1、除菌過(guò)濾器選擇隨著藥品(特別是無(wú)菌制劑)的安全性受到越來(lái)越廣泛的關(guān)注，無(wú)菌制劑的生產(chǎn)過(guò)程也受到藥品監(jiān)管機(jī)構(gòu)越來(lái)越嚴(yán)格的管理，無(wú)菌制劑的滅菌、無(wú)菌操作及除菌過(guò)濾等關(guān)鍵生產(chǎn)步驟被逐漸放大置于最大強(qiáng)度和頻度的監(jiān)管中，而這確實(shí)也是無(wú)菌制劑的關(guān)鍵控制點(diǎn)。筆者所在單位有一條小容量注射劑流水線，生產(chǎn)產(chǎn)品為非最終滅菌無(wú)菌制劑，主要以除菌過(guò)濾和無(wú)菌操作保證再輔之以最終100 水浴滅菌相結(jié)合的方式來(lái)達(dá)到無(wú)菌控制要求。本文通過(guò)對(duì)除菌過(guò)濾器的選擇和相關(guān)關(guān)鍵控制環(huán)節(jié)的無(wú)菌質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)分析，做出了較大的技術(shù)和管理改進(jìn)，降低了小容量注射劑的無(wú)菌質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)。1      

2、    除菌過(guò)濾材料的概述目前，用于過(guò)濾器常用的主要過(guò)濾材料大致有：(1)混合纖維素酯，常用來(lái)制成圓形的單片平板濾膜，用于液體和氣體的精過(guò)濾；(2)聚丙烯(PP)，做成折疊式，常用于筒式過(guò)濾器，有較大的孔徑，其具有親水性，屬粗過(guò)濾材料；(3)聚偏二氟乙烯(PVDF)，屬精過(guò)濾材料，耐熱和耐化學(xué)穩(wěn)定，蒸汽滅菌承受性良好，可制成親水性濾膜，較廣泛應(yīng)用于制藥工業(yè)無(wú)菌制劑用水及注射用水的過(guò)濾；(4)聚醚砜(PES)，做成折疊式，常用于筒式過(guò)濾器，耐溫耐水解性能好，親水性材料，用于精度較高的溶液的精過(guò)濾；(5)尼龍，做成折疊式，常用于筒式過(guò)濾器，親水性材料，常用作液體的精過(guò)

3、濾；(6)聚四氟乙烯(PTFE)，做成折疊式，常用于筒式過(guò)濾器，疏水性材料，其是使用相當(dāng)廣泛的一種材料，耐熱耐化學(xué)穩(wěn)定，常用于水、無(wú)機(jī)溶劑及空氣的精過(guò)濾。另外，過(guò)濾材料按與水的關(guān)系分為親水性（水可浸潤(rùn)的）和疏水性（水不浸潤(rùn)）兩種。親水性的過(guò)濾材料主要應(yīng)用在水或水/有機(jī)溶液混合的過(guò)濾和除菌過(guò)濾；疏水性過(guò)濾材料是通過(guò)水被截流或“引導(dǎo)”進(jìn)入濾膜，主要應(yīng)用在溶劑、酸、堿和化學(xué)品過(guò)濾，罐/設(shè)備呼吸器,工藝用氣,發(fā)酵進(jìn)氣/排氣過(guò)濾。 2          除菌過(guò)濾器的選擇在小容量注射劑的生產(chǎn)中，利用細(xì)菌不能通過(guò)致密小

4、孔濾材的原理，過(guò)濾除去工藝過(guò)程中使用的氣體或液體中的微生物。2.1 除菌過(guò)濾器的孔徑選擇配制好的藥液需要使用適當(dāng)孔徑的過(guò)濾器進(jìn)行過(guò)濾，以去除藥液中的雜質(zhì)和細(xì)菌。通常的藥液過(guò)濾采用兩級(jí)以上不同孔徑的過(guò)濾器串聯(lián)過(guò)濾。在實(shí)際生產(chǎn)過(guò)程中，通常采用不同孔徑的濾器對(duì)藥液分級(jí)過(guò)濾，最后通過(guò)一個(gè)孔徑為0.22 m的微孔過(guò)濾器對(duì)藥液過(guò)濾除菌。藥液過(guò)濾時(shí)，要特別注意確認(rèn)除菌過(guò)濾器的孔徑及其在生產(chǎn)過(guò)程中的完整性，即除菌過(guò)濾器濾膜要進(jìn)行氣泡點(diǎn)試驗(yàn)，試驗(yàn)合格后方可使用。當(dāng)藥液配制系統(tǒng)使用的方法是一邊過(guò)濾一邊灌裝時(shí)，這種系統(tǒng)則應(yīng)該使用兩個(gè)除菌過(guò)濾器串聯(lián)使用，以保證即便是過(guò)濾灌裝過(guò)程中出現(xiàn)一個(gè)過(guò)濾器濾膜損壞，也不

