1、獸醫(yī)微生物學(xué)筆記重點(diǎn)串珠反應(yīng) ：在含青霉素0.5u/ml的培養(yǎng)基中，幼齡炭疽桿菌因細(xì)胞壁的肽聚糖合成受到抑制，形成原生質(zhì)體相互連接成串 細(xì)菌特殊結(jié)構(gòu) 莢膜 (capsule)某些細(xì)菌在其細(xì)胞壁外包繞一層黏液性物質(zhì)，用理化方法去除后并不影響細(xì)胞的生命活動(dòng)。1.抗吞噬作用2.抗有害物質(zhì)的損傷作用3.營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的貯存場(chǎng)所與廢物排出之地s 層 某些細(xì)菌的一種特殊的表層結(jié)構(gòu)，完整包裹菌體，由單一的蛋白質(zhì)亞單位組成，排列規(guī)則，呈晶格樣結(jié)構(gòu)1.分子篩和離子通道2.屏障作用，保護(hù)細(xì)菌3.黏附宿主細(xì)胞4.重要的表面抗原鞭毛 (flagellum) 許多細(xì)菌在菌體上附有細(xì)長(zhǎng)并呈波狀彎曲的絲狀物，稱(chēng)為鞭毛，是細(xì)菌的運(yùn)

2、動(dòng)器官。鞭毛是運(yùn)動(dòng)器官。鞭毛有抗原性。與致病性有關(guān)芽胞 (spore) 某些細(xì)菌在一定的環(huán)境條件下，能在菌體內(nèi)部形成一個(gè)圓形或卵圓形小體，是細(xì)菌的休眠形式。芽胞形成后細(xì)菌即失去繁殖能力。產(chǎn)生芽胞的都是革蘭陽(yáng)性菌。菌毛 (filus菌體表面存在著一種比鞭毛更細(xì)、更短而直硬的絲狀物，與細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)無(wú)關(guān)。巴氏桿菌科巴氏桿菌屬（pasteurella) 兩端鈍圓，中央微凸的短桿菌g-菌 抵抗力不強(qiáng)多殺性巴氏桿菌(p.multocida)是本屬中最重要的畜禽致病菌，可引起多種動(dòng)物發(fā)生出血性敗血癥或傳染性肺炎,如豬肺疫 、禽霍亂、兔巴氏桿菌病等,動(dòng)物患病痊愈后，可獲得較強(qiáng)的免疫力，且對(duì)其他血清型具有交叉保護(hù)

3、力在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)貧瘠，血液或血清培養(yǎng)基中生長(zhǎng)良好,不溶血, 瑞氏染色或美藍(lán)染色時(shí)，可見(jiàn)典型的兩極著色血清型:1.菌體抗原 :16個(gè)型，以阿拉伯?dāng)?shù)字表示 2.莢膜抗原 :多糖成分，有6個(gè)型，微生物學(xué)診斷 1.涂片或觸片鏡檢 染色（美藍(lán)或瑞氏），兩極著色2.分離培養(yǎng) 麥康凱瓊脂不生長(zhǎng),血平板不溶血 3.動(dòng)物試驗(yàn) 病料懸液或培養(yǎng)物接種小白鼠,引起小白鼠迅速死亡里氏桿菌屬（riemerella ) 菌體呈桿狀或橢圓形，多為單個(gè)，少數(shù)成雙或短鏈排列。可形成莢膜，無(wú)芽胞，無(wú)鞭毛。 g-菌，兩極著色。鴨疫里氏桿菌（r. anatipestifer）是本屬的代表種,是雛鴨傳染性漿膜炎的病原菌。營(yíng)養(yǎng)要求較高

4、，普通培養(yǎng)基和麥康凱培養(yǎng)基上不生長(zhǎng)，在巧克力或胰蛋白胨大豆瓊脂（tsa）平板上，呈圓形、微突起、表面光滑、奶油狀小菌落。生化試驗(yàn)大多陰性，不發(fā)酵葡萄糖和蔗糖，與多殺性巴氏桿菌相區(qū)別。 血清型 : 21個(gè)型致病性 : 主要感染雛鴨，尤其23周齡者，引起急性或慢性的敗血癥和漿膜炎。 診斷 : 涂片鏡檢（兩極著色）、分離培養(yǎng)（巧克力培養(yǎng)基）、生化試驗(yàn) （不發(fā)酵葡萄糖和蔗糖）放線(xiàn)桿菌屬（actinobacillus ) 小球桿菌，具多形性。新鮮病料呈兩極染色，有莢膜和鞭毛，具運(yùn)動(dòng)性。代表種：胸膜肺炎放線(xiàn)桿菌（a. pleuropneumoniae）豬傳染性胸膜肺炎的病原菌在普通營(yíng)養(yǎng)基不長(zhǎng)，需添加v因子

