1、藥物血漿半衰期得測定實驗報告【實驗目得】掌握藥物半衰期得測定方法【實驗原理】藥物消除半衰期就是血漿藥物濃度下降一半所需要得 時間。其長短可反映體內藥物消除速度，根據半衰期可確定 給藥間隔時間。按一級動力學消除得藥物，其血漿半衰期就 是一個固定得值，不受藥物初始濃度與給藥劑量得影響，僅 取決于1值（一級動力學得消除速率常數）得大小?；前房Χ福⊿D）得測定原理：磺胺類藥物為氨基苯類化 合物，在酸性溶液中可與亞硝酸鈉起重氮反應生成重氮鹽， 此鹽在堿性溶液中與麝香草酚溶液起偶聯反應形成橙紅色 偶氮化合物，將該化合物在525nm波長下比色，其光密度與 磺胺類藥物得濃度成正比（朗伯比爾定律）?！緦嶒瀸ο蟆?/p>

2、家兔。體重1、52、5kg?！緦嶒炘噭?0%磺胺喀陡鈉，肝素，7、5%三氯醋酸，0、5%麝香草 酚，0、5%亞硝酸鈉，蒸儲水。【實驗器材】離心機，分光光度計，離心管，試管，注射器，移液管,吸球，燒杯，玻璃棒?！緦嶒灧椒ā?1)取藥前血取家兔1只稱重，0、5%肝素生理鹽水潤濕注射器與抗 凝瓶，由耳緣靜脈取藥前血2ml (空白對照)于抗凝瓶內。給藥由一側耳緣靜脈注射 10%磺胺喀陡鈉溶液3ml/kg (藥物 濃度為200mg/10ml)準確記錄給藥結束時間。(3)取藥后血分別于給藥后5min與35min ,取另一側耳緣靜脈血各 2ml分別置于抗凝瓶內(每次取血后，洗凈注射器并用肝素 生理鹽水濕潤

3、備用)。準確記錄實際采血時間。(4)測定血液樣本SD濃度3次血液樣本各準確吸取 0、2ml,分別加至編號得含 7、5%三氯酉I酸2、8ml離心管中，混勻。3000r/min，離心10min。準確吸取離心管各管上清液1、5ml,分別至相應編號得試管中。各管分別加入 0、5%亞硝酸鈉溶液0、5ml,充分混勻；再加入0、5%麝香草酚溶液1ml,混勻。以給藥前得空白管作參比，使用分光光度計在525nm波長處測定各管光密度值，按下列公式計算血中SD濃度。樣品上八“、，一 /1 rm X 1000 血中SD濃度(Kg/ml) =d標注品半衰期得計算0、6931/2= .勺二2、303 x斜率斜率=(log

4、 G - log c2)/r代入上述公式：上0. 301tV2 = (10gCi_|0gC2)/T公式甲T為給藥后兩次取血得間隔時間，g、Q分別為給藥后兩次取血得血漿藥物濃度。C(6)計算零時濃度()CQ = x log - 1(0、301 x計算表觀分布容積(與匕=D。計算本次實驗得半衰期、預期零時濃度及表觀分布容積【注意事項】1、采血量要準確。采血時可用食指輕彈兔耳根部，使兔耳 充血后有助于家兔耳緣靜脈取血。若耳緣靜脈采血不暢， 可用刀片劃破耳緣靜脈采血或心臟取血。若未能及時采血，須以實際采血間隔時間代入公式計算。每次采血應避免采血器械交叉污染。2、離心管及試管要注意標記編號，以免實驗操作

5、中混淆。3、血液樣本SD濃度測定時，注意所加溶液得正確順序。【思考題】測定藥物血漿半衰期有何臨床意義?原始數據體重：2、7kg 給藥：8、1ml給藥結束時間：15: 34第一次取血結束時間：15: 52第二次取血結束時間：16: 44% 18min,以 70、7min, T=52、7min實驗室結果5min35min10、5450、45220、3270、27030、7530、46040、5900、32850、8220、92460、9200、71970、5820、41380、9130、784本組實驗數據為第8組數據，實驗數據處理如下：0、301231、5min1/2 - (log 913-log

6、 784)/52. 7-1/18 Cn = 913 x log 0. 301 x）I231、5，963、3g/miV.=6 60/963、5=0、062l/kg思考與討論：實驗過程中，存在一些因素使藥物濃度降低，進而影響 半衰期大小，這些因素可能就是：1 .加三氯醋酸過程中未立即搖勻，由現凝血塊，血液樣本中少量藥物可能與蛋白結合被沉淀。2 .給藥過程中，有少許藥物流落未注入耳緣靜脈。3 .注射器取血、釋血過程中殘留少許全血于器壁。止匕外，采血過程中，2次采血時長（18min, 52、7min） 均超過規定時長（5min , 35min ）血藥濃度會因藥物代謝得 變化而產生較大誤差，再者，在吸取上清液得過程中，不慎 吸入少量沉淀物，沉淀雜質影響藥物濃度測量。本組藥物SD濃度值變動不大，可能就是比色皿里得溶 液混合不均勻，或就是受殘余藥物得影響，也可能就是從吸 取上清液至比色得過程中，上清液浸于酸性、堿性溶液得時 間較短、混合