1、.檢測方法解釋免疫反應中形成三聯吡啶釕標記抗體-抗原 -抗體或者標記抗原-抗電化學發光法ECLI體復合物，通過生物素-鏈霉素結合至微粒體上并轉移至電極處，Electro-Chemiluminescence附加于電極的電壓使三聯吡啶釕產生化學發光，強度與樣本中的Immunoassay待測抗原濃度成正比或反比。樣本中的酶催化底物反應生成有色產物，引起吸光度變化，單位速率法Rate method時間內的吸光度變化與酶含量呈正比。葡萄糖氧化酶能將葡萄糖氧化成葡萄糖酸和過氧化氫。在色原性葡萄糖氧化酶法 GOD Glucose oxidase氧受體 (如聯大茴香胺， 4氨基安替比林偶聯酚 )的存在下，過氧

2、method化物酶催化過氧化氫，氧化色素原，生成紅色化合物。其色澤深淺在一定范圍內與葡萄糖濃度成正比。化學發光法 Chemiluminescent免疫反應中形成的抗原抗體復合物包被于固相載體表面，其上標immunometeic assay記的堿性磷酸酶催化底物反應產生化學發光在一定量的抗體中分別加入遞增量的抗原，經一定時間后形成抗免疫比濁法 Immunonephelometry原抗體復合物，用濁度計測量反應液體的濁度，并由此推算樣品中的抗原含量。依賴于特定的化學反應及其計量關系來對物質進行分析的方法，化學法 Chemical method of analysis主要包括重量分析法和滴定分析法，

3、以及試樣的處理和一些分離、富集、掩蔽等化學手段。放射性同位素標記的抗原 （簡稱“標記抗原”） 和非標記抗原 （標放射免疫法 RIA Radioimmunoassay準抗原或待測抗原）同時與數量有限的特異性抗體之間發生競爭性結合（抗原抗體反應） 。反應后分離并測量放射性而求得未標記抗原的量。酶聯免疫吸附法 ELISA Enzyme-linked酶分子與抗抗體分子共價結合，滴加底物后，底物可在酶作用下immunosorbent assay出現顏色反應。間接免疫熒光法 IFL Indirect以熒光素為標記物測定血清中抗體的免疫測定技術。immunofluorescence高效液相色譜法 HPLC

4、High efficiency樣本各組分由于性質不同，在色譜住中的保留時間也不相同。在特定的壓力和流動相條件下， 各組分會在各自對應的時間被洗脫。liquid chromatography檢測特定時間的洗脫物，就可以得到目標物的量。流式細胞術 FCM Flow Cytometry主要是測量群體中單個細胞經適當染色后其成分所發出的散射光精品.和熒光，經染色的細胞在懸濁液中以單形流過高強度光源的焦點，當每個細胞經過焦點時，發出一束散射光或熒光。它們經過過濾及光鏡系統收集到達一個光電檢測器（光電倍增管或一個固態裝置），光檢測器把散射光定量轉化成電信號，經數字轉換器進行數字化后而成整數，然后進行電子存

5、儲，以后數據可以調出顯示和進行分析。精品.免疫散射比濁法 Immunonephelometric樣本中的抗原與包被珠上的抗體反應形成大分子的抗原抗體復合assay物，檢測光照射時被折射，引起特定角度的折射光強度改變。斑點法抗原等蛋白樣品經過 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳，轉移到固相載體免疫印跡法 Western blot（例如硝酸纖維素薄膜）上，與對應的抗體起免疫反應，再與酶或同位素標記的第二抗體起反應，經過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達的蛋白成分。熒光酶免法 FEIA Fluor euzymelinkedimmunosorbent assay以熒光物質標記的抗體進行抗原

