不帶小數，組間的允許誤差表 5.2如果沒有超過容許誤差， 測定結果可以認為是正確的，即以各組的平均百分數作為本次測定結果。如果超過容許的誤差范圍， 則認為測定結果不 正確，需進行第二次測定。 第二次測定 （也以 與上次同時做） 的結果和第一次測定結果之差 附合規定時， 則用兩次測定的平均數作為發芽 率，填入檢驗證。 檢查的方法是規定計算兩次 的平均數，并在表 5.3中查出

12、最大容許差距， 如？次的結果相差不超過表 5.3所規定的容許 差距，則測定是符合的。 如超過容許誤差， 則 應再測定。表 5.3 判斷兩次測定是否符合的容許差距只 考慮隨機取樣的變異 平均發芽百分率 最大容許差距 98-99 2-3 2 95-97 4-6 3 91-94 7-10 4 85-90 11-16 5 77-84 17-24 6 60-76 25-41 7 51-59 42-50 8 5.5.2發芽勢 在規定時間（見表 5.1，一般是發芽達到高峰 以前）內正常發芽的種子的種子數占供試種子 數百分比，稱為發芽勢。發芽勢也是分組計算， 然后求四組之間的平均值。發芽勢計算到小數點后一位， 計算時容許的誤差為計算發芽率時所容許的 1.5倍。5.5.3絕對發芽率供試種子中飲滿種子的發芽率稱為絕對發芽式中： n 正常發芽粒數；N 供試種子數a 供試種子的空粒種子數和澀粒數。5.5.4平均發芽時間平均發芽時間是指供試種子發芽所需的平均天數。平均發芽時間的計算如下：式中： D 種子置床以后的天數，以置床之日