5、，常用巧克力培養(yǎng)基培養(yǎng)血清型 :本菌分為15個(gè)血清型致病性 ：豬是本菌高度專(zhuān)一性的宿主，寄生在豬肺壞死灶內(nèi)或扁桃 體，較少在鼻腔 毒素是本菌最重要的毒力因子，不同血清型的菌株可產(chǎn)生4種細(xì)胞毒素，名為apx，是一種穿孔毒素嗜血桿菌屬（haemophilus）多為短桿狀，無(wú)鞭毛，無(wú)芽胞，新分離的致病菌株有莢膜。g-菌，兩極著色，抵抗力不強(qiáng)嗜血桿菌 是一群酶系統(tǒng)不完全的革蘭氏陰性桿菌，生長(zhǎng)需要血液中的生長(zhǎng)因子，尤其是x因子和v因子。 培養(yǎng)特性 ：初次分離培養(yǎng)時(shí)供給5%10%co2可促進(jìn)生長(zhǎng),本屬菌生長(zhǎng)需供給x因子和v因子（細(xì)菌呼吸過(guò)程中起遞氫作用的兩種脫氫輔酶），在巧克力平板上生長(zhǎng)較佳。致病性 ：毒

6、力因子包括莢膜、菌毛和內(nèi)毒素等。與獸醫(yī)有關(guān)的嗜血桿菌有：1副豬嗜血桿菌：可引起豬的心肌炎、腹膜炎、胸膜炎及關(guān)節(jié)炎等，常與豬流感病毒聯(lián)合引起豬流感。2副禽嗜血桿菌：可引起雞傳染性鼻炎，導(dǎo)致產(chǎn)蛋量迅速下降。微生物學(xué)診斷 1.顯微鏡檢查 ：兩極著色 2.分離培養(yǎng) ：血平板（生長(zhǎng)不好或不長(zhǎng)）巧克力平板（生長(zhǎng)良好） 3.衛(wèi)星現(xiàn)象：可疑菌落，鮮血平板，再接金葡菌， 培養(yǎng)， 衛(wèi)星現(xiàn)象 4.生化試驗(yàn) 5.血清學(xué)試驗(yàn) 衛(wèi)星現(xiàn)象： 愈靠近金黃色葡萄球菌落生長(zhǎng)的本屬菌菌落愈大，愈遠(yuǎn)的愈小，甚至不見(jiàn)菌落生長(zhǎng)腸桿菌科（enterobacteriaceae)埃希菌屬（escherichia) 革蘭氏陰性小桿菌，散在或成對(duì)

7、，周毛菌，有菌毛。人畜共患病最重要的是大腸埃希菌俗稱(chēng)大腸桿菌（e.coli)培養(yǎng)特性 ：1.普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好，光滑、濕潤(rùn)、半透明、灰白色菌落；2. 麥康凱瓊脂上形成紅色菌落，伊紅美藍(lán)瓊脂上產(chǎn)生黑色帶金屬光澤菌落；3.致病菌株在綿羊血平板上呈型溶血；4.生化特性：糖發(fā)酵試驗(yàn)（發(fā)酵乳糖）和imvic（+-）試驗(yàn)。 h2s陰性抗原 ： 1，菌體抗原（o抗原）：其成分為lps的多糖側(cè)鏈。173種 2，莢膜抗原（k抗原）：其成分多數(shù)為多糖 80種 3， 鞭毛抗原（h抗原）血清型（抗原式）表示方法：o：k：h， 如： o8：k23(l)：h19 病原性大腸桿菌分為5類(lèi)：（1）產(chǎn)腸毒素大腸桿菌（etec

8、）（2）產(chǎn)類(lèi)志賀毒素大腸桿菌（sltec）（3）腸致病性大腸桿菌（epec）（4）尿道致病性大腸桿菌（upec）（5）敗血性大腸桿菌（sepec）（6）禽致病性大腸桿菌（apec)（一） 產(chǎn)腸毒素大腸桿菌（etec） 引起人和動(dòng)物腹瀉，主要毒力因子有兩類(lèi)：1. 黏附素（定居因子）2 腸毒素：分泌到胞外的一種蛋白質(zhì)性毒素。（1）不耐熱腸毒素（heat-labile enterotoxin,lt）對(duì)熱敏感，可轉(zhuǎn)變成類(lèi)毒素，具有a和b亞單位。（2）耐熱腸毒素（heat-stable enterotoxin,st) 耐熱，分子量小，無(wú)免疫原性。（二） 產(chǎn)類(lèi)志賀毒素大腸桿菌（sltec） 引起豬水腫病，

9、有兩類(lèi)毒力因子：1 黏附素f18，有助于細(xì)菌在腸黏膜上皮細(xì) 胞定居和繁殖。 2類(lèi)志賀毒素 vero毒素直接導(dǎo)致該病發(fā)生的主要毒力因子。（三）禽致病性大腸桿菌（apec） 表現(xiàn)為氣囊炎、肺炎、心包炎、肝周炎、腹膜炎、輸卵管炎等，有時(shí)表現(xiàn)為急性敗血癥。檢查方法 ：（一）分離培養(yǎng)：選擇培養(yǎng)基（二）生化試驗(yàn)：糖發(fā)酵、imvic試驗(yàn)、h2s陰性（三糖鐵培養(yǎng)基）（三）血清學(xué)試驗(yàn)：玻片凝集試驗(yàn)鑒定血清型沙門(mén)氏菌屬（salmonella) 與大腸桿菌相似，除雞白痢和雞傷寒沙門(mén)氏菌無(wú)鞭毛不運(yùn)動(dòng)外，其余均以周鞭毛運(yùn)動(dòng)。培養(yǎng)及生化特性：在選擇培養(yǎng)基上因不發(fā)酵乳糖而呈無(wú)色菌落。imvic試驗(yàn)：-+-+；多數(shù)菌株h2s