6、檢測的技術。PCR-反向點雜交 PCR-Reverse dot blot先將帶用的探針分別點到硝酸纖維素膜或尼龍膜上，再將待測的DNA 樣本與之雜交，待測樣本與具有同源序列的探針結合，再經hybridization相應的反應顯出雜交信號。免疫凝集法 Immune agglutination特異性的抗原與相應抗體反應，出現肉眼可見的凝集顆粒。實時熒光 PCR 法 Real-time fluorescent在 PCR 反應體系中加入熒光基因，利用熒光信號積累實時檢測整PCR個 PCR 過程。免疫層析法 Immunochromatography將單克隆技術和免疫色譜分離技術結合起來的一種免疫學診斷方

7、法。將大量探針分子固定于支持物上后與標記的DNA 樣品分子進行生物芯片法 Bio-chip Detection雜交，通過檢測每個探針分子的雜交信號強度進而獲取樣品分子的數量和序列信息。利用顯微鏡對人體的排泄物、分泌物、脫落細胞和人體組織等進鏡檢法Microscopic examination行分析判斷，來診斷人體疾病的方法。本 -周氏蛋白在一定pH 條件下加熱至 40-60 時有沉淀發生，溫度熱沉淀反應法Heat test method升高至100 時，沉淀消失，再冷卻時又可重新沉淀。在酸性環境中， 尿中含有高鐵離子 （Fe3+ ）時可與亞鐵氰化物作用，羅斯法Rous method產生藍色的亞

8、鐵氰化鐵沉淀。精品.利用酶催化一系列生物化學反應，最終產生可用現有檢測方法測酶法Enzymatic analysis定的物質的技術。將染色體標本用堿、胰蛋白酶或其他鹽溶液處理后，再用Giemsa染色體 G 帶分析 G Banding染液染色，在普通顯微鏡下，可見深淺相間的帶紋，通過條紋來識別染色體的異常。R 帶所顯示之深淺帶紋區域正好與G 帶之帶紋相反。在G 帶染色染色體 R 帶分析 R Banding體的兩末端都不顯示深染，而在R 帶中則被染色，因此R 帶有利測定染色體長度以及末端區域結構的變化。在 DNA 聚合酶催化下，以母鏈DNA 為模板，以特定引物為起始聚合酶鏈式反應PCR Polym

9、erase chain點，通過變性、退火、延伸等步驟，體外復制出與母鏈模板DNAreaction互補的子鏈 DNA 過程。是一項 DNA體外合成放大技術，能快速的體外擴增任何目的DNA 。原子吸收法Atomic absorption光源輻射出的待測元素特征譜線通過樣品蒸汽，被待測元素基態spectrometry原子吸收，由發射光譜減弱的程度，求得樣品中待測原子的含量。雙縮脲在堿性溶液中與二價銅離子結合形成紫紅色絡合物，這樣雙縮脲法 Biuret reaction的呈色反應，稱之為雙縮脲反應。因為蛋白質含有大量彼此相連的肽鍵（ -CO-NH-) ，可在相同條件下發生與雙縮脲相似的反應，生成紫紅色

10、的絡合物。繼而根據吸光度變化，測得蛋白質含量。血清白蛋白在 pH 4.2的緩沖液中帶正電荷，在有非離子型表面活溴甲酚綠法 Bromocresol green staining性劑存在時，可與帶負電荷的染料溴甲酚綠（Bromocresol green，BCG）結合形成藍綠色化合物復合物，其顏色深淺與白蛋白成正比。計算法 Calculation method根據先前檢測獲得的數據，經過數學計算獲得目標數值。在 pH 3 附近，表面活性劑和釩酸作用于血清TBil ，使之氧化成膽礬酸鹽氧化法 Vanadilcm-acid oxidalion綠素，使膽紅素所特有的黃色減少，由此測定吸光度的變化求出met

