1、淺談瘧原蟲鏡檢及鑒定方法韓秀麗(河南省新鄉市傳染病醫院453000)【摘要】瘧疾是我國五大寄牛蟲病之一，也是世界六大熱帶病之一，主要分 布在熱帶、亞熱帶各國。我國經過積極開展瘧疾防治工作，現基木己無當地病例， 但近年來四種瘧疾均有輸入病例。2013年3月、2014年7月在我院發熱門診分 別檢出一例輸入性惡性瘧原蟲。通過鏡檢能夠及時發現瘧原蟲。木文簡要講述了 薄血膜和厚血膜的制作方法，并陳述了瘧原蟲類型及瘧原蟲臨床分期，最后瘧原 蟲鏡檢及鑒定需要注意的事項，旨在提高瘧原蟲鏡檢及鑒定水平。【關鍵詞】瘧原蟲 鏡檢 鑒定方法【中圖分類號】r446【文獻標識碼】a【文章編號】2095-1752 (201

2、4) 21-0258-02我國積極開展瘧疾防治工作，雖然取得了很好的成果，但是由于我國的流動 人口較多，隨著出國務工人員的增多，使得許多地方仍存在瘧疾病例。診斷瘧疾 和早期治療瘧疾的意義重大，現結合工作經驗簡述瘧原蟲鏡檢檢測及鑒定的方法。 詳細內容如下：一、血片的制作方法將載玻片從右向左分成6等分，在第1格和第2格貼上編號和標簽，在第3 格的正中央涂圓形厚血膜，第4格前緣至第6格的中部涂舌狀薄血膜。血片如果 作為標木，則需要將薄血膜和厚血膜涂在同張玻片上。發熱病人和門診的血片每 片一個人，涂一個薄血膜和兩個厚血膜，避免血膜脫落對檢查結果造成影響2。1、厚血膜的制作方法用推片的一角刮取約4-5&

3、amp;mu;l的血量，確保載玻片和血滴充分接觸，由里 到外一個方法旋轉多圈，最后回到中心，涂成直徑0.8-lcm的圓形厚血膜。厚血 厚血膜不能出現劃痕，而且薄厚均勻。因為，厚血膜太厚極易脫落，厚血膜太薄 則不能達到檢查要求3。2、薄血膜的制作方法用推片的一端邊緣的中點刮取約1-1.5μl的血量，確保載玻片和血滴充分 接觸，形成25-30°的夾角，待血液向兩側擴展到2厘米左右吋，均勻而迅速 地輕輕向左推出舌狀的薄血膜，需要注意的是，推制的速度不能太快，也不能太 慢，要均勻適中。3、注意的爭項血片制作吋，一定要用清潔的載玻片，手持載玻片的兩側，避免沾上油污, 否則將

4、會影響鏡檢的結果。固定薄血膜時不要將甲醇觸碰到厚血膜。干燥厚血膜 時堅決不能加熱，否則原蟲會變形，在很大程度上影響鏡檢結果。沖洗染液時，用盆接滿水后漂洗，切勿水龍頭下沖洗，以免沖走厚血膜，不要將 染液倒掉后再漂洗，以免染料渣沉著在血膜上。4、制作血片的質量要求吉氏染色后，薄血膜要平整，無皺折和空泡，沒有劃痕，厚血膜不能有脫落， 呈現的顏色是紫蘭色。二、正確的采血時間，提高鏡檢鑒定質量在人體內寄生的瘧原蟲總共有四種，惡性瘧和間日瘧可以混合感染，卵形瘧 和三日瘧比較少見。惡性瘧和間日瘧可以分為間歇期、出汗期、發熱期、發冷期。 瘧原蟲在發熱期和發冷期比較容易檢出。發熱期的瘧原蟲主要是小滋養體，這個

5、時期的原蟲剛剛分裂不久，有很多蟲體，引起極易檢出。發冷期的瘧原蟲基本都 是環狀體，極易檢出。在間歇期進行血檢有利于鑒定和分類瘧原蟲，這個期間的蟲子數量雖然少, 但是蟲子的體積較大，極易識別，因此有利于蟲子種類的鑒別。臨床認為惡性瘧在間歇期不宜進行血檢，主要原因是在這個時期，很多原蟲 進到內臟毛細血管，而外周血蟲體比較少，這個吋候尚未出現配子體，因此血檢 的結果可能是陰性。三、鏡檢分析瘧原蟲鏡檢的順序是先厚血膜后薄血膜厚血膜的紅細胞重疊，血量較多，而且干燥比較慢，導致瘧原蟲皺縮，蟲體 變形，相對薄血膜來說，蟲體和蟲種的鑒別難度較大，但是由于原蟲相對集中, 因此極易發現。鑒別薄血膜的要素是瘧色素，

6、瘧色素能夠區分其他生物和瘧原蟲 的不同。薄血膜的原蟲形態較清晰,而口結構完整，能夠辨別原蟲的形態特征和種類, 但是蟲數較少，極易出現漏檢現象，因此需要注意的問題有很多。首先要查看寄 生的紅細胞的具體變化。惡性瘧在發育期紅細胞中寄存，紅細胞的體積不會變大, 但是滋養體期開始岀現紅色的、粗人的茂氏小點。間日瘧人多在網織紅細胞中寄 存，導致紅細胞的體積變大，滋養體期開始出現紅色的、細微的薛氏小點。其次 要查看環狀體的數目和大小。惡性瘧環狀體比較小，有一個或兩者或兩個以上的 核，體積大概是紅細胞直徑的五分之一，蟲體一般在紅細胞的邊緣寄存，呈現一 種鳥飛狀。間日瘧的環狀體比較大，有一個或者兩個核，體積大

7、概是紅細胞直徑 的三分之一。接著要查看配子體的形態和瘧色素的著色情況和分布情況。惡性瘧 配子體呈現的是臘腸形，瘧色素在核周圍分布，或疏松或密布，呈現棕褐色或者 是黑褐色。間日瘧配子體體積較大，呈現的是圓形，瘧色素的分布較均勻，呈現 的黃綠色或者黃褐色。最后要查看相同血片上各期蟲體的具體分布。惡性瘧在的 配子體和環狀體岀現在外周血片，不容易看到裂殖體和滋養體。間日瘧各期形態 出現在外周血片。假如看見裂殖體和滋養體出現在外周血片，則可以判定為間日 瘧。四、討論病原學診斷和傳統的鏡檢都是診斷瘧疾的重要方法，優點的價格低廉，并且 對設備沒有很高的要求，便于在基層展開。及吋、準確的診斷有利于治療和預防 瘧疾，降低瘧疾的發病率，提高國民的身體素質。參考文獻1 王偉明，金小林，曹俊，楊國靜，周華云,李菊林，顧亞萍,梁幼生，高琪江蘇省瘧疾流行地理信息系統數據庫的建立j中國熱帶醫學” 2014,1(30):214-215.2 劉英杰，李瑩，潘艷艷,朱曉彤，劉軍，單風平,曹雅明.不同毒力瘧原蟲感染早 期根治性治療對免疫記憶形成影響的研究j 微生物學雜志,2013,&10):321321.3 張小萍.ict惡性瘧/間日瘧免疫層析分離測試法對卵形瘧的檢測j