10、陽(yáng)性。人畜共患病血清型（抗原式） 表示方法： o抗原：第1相h抗原：第2相h抗原, 如： 1，4，5，12：i : 1,2 ; 有vi抗原的，則表示為o抗原： vi抗原：第1相h抗原：第2相h抗原致病性 ： 1專(zhuān)嗜性：如雞白痢、雞傷寒沙門(mén)氏菌2. 偏嗜性：如豬霍亂沙門(mén)氏菌3. 泛嗜性：如腸炎沙門(mén)氏菌診斷 ： （一）分離培養(yǎng)：選擇培養(yǎng)基（二）生化試驗(yàn)：糖發(fā)酵、imvic試驗(yàn)、h2s陽(yáng)性（三糖鐵培養(yǎng)基）。（三）血清學(xué)試驗(yàn)：玻片凝集試驗(yàn)鑒定血清型分枝桿菌屬 人畜和禽類(lèi)慢性傳染病牛分枝桿菌（m. bovis） 細(xì)長(zhǎng)、微彎的桿菌，無(wú)莢膜、芽孢和鞭毛 革蘭氏陽(yáng)性菌,抗酸染色為紅色專(zhuān)性需氧菌，對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求嚴(yán)格

11、，在添加特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基（羅杰二氏培養(yǎng)基）上才能生長(zhǎng)，但生長(zhǎng)緩慢, 對(duì)外界環(huán)境的抵抗力很強(qiáng),耐酸耐堿致病性 主要引起牛結(jié)核病。細(xì)胞內(nèi)寄生。卡介苗（bcg） 即將牛分枝桿菌在含甘油、膽汁、馬鈴薯的培養(yǎng)基中經(jīng)13年230代傳代而獲得的減毒活疫苗株，現(xiàn)廣泛用于預(yù)防接種。微生物學(xué)診斷.涂片鏡檢 ：抗酸染色紅色.分離培養(yǎng) ：強(qiáng)酸或強(qiáng)堿處理后接種羅杰二氏培養(yǎng)基 .細(xì)菌鑒定：培養(yǎng)特性、生化特性.動(dòng)物接種 ：兔有致病性.變態(tài)反應(yīng) ：ppd皮內(nèi)注射法 4mm以上為陽(yáng)性；2-4mm為可疑；2mm以下為陰性。 6.血清學(xué)檢查 : elisa檢測(cè)特異性抗體革蘭氏陽(yáng)性產(chǎn)芽孢桿菌芽胞桿菌屬（bacillus） 需氧炭

12、疽芽胞桿菌（b. anthracis）俗稱(chēng)炭疽桿菌，是引起人類(lèi)、各種家畜和野生動(dòng)物炭疽（anthrax）的病原毒力主要與莢膜和毒素有關(guān) 革蘭氏陽(yáng)性大桿菌 在組織中或含血液的培養(yǎng)基可形成莢膜。芽孢在有氧條件下形成，位于菌體中央，無(wú)鞭毛培養(yǎng)特性 1.需氧菌或兼性厭氧，最適生長(zhǎng)溫度30-37，營(yíng)養(yǎng)要求不高，普通培養(yǎng)基中即能生長(zhǎng)良好。2. 血瓊脂上一般不溶血，但個(gè)別菌株也可輕微溶血。3.液體培養(yǎng)基中呈絮狀沉淀生長(zhǎng)4.明膠穿刺培養(yǎng)，呈倒松樹(shù)狀，表面液化呈漏斗狀5.在含青霉素的培養(yǎng)基中，可形成串珠反應(yīng)，與其它需氧芽孢桿菌區(qū)別。抗原結(jié)構(gòu) （一）結(jié)構(gòu)抗原1.莢膜抗原：多肽，僅見(jiàn)于有毒菌株，與毒力和抗吞噬有關(guān)2

13、.菌體抗原：多糖，與細(xì)菌毒力無(wú)關(guān)3. 芽胞抗原：是芽胞的外膜和皮質(zhì)組成，具有免疫原性微生物學(xué)診斷 1.細(xì)菌學(xué)檢查 （）鏡檢：大桿菌，兩端平截，竹節(jié)狀（）分離培養(yǎng)：用普通瓊脂或血瓊脂（）純培養(yǎng):鏡檢、串珠試驗(yàn)、生化試驗(yàn)（4）動(dòng)物試驗(yàn)：將檢驗(yàn)材料制成懸液或純培養(yǎng)物給小鼠注射，24-36h,小鼠死于敗血癥梭菌屬（clostridium） 多數(shù)嚴(yán)格厭氧 并非梭菌屬的細(xì)菌均為梭狀，如破傷風(fēng)梭菌，芽孢位于菌體頂端，菌體呈鼓槌狀，產(chǎn)生多種外毒素和侵襲性酶，致病性強(qiáng)產(chǎn)氣莢膜梭菌（cl. perfringens）可引起多種嚴(yán)重疾患，局部組織出現(xiàn)壞死、水腫、產(chǎn)氣。n 菌體直桿狀 無(wú)糖培養(yǎng)基上可形成芽胞，多數(shù)菌株可