11、hod血清中總膽紅素的濃度。當試劑中缺少表面活性劑時，釩酸只作用于血清中結合膽紅素，此時測定吸光度下降值求出血清中結合膽紅素的濃度。在 NAD 存在下，各種膽汁酸C3上 羥基脫氫生成羰基，NAD 被循環酶法 Enzymatic cycling assay還原為 NADH 。在黃素酶的存在下， NADH氧化為 NAD ，而共存的碘化硝基四氮唑 （INT ）還原為紫紅色甲臢。 甲臢的生成量與血清中總膽汁酸含量成正比。精品.乳酸脫氫酶催化的反應乳酸丙酮酸（ L P，）伴有還原輔酶LD-L 法（NA D H ）生成，導致吸光度變化。據此變化可以測得乳酸脫氫酶活性。血清中的膽固醇酯（CE）被膽固醇酯水解

12、酶（CEH ）水解成游離膽固醇（ CHOL ），后者被膽固醇氧化酶（CHOD ）氧化成4膽CHOD-PAP 法甾烯酮并產生過氧化氫，再經過氧化物酶（POD ）催化 4氨基安替比林與酚（三者合稱PAP），生成紅色醌亞胺色素（Trinder）。吸光度與標本中TC 含量成正比。用高效的微生物脂蛋白脂肪酶（LPL ）使血清中TG水解成甘油與脂肪酸，將生成的甘油用甘油激酶及三磷酸腺苷磷酸化，以磷GPO PAP 法酸甘油氧化酶（GPO ）氧化 3磷酸甘油（ G 3 P），然后以過氧化物酶（ POD ）、4氨基比林（ 4 AAp ） 與 4氯酚（三者合稱 PAP）顯色，測定所生成的H2O2 ，故本法簡稱GP

13、O PAP 法。勻相測定法DGKC 法德國臨床化學學會(DGKC) 推薦的方法。離子選擇電極法Ion selective electrode利用特異的固態膜電極對標本水相中活化離子產生選擇性響應，method根據產生的電位信號測定含量。偶氮砷法Arsenazo Photometric 偶氮砷可與多種化合物形成有顏色的絡合物，且吸光度與目標Method化合物的含量成正比。利用葡萄糖的還原性，將堿性銅試劑中的二價銅(Cu2+ )還原成一價磷鉬酸法Folin-Wu method銅(Cu+ )，然后 Cu+可使磷鉬酸還原呈藍色，其藍色的深度與血濾液中葡萄糖的濃度成正比，經紫外比色可測定含量。在堿性條件

14、下，鎂離子和二甲苯胺藍形成紫色絡和物。加入二甲苯胺蘭比色法Xylidyl blueGEDTA和鈣形成絡和物， 使本反應可特異監測鎂。紫色深淺和鎂濃度呈正比。利用脲酶催化尿素水解生成銨鹽，銨鹽可用納氏試劑直接顯色、脲酶法urease method酚-次氯酸鹽顯色或酶偶聯反應顯色。尿、血清中的肌酐與苦味酸鹽作用，生成黃紅色的苦味酸肌酐復苦味酸法Jaffé reaction-rate method合物。根據吸光度測定指標成分含量。精品.-N乙酰氨基葡萄糖苷酶可使對硝基酚-N-乙酰 -D 氨基葡萄糖對硝基酚比色法p-Nitrophenol水解，釋放出游離的對硝基酚，在堿性溶液中顯色，其顏色深

15、淺colorimetric assay與酶活力有關。電泳法 Electrophoresis根據帶電粒子在電場中定向運動，可將可溶性被測物的各個蛋白進行分離，對分離后的凝膠進行染色掃面分析。血細胞分析儀對血細胞的計數，是用電子學的方法把細胞數目和血常規自動分析Blood routine analysis其他信息，以數碼管、打印卡片、粒度分布直方圖或散點圖的方式顯示出來。干化學法 Dry chemistry method除了被分析物以外的反應組分均附著于紙質載體上，加入被分析物后發生反應并顯色，可通過肉眼或儀器進行比色。免疫膠體金法ICG Immune colloidal是以膠體金作為作為示蹤標志