5、致影響濾液的無(wú)菌性。2.2 過(guò)濾材料除菌過(guò)濾材料不得對(duì)被濾過(guò)成分有吸附作用，也不能釋放物質(zhì)，不得有纖維脫落。對(duì)小容量注射劑除菌過(guò)濾應(yīng)選材親水性，且能高精度過(guò)濾。2.3  0.22m除菌過(guò)濾器的特殊要求（1）過(guò)濾器濾膜和結(jié)構(gòu)材料，要求與制品藥液具有良好的相溶適應(yīng)性；（2）過(guò)濾器能夠通過(guò)泡點(diǎn)試驗(yàn)證明其孔徑的大小和濾器的完整性；(3)濾材應(yīng)經(jīng)過(guò)恰當(dāng)而有效的細(xì)菌挑戰(zhàn)試驗(yàn)，即生物性質(zhì)應(yīng)確認(rèn)（微生物截留試驗(yàn)）:要求在實(shí)際藥液而非水的生產(chǎn)條件下，使用缺陷性假單胞菌（菌種ATCC 19146，缺陷性假單胞菌的尺寸：0.68 µm×0.31 µm）驗(yàn)證對(duì)微生物截

6、留性能（Brevundimonas diminuta）；(4)濾材應(yīng)能夠耐受121 的蒸汽滅菌。2.4 過(guò)濾效率過(guò)濾過(guò)程中的無(wú)菌保證程度，與過(guò)濾液體的初始生物負(fù)荷及過(guò)濾器的對(duì)數(shù)下降值LRV有關(guān)。LRV用于表示過(guò)濾器的過(guò)濾除菌效率，對(duì)0.22 m的過(guò)濾器而言，要求每1 cm2有效過(guò)濾面積的過(guò)濾除菌效率LRV值應(yīng)7。因此過(guò)濾除菌時(shí)，被過(guò)濾產(chǎn)品總的污染量應(yīng)控制在規(guī)定的限度內(nèi)。為保證過(guò)濾除菌效果，可使用兩個(gè)過(guò)濾器串連過(guò)濾。2.5 除菌過(guò)濾器的使用要求在除菌過(guò)濾中，一般無(wú)法對(duì)全過(guò)程中過(guò)濾器的關(guān)鍵參數(shù)（濾膜孔徑的大小及分布，濾膜的完整性及LRV）進(jìn)行監(jiān)控。因此，在每一次過(guò)濾除菌前后均應(yīng)

7、作濾器的完整性試驗(yàn)，即氣泡點(diǎn)試驗(yàn)或壓力維持試驗(yàn)或氣體擴(kuò)散流量試驗(yàn)。確認(rèn)濾膜在除菌過(guò)濾過(guò)程中的有效性和完整性。一般情況下，除菌過(guò)濾器的使用時(shí)間不應(yīng)超過(guò)一個(gè)工作日。濾器和濾膜在使用前應(yīng)進(jìn)行潔凈處理，并用高壓蒸汽進(jìn)行滅菌或作在線滅菌。更換品種和批次應(yīng)先清洗濾器，再更換濾膜。2.6 除菌過(guò)濾器的選擇通過(guò)上述分析，我們選擇了0.22 µm Millipore的聚偏二氟乙烯(PVDF)和Pall的聚醚砜(PES)及尼龍材料的過(guò)濾器作為料液的備選終端除菌過(guò)濾器。目前，在0.22 µm的除菌過(guò)濾器供應(yīng)商中，以Pall和Millipore兩家最為出色，兩公司均有超過(guò)50年以上的過(guò)濾

8、器經(jīng)營(yíng)和研發(fā)歷史，各有特色，前者的液體用過(guò)濾器主要以聚醚砜(PES)和尼龍為特色，后者則聚偏二氟乙烯(PVDF)為強(qiáng)項(xiàng)。3          除菌過(guò)濾器的完整性測(cè)試為了確保除菌過(guò)濾器的過(guò)濾效果，需要對(duì)過(guò)濾器的使用前和使用后進(jìn)行完整性測(cè)試，以確保其過(guò)濾有效。目前主要的完整性測(cè)試方法有前進(jìn)流、氣泡點(diǎn)和水侵入等測(cè)試方法，其主流測(cè)試儀有Pall的Flowstar和Millipore的Intergritest兩款。隨著98版GMP推行的日漸深入及新的藥品GMP認(rèn)證檢查評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)施，過(guò)濾器的完整性測(cè)試越來(lái)越受到企業(yè)