14、形成莢膜，無(wú)鞭毛 普通培養(yǎng)基上可生 長(zhǎng)，菌落多為圓形、光滑、隆起、灰白色的圓屋頂樣 血平板上，多數(shù)菌株有雙層溶血環(huán)，內(nèi)環(huán)完全溶血，外環(huán)不完全溶血。生化特性，是對(duì)牛乳培養(yǎng)基的“暴烈發(fā)酵”。微生物學(xué)診斷 1. 直接涂片鏡檢：g+大桿菌，并有莢膜2. 分離培養(yǎng)：接種血平板，有雙層溶血環(huán)3.純培養(yǎng)：引起牛奶暴烈發(fā)酵 4. 動(dòng)物試驗(yàn)：小鼠、家兔或鴿5. 腸毒素檢查：取回腸內(nèi)容物加適量滅菌生理鹽水稀釋?zhuān)?jīng)離心沉淀后取上清液分成兩份 ，一份不加熱，一份加熱，分別靜脈注射家兔或小鼠。如有毒素存在，不加熱組動(dòng)物常于數(shù)分鐘至數(shù)小時(shí)內(nèi)死亡，而加熱組動(dòng)物不死亡。破傷風(fēng)梭菌（cl.tetani）引起人畜破傷風(fēng)的病原，本

15、病以骨骼肌發(fā)生強(qiáng)直性痙攣的癥狀為特征 嚴(yán)格厭氧菌致病性 此菌產(chǎn)生兩種毒素：1. 破傷風(fēng)痙攣毒素2. 破傷風(fēng)溶血素革蘭氏陽(yáng)性球菌球 菌 陽(yáng)性：葡萄球菌、鏈球菌、肺炎球菌 陰性：淋球菌、腦膜炎球菌葡萄球菌屬staphylococcus引起化膿性炎癥、敗血癥，食物中毒、毒性休克綜合征等疾病。金黃色葡萄球菌s. aureus無(wú)芽孢和鞭毛，個(gè)別形成莢膜培養(yǎng)及生化特性 1. 普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好2. 血平板上生長(zhǎng)更佳，致病菌株溶血3. 產(chǎn)生金黃色色素4. 高度耐鹽5. 分解葡、乳、麥、蔗糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，致病菌株能分解甘露醇。致病性和毒力因子 毒力因子主要包括酶和毒素1.毒素(alphatoxin) 溶血素

16、（-haemolysin）2.腸毒素(enterotoxin) 可引起急性胃腸炎即嘔吐為主要癥狀的食物中毒。3. 凝固酶(coagulase) 能使含有抗凝劑的人或兔血漿發(fā)生凝集的酶類(lèi)物質(zhì)。4.耐熱核酸酶(thermonuclease) 、纖維蛋白溶酶fibrinolysin)、透明質(zhì)酸酶(hyaluronidase)等利于細(xì)菌擴(kuò)散。5.毒素休克綜合癥毒素1（toxic shock syndrome toxin 1,tsst-1)鑒定 ：純培養(yǎng)物 1 致病性葡萄球菌的鑒定： （1）產(chǎn)生凝固酶和耐熱核酸酶（2）產(chǎn)生金黃色色素，有溶血性；（3）發(fā)酵甘露醇 鏈球菌屬streptococcus 可引起

17、多種動(dòng)物發(fā)病，如牛羊乳房炎，豬的敗血癥等。蘭氏（lancefield)用溫?zé)岬南←}酸浸出c抗原，與特異性血清作沉淀反應(yīng)，將鏈球菌分為20個(gè)血清群（a-v，缺i和j）鏈球菌間，因表面蛋白質(zhì)抗原不同，又分不同型。根據(jù)溶血現(xiàn)象分類(lèi) 型溶血性鏈球菌 菌落周?chē)?-2mm寬的草綠 色溶血環(huán)。多為條件性致病菌。 型溶血性鏈球菌 菌落周?chē)纬梢粋€(gè)2-4mm寬、界限分明、完全透明的無(wú)色的溶血環(huán)。致病力強(qiáng)。 型鏈球菌不產(chǎn)生溶血素，菌落周?chē)鸁o(wú)溶血環(huán)，也稱(chēng)為不溶血性鏈球菌。無(wú)致病性 培養(yǎng)特性 營(yíng)養(yǎng)要求復(fù) 雜，需補(bǔ)充血液、血清、葡萄糖等。在血液瓊脂平板上形成灰白色、表面光滑、邊緣整齊、直徑0.5-0.75mm的細(xì)小菌

18、落。致病性 胞壁脂磷壁酸（lta） m蛋白 一旦病菌大量繁殖則產(chǎn)生鏈球菌溶血素、致熱外毒素 等毒性物質(zhì)，透明質(zhì)酸酶、鏈激酶、dna酶等侵襲性物質(zhì)。 革蘭氏陽(yáng)性無(wú)芽孢桿菌 李氏桿菌屬（listeria）有7個(gè)種，代表種是產(chǎn)單核細(xì)胞李氏桿菌（l. monocytogenes)，引致人和動(dòng)物的李氏桿菌病。短桿狀 ,革蘭氏染色陽(yáng)性。不形成莢膜、無(wú)芽胞，有鞭毛 胞內(nèi)寄生菌培養(yǎng)特性 普通瓊脂平板上可生長(zhǎng)，光滑型、藍(lán)綠色光澤菌落；血清瓊脂培養(yǎng)基上可見(jiàn)其周?chē)M窄的溶血環(huán)；半固體培養(yǎng)基上穿刺培養(yǎng)，沿穿刺線(xiàn)呈云霧狀生長(zhǎng)。致病性 不被宿主細(xì)胞吞噬而不被破壞。產(chǎn)生的李氏桿菌溶血素o（listeriolysin o,

