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文檔簡介

1、1會計學creloxp基因敲除系統解讀基因敲除系統解讀 1981 年Evans 等首次在體外分離和培養ES，成功建立了小鼠胚胎干細胞系1985 年Smithies最早在哺乳動物細胞中發現并實現了同源重組同源重組示意圖同源重組示意圖P1噬菌體Offspring：50% heterozygous knockout after 1 generationOffspring: 25% homozygous knockout after 2 generationConditional KnockoutExon13NGT/AGAttention: 電穿孔或是顯微注射方法將構建好的打靶載體導入ES細胞電轉需要

2、的細胞數量2-5x107隨機整合定點整合沒有整合DTA(白喉毒素A亞基） 小鼠的遺傳背景取決于ES和囊胚細胞Loxp2小鼠品系建立完成純合突變小鼠用來和Cre小鼠雜交，雜合突變小鼠保種 DNA顯微原核注射，是指將外源DNA通過顯微注射的方法注射到受精卵的原核內，注射DNA整合到小鼠受精卵的基因組中，并穩定遺傳給后代。 D.S. Sohal, M. Nghiem. Temporally regulated and tissue-specific gene manipulations in the adult and embryonic heart using a tamoxifen-inducible Cre protein. Circ Res. 89:20-25 (2001). MHC (cardiac-specific a-myosin heavy chain)Mer (mutated murine estrogen receptor ligand-binding domain amino acids 281 to 599, G525R)Co

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