9、和藥監(jiān)檢查官員的重視，幾乎是逢檢必查，特別是關(guān)鍵工藝和關(guān)鍵控制步驟的過(guò)濾器的完整性測(cè)試已經(jīng)首當(dāng)其沖成為每次各種類型的檢查重點(diǎn)。在上述材料的過(guò)濾器中，混合纖維素酯和聚丙烯(PP)的完整性較難檢測(cè)，一般視作無(wú)法檢測(cè)，故其無(wú)法成為較好的終端除菌過(guò)濾器，存在較大的無(wú)菌質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)。4    從質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)分析角度分析無(wú)菌過(guò)濾與相關(guān)改進(jìn)4.1 小容量注射劑的無(wú)菌質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)分析ICH Q9 質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)管理的基本程序流程圖如圖1所示。根據(jù)ICH Q9 質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)管理的基本程序流程，我們對(duì)小容量注射劑的無(wú)菌質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行了分析。由于該產(chǎn)品為終端0.22 m除菌過(guò)濾器過(guò)濾，并最終100

10、、30 min水浴滅菌的生產(chǎn)工藝特點(diǎn)，其滅菌程序的F0值偏低，  無(wú)法滿足F08，單純的水浴滅菌也無(wú)法達(dá)到滅菌效果，滅菌不徹底。這祥，只有在確保除菌過(guò)濾的效果的基礎(chǔ)上，降低產(chǎn)品滅菌前微生物負(fù)荷，才能結(jié)合100 、30 min水浴滅菌，達(dá)到無(wú)菌質(zhì)量保證。基于此，我們對(duì)實(shí)際生產(chǎn)中滅菌前的主要操作步驟進(jìn)行了風(fēng)險(xiǎn)分析：(1)原材料和內(nèi)包裝料的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。潛在風(fēng)險(xiǎn)：產(chǎn)品滅菌前微生物數(shù)量失控，可導(dǎo)致微生物質(zhì)量缺陷。(2)產(chǎn)品料液配制管路的清潔與滅菌風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。潛在風(fēng)險(xiǎn)：夜間進(jìn)行料液配制管路清潔與滅菌，缺乏有效的監(jiān)測(cè)，實(shí)際操作和滅菌關(guān)鍵參數(shù)無(wú)法保證，滅菌效果無(wú)法保證，可導(dǎo)致產(chǎn)品滅菌前微生物含

11、量失控。(3)料液終端除菌過(guò)濾器的滅菌效果和完整性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。潛在風(fēng)險(xiǎn)：終端除菌過(guò)濾器的滅菌關(guān)鍵參數(shù)的記錄和使用前與使用后的完整性測(cè)試，存在現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)測(cè)的缺陷將導(dǎo)致滅菌前微生物含量失控。(4)無(wú)菌生產(chǎn)環(huán)境和人員造成污染的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。潛在風(fēng)險(xiǎn)：生產(chǎn)環(huán)境失控和操作人員引入造成滅菌前微生物失控。4.2 無(wú)菌過(guò)濾的相關(guān)改進(jìn)根據(jù)以上質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)分析，我們制定了技術(shù)和管理改進(jìn)措施以降低無(wú)菌過(guò)濾質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)，主要如下：(1)采購(gòu)標(biāo)準(zhǔn)控制原輔料微生物限度；使用定點(diǎn)采購(gòu)的內(nèi)包裝，封裝嚴(yán)實(shí)，防止淋濕和昆蟲污染；注射用水65 以上保溫循環(huán)；按照SOP對(duì)總回水口和其他使用點(diǎn)定期檢驗(yàn)微生物和內(nèi)毒素；降低原材料和內(nèi)包裝料的微生

12、物負(fù)荷風(fēng)險(xiǎn)。(2)正確選擇除菌過(guò)濾器，加強(qiáng)完整性測(cè)試和料液配制管路和除菌過(guò)濾器的清潔滅菌在線監(jiān)測(cè)。            其中，選擇0.22 µm Millipore的聚偏二氟乙烯(PVDF)和Pall的聚醚砜(PES)及尼龍材料的過(guò)濾器作為料液的備選終端除菌過(guò)濾器；采用Millipore的Intergritest TM 4作為完整性測(cè)試儀進(jìn)行使用前和使用后完整性測(cè)試，確保完整性良好。            設(shè)計(jì)并制作了符合實(shí)際料液配制管路和終端過(guò)濾器121 、30 min在線滅菌的溫度、壓力、時(shí)間等關(guān)鍵參數(shù)的在線監(jiān)測(cè)記錄儀。并對(duì)滅菌效果進(jìn)行了滅菌效果挑戰(zhàn)，滅菌效果良好，且在線記錄儀的使用很好，使夜間操作的關(guān)鍵參數(shù)得到記錄并受控，降低了夜間操作的風(fēng)險(xiǎn)。(3)每日進(jìn)行潔凈區(qū)沉降菌監(jiān)測(cè)，每月進(jìn)行浮游菌監(jiān)測(cè)，并定期進(jìn)行潔凈區(qū)的大消毒，確保稀配環(huán)境為萬(wàn)級(jí)，灌封為萬(wàn)級(jí)背景下的局部百級(jí)的環(huán)境控制要求。并且每批藥品生產(chǎn)前對(duì)灌封用具進(jìn)行清洗