19、llo），與其能在巨噬細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)有關(guān)。可使牛、綿羊、山羊、禽等動(dòng)物發(fā)病，成年牛、羊往往表現(xiàn)為神經(jīng)癥狀的“轉(zhuǎn)圈病”。510的人是無(wú)癥狀健康帶菌者，孕婦感染本菌出現(xiàn)類(lèi)似流感癥狀，并致胎兒流產(chǎn) 。 微生物學(xué)診斷 鏡檢：g+小桿菌 分離培養(yǎng)：藍(lán)綠光澤的菌落 ，溶血 純培養(yǎng)：溶血檢查、運(yùn)動(dòng)性檢查、生化特性鑒定 動(dòng)物試驗(yàn) ：小鼠腹腔注射，剖檢肝臟壞死，分離細(xì)菌 血清學(xué)檢查 ：凝集反應(yīng) 丹毒絲菌屬（erysipelothrix）只有1種，即豬丹毒絲菌（e. rhuriopathiae），是豬丹毒病的病原體，通稱(chēng)豬丹毒桿菌。 無(wú)鞭毛、無(wú)莢膜、不產(chǎn)生芽胞 培養(yǎng)與生化特性 微需氧菌，普通瓊脂上生長(zhǎng)不良，血平板上生

20、長(zhǎng)茂盛 ，灰白色露滴狀小菌落，并形成溶血環(huán)，微生物學(xué)診斷 涂片鏡檢： g+纖細(xì)的小桿菌 分離培養(yǎng)：血平板 細(xì)菌鑒定：培養(yǎng)特性和生化特性 血清學(xué)診斷：凝集試驗(yàn)革蘭氏陰性需氧桿菌布氏桿菌屬（brucella）布氏桿菌又名布魯菌 主要寄居于肝、脾和淋巴組織內(nèi)的單核細(xì)胞中，是胞內(nèi)寄生菌。多單在，不形成芽胞和莢膜 ，無(wú)鞭毛。革蘭氏染色陰性 ，但著色不佳。柯茲羅夫染色法染成紅色，其他菌呈綠色。在培養(yǎng)基中加入少量血液、血清或肝浸液 ，可促進(jìn)生長(zhǎng)，不溶血致病性 主要致病物質(zhì)有內(nèi)毒素、莢膜和透明質(zhì)酸酶病畜主要表現(xiàn)為睪丸炎、附睪炎、乳腺炎、子宮炎等。孕期動(dòng)物對(duì)布氏桿菌最敏感，感染后常引起流產(chǎn)血清學(xué)檢查：用已知的布

21、氏桿菌檢查動(dòng)物的血清抗體 凝集試驗(yàn)（虎紅平板凝集試驗(yàn)）。大動(dòng)物血清凝集價(jià)達(dá)1：100時(shí)陽(yáng)性，1：25可疑；小動(dòng)物1：50為陽(yáng)性，1：25可疑 補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn) 慢性布氏桿菌病診斷。規(guī)定1：10被檢血清阻止溶血在50%以上即陽(yáng)性螺旋體（spirochaeta）二分裂繁殖 主要生物學(xué)特性1.形態(tài)：螺旋狀 ，有些可通過(guò)細(xì)菌濾器或?yàn)V膜。 2.結(jié)構(gòu)：原生質(zhì)柱 、軸鞭毛 、外鞘。3.運(yùn)動(dòng)性：運(yùn)動(dòng)活躍4.繁殖方式：以二分裂法繁殖。5.核酸：核酸兼有rna和dna。6.染色：革蘭氏陰性，但大多數(shù)不易著色。 7.培養(yǎng)特性：多數(shù)需厭氧培養(yǎng)，營(yíng)養(yǎng)要求較高,有些不能用人工培養(yǎng)基培養(yǎng)。 豬痢疾短螺旋體(b.hyodysen

22、teriae) 伯氏疏螺旋體（b. burgdorferi）引起萊姆病（lyme disease）的病原體,此病由硬蜱（ixodes）為傳播媒介，感染人和犬、牛、馬等動(dòng)物，可致關(guān)節(jié)炎等多種疾病。病人出現(xiàn)的第一個(gè)病癥是被蜱叮咬的部位呈圓環(huán)狀疹塊。 支原體（mycoplasma） 支原體又譯作霉形體，是一類(lèi)無(wú)細(xì)胞壁的細(xì)菌，是目前已知能在無(wú)生命的培養(yǎng)基中繁殖的最小微生物具有多形性、可塑性和濾過(guò)性。無(wú)鞭毛，革蘭氏染色呈陰性，著色不良，姬姆薩或瑞氏染色良好，呈淡 紫色。霉形體的細(xì)胞膜具有三層結(jié)構(gòu)，內(nèi)、外層主要是蛋白質(zhì)，中間層主要是脂質(zhì) (固醇含量高）。培養(yǎng)特性 營(yíng)養(yǎng)要求較高，需牛心浸液，酵母膏，輔酶i、