16、物應用于抗原抗體檢測的一種免疫gold technique標記技術。以微孔膜為固相載體，其上固定有已知的特異性抗原或抗體，將免疫滲濾試驗IFA Immunofiltration其裝入特殊的滲濾裝置中。加入的膠體金標記的抗體 (抗原 )也在滲濾中與已結合在膜上的抗原(抗體 )相結合。因膠體金本身呈紅色，assay陽性反應即在膜中央顯示紅色斑點，陰性反應則不會出現這種紅色斑點。將膠體金標記的抗體先固定于硝酸纖維膜的某一區帶，當該干燥的硝酸纖維素膜一端浸入樣品后，由于毛細管作用，樣品將沿著免疫層析試驗ICA該膜向前移動，當移動至固定有抗體的區域時，樣品中相應的抗Immunochromatograph

17、ic assay,原即與該抗體發生特異性結合。若用免疫膠體金可使該區域顯示一定的顏色，從而實現特異性的免疫診斷。利用來源相同的蛋白質和堿性（或酸性）氨基酸含量大體相同這一特點，加入過量的酸性（或堿性）染料，使其和蛋白質形成不染料結合終點法Dye-binding method溶性鹽而沉淀析出，以分光光度計測定反應前后溶液和透光度，然后根據計算出來的結合染料量求得蛋白質含量。試管法Tube method在試管中完成完成對標本中目標成分含量的一類方法。在微柱凝膠管內的反應中，紅細胞和相應抗體結合后，形成紅細微柱凝膠免疫法MGIA Micro-column胞凝集團塊。在一定的離心力作用下，未結合抗體的

18、紅細胞沉降gel immunoassay,至凝膠管底，而形成凝集團塊的則將被凝膠截留在表面或膠中。精品.魏氏法 Westergren將一定量的抗凝全血灌注于特制的血沉管中，直立于血沉架上1h后讀取紅細胞下沉后所暴露出的血漿段高度。乙醚萃取法 Extraction利用溶質在互不相溶的溶劑里溶解度的不同，用乙醚將目標成分從樣品中提取出來的操作方法。將 DNA( 或 RNA) 探針用特殊的核苷酸分子標記，然后將探針直接熒光原位雜交 FISH Fluorescence in situ雜交到染色體或 DNA 纖維切片上，再用與熒光素分子偶聯的單克hybridization隆抗體與探針分子特異結合， 檢測

19、 DNA 序列在染色體或 DNA纖維切片上的定性、定位、相對定量分析。采集注意事項1、正確的采集標本是保證檢驗質量的基礎。要注意以下問題：1) 避免干擾物污染，特別是定量分析標本；2) 標本采集部位和方法要正確；3) 標本標識一定要清晰無誤；4) 無人為的溶血和混濁因素： 如收集標本用力震蕩或用玻璃棒及木棍攪拌會導致溶血；餐后采血會出現脂血而致血清、血漿混濁。5) 合理使用抗凝劑及防腐劑；6) 收集區溫度最好不超過20 ；7) 微生物檢驗標本采集嚴格無菌概念；8) 標本采集后要盡快送至實驗室。2、標本采集時間：1) 空腹標本：一般指空腹 8h 后采集的標本。清晨空腹血液標本常用于臨床生化定量測定，受飲食、體力活動、生理活動等的影響較小，易于發現和觀察病理情況，而且重復性較好。2) 隨時或急診標本：指無時間限制或無法規定時間而必須采集的標本，被檢者一般無法進行準備。 隨時或急診標本主要用于體內代謝比較穩定以及受體內因素干擾少的物質的檢查，或者急診、搶救病人必須做的檢查。3) 指定時間標本：即指定采集時間的標本，根據不同的檢測要求有不同的指定時間，如24h 尿蛋白定量、葡萄糖耐量試驗、內分泌腺的興奮或抑制試驗、腎臟