23、氨基酸等。 生長(zhǎng)緩慢，菌落呈“荷包蛋狀”（豬肺炎霉形體除外）引起牛傳染性胸膜肺炎、豬喘氣病、禽敗血霉形體感染等，傳播途徑主要是呼吸道。與細(xì)菌l型的區(qū)別 支原體 l型 遺傳上與細(xì)菌無(wú)關(guān) 與原菌有關(guān)，常可以回復(fù) 細(xì)胞膜含高濃度固醇 細(xì)胞膜不含固醇 在一般培養(yǎng)基中穩(wěn)定 大多需要高滲培養(yǎng) 生長(zhǎng)慢，菌落小 菌落稍大 0.1-0.3mm 0.5-1.0mm 菌落中心深埋于培養(yǎng)基中 菌落生長(zhǎng)于基質(zhì)表面， 不易刮除 易于刮除 液體培養(yǎng)混濁度低 有一定混濁度 立克次體（rickettsia） 介于病毒與細(xì)菌之間 引起人和動(dòng)物立克次體病（如q熱、斑疹傷寒、恙蟲(chóng)病等）生物學(xué)特性 1. 多形性，主要是球桿狀2.大小介

24、于細(xì)菌和病毒之間，多數(shù)不能通過(guò)細(xì)菌濾器。3.革蘭氏陰性,有細(xì)胞壁 4.專(zhuān)性細(xì)胞內(nèi)寄生 5.以二分裂方式繁殖 6.對(duì)理化因素抵抗力不強(qiáng)，尤對(duì)熱敏感 7.主要寄生于節(jié)肢動(dòng)物中，通過(guò)叮咬感染人和動(dòng)物 衣原體（chlamydia）細(xì)胞內(nèi)寄生 引起人和家畜的衣原體病。生物學(xué)特點(diǎn)革蘭氏陰性，圓形或橢圓形 含dna和rna兩種核酸 有由粘肽組成的細(xì)胞壁 細(xì)胞內(nèi)寄生（雞胚或細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物接種） 獨(dú)特的發(fā)育周期，并以二分裂方式繁殖 對(duì)某些抗生素敏感包涵體（inclusion)：是衣原體在細(xì)胞空泡內(nèi)繁殖過(guò)程中所形成的集團(tuán)形態(tài)，內(nèi)含無(wú)數(shù)子代元體和正在分裂的網(wǎng)狀體。沙眼衣原體：人的沙眼 肺炎親衣原體：人的急性呼吸道疾

25、病 鸚鵡熱親衣原體：畜禽肺炎、關(guān)節(jié)炎、流產(chǎn)，也可引起人的肺炎牛羊親衣原體：牛羊關(guān)節(jié)炎、腦脊髓炎、腹瀉真菌 (fungus) 分為酵母菌 霉菌 擔(dān)子菌酵母菌（yeasts)：?jiǎn)渭?xì)胞真核微生物 分無(wú)性繁殖和有性繁殖兩類(lèi)，主要是無(wú)性繁殖。無(wú)性繁殖：包括芽殖、裂殖等，以芽殖為主。有性繁殖：主要是產(chǎn)生子囊孢子霉菌(molds) 絲狀真菌的統(tǒng)稱(chēng)形態(tài)與結(jié)構(gòu) 絲狀菌能長(zhǎng)出菌絲（hypha），有的菌絲上長(zhǎng)出孢子，各絲狀菌長(zhǎng)出的菌絲與孢子形態(tài)不同是鑒別霉菌的重要標(biāo)志。 依功能分：營(yíng)養(yǎng)菌絲氣生菌絲 按分化程度分：無(wú)隔菌絲有隔菌絲孢子(spore) 真菌的繁殖結(jié)構(gòu)一條菌絲上可長(zhǎng)多個(gè)孢子。在環(huán)境條件適宜時(shí)，孢子可發(fā)育成

26、菌絲體。真菌孢子與細(xì)菌芽胞不同。病毒 形體微小，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，僅含有1種核酸dna或rna，復(fù)制為其繁殖方式，嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生，非細(xì)胞形態(tài)微生物病毒的特點(diǎn) 形體微小，缺乏細(xì)胞結(jié)構(gòu)； 只含有一種核酸，dna或rna ； 以自身的核酸為模板進(jìn)行復(fù)制； 缺乏完整的酶和能量系統(tǒng)； 嚴(yán)格的細(xì)胞內(nèi)寄生（利用宿主細(xì)胞的核糖體和轉(zhuǎn)移rna合成病毒的蛋白質(zhì)）；6. 對(duì)干擾素敏感，而抗菌藥物不敏感。病毒與其它微生物的區(qū)別 人工培養(yǎng)基上上的生長(zhǎng)二等分裂 dna和rna 核糖體 對(duì)抗生素的敏感性 對(duì)干擾素的敏感性 細(xì)菌支原體立克次體衣原體病毒 + + + + +含1種 + + + + + 病毒子（virion):

27、一個(gè)形態(tài)和結(jié)構(gòu)上完整的病毒顆粒測(cè)量病毒的單位為納米(nanometer,nm) ，痘病毒最大，約300nm；圓環(huán)病毒最小，約17nm病毒的結(jié)構(gòu)（見(jiàn)課件） 脂溶劑可去除囊膜，使病毒喪失活性。對(duì)稱(chēng)型 螺旋狀對(duì)稱(chēng) 20面體對(duì)稱(chēng) 鄰體 復(fù)合對(duì)稱(chēng)型有些病毒去除囊膜和衣殼，裸露的dna或rna也能感染細(xì)胞，這樣的核酸稱(chēng)為傳染性核酸dna病毒多數(shù)為雙股、線(xiàn)狀；rna病毒多數(shù)為單股線(xiàn)狀，不分節(jié)段正股（positive sense） 以mrna的堿基序列作為標(biāo)準(zhǔn)，凡與此相同的核酸 負(fù)股（negative sense） 與其互補(bǔ)的核酸動(dòng)物病毒中螺旋對(duì)稱(chēng)的病毒均屬有囊膜的單股rna病毒，除痘病毒外，所有脊椎動(dòng)物dn

28、a病毒均為20面體。復(fù)合對(duì)稱(chēng)的病毒有噬菌體，痘病毒。科(family)和屬(genus)是病毒分類(lèi)系統(tǒng)的最主要單位 三大類(lèi)病毒：dna病毒類(lèi)、dna反轉(zhuǎn)錄與rna反轉(zhuǎn)錄病毒類(lèi)、rna病毒類(lèi)。第7次分類(lèi)報(bào)告在部分科之上建立了3個(gè)目：尾病毒目（caudovirales）涉及噬菌體，單負(fù)股病毒目“mononegavirales”以及套式病毒目“nidovirirales”涉及動(dòng)物亞病毒（subvirus):1.類(lèi)病毒(viroid)：由環(huán)狀rna分子組成，不含蛋白衣殼。在植物中發(fā)現(xiàn)。2.朊病毒(prion)：只含傳染性蛋白 病毒的復(fù)制 主要包括 吸附和穿入、脫殼、生物合成、組裝和釋放四個(gè)連續(xù)步驟感染

29、比（multiplicity of infection, moi）是指在一個(gè)系統(tǒng)中感染病毒的細(xì)胞數(shù)與細(xì)胞總數(shù)之比 血凝作用（ha）其本質(zhì)是病毒與細(xì)胞受體的結(jié)合 血凝抑制作用（hi） 病毒的特異抗體可抑制其血凝作用 血吸附（haemadsorption）是一種特殊形式的血凝作用，是將紅細(xì)胞吸附于病毒感染的宿主細(xì)胞表面無(wú)囊膜的病毒 一般經(jīng)過(guò)細(xì)胞膜吞入，稱(chēng)為病毒胞飲,如腺病毒、小rna病毒等有囊膜的病毒 囊膜與宿主細(xì)胞膜融合，病毒的核衣殼直接 進(jìn)入細(xì)胞漿內(nèi)絕大多數(shù)dna病毒均在細(xì)胞核內(nèi)組裝，rna病毒和痘病毒在細(xì)胞漿內(nèi)組裝。雙股dna病毒的增殖周期（筆記）缺損型干擾(defective interf

30、ering,di)突變株（di顆粒）自身不能復(fù)制,只有在親本野生株作為輔助病毒存在時(shí)才能復(fù)制,但又干擾親本病毒的復(fù)制,導(dǎo)致后者數(shù)量減少。是一種缺失突變的產(chǎn)物。di突變株特點(diǎn)1.含正常的衣殼蛋白質(zhì)2.只含有正常基因組的一部分3.只能在正常同源病毒同時(shí)存在時(shí)才能繁殖,這時(shí)同源病毒成為輔助病毒(helper virus)4.特異性地干擾同源病毒的繁殖,經(jīng)連續(xù)傳代后,di顆粒增多重組（recombination) 將兩個(gè)有親緣關(guān)系但生物學(xué)性狀不同的毒株感染同一個(gè)宿主細(xì)胞，從而可發(fā)生核酸水平上的互換，產(chǎn)生兼有兩親本特性的子代，稱(chēng)為重組。重配(reassortment) 對(duì)于分節(jié)段的rna病毒，通過(guò)交換r

31、na節(jié)段而進(jìn)行的重組稱(chēng)為重配。病毒的培養(yǎng) 動(dòng)物接種、雞胚接種，細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)優(yōu)點(diǎn)：1.每個(gè)細(xì)胞生理特性基本一致，對(duì)病毒易感性相等2.無(wú)個(gè)體差異，準(zhǔn)確性和重復(fù)性好3.可嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌操作4.細(xì)胞培養(yǎng)本身就能顯示病毒的生長(zhǎng)特征5.應(yīng)用空斑技術(shù)可進(jìn)行病毒的克隆化原代細(xì)胞（primary cell） 動(dòng)物組織經(jīng)胰蛋白酶消化處理，使細(xì)胞分散而得到的細(xì)胞。二倍體細(xì)胞株（diploid cell strain） 將長(zhǎng)成單層的原代細(xì)胞消化分散成單個(gè)細(xì)胞，繼續(xù)培養(yǎng)傳代，其染色體數(shù)與原代細(xì)胞一樣，保持其二倍染色體數(shù)目的細(xì)胞，稱(chēng)為二倍體細(xì)胞。傳代細(xì)胞系（established cell line）能在體外持續(xù)增殖傳

32、代的細(xì)胞，大多數(shù)由癌細(xì)胞或二倍體細(xì)胞突變而成。細(xì)胞病變效應(yīng)(cytopathic effect,cpe) 由病毒感染導(dǎo)致的細(xì)胞損傷。cpe能在光學(xué)顯微鏡下觀察。常見(jiàn)的細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化為細(xì)胞變圓、壞死、溶解、脫落或形成合胞體。有些病毒能形成包涵體。病毒感染抗體依賴(lài)的增強(qiáng)作用（ade）在病毒感染過(guò)程中，宿主產(chǎn)生的抗體與病毒結(jié)合，非但未能阻斷病毒吸附宿主細(xì)胞，反而增強(qiáng)了病毒對(duì)細(xì)胞的感染，提高了病毒的滴度。 將適當(dāng)濃度的病毒懸液加入單層細(xì)胞培養(yǎng)中，當(dāng)病毒吸附細(xì)胞后，再覆蓋一層融化的瓊脂。病毒在細(xì)胞內(nèi)復(fù)制后產(chǎn)生局限性病灶，病灶逐漸擴(kuò)大，肉眼也能看見(jiàn)，此即空斑(plaque)。空斑是由一個(gè)感染性病毒粒子復(fù)制

33、形成的，類(lèi)似于細(xì)菌的菌落，稱(chēng)為空斑形成單位（pfu）。包涵體（inclusion body) 是某些病毒感染細(xì)胞產(chǎn)生的特征性的形態(tài)變化，在普通光學(xué)顯微鏡下可見(jiàn)胞漿或胞核內(nèi)出現(xiàn)的呈嗜酸性或嗜堿性染色、大小數(shù)量不等的圓形或不規(guī)則形的團(tuán)塊狀結(jié)構(gòu)，稱(chēng)為包涵體。干擾素（ifn）由病毒或誘生劑刺激機(jī)體細(xì)胞產(chǎn)生的具有抗病毒、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)作用的糖蛋白抗病毒作用：干擾素不直接作用于病毒，而是作用于鄰近的細(xì)胞，使其產(chǎn)生抗病毒蛋白，這些抗病毒蛋白降解病毒mrna、抑制蛋白合成。干擾素作用具有宿主特異性，而無(wú)病毒特異性。rna干擾（,rnai）指細(xì)胞利用內(nèi)源或外源的小分子雙股rna片段，特異性地降解同源基因的mr

34、na，從而導(dǎo)致靶基因轉(zhuǎn)錄后的基因沉默（post translational gene silence, ptgs）的現(xiàn)象。 具有反轉(zhuǎn)錄過(guò)程的病毒反轉(zhuǎn)錄病毒科（retroviridae)： rna病毒 嗜肝病毒科(hepadnaviridae)：dna病毒，感染人。反錄病毒科的特點(diǎn)1.有囊膜，直徑80-100nm 2.三層結(jié)構(gòu) ：基因組-核蛋白復(fù)合體-螺旋對(duì)稱(chēng)，衣殼20面體對(duì)稱(chēng)，囊膜表面有糖蛋白突起（纖突）3. 基因組為二倍體2條單股正鏈rna組成的二聚體, 4. 病毒具有反轉(zhuǎn)錄酶 反錄病毒科代表病毒 禽白血病/肉瘤病毒(avian leucosis/sarcoma viruses) 馬傳染性貧

35、血病毒（eiav)朊病毒（prion) 可以導(dǎo)致人類(lèi)和家畜患中樞神經(jīng)系統(tǒng)退化性病變朊病毒是機(jī)體正常的prpc變構(gòu)形成牛海綿狀腦病（bse）俗稱(chēng)“瘋牛病”，表現(xiàn)突然發(fā)作、運(yùn)動(dòng)失調(diào)、性情暴躁 癢 病（scrapie)雙股rna病毒 分節(jié)呼腸孤病毒科 (reoviridae) 雙rna病毒科 (birnaviridae)呼腸孤病毒科 病毒顆粒近似球形，無(wú)囊膜，有內(nèi)、外雙層衣殼，20面體對(duì)稱(chēng)，基因組為線(xiàn)狀雙股rna，有10-12個(gè)節(jié)段，病毒在胞漿內(nèi)復(fù)制，某些種具有血凝性。雙rna病毒科 傳染性法氏囊病病毒（ibdv) 傳染性胰壞死病毒（ infectious pancreatic necrosis v

36、irus, ipnv)核衣殼20面體對(duì)稱(chēng)，無(wú)囊膜，單層衣殼，基因組為雙股雙節(jié)段rna，病毒在胞漿內(nèi)復(fù)制。雙股dna病毒痘病毒科 非洲豬瘟病毒科 虹彩病毒科 皰疹病毒科 腺病毒科 多瘤病毒科 乳頭瘤病毒科 痘病毒科poxviridae 胞漿內(nèi)復(fù)制，出芽方式釋放代表性病毒: 1. 痘苗病毒（vaccinia virus)2. 綿羊痘病毒（sheeppox virus)3.雞痘病毒（fowlpox virus)4.口瘡病毒（orf virus)非洲豬瘟病毒科 asfarviridae 僅有一個(gè)病毒，即非洲豬瘟病毒（asfv）。病毒特征:二十面體對(duì)稱(chēng)，雙股dna，有囊膜。有血吸附但無(wú)血凝作用。致病性:是唯一已知核酸為dna的蟲(chóng)媒病毒，由軟蜱傳遞，自然條件下僅家豬易感皰疹病毒科核衣殼20面體對(duì)稱(chēng).有囊膜，囊膜表面有纖突.基因組為dsdna，病毒感染細(xì)胞內(nèi)可形成特征性嗜酸性核內(nèi)包涵體代表病毒 偽狂犬病病毒(pseudorabies virus) 馬立克氏病毒(mareks disease virus) 禽傳染性喉氣管炎病毒（avian infectious laryngotracheitis virus)鴨瘟病毒(duck plague virus)偽狂犬病病毒 豬作為本病毒的原始宿主和儲(chǔ)存宿主馬立克